侧脑室注射Orexins对大鼠摄食的影响及机制

目的:探讨侧脑室注射orexins(食欲素)、NPY(神经肽Y)、MCH(黑色素聚集激素)和甘丙肽对大鼠摄食的影响及其机制。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、侧脑室注射组和室旁核(PVN)注射组。通过套管将orexin-A、orexin-B、NPY、MCH和甘丙肽分别注射至侧脑室和PVN内,随后测量大鼠食物摄入量,并检测PVN、弓状核(ARC)和VMH内c-fos的表达。结果:与对照组比较,侧脑室注射NPY、MCH和orexin-B 2 h后,大鼠摄食量显著增多(P0.05)。相较于orexin-B和MCH,NPY对摄食的影响更显著(P0.05)。与NS对照组比较,侧脑室注射甘丙肽和orexin-A 1 h后,大鼠摄食量显著增多(P0.05)。与NS对照组比较,侧脑室注射orexin-A可显著增加c-fos在PVN和ARC中的表达,在VMH中效应较弱(P0.05)。与NS对照组比较,PVN注射NPY能显著增加大鼠2 h摄食量(P0.05),PVN注射orexin-A能显著增加大鼠2 h和4 h摄食量(P0.05)。结论:orexins与可促进大鼠摄食,此效应可能通过下丘脑参与摄食调控中枢PVN和ARC而实现的。     

下丘脑弓状核PYY对大鼠摄食、胃运动和能量代谢的影响及机制

目的:探究YY肽(PYY)对雄性Wistar大鼠的摄食、胃运动和能量代谢的影响及潜在机制。方法:采用免疫组织化学实验方法观察大鼠下丘脑弓状核(ARC)中Y2受体的表达;通过ARC微量注射PYY,观察其对下丘脑中编码摄食相关代谢激素的m RNA表达以及ARC中PYY反应性神经元的放电频率、食物摄入量及水摄入量、氧气消耗(VO_2)、CO_2产生(VCO_2)及能量代谢的影响。结果:免疫组化结果显示大鼠ARC内存在Y2受体;大鼠ARC注射PYY能够兴奋PYY反应性神经元,上调可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及促肾上腺皮质释放激素(CRH)等抑食肽m RNA的表达,下调神经肽Y(NPY)及下丘脑泌素(HCRT)等促食肽m RNA的表达;且抑制大鼠食物摄入量,并参与调控大鼠呼吸、能量代谢及胃运动的改变。结论:ARC微量注射PYY可减少食物摄入并调节全身能量平衡,PYY可能是一种新型代谢肽。     

Orexins在雌性大鼠条件性蔗糖摄取中的作用研究

目的:探讨Orexins在雌性大鼠的摄取蔗糖的操作反应行为的作用,以及在线索诱导下恢复寻找蔗糖行为中的作用。方法:将雌性SD大鼠分为限制进食组和自由进食组,以固定比率和累进比率训练大鼠自己摄取蔗糖颗粒。通过Ox R1受体拮抗剂SB-334867预处理,观察SB-334867对大鼠按固定比率摄取蔗糖行为和在线索诱导下恢复寻找蔗糖行为的影响。结果:限制进食的大鼠表现出按压有效杠杆次数和获取蔗糖颗粒数显著增多(P0.05),按压无效杠杆次数稍微增多。SB-334867可显著减少限制进食大鼠按压有效杠杆次数(P0.05)。与对照组相比,SB-334867在消退期间可显著增加按压有效杠杆的次数(P0.05);在恢复期间,限制进食大鼠按压有效杠杆的次数显著增多(P0.05)。结论:Orexins系统在大鼠条件刺激诱导摄取蔗糖中可能存在性别差异。     

大豆异黄酮对游泳小鼠能量代谢的影响

目的：探讨大豆异黄酮（SI）对游泳小鼠能量代谢的影响。方法：建立小鼠运动疲劳模型,选用雄性昆明小鼠30只,根据体质量随机分为3组（n=10）：正常组、游泳模型组、游泳+SI干预组（SI组）。正常组及模型组小鼠以AIN-93M合成饲料饲养,SI组在AIN-93M合成饲料中添加相应剂量的SI （4 g/kg）。饲养2周后,模型组和SI组小鼠负重2%游泳1 h后处死,测定其血乳酸（Lac）含量及乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、肌酸激酶（CK）、ATP酶的活性。结果：与正常组相比,模型组和SI组血清中Lac含量明显增加（P<0.05）,模型组肌肉和SI组血中LDH活性显著升高（P<0.05）,模型组血清、肝脏和肌肉中SDH和CK活性明显升高,SI组血清和肌肉中SDH和CK活性显著升高（P<0.05）;与模型组相比,SI组小鼠游泳后,血清Lac含量明显下降（P<0.05）,LDH、SDH、CK酶活性较模型组都有明显升高（P<0.05）。结论：大豆异黄酮对游泳小鼠能量代谢具有一定的调节作用。     

下丘脑Nesfatin-1/NUCB2对糖尿病小鼠摄食的影响

目的:探讨下丘脑神经肽NUCB2与Tsumura Suzuki(TS)多基因突变2型糖尿病(T2DM)小鼠摄食过多的关系。方法:将动物分为Tsumura Suzuki糖尿病(TSD)小鼠、正常小鼠;监视器监测小鼠摄食量;分析血生化指标;定量RT-PCR分析摄食相关神经肽m RNA表达水平;放射免疫分析法检测nesfatin-1蛋白水平。结果:与年龄匹配的TSN小鼠相比,TSD小鼠在1月龄就存在体重增加(P<0.05)和高瘦素血症(P<0.05),3-12月龄出现贪食(P<0.05)、高血糖(P<0.05)、高血脂(P<0.05)和高胰岛素血症(P<0.05),且3-12月龄时厌食肽nesfatin-1前体核连蛋白2(NUCB2)m RNA和nesfatin-1蛋白水平均显著降低(P<0.05~0.01);TSD小鼠下丘脑甘丙肽、黑色素浓集素、神经肽Y及前黑素细胞皮质素原m RNA水平也有显著改变(P<0.05)。结论:下丘脑NUCB2介导信号通路破坏可能导致TSD小鼠摄食过多。     

随机饥饿和重喂食对小鼠能量代谢和行为的影响

为阐明能量代谢和行为的可塑性对动物适应食物资源变化的意义,将成年雄性KM 小鼠随机饥饿驯化4
周,再重喂食驯化4 周。采用食物平衡法测定摄食量、封闭式流体压力呼吸计测定基础代谢率(BMR) 和非颤
抖性产热(NST)、观察法测定行为。随机饥饿使摄食量、消化道重量显著增加,BMR 和NST 显著降低。与对照
组相比,饥饿组休息行为显著增加,活动显著降低。重喂食后,上述指标均恢复到对照组水平,表现出显著的
可塑性。研究结果表明,动物适应难以预测的食物资源短缺的主要策略包括:增加自由取食期间的摄食量;降
低BMR、NST 和活动行为,从而保存身体贮存的能量。能量代谢和活动行为在较短的时间尺度内表现出显著的
可塑性对小鼠适应不可预测的食物资源短缺的应激环境具有重要意义。     

骨钙素对能量代谢调节的研究进展

研究表明,骨钙素(osteocalcin)是由骨骼中成熟的成骨细胞合成并分泌的一种非胶原蛋白质,在骨骼的合成和重建过程中起着重要作用。近年来研究显示,骨骼亦可作为一种分泌器官,通过分泌骨钙素,作用于胰腺、脂肪、睾丸等器官,调节能量代谢、雄性生殖能力。此外,临床研究表明,骨钙素与糖尿病、心血管疾病等也有着密切的联系。因此,本文一方面概述了骨钙素的基本特征,另一方面着重介绍了骨钙素在调节能量代谢等方面的研究进展,以便为治疗糖尿病等代谢性疾病提供新的治疗靶点。     

结节乳头体在小鼠运动和摄食中的作用及机制研究

目的:探讨结节乳头体在小鼠运动和摄食中的作用及机制。方法:选择雄性ddy小鼠,180-200 g,通过单侧植入电极损毁TMN-E2区。采用荧光金逆行追踪方法检测小鼠Me5与TMN之间的神经纤维联系;采用免疫组化方法检测小鼠TMN中组氨酸脱羧酶(HDC)免疫反应阳性细胞数;采用旷场试验箱记录小鼠全天、夜间以及白天的自主活动和摄食摄水;采用PCR检测小鼠穹窿周和下丘脑外侧区的orexin m RNA的表达。结果:荧光金逆行追踪实验显示小鼠Me5可向TMN-E2发出神经纤维投射。单侧TMN损毁,两侧TMN中HDC反应阳性细胞显著减少(P0.05),且损毁侧比未损毁侧HDC免疫反应阳性细胞数减少(P0.05)。TMN损毁对小鼠24 h自主活动和摄食摄水无明显影响。单侧TMN损毁,小鼠从暗期到光期的自主活动和摄食摄水显著减少(P0.05)。单侧TMN损毁,小鼠正常昼夜活动摄食节律无显著改变。单侧TMN损毁,小鼠穹隆周和下丘脑外侧区白天的orexin m RNA表达显著减少(P0.05)。结论:Me5与TMN之间存在神经通路,该通路可能通过调节穹隆周区或下丘脑外侧区的orexin神经元的激活从而调控摄食及相关行为的昼夜节律。     

虾红素对小鼠肌肉组织和骨骼肌细胞中能量代谢相关基因mRNA表达的影响

本试验用高、低浓度虾红素日粮饲喂昆白系小鼠和处理原代培养小鼠骨骼肌细胞,提取总RNA,检测各时段UCP3、LXRα基因mRNA表达量,探讨虾红素对小鼠个体发育、肌肉能量代谢相关基因表达变化规律的影响。结果表明:高浓度组与对照组相比,小鼠体重增长明显减慢,肌肉组织第10天、30天以及骨骼肌细胞作用24h时UCP3mRNA表达量均显著下降(P<0.05),LXRα基因mRNA表达量均显著上升(P<0.05),72h达到极显著水平(P<0.01)。低浓度组与对照组相比,肌肉组织中UCP3、LXRα基因mRNA表达差异均不显著(P>0.05);虾红素作用骨骼肌细胞24hUCP3基因mRNA表达量显著下降(P<0.05),LXRα基因mRNA表达量显著上升(P<0.05)。结果提示虾红素对小鼠肌肉的能量利用有一定的调控作用。     

Ghrelin对大鼠摄食的影响及orexins信号通路的调控

目的:探究Ghrelin对大鼠摄食的影响及orexins信号通路的调控作用。方法:采用免疫组织化学染色的方法观察Ghrelin免疫阳性神经元轴突末梢与orexin神经元的突触联系以及下丘脑外侧区(LHA)内c-fos的表达。侧脑室注射抗-orexin-A IgG和抗-orexin-B IgG混合液、抗-黑色素浓集激素(MCH)IgG、NPY-1受体拮抗剂后测量大鼠摄食量,观察其对ghrelin诱导摄食的影响。结果:Ghrelin免疫阳性神经元轴突末梢与orexin神经元的突触相接触。侧脑室注射ghrelin可诱导orexin神经元内c-fos表达,但是没有引起MCH神经元内c-fos的表达。预先注射抗-NPY IgG抗体,ghrelin仍然可诱导orexin神经元内c-fos表达。侧脑室预先注射抗-orexin-A IgG和抗-orexin-B IgG抗体可减弱ghrelin促摄食作用,但是预先注射抗-MCH IgG抗体对ghrelin诱导的摄食作用没有明显影响。注射NPY受体拮抗剂可进一步加强抗-orexin-A IgG抗体和抗-orexin-B IgG抗体对ghrelin诱导摄食的抑制效应。结论:ghrelin可能与orexin系统相互作用共同参与摄食和能量平衡的调控。     

鱼类摄食代谢和运动代谢研究进展

摄食和运动不仅是动物最主要的生理活动,同时也是机体代谢能量消耗的主要过程。相关研究表明鱼类摄食代谢主要由营养物质同化过程的耗能组成,其食物蛋白质同化耗能远低于陆生脊椎动物,而摄入营养物质不平衡可能导致摄食代谢耗能增加;鱼类摄食代谢和运动代谢上可能存在能量消耗与性能维持之间的权衡,且都可能受最大代谢能力限制。鱼类不仅在摄食和运动代谢的相对大小及其他特征上存在差异,而且在摄食和运动代谢竞争上存在不同的模式。从功率分配的角度,研究鱼类摄食和运动代谢特征及其与物种生态习性的关系将成为鱼类能量学研究的重要方向之一。     

Orexin受体1对摄食条件反射的调控研究

目的:观察Orexin受体1对摄食条件反射的调控研究。方法:将40只大鼠随机分为四组,分别为NS/NS组,SB/SB组,NS/SB组,SB/NS组,每组10只大鼠,给予大鼠八组"条件刺激-无条件刺激(CS-US)"训练,给予无条件刺激后立即进行条件刺激,每组进行训练前30 min给予SB或生理盐水(NS)。获得性训练后,给予2组反射消失性训练,即给予8次条件刺激。条件刺激是给予大鼠10 s,2kHZ声音刺激,无条件刺激是直接给予大鼠食物。结果:给予条件刺激后,四组大鼠摄食行为均明显增加,摄食间隔均明显缩短,当条件刺激强度增加时,摄食行为也增加,而预先给予SB,与NS/NS组相比,其余组大鼠摄食行为相对减少(P0.05),摄食间隔增加。消失性训练中,与NS/NS,NS/SB组相比,SB/NS组和SB/SB组大鼠摄食行为明显减少(P0.05)。与其他三组大鼠相比,SB/NS组大鼠摄食间隔缩短。预先给予SB使后两次刺激后摄食间隔明显增加(P0.05)。结论:OX1R信号通路调控摄食反射的产生和消失。     

下丘脑催产素对大鼠摄食和胃动力的影响及调控研究

目的:探讨下丘脑催产素(OXT)对大鼠摄食和胃动力的影响及调控机制。方法:采用荧光金逆行追踪结合免疫组化实验,观察大鼠视上核(SON)与弓状核(ARC)之间的神经通路;采用核团置管术观察ARC微量注射OXT对大鼠摄食的影响;采用单极电刺激观察电刺激SON对大鼠胃运动的影响及ARC微量注射OXT对大鼠胃运动和胃排空的影响。结果:荧光金逆行追踪结合免疫组化实验显示大鼠SON与ARC之间存在神经通路;ARC微量注射OXT大鼠0-2 h、0-3 h和0-4 h摄食量显著下降,OXT受体拮抗剂阿托西班可完全阻断OXT的抑制摄食作用,注射OXT和缩胆囊素(CCK)受体拮抗剂MK-329混合液后,OXT对大鼠摄食的抑制作用被部分阻断;电刺激SON,大鼠胃运动幅度和频率显著增强,预先向ARC内微量注射阿托西班后再电刺激SON,电刺激SON对胃运动的促进作用进一步增强;ARC微量注射OXT后,大鼠胃运动幅度和频率显著降低,阿托西班可完全阻断OXT对胃运动幅度和频率的抑制作用,MK-329可部分阻断OXT对胃运动幅度和频率的抑制作用;ARC微量注射OTX后,大鼠胃排空率显著降低,阿托西班可完全阻断OXT对胃排空的抑制作用,MK-329可部分阻断OXT对胃排空的抑制作用。结论:SON-ARC内具有OXT神经通路,且该通路由CCK介导。     

谷氨酰胺联合恩替卡韦对病毒型肝硬化小鼠肝脏病变指标及免疫水平的影响

目的:探讨谷氨酰胺联合恩替卡韦对病毒型肝硬化小鼠肝脏病变指标及免疫水平的影响。方法:将60只健康雄性BABL/cJ小鼠按照随机数字表法分为模型组、谷氨酰胺组,谷氨酰胺联合恩替卡韦组(联合组),对照组,每组15只。采用高压水注射方法将50μL HBV质粒通过尾静脉注入模型组、谷氨酰胺组,联合组三组小鼠体内,然后腹腔注射50%CCI4(5 m L/kg)以构建肝硬化模型小鼠。对照组经尾静脉注射50μL生理盐水,然后腹腔注射生理盐水(5 m L/kg)。谷氨酰胺组接受谷氨酰胺(0.5 m L/10g)治疗,联合组接受恩替卡韦联合谷氨酰胺(0.5 m L/10 g)治疗,对照组、模型组接受生理盐水(0.5 m L/10g)治疗,每天1次,治疗周期均为4周。比较四组小鼠的肝功能、病毒载量、肝纤维化指标、免疫功能。结果:成模后,模型组、谷氨酰胺组、联合组的病毒载量、ALT、AST、HA、PIIIP水平无统计学差异(P0.05);治疗4周后,谷氨酰胺组、联合组两组病毒载量、ALT、AST、HA、PIIIP水平显著下降,且联合组病毒载量、ALT、AST、HA、PIIIP水平低于谷氨酰胺组,差异具有统计学差异(P0.05);治疗4周后,谷氨酰胺组病毒载量、ALT、AST、HA、PIIIP水平低于模型组,差异具有统计学差异(P0.05);治疗4周后,谷氨酰胺组、联合组两组脾脏指数、CD4+、CD4+/CD8+百分率升高组脾脏指数、CD4+、CD4+/CD8+百分率高于谷氨酰胺组,差异具有统计学差异(P0.05)。结论:谷氨酰胺联合恩替卡韦可改善病毒型肝硬化小鼠肝脏肝功能,减轻组织纤维化,并有助于增强其免疫功能。     

七氟烷全身麻醉对失血性休克复苏小鼠血流动力学及记忆功能的影响机制

摘要 目的：探讨七氟烷全身麻醉对失血性休克复苏小鼠血流动力学及记忆功能的影响机制。方法：将建立成功的42只失血性休克复苏小鼠按照随机数字表法平分为3组-模型组、氧气组、七氟烷组，对照组吸入空气4 h，氧气组吸入100.0 %氧气4 h，七氟烷组吸入100.0 %氧气和2.5 %七氟烷4 h，监测与记录小鼠血流动力学及记忆功能变化情况。结果：氧气组、七氟烷组麻醉后第3 d与第7 d的Morris水迷宫逃避潜伏期少于模型组，穿越原平台次数多于模型组(P<0.05)，氧气组与七氟烷组对比差异有统计学意义(P<0.05)。氧气组、七氟烷组麻醉后第3 d与第7 d的去甲肾上腺素(Norepinephrine，NE)pD₂与Emax值高于模型组(P<0.05)，七氟烷组高于氧气组(P<0.05)。氧气组、七氟烷组麻醉后第3 d与第7 d的脑组织凋亡指数低于模型组(P<0.05)，七氟烷组低于氧气组(P<0.05)。氧气组、七氟烷组麻醉后第3 d与第7 d的海马组织Akt、Caspase-3蛋白相对表达水平低于模型组(P<0.05)，七氟烷组低于氧气组(P<0.05)。结论：七氟烷全身麻醉在失血性休克复苏小鼠的应用能抑制Akt、Caspase-3蛋白的表达，可抑制脑组织神经细胞凋亡，可改善血流动力学状况，促进小鼠记忆能力的恢复。     

葛根素对正常产后小鼠泌乳作用的影响

摘要 目的：探究葛根素对产后正常小鼠泌乳作用的影响及其机制,并初步探究葛根素对产后正常小鼠的安全性。方法：将雌、雄KM小鼠以3:1比例合笼配种,得到孕鼠饲养至分娩。分娩后的小鼠随机分为正常对照组、葛根素低剂量（18 mg?kg^-1）、高剂量组（72 mg?kg^-1）,每组8只。从产后第3 d起,每天灌胃一次,共10 d。观察小鼠每日泌乳量变化,ELISA法检测血清中催乳素（PRL）、孕酮（P4）、雌二醇（E₂）含量,HE染色观察乳腺、肝、肾、子宫、卵巢组织病理学形态,Western Blot法检测乳腺组织中催乳素受体（PRLR）、酪氨酸激酶 2（JAK2）和信号传导与激活因子5a（STAT5a）的表达。结果：与正常对照组相比,从给药的第6天起,葛根素低剂量组的泌乳量显著升高（P＜0.05）;葛根素低、高剂量组均可见乳腺小叶内腺泡明显变大,分泌物明显增多,且低剂量组更为明显;葛根素低、高剂量组血清PRL水平明显升高（P＜0.01或P＜0.05）;葛根素低剂量组PRLR的蛋白表达明显增加（P＜0.01）,而葛根素高剂量组PRLR、JAK2的蛋白表达明显降低（P＜0.01）。葛根素低剂量组PRLR、JAK2、STAT5a的蛋白表达明显高于葛根素高剂量组（P＜0.01或P＜0.05）。结论：葛根素低剂量对产后正常小鼠有一定促进泌乳作用,高剂量时对泌乳作用不明显。葛根素低、高剂量均未对产后正常小鼠的肝、肾、卵巢和子宫产生明显的病理学改变。