微藻合成多不饱和脂肪酸DHA

二十二碳六烯酸（DHA）具有独特的生理功效,主要表现在心脏循环系统、炎症和癌症3方面。可以预防和治疗动脉粥样硬化、血栓形成、高三酸甘油酯、高血压、气喘、关节炎、头疼、牛皮癣、肾炎、乳房炎、前列腺炎和结肠炎等各种疾病。     

多不饱和脂肪酸合成途径研究进展

多不饱和脂肪酸在大多数生物体膜生物学和信号传递过程中起着至关重要的作用。最近研究发现,一些深海生物合成多不饱和脂肪酸并非由饱和脂肪酸的延长及脱饱和反应,而是由聚酮合酶途径(polyketide synthase,PKS)直接合成。介绍多不饱和脂肪酸的生物合成并总结近年来聚酮合酶这一新途径及其分子机制的研究进展。     

转基因哺乳动物细胞自合成多不饱和脂肪酸

亚油酸、亚麻酸是哺乳动物体内的必需脂肪酸,但哺乳动物由于缺乏△12和ω-3脂肪酸脱氢酶而自身不能合成．△12和ω-3脂肪酸脱氢酶存在于真菌、植物和一些低等动物中．为了实现哺乳动物细胞亚油酸的自身合成,克隆了线虫编码△12脂肪酸脱氢酶的FAT-2基因eDNA序列,通过优化密码子,构建真核表达载体,稳定转染细胞,经抗生素筛选获得稳定整合FAT-2基因的CHO细胞．PCR和RNA印迹（Northern blot）验证了基因的整合和表达．气相色谱分析细胞的脂肪酸含量表明,FAT-2基因的表达显著提高了转基因细胞中亚油酸的含量,亚油酸含量为阴性对照细胞的2．4倍．研究结果表明,低等动物△12脂肪酸脱氢酶可以重建哺乳动物多不饱和脂肪酸合成途径,并利用细胞中的油酸合成亚油酸．上述研究为进一步利用转基因技术促进农业动物合成多不饱和脂肪酸从而提高食品营养价值奠定基础．     

植物合成长链多不饱和脂肪酸研究进展

长链不饱和脂肪酸（LC-PUFAs）对人类健康具有重要作用,通过转基因植物生产LC-PUFAs具有低成本、可持续、污染少等诸多优势。本文简要介绍了LC-PUFAs的作用、来源及其植物生物合成途径,综述了转基因植物合成LC-PUFAs的研究进展,并对如何进一步提高LC-PUFAs产量进行了探讨。     

固相法合成多肽AN-M的工艺研究

目的:探讨生物活性肽AN-M的固相合成工艺,并为工业化合成目的肽提供理论依据。方法采用固相法,以Fmoc-保护基保护的α-氨基酸和Wang树脂为原料,经1—氧—3—双二甲胺羧基苯骈三氮唑四氟化硼盐(TBTU)、1—羟基苯并三氮唑(HoBt)、二异丙基乙胺(DIEA)缩合,20%哌啶的DMF溶液脱保护,用切割试剂将AN-M粗品从Wang树脂上切割下来。结果经反相高效液相色谱分析纯化,可得目的肽的得率大于67．00%,最终成品的纯度在98．78%以上,经质谱鉴定其分子量与理论值一致。结论该合成方法步骤简便、便于操作、产品得率高,可用于大规模合成目的肽。     

优化尿素包和法富集鼠尾藻中多不饱和脂肪酸工艺

利用响应曲面分析法优化尿素包和法富集鼠尾藻中多不饱和脂肪酸的工艺,分别以亚油酸(LA,Y1)、亚麻酸(GLA,Y2)、十八碳四稀酸(SA,Y3)、花生四稀酸(AA,Y4)、二十碳五稀酸(EPA,Y5)、总的不饱和脂肪酸(PUFAs,Y6)为响应变量,采用三因素中心复合旋转设计来研究尿素脂肪酸质量比值(X1),结晶温度(X2),结晶时间(X3)对响应变量的影响,并建立二次多项式数学模型.实验表明,最佳工艺条件为尿素脂肪酸质量比值3.5,结晶温度-5℃,结晶时间20.4 h,在此工艺条件下,最大多不饱和脂肪酸的总量可达85.02%.     

裂壶藻脂肪酸合酶途径合成多不饱和脂肪酸的研究

裂壶藻作为一种生产DHA的重要菌种,其脂肪酸合成途径除了已经被广泛了解的聚酮合酶(PKS)途径外,还残存着作为真核微生物中常见的脂肪酸合酶(FAS)途径中的功能酶和中间产物。经过前期的研究,运用基因工程手段,将载有与裂壶藻近缘藻种中已知的Δ12-desaturase表达模块和相关筛选标记构建入载体,通过电击转化导入Schizochytrium sp.ATCC20888中,以期望修复裂壶藻中FAS途径的合成能力。通过分子水平检测确定目的功能基因已稳定转化后,再由气相色谱分析转化株油脂中相关脂肪酸含量分布情况。经过长期筛选验证,最终证明获得了两株阳性转化株,其生物量初步测定分别较野生株提高11.14%和4.12%,其油脂中DHA含量分别较野生株提高了19.50%及14.65%。     

生物法合成β-丙氨酸的分离纯化工艺研究

依据天冬氨酸和β-丙氨酸等电点的差异,采用静态吸附和动态吸附法,筛选适于分离β-丙氨酸的最佳树脂,并研究最佳树脂的吸附动力学和料液pH值、上样液流速,洗脱剂浓度等对β-丙氨酸分离的影响。结果表明:β-丙氨酸吸附的最佳树脂为HZ014,HZ014的静态吸附70 min达到动态平衡,吸附容量为72.92 g.kg-1,吸附率高于90%,最佳料液流速是2 ml.min-1,料液最佳pH为5.0,洗脱剂氨水浓度为4%。     

乙酰胆碱酯酶的结构与功能研究进展

乙酰胆碱酯酶是多分子型复杂蛋白质,广泛分布于各种组织,其主要功能是催化水解神经递质乙酰胆碱,近年来发现其有非胆碱能活性。同一组织不同分子型乙酰胆碱酯酶其催化机制及K_m具有相似性,但其一级结构不同。乙酰胆碱酯酶催化效率很高,其催化机制包括靠近、定向、一般酸碱催化及电荷接力系统等过程。乙酰胆碱酯酶在粗面内质网内合成,其代谢过程受某些因素的调节,在某些病理状态下酶活性发生改变。     

细菌通过聚酮合成酶途径合成多不饱和脂肪酸的研究进展

细菌利用聚酮合成酶途径合成多不饱和脂肪酸是近年发现的新的脂肪酸合成途径。这种途径与常规的由脂肪酸去饱和酶和脂肪酸延长酶引导的脂肪酸合成途径有着本质上的差别。总结了近些年细菌利用聚酮合成酶合成多不饱和脂肪酸这一新途径的研究状况,重点阐明其分子机制,并对其研究趋势及应用前景进行了展望。     

生物转化法合成16α-羟基泼尼松龙的发酵工艺研究

目的:研究1株玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes)的发酵培养基和底物转化条件,以提高16α-羟基泼尼松龙的转化率。方法:采用紫外与氯化锂复合诱变获得目的菌株TS-58,利用正交实验等方法考查摇瓶发酵条件,研究不同浓度的碳源、氮源对玫瑰产色链霉菌生长的影响,以及不同底物浓度、底物加入时间、装液量、金属离子和添加助溶剂等条件对转化生成16α-羟基泼尼松龙能力的影响。结果:获得最佳转化培养基为葡萄糖10 g/L、可溶性淀粉50 g/L、蛋白胨10 g/L、黄豆饼粉25 g/L、磷酸二氢钾0.2 g/L、硫酸镁0.5 g/L硫酸锌0.5 g/L。在底物投料量5 mg/mL添加0.8 mg/ml PEG助溶剂的最优条件下,16α-羟基泼尼松龙的转化率达到了13.8%。结论:突变株Streptomyces roseochromogenes TS-58能有效地在泼尼松龙上引入16α-羟基羟基,为工业生产16α-羟基泼尼松龙奠定了基础。     

γ-谷氨酰转肽酶补料法合成L-茶氨酸工艺研究

对γ-谷氨酰转肽酶酶法制备L-茶氨酸的工艺进行优化。通过恒速补料的策略,以200 mmol/L L-谷氨酰胺和2 mol/L乙胺盐酸盐作为初始底物,37℃、p H10.0条件下反应,每2 h补加100 mmol L-谷氨酰胺,反应14 h,最终L-谷氨酰胺底物总浓度为900 mmol/L,L-茶氨酸的生成量达到573.2 mmol/L,转化率达到63.7%,生产强度为40.9 mmol/(h·L)。采用变速流加的工艺,以同样的初始条件进行反应,每2 h补加L-谷氨酰胺至初始浓度200 mmol/L,反应15 h,最终L-谷氨酰胺总浓度为600 mmol/L,L-茶氨酸的生成量达到445.8 mmol/L,转化率为74.3%,生产强度为29.7 mmol/(h·L)。     

多不饱和脂肪酸的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFAs)为一独特的生物活性物质,在生物系统中具有广泛的功能。过去二十年的研究已经揭示了其作用、参与类二十烷的代谢机理及在哺乳动物中的体内平衡功能。越来越多的研究认为:在类二十烷代谢系统中,采用普通的医疗条件诊治因多不饱和脂肪酸吸收和代谢紊乱所致的疾病效果甚微随着PUFAs开发应用领域的扩大,纯PUFAs脂质的需求量越来越多,而来自于植物、哺乳动物和海洋鱼的PUFAs远远不能满足市场需求,微生物特别是藻类、真菌能合成几乎所有的PUFAs并能在工业规模上培育而被视为有开发价值的可替代的生物资源 。     

多不饱和脂肪酸的研究进展

多不饱和脂肪酸（PUFAs)为一独特性的生物活性物质,在生物系统中具有广泛的功能。过去二十年的研究已经揭示了其作用、参与类二十烷的代谢机理及在哺乳动物中的体内平衡功能。越来越多的研究认为：在类二十烷代谢系统中,采用普通的医疗条件治因多不饱和脂肪酸吸收和代谢紊乱所致的疾病效果甚微。随着PUFAs开发应用领域的扩大,纯PUFAs脂质的需求量越来越多,而来自于植物、哺乳动物和海洋鱼的PUFAs远远不能满足市场需求,微生物特别是藻类、真菌能合成几乎所有的PUFAs并能在工业规模上培育而被视为有开发价值的可替代的生物资源。     

多不饱和脂肪酸的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA)是人类的必需脂肪酸,对人体有重要的生理功能,能调节人体的脂质代谢、治疗和预防心脑血管疾病、抗癌、对抗肥胖,促进生长发育和提高幼体的成活率等．综述了PUFA的生理作用和来源的研究进展,特别是在对抗肥胖、促进生长发育、提高幼体的成活率等方面的研究情况进行了阐述．     

蜜蜂酯酶同工酶的研究

本实验用聚丙烯酰胺凝胶等电聚集电泳分析了意蜂和中蜂的酯酶同工酶。意蜂和中蜂的酶谱有明显的种间差别。意蜂的酶谱可分为四组区带:酯酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。意蜂不同发育阶段的酶谱也有不同。酯酶Ⅳ的含量在蛹期有很大的变化。酯酶Ⅳ表现出多态现象,对多态现象的分析可推测种群的杂合程度。     

产多不饱和脂肪酸微生物的研究与展望

二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等ω3长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)具有多方面的生理功能和疾病防治作用。利用转基因油料植物和油质单细胞微生物生产富含ω3 PUFAs的植物油和单细胞油,已作为可替代鱼油生产的可持续的生产方式且科学家对其展开研究并取得很大进展。亚麻芥等经代谢工程改造的植油料物,在油籽中生产和积累的ω3 PUFAs已达到类似鱼油的水平;在油质微生物方面,采用裂殖壶菌等油质微藻生产的富含DHA的藻油已被广泛应用于婴儿配方奶粉、食品、化妆品和医药等产品;一些油质真菌如高山被孢霉也已被用于富PUFAs油的商业生产;从γ-变形菌门的希瓦氏菌属和拟杆菌门的屈挠杆菌属等种群中已分离出一批能产生ω3 PUFAs的细菌;此外,真核和原核微生物中ω3 PUFAs的生物合成途径及其催化酶已被相继阐明,并形成了耶氏酵母生物技术平台。本综述对产多不饱和脂肪酸微生物近年的研究进展进行了综述并对发展前景做了展望。     

人羧酸酯酶1结构和功能的研究进展

人羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,HCE1)是丝氨酸水解酶多基因家族的重要成员之一,它是一种参与肝脏外源物质解毒及代谢的肝羧酸酯酶。HCE1还能参与人体内胆固醇酯和游离脂肪酸的运输和代谢过程,与肝细胞肝癌的发生发展密切相关。文中就近十年来人羧酸酯酶1的分子结构、药物代谢、毒物代谢、脂质代谢及早期诊断肝细胞肝癌等功能方面的相关研究进展进行综述。