云南星云湖酵母菌多样性及产类胡萝卜素的评价

【背景】星云湖属云南高原湖泊,对其酵母菌的多样性研究和产类胡萝卜素菌株的筛选有助于开发利用星云湖酵母菌资源。【目的】研究云南星云湖酵母菌群落结构多样性,筛选和评价产类胡萝卜素活性菌株。【方法】采用膜过滤平置培养对星云湖水样进行酵母菌分离;应用26S rRNA D1/D2区域序列分析和形态特征及生理生化指标相结合,对分离获得的酵母菌进行鉴定;运用软件BIO-DAP分析酵母菌类群的多样性;采用酸热法提取类胡萝卜素,紫外分光光度计测定类胡萝卜素含量。【结果】从星云湖湖水中分离得到797株酵母菌,鉴定为18个属37个种。胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和Naganishia albida是优势种,分别占总菌株数的36.64%和28.86%;有28株酵母菌类胡萝卜素产量可达200μg/g细胞干重以上;有4株类胡萝卜素产量可达300μg/g细胞干重以上;粘红酵母(Rhodotorula glutinis) 2株、胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)和Rhodosporidiobolus fluviale各1株。【结论】云南高原湖泊星云湖的酵母菌具有丰富的多样性,湖泊的营养化程度以及地理差异影响酵母菌群落的结构;红冬孢酵母属(Rhodosporidiobolus)和红酵母属(Rhodotorula)是星云湖类胡萝卜素产量可达300μg/g细胞干重以上的主要类群。有进一步开发研究的价值。     

云南阳宗海酵母菌种群结构及产胞外酶测试北大核心CSCD

【目的】研究阳宗海酵母菌种群结构,分析生物因子及非生物因子对酵母菌种群分布的影响;测试阳宗海酵母菌产胞外酶活性。【方法】水样用醋酸纤维素滤膜过滤,原位培养分离酵母菌;梯度稀释法分离土样和底泥样品;对分离得到的菌株进行DNA提取和测序,分析26S rDNA的D1/D2区域,并结合形态及生理生化指标进行鉴定;用产酶筛选培养基对分离得到的酵母菌进行产胞外酶活性测试。【结果】共分离得到201株酵母菌,鉴定分属于15个属48个种,其中包括10个潜在的新种;普鲁兰类酵母(Aureobasidium pullulans),库德里阿兹威氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii),胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa),Cryptococcus podzolicus是优势种;15.9%的酵母菌具有产胞外酶活性,主要是脂肪酶和淀粉酶。【结论】阳宗海酵母菌有较为丰富的多样性,人为活动对阳宗海酵母菌分布影响较大,其次浊度、电导率也是影响酵母菌种群分布的重要因素;阳宗海产胞外酶酵母菌可能参与湖泊生态系统的自然循环。     

云南程海湖冬季酵母菌多样性及胞外酶活性研究

采用过滤涂皿的方法对云南程海湖冬季湖水样品中的酵母菌进行分离,通过26S r DNA D1/D2区域序列分析并结合形态观察和生理生化测试对分离获得的菌株进行鉴定,同时采用胞外酶定性筛选培养基进行产酶活性筛选,分析冬季程海湖酵母菌的多样性及胞外酶活性。结果从程海湖中分离获得171株酵母菌,鉴定为14个属22个种和2个潜在的新分类单元;优势属是红冬孢酵母属Rhodosporidium、红酵母属Rhodotorula和隐球酵母属Cryptococcus;优势种是红冬孢酵母Rhodosporidium kratochvilovae和斯鲁菲亚红酵母Rhodotorula slooffiae;湖北半部的样点CH2的多样性指数(H′=1.5945)和丰富度指数(R=2.7576)均最高,均匀度指数较高的是湖北部的样点CH1(J=0.8531);样点之间种群差异大,相似性低。大多数酵母菌株具有产1种以上的胞外酶。     

云南高原湖泊抚仙湖和星云湖的酵母菌胞外酶活性

【背景】高原湖泊因其海拔高、气压低、辐射强、氧气含量低,是一类特殊环境,而其中的微生物是高原湖泊生态系统物质循环与能量流动的重要参与者,其胞外酶活性的表现决定其适应这一特殊环境的方式与能力。【目的】对分离自云南高原湖泊抚仙湖和星云湖湖水的酵母菌进行产胞外酶活性的筛选,以期获得具有潜在应用价值的活性菌株。【方法】在5°C和25°C培养温度下,采用平板筛选法对两个湖泊酵母菌进行产胞外蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶、几丁质酶、木聚糖酶、植酸酶、菊粉酶、漆酶、锰依赖过氧化物酶和木质素过氧化物酶活性的筛选。【结果】抚仙湖和星云湖的所有测试酵母菌菌株至少都能产1种胞外酶,且主要产植酸酶、菊粉酶和淀粉酶;其次为脂肪酶、纤维素酶、木聚糖酶、锰依赖过氧化物酶和木质素过氧化物酶;产几丁质酶、蛋白酶和漆酶的酵母菌很少,星云湖酵母菌都不产漆酶。培养温度为5°C时,抚仙湖和星云湖的酵母菌产5种及5种以上胞外酶的活性菌株数均多于25°C。【结论】抚仙湖和星云湖的酵母菌产胞外酶菌株多样性丰富,胞外酶种类多样,产酶酵母菌可能参与高原湖泊生态系统的物质循环;筛选得到的产胞外酶菌株为开发与利用高原湖泊酶资源提供了良好的种质资源,具有进一步研究的价值。     

南海局部海洋沉积物中真菌多样性及产酶活性

【目的】从11份南海海洋沉积物中分离耐盐真菌,并对其物种多样性及产酶活性进行研究。【方法】利用平板涂布法分离耐盐真菌,基于形态学和ITS序列的系统进化研究耐盐真菌多样性;利用6种筛选培养基对耐盐真菌进行产酶活性筛选。【结果】分离得到1689株耐盐真菌,共41个形态种。形态学和ITS序列分析表明,这些真菌归于15个属,其中曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)为优势菌群。对已测序的41株耐盐真菌的产酶活性研究表明,8株产纤维素酶,9株产淀粉酶,5株产复合酶,16株产蛋白酶,3株产脂肪酶,未发现产壳聚糖酶的菌株,其中Acrodontium sp.8m和Aspergillus sp.86b产复合酶的活性相对较高,而Penicillium sp.41m产蛋白酶的活性相对较高。【结论】南海局部海洋沉积物中耐盐真菌丰富,多数菌株具有产酶活性。     

西藏拉鲁湿地水体酵母菌多样性及其与理化因子相关性

【目的】开展拉鲁湿地水体酵母菌多样性研究,探究理化因子与酵母菌群落结构的相互关系。【方法】采用原位培养法从拉鲁湿地11个水样中分离酵母菌,应用26S r RNA D1/D2区域序列分析,并结合经典分类法对获得的菌株进行分类鉴定,运用SPSS和CANOCO软件分析酵母菌多样性及其与环境因子相关性。【结果】从拉鲁湿地水体中分离得到169株酵母菌,鉴定分属为15个属31个种。优势种为Ustilentyloma graminis和Filobasidium magnum,优势属为Naganishia、Ustilentyloma、Filobasidium和Cystofibasidium。统计分析结果表明,化学需氧量(COD)是影响拉鲁湿地水体酵母菌数量的显著因素,另外,此理化因子是影响Ustilentyloma分布的重要环境条件。【结论】西藏拉鲁湿地酵母菌资源比较丰富,且存在明显的空间异质性。     

云南高原湖泊杞麓湖冬季可培养酵母菌多样性分析

【目的】探究云南杞麓湖酵母菌群落结构及其与环境因子的相互关系。【方法】采用原位培养方法对杞麓湖14个水样进行酵母菌分离,应用26S r DNA D1/D2区域序列分析,并结合形态及生理生化指标将对分离获得的酵母菌进行鉴定,运用软件bio-dap和Canoco分析酵母菌类群的丰富度及其与环境因子间的相互关系。【结果】从杞麓湖中分离得到321株酵母菌,鉴定为14个属27个种和1个潜在的新类群。Rhodosporidium kratochvilovae和出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)是优势种,分别为总菌株数的29.6%和16.8%。水体总磷含量是影响产色素红冬孢酵母属(Rhodosporidium)分布的重要环境因子,而p H为隐球酵母属(Cryptococcus)分布的一个重要选择条件。【结论】杞麓湖酵母菌具有较为丰富的群落多样性。     

西南地区高山湖泊中可培养细菌多样性及其所产胞外活性物质的特性

【目的】研究西南不同地区的高山湖泊中可培养细菌的多样性及其产胞外蛋白酶、纤维素酶和胞外多糖的能力。【方法】以西南4个不同地区的高山湖泊:雷波的马湖(LB)、中缅边境的凯邦亚湖(ZM)、沙德的莲花湖(SD)、腾冲的青海湖(TC)的水样为研究对象,利用稀释涂布平板方法对可培养细菌进行分离筛选,然后通过对可培养细菌的生理生化指标和16S r RNA基因序列进行分析,初步确定细菌属别;对分离得到的菌株进行产胞外蛋白酶和纤维素酶活性测定和产胞外多糖能力检测。【结果】从西南地区4个湖泊中共分离筛选得到41株细菌,其中LB 15株、ZM 13株、SD 7株、TC 6株。根据16S r RNA基因序列的系统进化分析,4个地区可培养细菌的组成和丰度存在明显差异,其中LB和ZM的优势菌属是芽孢杆菌属(Bacillus),其次是气单胞菌属(Aeromonas)和假单胞菌属(Pseudomonas),分离的TC菌株全部属于芽孢杆菌属(Bacillus),分离的SD菌株特异性较强。进一步酶活性和胞外多糖检测表明,分离得到的41株细菌中有28株菌的发酵产物具有蛋白酶活性,6株具有纤维素酶活性,17株可产胞外多糖(Exopolysaccharides,EPS)。其中有2株细菌同时产蛋白酶、纤维素酶和胞外多糖,10株细菌同时产蛋白酶和胞外多糖,2株细菌同时产蛋白酶和纤维素酶,1株细菌同时产纤维素酶和胞外多糖。【结论】西南4个高山湖泊中存在丰富的微生物菌种资源,且4个湖泊中筛选的可培养细菌受所处环境的影响大。其中莲花湖由于高海拔和较偏僻等特点,人为干扰小,分离得到的细菌类群与其他湖泊相比明显不同;而马湖、凯邦亚湖和青海湖3个湖泊的海拔相对较低,受人类活动影响较大,分离得到的细菌均较常见。此外高山湖泊中的可培养细菌具有分泌多种胞外活性物质特性,为工业化应用奠定了资源基础,极具更深入的开发和研究价值。     

云南抚仙湖产类胡萝卜素酵母菌的资源调查

【目的】对分离自云南抚仙湖湖水的379株酵母菌进行产类胡萝卜素的筛选,以期获得具有开发应用价值的产类胡萝卜素酵母菌。【方法】采用酸热法提取类胡萝卜素,紫外分光光度计测定类胡萝卜素含量,SPSS软件分析产类胡萝卜素酵母的分布特征。【结果】318株酵母菌(占供试菌株的83.91%)具有产类胡萝卜素的能力,大多数菌株类胡萝卜素产量在10-300μg/g之间,最高达590.83μg/g。产类胡萝卜素酵母集中分布于红冬孢酵母属(Rhodosporidium)和红酵母属(Rhodotorula);担子菌酵母产类胡萝卜素的能力高于子囊菌酵母;筛选到9株产类胡萝卜素活性较强的菌株:双倒卵形红冬孢酵母(Rhodosporidium diobovatum)3株、沼泽生红冬孢酵母(Rhodosporidium paludigenum)2株、粘红酵母(Rhodotorula glutinis)、禾本红酵母(Rhodotorula graminis)、瑞纳锁掷孢酵母(Sporidiobolus ruineniae)及Cystofilobasidium macerans各1株。【结论】高原湖泊抚仙湖生存着大量产类胡萝卜素的酵母菌,"红色酵母"(Red yeasts)具有较强的产类胡萝卜素的能力,红冬孢酵母属(Rhodosporidium)和红酵母属(Rhodotorula)是抚仙湖产类胡萝卜素酵母菌的主要类群。     

云南5个地区戟叶酸模花中酵母菌和类酵母的多样性

[目的]研究云南5个地区(晋宁、祥云、程海、泸沽湖、洱海)的戟叶酸模(Rumex hastatus)花中的酵母菌和类酵母.[方法]采用涂布平板法对5个地区的戟叶酸模花中酵母菌和类酵母进行分离,通过26S rDNA Dl/D2区域序列分析并结合形态观察对分离获得的酵母菌和类酵母进行鉴定;采用胞外酶定性筛选培养基进行产酶筛选;用苏丹黑B染色法筛选产油脂菌株.[结果]从戟叶酸模花中分离得到82株酵母菌和99株类酵母;82株酵母菌鉴定为6个属16个种和1个潜在新种,99株类酵母鉴定为短梗霉属(Aureobasidium)的普鲁兰类酵母(A.pullulans)及3个变种;戟叶酸模花中的优势属是类酵母短梗霉属,其次为红酵母属(Rhodotorula)和隐球酵母属(Cryptococcus);筛选到134株具有产胞外酶活性和83株产油脂的酵母菌和类酵母.[结论]研究结果显示5个地区的戟叶酸模花中酵母菌和类酵母种类多样性较为丰富,并具有产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶和油脂的特点,有潜在的应用前景.     

红富士苹果园酵母多样性研究

从北京顺义和山东泰安红富士苹果园采集果实、叶片、树皮和土壤等不同基物,分离酵母菌,利用26S rDNA的D1/D2区域序列分析并结合形态学特征和SSCP分析对这些菌株进行了分类学研究,探讨了苹果园酵母的物种多样性及其分布。北京苹果园共分离酵母菌129株,鉴定为13属21种,优势属为Pichia（4个种）,Cryptococcus（3个种）,Pseudozyma（3个种）,子囊菌占较大优势,分布于8属12种,占总种数的57.1%。山东苹果园共分离酵母291株,鉴定为13属26种,优势属为假丝酵母Candida（6个种）,毕赤酵母Pichia（4个种）和隐球酵母Cryptococcus（3个种）,并且子囊菌占较大优势,分布于7属17种,占总种数的65.4%。     

西藏曲拉和云南乳饼中酵母菌的鉴定及其生物多样性

【目的】探讨西藏曲拉和云南乳饼中酵母菌的生物多样性及其分布特征,为我国传统乳制品中酵母菌资源的利用提供基础数据。【方法】从西藏和云南分别采集的5份曲拉样品和8份乳饼样品中分离出41株酵母菌,利用26SrDNAD1/D2区域序列分析对这些菌株进行了分类鉴定。【结果】曲拉和乳饼样品中酵母菌的总数分别在106-107cfu/g和102-106cfu/g之间,曲拉样品的酵母菌平均数比乳饼样品中的高34倍。共鉴定出10属12种,其中西藏曲拉的优势菌株为发酵毕赤氏酵母(Pichia fermentans)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae);云南乳饼的优势菌株为类筒假丝酵母(Candida zeylanoides)和喜仙人掌毕赤氏酵母(Pichia cactophila)。毕赤氏酵母属(Pichia)是曲拉和乳饼的共同优势属。【结论】西藏曲拉和云南乳饼中的酵母菌都具有丰富的生物多样性,但其差异性很大。     

青海东部土壤中酵母物种多样性研究

从青海的互助、民和、门源等10个州县收集土样分离得到98株酵母菌, 利用26S rDNA D1/D2区域序列分析并结合形态学和生理生化特性对这些菌株进行了分类学研究, 探讨了青海东部土壤中酵母的物种多样性及其分布。共鉴定出10属13种(其中有两个疑似新种), 其中 Galactomyces geotrichum和Rhodotorula mucilaginosa为该地的优势种。     

石河子不同树龄蟠桃土壤中可培养酵母多样性分析及功能酵母的筛选

为了探究新疆本土蟠桃园可培养酵母菌多样性,并挖掘功能酵母资源,本研究以新疆石河子蟠桃园3年、8年、15年树龄的根际和非根际土壤以及桃树叶片为材料,经过传统的分离培养方法获得可培养的酵母菌菌株,并进行形态学、生理生化以及26S r DNA的D1/D2区序列分析,共获得可培养酵母菌129株,从属于12个属17个种,其中子囊菌酵母为优势菌群,占分离属的88%,分布于威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces),Vanrija属,Barnettozyma属和有孢圆酵母属(Torulaspora)等11个属的15个种。担子菌占分离属的12%,分布于隐球酵母属(Cryptococcus)的2个种。其中优势属威克汉姆酵母属,包括异常威克汉姆酵母(W. anomalus)和W. pijperi两个种,占总比例的33%,优势种异常威克汉姆酵母所占总株数比例为17%。从可培养酵母中共筛选出23株功能酵母,其中富硒酵母21株,优势种为白地霉(Galactomyces candidum),产蛋白酶酵母2株均属于隐球酵母属的Cryptococcus albidus。结果表明,新疆桃园中蕴含丰富的酵母菌资源,非根际土壤中的酵母多样性大于根际及叶片酵母多样性,且分离得到富硒酵母及产蛋白酶酵母。本研究挖掘了新疆本土可培养酵母菌资源,同时也为功能酵母的开发和利用提供理论指导。     

田间施药对自然发酵葡萄酒酵母菌群落结构的影响

【背景】酵母菌是葡萄酒发酵过程中一类非常重要的微生物,其多样性及群体组成对葡萄酒的质量有重要贡献。影响葡萄酒中酵母菌组成的因素有很多,但目前尚未见葡萄园田管理对葡萄酒酵母菌群落结构影响方面的报道。【目的】探索田间施药对自然发酵葡萄酒酵母菌群落结构的影响。【方法】采用分离培养、常规分子生物学鉴定和Illumina MiSeq宏基因组测序结合的方法分析不同样品中的酵母菌群落结构情况。【结果】从不使用内吸收型化学农药的葡萄样品自然发酵液中分离鉴定出Pichia、Hanseniaspora、Schizosaccharomyces、Candida、Saccharomyces、Zygoascus、Issatchenkia等7个属8个种的酵母菌,宏基因组测序结果表明有Pichia(29.42%)、Saccharomyces(21.91%)、Issatchenkia(17.99%)、 Hanseniaspora(12.10%)、 Candida(7.47%)、 Zygosaccharomyces(5.32%)、Schizosaccharomyces (3.07%)、Aureobasidium (0.29%)等属的酵母菌参与发酵;使用常规化学农药的葡萄样品自然发酵液中分离鉴定出Pichia、Hanseniaspora、Schizosaccharomyces、Candida、Cryptococcus等5个属6个种的酵母菌,宏基因组测序结果表明有Pichia (41.66%)、Hanseniaspora (21.54%)、Candida(19.11%)、 Zygosaccharomyces(7.78%)、 Schizosaccharomyces(4.04%)、 Cryptococcus(3.21%)、Saccharomyces (1.12%)、Aureobasidium (0.49%)等属的酵母菌参与发酵。【结论】两样品中酵母菌比例有显著差异,表明在酿酒葡萄的园田管理中化学农药的使用对自然发酵葡萄酒的酵母菌群落结构有较大影响。     

Yeasts from high-altitude lakes: influence of UV radiation

Mountain lakes located at a high elevation are typically exposed to high UV radiation (UVR). Little is known about the ecology and diversity of yeasts inhabiting these extreme environments. We studied yeast occurrence (with special emphasis on those producing carotenoid pigments) at five high-altitude (>1400 m a.s.l.) water bodies located in the Nahuel Huapi National Park (Bariloche, Argentina). Isolates were identified using a polyphasic approach. Production of photoprotective compounds (carotenoids and mycosporines) by yeast isolates, and UVB resistance of selected species were studied. All water samples contained viable yeast cells in variable numbers, generally ranging from 49 to 209 cells L⁻¹. A total of 24 yeast species was found; at least four represented novel species. Carotenogenic yeasts prevailed in lakes with low water conductivity and higher transparency and chlorophyll a levels. Apparently, the ability to produce photoprotective compounds in yeasts was related to the transparency of mountain lake waters, and strains from more transparent waters developed increased UVB resistance. Our results indicate that UVR is an important environmental factor affecting the yeast community structure in aquatic habitats.