口岸植物检疫脱毒处理技术研究进展

植物病毒影响植物的生长和发育,尤其是植物病毒的传染性及增殖性对一种或者一类植物的危害巨大。为了防范植物病毒随寄主贸易跨境传播危害,本文阐述了茎尖培养脱毒、热处理脱毒、热处理结合茎尖脱毒、离体微型嫁接、化学处理结合茎尖脱毒和低温疗法等脱毒技术,对应用于口岸检疫性病毒的不同脱毒方法进行了综述和分析,同时对今后植物检疫脱毒研究方向进行了展望。     

植物病毒及其危害

病毒是至今人们所知的在自然界最小的生物之一,其形态大小要借助电镜放大到几万甚至几十万倍才能观察得到。它具有严格的寄生性。必须在宿主细胞内才能生长繁殖。植物病毒作为重要的病原物,可通过多途径传播,在全世界范围内引起农作物严重的病害。目前多采用综合措施防治以减轻病害,尚未有彻底的根治方法。     

园艺植物茎尖冷冻疗法脱毒的技术研究

超低温冷冻疗法是超低温保存技术在植物脱毒上的一个新的应用。由于其脱毒率高,操作简单,被认为是最有效脱除植物病毒的方法,为脱毒苗的生产开辟了一条新的途径。本文就超低温冷冻疗法脱毒的原理、操作程序、关键技术和在园艺植物上的最新研究进展进行综述,并对其今后的发展进行了展望。     

植物组培脱毒技术及其在药用植物藏红花中的应用

植物组培脱毒技术可以脱除患病毒病植株的病毒,起到植株复壮,提高产量及质量的作用。综述了植物组织培养脱毒的技术方法及其近几年的应用情况,同时针对药用植物藏红花脱毒球茎培育中应用的脱毒技术做了总结及探讨。     

金针菇褐化病毒(FvBV)脱毒方法

【目的】评价5种不同脱毒方法对金针菇(Flammulina velutipes)菌株的脱毒效果,筛选出脱毒率高和脱毒后金针菇菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等性状改善明显的脱毒方法。【方法】以栽培金针菇菌株F-4889为研究材料,从菌丝体中提取大小约2.0 kb的病毒dsRNA,经RT-PCR鉴定该病毒为金针菇褐化病毒(FvBV)。采用菌丝尖端分离、原基组织分离、原生质体单核化、有性生殖和核迁移5种脱毒方法对金针菇菌株进行脱毒处理,利用dsRNA技术和RT-PCR检测脱毒效果。【结果】菌丝尖端分离脱毒后得到1株脱毒菌株;原基组织分离法未能脱毒;原生质体单核化脱毒法得到3株脱毒单核菌株和2株原单杂交脱毒菌株;有性生殖脱毒法获得脱毒孢子单核菌株23株和单孢杂交脱毒菌株8株;核迁移脱毒后得到5株核迁移脱毒菌株。脱毒率依次为25.0%、0、7.5%、57.5%和100%。脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均优于出发菌株、菌丝尖端和原基组织分离菌株。【结论】这5种方法中原生质体单核化、有性生殖和核迁移脱毒法脱毒效果较佳,均能有效脱除FvBV,脱毒率高,脱毒后菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均明显提高。     

检测植物组培苗脱毒的酶联免疫技术

目前,植物茎尖培养是植物脱病毒技术中一种较有效的方法,国内外植物脱病毒技术的研究大都集中于这项工作。在植物脱病毒的研究中,病毒检测是一个重要的环节,而试管苗一般不易直接观察到病毒的症状。当前,常用于检测试管苗脱毒的技术有指示植物法和电镜观察法,其中,指示植物检测法灵敏度低,同时因受寄主植物生长期,培养指示植物的温度及光照等条件的影响,有时会导致症状很难表现。电子显微镜检测法灵敏直观,但工作量很大,速度慢。酶联免疫检测法(ELISA)的原理是通过抗原抗体专一性反应来鉴定病毒的存存与否,因此,这种方法具有灵敏度高,专一性强,速度快,操作简便的优点。     

应用生物技术脱除大蒜病毒的研究

大蒜普遍感染病毒,是影响产量的关键因素.应用生物技术对大蒜进行脱毒研究,获得了脱毒再生植株和脱毒蒜.结果表明,选用带一片叶原基的茎端作外殖体比较适宜,既能保证成活率,又有较好的脱毒效果;筛选出适宜茎端生长的培养基MS附加KT0.5mg/l,NAA0.5mg/l,成苗率70%以上;筛选出低浓度盐的生根培养基,生根率100%;采用电镜定量检测法进行病毒测定,再生株脱毒率达到53.8%.已获得脱毒的二代两瓣大蒜,其直径和重量已经超过正常的商品蒜.     

百合不定芽培养脱毒种球生产的研究

百合不定芽培养再生植株的病毒脱毒效果因百合品种和病毒种类而有所差异;‘卡萨布兰卡’百合潜在病毒（LSV）容易脱去,脱毒率达76%,‘魅丽’黄瓜花叶病毒（CMV）能全部脱去。‘卡萨布兰卡’不定芽培养在固体培养基和液体培养基都能很好形成子球;在含有抗病毒剂（10 mg/L DHT）的液体培养基中子球增大显著,LSV脱毒效果理想。无病毒子球移到有防虫网的户外栽培,2年后部分植株被检测出病毒,再感染率因品种而不同,‘卡萨布兰卡’高达73%,麝香百合‘乔治亚’仅17%;无病毒植株‘乔治亚’,香华丽百合和‘卡萨布兰卡’的生长高度要比有病毒植株明显增高。     

百合不定芽培养脱毒种球生产的研究

百合不定芽培养再生植株的病毒脱毒效果因百合品种和病毒种类而有所差异;‘卡萨布兰卡’百合潜在病毒(LSV)容易脱去,脱毒率达76％,‘魅丽’黄瓜花叶病毒(CMV)能全部脱去。‘卡萨布兰卡’不定芽培养在固体培养基和液体培养基都能很好形成子球;在含有抗病毒剂(10mg／L DHT)的液体培养基中子球增大显著,LSV脱毒效果理想。无病毒子球移到有防虫网的户外栽培,2年后部分植株被检测出病毒,再感染率因品种而不同,‘卡萨布兰卡’高达73％,麝香百合‘乔治亚’仅17％;无病毒植株‘乔治亚’．香华丽百合和‘卡萨布兰卡’的生长高度要比有病毒植株明显增高。     

半夏脱毒与快繁技术研究进展

半夏是我国传统中药材，长期无性繁殖导致病毒积累对半夏产量和品质造成了严重影响。由于半夏茎尖病毒积累少，利用半夏茎尖脱毒快繁技术可有效解决病毒害严重的问题。本研究从半夏主要病毒种类、脱毒方法、组培快繁和病毒检测等方面对半夏脱毒与快繁技术进行综述，以期为半夏脱毒快繁体系的建立提供参考。     

植物抗病毒基因工程研究进展

病毒作为一种依赖于宿主细胞代谢的病原体对全球农业造成了重大经济损失。虽然目前已利用多种防治策略来控制病毒病,例如培育抗病毒品种、使用化学杀菌剂、切断病毒的感染途径、组织脱毒、传统农业防治等,但都无法从根本上控制病毒病的危害。近年来的研究表明,基因工程手段能够有效对抗植物病毒病害。本文综述了基因工程手段改造植物抗病毒能力的技术和方法。     

台湾植物组织培养研究现状

高等植物组织培养技术在农业研究上的应用已引起广泛的注意,在许多发达国家组织培养已取得巨大进步。本文概括介绍组织培养技术在台湾农业上的应用情况。这包括：1．生产脱毒植物;2．优良作物的快速繁殖;3．花药培养生产单倍体植物;4．试管受精和胚胎培养;5．通过愈伤组织和细胞悬浮培养生产次生物质;6．通过体细胞变异产生新的遗传资源;7．种质保存和运输;8．原生质体培养和基因转移技术。工生产脱毒植物通过组织培养的无菌操作可以得到无细菌或真菌感染的植物。茎尖或根尖通常没有病毒或只有很少病毒颗粒（Kassanis,1957）。因…     

植物抗病毒基因工程的研究进展

病毒病是农作物的主要病害之一．目前已知的植物病毒有32组700多种,几乎在各类作物上都有发生,给农业生产带来了巨大的损失。为此人们多方探索,但目前仍缺乏直接有效的方法,主要还是依靠一些间接的手段,如用农药控制传播病毒的昆虫,保护植物免受病毒侵染。但该方法所用药剂价格较高,使用费时费工,易造成环境污染。另一种方法是通过组培脱毒法获得无毒种植材料．但成本高,工作量大;特别是由于病毒田间再侵染,使得无毒材料“旧病复发”。因此防止植物病毒的根本途径归根到底依赖于培育抗病品种。但传统的抗病毒育种存在着许多限制…     

植物病毒互作研究及基因编辑技术在抗病育种中的应用进展

病毒病害是危害农作物生长的重要病害,最经济有效的防治策略是选育对病毒有抗性的品种。随着病毒与植物互作研究的深入,我们对于病毒在其生活周期中与其所依赖的植物基因的互作有了深入的认识。病毒进入植物细胞后,其病毒颗粒的解聚、基因的表达、基因组的复制、其核酸蛋白复合体通过包间连丝和韧皮部的移动等过程都依赖病毒基因与植物特定基因的相互作用。这些植物基因的隐性突变可以导致植物对病毒的抗性。这类变异存在于作物的自然变异群体中,可以直接应用于抗病育种。CRISPR/Cas介导的基因编辑技术是一种可以在动植物体内对DNA序列进行定点突变的新技术,在过去几年里得到了突飞猛进的发展。利用该技术对病毒所依赖的植物基因进行定点突变或编辑,从而打破病毒与植物基因的互作关系,为创造抗病毒的作物提供了一条行之有效的途径。植物病毒互作研究和基因编辑技术的结合可以克服自然变异群体中,病毒依赖基因隐性突变频率小的问题,加速相关种质资源的创新步伐。因此它们正成为两支有力的翅膀,推动抗病育种的腾飞。拟通过对基因编辑研究领域近两年的研究进展以及植物与病毒互作研究领域的研究成果进行归纳总结,为基因编辑技术在抗病毒植物种质创新提供参考。     

黄独脱毒苗种质离体保存及其遗传稳定性和病毒变化的初步研究

以黄独脱毒苗带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,采用正交实验和单因子实验方法研究了无机盐水平、蔗糖、甘露醇和植物生长抑制剂PP₃₃₃对黄独脱毒苗离体保存的影响。结果表明,黄独脱毒苗带芽茎段在25±1℃下保存于附加2.0 mg·L^-1 KT、0.5 mg·L^-1 NAA、30 g·L^-1蔗糖、20 g·L^-1甘露醇和4 mg·L^-1 PP₃₃₃的1/4MS培养基上,180 d后其成活率可达90%以上。离体保存后的脱毒苗经形态指标和生理生化指标以及RT-PCR分析测定没有发生遗传变异,也没有检测到PVY病毒。本实验结果为药用植物黄独脱毒苗的种质保存提供了一条简单有效的途径。     

食用菌病毒的研究进展

病毒是引起食用菌发生病害的重要病原之一,由于其具有潜隐性、不易辨认的特点,因而难以被人们所察觉,一旦发病就难以控制。在食用菌研究领域中,食用菌病毒使食用菌产量严重下降,引起的病害越来越受人们的重视,逐步成为该领域的研究热点。因此,本文主要针对食用菌病毒的结构与分类、危害、传播方式、检测方法以及食用菌病毒的脱毒技术等方面进行了综述,并对其存在的问题和前景进行了展望。这为食用菌病毒的检测、脱毒和无毒菌种的生产提供了理论依据,并为食用菌病毒的深入研究提供参考。     

深切缅怀田波院士

正田波(1931–2019),中国科学院院士,我国著名病毒学家,美国病毒学会高级会员,印度病毒学会终身会员,国际类病毒工作委员会委员。第八届、第九届全国政协委员。田先生是中国现代病毒学的先驱和开拓者。早期致力于植物病毒学的研究,20世纪50–70年代,他阐明了病毒与高温在马铃薯花叶型退化中的作用,合作制定了茎尖脱毒生产无病毒马铃薯原种的技术方案,广泛应用于我国马铃薯的生产     

植物病毒的提纯

植物被病毒感染后常表现种种外部病症,这是研究植物病毒的一个重要方面。而对病毒的形态及各种物理化学特性的研究,首先要将病毒提纯或部分提纯。本文拟对植物病毒的提纯方法作一系统简介。     

烟草脆裂病毒诱导的基因沉默在植物基因功能研究中的应用

烟草脆裂病毒(tobaccorattlevirus,TRV)是一类应用比较广泛而且效率和持久性较好的病毒载体,能够介导基因沉默同时不会带来病毒诱导的症状。改造后的病毒能够促进非病毒序列的插入以及对植物的后续感染,也可以鉴定宿主植物生长点的基因,因此TRV在植物基因功能鉴定中具有广泛的应用。该文介绍TRV沉默载体的构建、诱导基因沉默原理、在植物基因功能研究中的应用以及优缺点。     

烟草花叶病毒及其弱毒疫苗-N14基因组cDNA克隆的构建与侵染性分析

植物病毒弱毒疫苗在防治植物病毒病害中发挥着重要的作用,但对于其致弱的根本原因和机理仍不十分清楚。弱病毒能够在植物体内生存和繁殖,却不严重危害植物的生长、开花和种子生产,而对外来病毒具有杀灭和防治作用,这种共生和保护宿主的现象是大多数植物弱病毒所具有的共同...