人工关节假体无菌性松动动物模型的快速建立

目的:人工关节置换手术发展至今,取得了非常大的成功,已在临床解决了许多终末期的关节疾患。研究表明,假体无菌性松动的患者,其假体周围处于高骨更新状态。因此骨-假体界面的早期整合对于阻止磨屑颗粒和细胞因子的迁移至关重要,而限制人工关节假体使用寿命的一个主要原因是磨屑颗粒诱导的假体无菌性松动。在本研究中,我们旨在尝试使用107个UHMWPE颗粒快速建立人工关节假体无菌性松动的兔动物模型,以便为进一步探讨假体无菌性松动的机制及防治奠定实验基础。方法:我们用雌性新西兰大白兔建立动物模型,随机均分为实验组和对照组,在两组动物的左侧胫骨髓腔内植入羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)涂层假体。在实验组中,分别于假体表面和膝关节腔内植入0.5×10~7超高分子量聚乙烯(Ultra-high molecular weight polyethylene,UHMWPE)颗粒。结果:同对照组相比,实验组动物的关节内压力更高、骨组织形态学参数更差、假体生物力学固定强度更低,同时,促炎细胞因子和骨更新标志均显著高于对照组。结论:我们使用很少的UHMWPE颗粒成功快速地建立了人工关节假体无菌性松动的兔动物模型,从而为今后人工关节假体无菌性松动的进一步研究奠定了实验基础。     

运用偏振光观测聚乙烯磨屑颗粒诱导人工关节假体无菌性松动

目的:探讨运用偏振光显微镜来观测无菌性松动人工关节假体周围的聚乙烯颗粒分布,评估其在研究磨屑颗粒诱导假体无菌性松动机制及防治措施等实验研究中的可行性。方法:我们用雌性新西兰大白兔建立动物模型,在左侧胫骨髓腔内植入羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)涂层假体。并分别于假体表面和膝关节腔内植入0.5×107超高分子量聚乙烯(Ultra-high molecular weight polyethylene,UHMWPE)颗粒。术后行四环素荧光双标记。膝关节滑膜组织苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、骨组织改良丽春红染色后分别用普通光镜和偏振光镜观察,未染色的骨组织行荧光显微镜和偏振光镜观察。结果:在聚乙烯颗粒刺激下,膝关节滑膜组织增生明显,骨-假体结合差,假体周围骨小梁稀疏,偏振光显微镜可清晰显示双折光性的聚乙烯颗粒在膝关节分布于滑膜及其深层结缔组织中,在骨-假体间隙间大量充填,阻碍骨-假体整合。结论:运用偏振光显微镜可以清晰而简便地观察滑膜和假体周围的聚乙烯颗粒分布,与传统实验方法相比,更加直观、简便和经济。     

CD39的临床意义及其与肝癌浸润T细胞耗竭的相关性分析

摘要 目的：探索CD39分子（编码基因ENTPD1）在原发性肝细胞肝癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）中的表达、临床意义及其与HCC中免疫浸润和T细胞耗竭的相关性。方法：TIMER、GEPIA、Kaplan-Meier Plotter、TCGA等数据库分析CD39在肝癌中的差异性表达、与免疫浸润的关系、相关基因的表达及其与肝癌患者预后的关系。免疫荧光染色、细胞测序和流式检测验证临床HCC患者的癌及癌旁组织中CD39的差异性表达及其和CD8⁺T细胞耗竭特性的相关性。结果：（1）生物信息学分析结果显示：CD39在多种肿瘤组织中表达上调（包括HCC）（P＜0.05）；且其表达水平与HCC的临床预后等显著相关（P＜0.05）；与CD39低表达组相比，HCC中CD39高表达组患者无复发生存期（relapse-free survival, RFS）（P=0.025）和无进展生存期（progression-free survival, PFS）（P=0.026）较短；CD39与HCC肿瘤微环境中CD8⁺T、CD4⁺T、巨噬细胞等免疫细胞浸润水平均有明显正相关。（2）临床HCC样本验证：免疫荧光和流式结果显示CD39在癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织，与耗竭相关分子LAYN、TIM3、CTLA4等共表达，且在耗竭CD8⁺T细胞中表达比例显著高于非耗竭细胞。结论：CD39在HCC肿瘤组织及浸润的CD8⁺T细胞中高表达，与HCC的RFS、PFS、免疫细胞浸润等紧密相关，且参与CD8⁺T细胞耗竭。     

11q21区段与中国汉族人群Graves病相关性研究

目的:在中国人群中验证Cooper团队在欧洲人群中鉴定的新的Graves病(Graves'disease,GD)易感区段11q21与中国汉族人群GD的相关性。方法:在前期1442例GD患者和1468例正常对照的GWAS数据基础上通过11q21区段精细定位选取主效位点,利用Taqman探针技术进行等位基因分析,在1594例GD患者和1679例正常对照中进行扩大样本验证,然后将两个阶段的结果合并分析并得出11q21区段与GD的相关性结果。结果:验证阶段11q21的rs12575636与GD相关的P值为2.98×10~(-5)(OR=1.42,95%CI=1.20-1.67),GWAS阶段和验证阶段合并后11q21的rs12575636与GD相关的P值达到1.26×10~(-6)(OR=1.35,95%CI=1.19-1.51)。结论:11q21的rs12575636与中国汉族人群GD显著相关,11q21的rs12575636是中国汉族人GD的易感位点。     

CD11b在小鼠急性结肠炎模型中的表达及鼠李糖乳杆菌的调节作用

目的 研究CD11b在炎症性肠病模型小鼠结肠组织中的表达及定位,探讨鼠李糖乳杆菌(LGG)对CD11b的调节作用.方法 将28只SPF级小鼠随机分为3组:Ctrl组8只、DSS组10只、DSS+LGG组10只,给予3％ DSS自由饮用建立急性结肠炎模型,DSS+ LGG组小鼠提前1周管饲LGG共14 d;模型建立期间观...     

CD133、β-catenin在胃癌组织中的表达与临床意义

目的:探讨胃癌组织CD133、β-catenin的表达与临床意义。方法:分别选择2013年12月到2017年2月选择在我院进行诊治的胃癌患者标本120例和同期在我院收治的正常胃组织标本120例作为观察组和对照组,采用免疫组化检测CD133、β-catenin表达情况,并分析CD133、β-catenin的表达与胃癌患者临床病理特征的相关性。结果:观察组与对照组CD133、β-catenin阳性表达率分别为75.0%和63.3%,均明显高于对照组[3.3%和9.7%](P0.05)。CD133、β-catenin的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、黏液癌、Dukes分期呈正相关(P0.05),与肿瘤的分化程度呈负相关(P0.05)。结论:CD133、β-catenin的表达上调可能参与了胃癌的发生与发展,并可能作为胃癌诊断和预后预测的参考指标。     

慢性牙周炎与原发性肝硬化的相关性分析

目的:探究慢性牙周炎与原发性肝硬化之间的相关性。方法:选择2017年1月至2019年1月于我院接受治疗的60例原发性肝硬化患者为研究组,选择同期于我院接受体格检查的100例健康个体为对照组,对两组患者分别实施牙周检查,对比两组患者牙周炎发生率,分析吸烟、饮酒对牙周炎发生率影响,按照Child-改良分级法对肝硬化患者进行评分并分级,对比各级原发性肝硬化患者慢性牙周亚发生率,并就慢性牙周炎与肝硬化相关性进行分析。结果:(1)对照组慢性牙周炎发生率显著低于研究组慢性牙周炎发病率(44.00%vs. 71.67%,P0.05);(2)研究组和对照组中吸烟者的慢性牙周炎患病率显著高于不吸烟者(P0.05),研究组中吸烟者发生慢性牙周炎患病率高于对照组,对比无统计学意义(P0.05);研究组和对照组饮酒者的慢性牙周炎患病率显著高于不饮酒者(P0.05),研究组中饮酒者发生慢性牙周炎患病率显著高于对照组(P0.05);(3)随着原发性肝硬化患者评分的升高,患者牙周炎患病率也随之上升,牙周附着丧失程度也出现加剧(P0.05)。结论:原发性肝硬化患者慢性牙周炎患病率高于健康个体,随着肝硬化患者病情的加剧,患者慢性牙周炎发生率也随之上升;另外,吸烟及饮酒会增加健康个体慢性牙周炎患病率。     

CD44及CD24在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系研究

目的:探讨肿瘤标志因子CD44及CD24在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:选择从2015年1月到2017年1月在我院接受手术治疗的乳腺癌患者80例纳入本次研究,另选同期在我院治疗的导管原位癌患者30例,小叶增生患者20例及导管单纯增生患者20例的组织提取标本进行对照,分析CD44及CD24在乳腺癌组织和不同病变类型中的表达,并分析CD44~+/CD24~-细胞在癌症免疫分型中的表达以及CD44~+/CD24~-细胞与乳腺浸润导管癌相关病理特征的关系。结果:乳腺癌组织内的CD44阳性率为52.50%,CD24的阳性率为57.50%,均显著高于癌旁组织的11.25%和15.00%,差异均有统计学意义(均P0.05)。CD44及CD24在导管原位癌及乳腺浸润导管癌中的阳性率高于小叶增生和导管单纯增生,导管原位癌的阳性率高于乳腺浸润导管癌,差异均有统计学意义(均P0.05),且CD44在乳腺浸润导管癌不同分化类型中的阳性率差异有统计学意义(P0.05)。CD24在乳腺浸润导管癌不同分化类型中的阳性率差异不显著(P0.05)。CD44~+/CD24~-细胞在不同癌症免疫分型以及不同分化中的阳性率比较差异均有统计学意义(P0.05)。CD44~+/CD24~-细胞与乳腺浸润导管癌患者的年龄、月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移以及远处转移之间均无明显关系(均P0.05)。结论:CD44及CD24在乳腺癌组织内存在较高的阳性率,且CD44~+/CD24~-在乳腺原位癌及低分化的乳腺癌组织内具有更高的阳性率,临床上可尝试通过监测CD44~+/CD24~-的阳性表达情况评价患者的病情及预后。     

超声对原发性胆汁性肝硬化合并自身免疫性甲状腺炎的诊断价值和相关性分析

摘要 目的：探讨超声对原发性胆汁性肝硬化合并自身免疫性甲状腺炎的诊断价值以及相关性。方法：选取2017年1月~2019年12月我院收治的90例原发性胆汁性肝硬化合并自身免疫性甲状腺炎患者为研究组,根据患者病情的不同将其分为早期组（n=48）和晚期组（n=42）。另选取50例健康志愿者为对照组,对所有患者进行超声诊断,比较两组患者的门静脉血流参数、肝动脉血流参数、肝中静脉血流参数以及脾静脉血流参数。结果：晚期组的门静脉主干内径（portal vein diameter,PVD）明显高于早期组和对照组（P<0.05）,晚期组的平均流速（portal vein velocity,PVV）明显低于早期组和对照组（P<0.05）,三组患者的门静脉血流量（perceptual video quality,PVQ）差异无统计学意义（P>0.05）。晚期组的肝动脉内径（hepatic artery inner diameter,HAD）、阻力指数（resistance index,RI）、收缩期峰值流速（peak systolic velocity/end diastolic velocity,HAVmax）、血流量（blood flow,HAQ）均明显大于对照组（P<0.05）。晚期组的肝中静脉内径（middle hepatic vein diameter,MHAD）、最高平均流速（maximum average flow rate ,MHV Vm）、最大血流量（maximum blood flow,MHVQ）均较早期组和对照组减少（P<0.05）。晚期组的脾静脉内径（splenic vein diameter,SVD）明显高于对照组和早期组（P<0.05）,晚期组的脾静脉平均流速（splenic vein mean flow rate,SVm）、脾静脉血流量 (splenicveinflow, SVF)与对照组、早期组相比差异无统计学意义（P>0.05）;经过相关性分析肝脏超声指标与甲状腺超声指标均呈现正相关关系（P＜0.05）。结论：超声在原发性胆汁性肝硬化合并自身免疫性甲状腺炎患者中应用具有很高的价值,通过对原发性胆汁性肝硬化超声指标推测自身免疫性甲状腺炎病情程度,患者的超声图像具有一定的特征性,可以用以患者的诊断和病因分析,值得在临床中应用推广。     

Amyloid beta在湿性年龄相关性黄斑变性患者中的表达及意义

目的:探讨Amyloid beta(Aβ)在湿性年龄相关性黄斑变性患者中的表达及意义。方法:2017年9月到2019年5月选择在本院诊治的湿性年龄相关性黄斑变性患者72例(72眼),检测血清Aβ含量,调查患者的一般资料、临床特征并进行相关性分析。结果:在72例患者中,平均血清Aβ含量为203.29±14.29 ng/mL,其中Aβ含量≥180 ng/mL 40例。Aβ阳性组的脉络膜厚度显著高于Aβ阴性组(P0.05)。Aβ阳性组的患眼动脉舒张末期血流速度和收缩期峰值血流速度都显著低于Aβ阴性组(P0.05)。Aβ阳性组的的性别、年龄、眼压、血压、体重指数、病程等与Aβ阴性组对比差异无统计学意义(P0.05)。直线相关性分析显示血清Aβ含量与脉络膜厚度、患眼动脉舒张末期血流速度和收缩期峰值血流速度都有显著相关性(P0.05),其中Aβ含量与脉络膜厚度呈正相关(r=0.566,P=0.003),Aβ含量与患眼动脉舒张末期血流速度和收缩期峰值血流速度呈负相关(r=-0.673,P=0.000;r=-0.455,P=0.010)。结论:Aβ在湿性年龄相关性黄斑变性患者中多呈现高表达状况,血清Aβ含量与脉络膜厚度、患眼动脉舒张末期血流速度和收缩期峰值血流速度相关,从而影响患者病情的进展。     

马桑内酯对在体和离体小胶质细胞 CD11b/c表达的影响

目的研究致痫剂马桑内酯(CL)对在体和离体小胶质细胞CD11b/c表达的影响。方法①正常SD大鼠行马桑内酯侧脑室注射,观察大鼠的行为改变;利用免疫荧光染色的方法观察大鼠大脑皮质、海马内CD11b/c表达的变化。②纯化培养的小胶质细胞无血清培养,给予马桑内酯(5×10-5mol/L)刺激,利用免疫荧光染色结合流式细胞仪检测CD11b/c的表达。结果①马桑内酯侧脑室注射30min后均出现强烈的癫痫样发作,持续约4h;②马桑内酯侧脑室注射后大脑皮质及海马各区CD11b/c阳性细胞表达均出现明显增强,4-6h为表达高峰,至24h大脑皮质恢复至正常水平,但海马各区仍保持较高水平。③纯化培养的小胶质细胞在马桑内酯作用1h出现CD11b/c表达增强,2h达到高峰,至24h恢复正常。结论马桑内酯对小胶质细胞具有直接的活化作用;小胶质细胞的活化参与了马桑内酯的致痫过程。     

Biosynthesis and function of membrane bound and secreted forms of recombinant CD11b/CD18 (Mac-1)

Full-length (membrane bound) and truncated (secreted) forms of the beta 2 integrin heterodimer, CD11b/CD18 (Mac-1), were expressed in a human kidney cell line (293) that normally does not express leukocyte adhesion molecules (Leu-CAMs). The biosynthesis of recombinant Mac-1 in 293 cells differed from that reported for leukocytes in that heterodimer formation was not required for CD11b to be exported to the cell surface. A stable cell line was constructed that constitutively secreted the recombinant, truncated Mac-1 heterodimer into growth conditioned cell culture medium. A novel monoclonal antibody that enabled an immunoaffinity method for the selective purification of recombinant Mac-1 heterodimers was identified. Sufficient protein was purified to allow the first measurement of the 50% inhibitory concentration (IC₅₀) for CD11b/CD18 and for the direct comparison of the inhibitory activity of recombinant soluble Mac-1 with that of various CD18 and CD11b specific monoclonal antibodies. Purified recombinant soluble Mac-1 inhibited the binding of neutrophils, activated by opsonized zymosan or fMet-Leu-Phe peptide, to human umbilical vein endothelial cells. Similarly, the recombinant integrin was effective in inhibiting the binding of unactivated neutrophils to tumor necrosis factor (TNF-alpha) activated endothelial cells. The availability of an abundant source of purified, biologically active Mac-1 will enable direct physical and chemical investigations into the relationship between the structure and function of this leukocyte adhesion molecule.     

Sulfonated human immunoglobulin enhances CD16-linked CD11b expression on human neutrophils

Intravenous human immunoglobulin therapy infrequently results in excessive inflammatory responses in vivo; these effects are not fully understood. We assessed whether sulfonated human immunoglobulin (SHIG) or polyethylene glycol-treated human immunoglobulin (PHIG) enhanced expression of inflammatory receptors on peripheral blood neutrophils in vitro, such as alphaMbeta2 (CD11b/CD18) and Fc gamma receptor type III (FcgammaRIII). CD11b and CD16 expression on neutrophils was measured by fluorescence flow cytometry. Various cytokines were assessed using a highly sensitive fluorescence microsphere system. SHIG enhanced/induced CD11b expression and partial aggregations on neutrophils, but PHIG did not. No detection of aggregation IgG was observed in SHIG and PHIG. SHIG-induced CD11b expression was inhibited by treatment of corticosteroid (dexamethasone) and by anti-CD16 monoclonal antibody. Concentrations of various cytokines such as interleukin (IL)-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, RANTES, tumor necrosis factor (TNF)-alpha, and interferon (INF)-gamma in culture supernatant were not significantly changed by SHIG or PHIG. SHIG and PHIG did not enhance CD16 on neutrophils. SHIG enhanced CD16-linked CD11b expression on neutrophils in vitro. CD11b induction was inhibited by dexamethasone and by anti-CD16 antibody. These in vitro results suggest that aggregations and enhancement of CD11b on neutrophils by SHIG may induce excessive inflammatory responses in vivo.     

High-throughput screening based identification of small molecule antagonists of integrin CD11b/CD18 ligand binding

Binding of leukocyte specific integrin CD11b/CD18 to its physiologic ligands is important for the development of normal immune response in vivo. Integrin CD11b/CD18 is also a key cellular effector of various inflammatory and autoimmune diseases. However, small molecules selectively inhibiting the function of integrin CD11b/CD18 are currently lacking. We used a newly described cell-based high-throughput screening assay to identify a number of highly potent antagonists of integrin CD11b/CD18 from chemical libraries containing >100,000 unique compounds. Computational analyses suggest that the identified compounds cluster into several different chemical classes. A number of the newly identified compounds blocked adhesion of wild-type mouse neutrophils to CD11b/CD18 ligand fibrinogen. Mapping the most active compounds against chemical fingerprints of known antagonists of related integrin CD11a/CD18 shows little structural similarity, suggesting that the newly identified compounds are novel and unique.     

慢性牙周炎患者唾液中IL-17，miR-146a表达水平与疾病程度的相关性分析

目的:观察和分析慢性牙周炎(CP)患者唾液中白细胞介素-17(IL-17)、微小RNA-146a(miR-146a)表达水平与疾病程度的相关性。方法:选取80例CP患者作为病例组,选取80名健康志愿者作为对照组,对两组研究对象唾液样本中的IL-17、miRNA-146a表达水平进行检测和比较。对病例组患者的菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、牙周探诊深度(PD)和附着丧失(AL)等牙周病指标进行检测。结果:病例组患者唾液中IL-17、miR-146a表达水平显著高于对照组,两组之间的差异均有统计学意义(P0.05)。随着疾病程度的加剧,患者唾液中IL-17、miR-146a表达水平也逐渐上升,各组之间的差异均有统计学意义(P0.05)。Spearman等级相关分析结果显示,CP患者唾液中IL-17、miR-146a表达水平与牙周炎严重程度均呈正相关关系(P0.05)。直线相关分析结果显示,CP患者唾液中IL-17、miR-146a表达水平与PLI、GI、PD、AL等牙周炎临床指标均呈正相关关系(P0.05)。结论:CP患者表现为唾液中IL-17、miR-146a表达水平的显著升高,其表达水平与疾病严重程度和临床指标均具有相关性。     

KDR rs1870377基因与经皮冠状动脉介入治疗术后氯吡格雷耐药相关性分析

摘要 目的：探讨与分析KDR rs1870377基因与经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention, PCI）术后氯吡格雷耐药相关性。方法：2018年5月到2021年2月选在航天中心医院（北京大学航天临床医学院）老年医学一科住院的冠心病患者97例作为研究对象,所有患者在PCI术后判定氯吡格雷耐药情况,检测KDR rs1870377基因多态性状况并进行相关性分析。结果：在97例患者中,PCI术后氯吡格雷耐药22例(耐药组),耐药率为22.7 %。耐药组的空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯等与非耐药组对比差异无统计学意义（P>0.05）。KDR rs1870377基因主要包括AA、CC、CA三种基因型,两组都与Hardy-Weinberg平衡定律相符合,研究对象具有群体代表性。耐药组的KDR rs1870377基因CC基因型高于非耐药组（P<0.05）,耐药组的等位基因C频率高于非耐药组（P<0.05）。Spearsman分析显示KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C与氯吡格雷耐药存在相关性（P<0.05）。多元Logistic回归分析显示KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C为导致PCI术后氯吡格雷耐药的重要因素（P<0.05）。结论：冠心病患者PCI术后氯吡格雷比较常见,也伴随有KDR rs1870377基因多态性,KDR rs1870377基因CC基因型、等位基因C为导致PCI术后氯吡格雷耐药的重要因素。     

Increased CD11b+ Gr‐1+ cell population in the placenta after infection with Toxoplasma gondii

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan pathogen that can cross the placenta, resulting in congenital toxoplasmosis with severe fetal brain abnormalities. The molecular mechanisms of immune responses against T. gondii infection in the placenta have largely remained unclear. An analytical method for characterizing phenotypes of immune cells in the placenta by flow cytometry was established and it was found that numbers of CD11b⁺ Gr‐1⁺ cells in the placenta increased significantly after T. gondii infection. These results suggest that innate immune responses play an important role in immunity against T. gondii infection via the feto‐maternal interface.