蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

运动神经末梢(运动终板)制片法

运动神经末梢分布到骨骼肌纤维并和肌纤维紧密相贴,组成运动终板。运动终板呈卵圆形的板状隆起,一般长40—60微米,厚约10微米,大小可随肌纤维的粗细而改变。 1.取材蜥蜴、壁虎、蛇及幼年的哺乳动物的肋间肌。肌肉每块厚度3毫米左右。 2.固定组织人下列固定液呈透明。柠檬酸20克,葡萄糖7克,1％氯化金水溶液1毫升,蒸馏水100毫升 3.方法步骤 (1) 用洁净滤纸将固定后的组织吸干。 (2) 1％氯化金水溶液,浸30—60分钟(放置暗处)至肌肉组织呈金黄色为止。     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

检测烟草中烟草花叶病毒的RNA斑点杂交法

用普通烟草花叶病毒OM株3′-端约2kb的cDNA为探针,探索了用RNA斑点杂交法对烟草组织中烟草花叶病毒RNA进行检测的条件。这些条件包括用分子杂交法观察云南烟区和上海烟草上分到的烟草花叶病毒与OM株的同源性,从烟草组织中提取烟草花叶病毒的几种方法的比较,使RNA有效地固定在硝酸纤维素滤膜上的方法,烟草组织中是否有干扰RNA固定和杂交的物质,斑点杂交方法检测烟草花叶病毒的特异性、灵敏度等。     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

半月板切片制作方法的改进

半月板主要由纤维软骨构成 ,具有一定的硬度 ,经二甲苯透明和高温石蜡浸蜡后更坚硬易碎 ,不易切出完整的组织切片。国内外虽有此项方法学研究的报导 ,但较复杂 ,我们就此在常规切片制作方法的基础上进行了改进研究。我们经过 4 0例试验 ,摸索出一种简易有效的半月板切片制作方法。1　材料及固定1.1　材料　选用成年大白兔的半月板。1.2　固定　组织块用 10 %中性甲醛或波氏液固定 3天以上。2　组织蜡块的制作2 .1　脱水　 70 %乙醇 6～ 2 4 h　 80 %乙醇 6～ 2 4 h　95%乙醇 1.5h　 10 0 %乙醇 1h。2 .2　氯仿透明 12～ 2 4 h。2 .3　浸蜡　…     

微小昆虫整体玻片标本的简便制法

我多年来对微小而柔软昆虫整体标本的制作摸索出几点简便方法,现介绍如下。一、几个优点 1.省去繁琐的脱水过程;2.节省时间,容易做成功;3.标本清晰,层次分明,不易变形;4、便于保存,适于鉴定、观察用。二、制作方法 1.处死固定:将蚊、蚜等置于70％酒精中杀死固定。 2.脱脂:将材料装入试管中注入适量70％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右。     

念珠藻的制片方法

取材普通念珠藻(Nostoc Commune)生于潮湿的土壤或草地上,在春、夏多雨季节里很容易采到.它形似木耳,俗称“地木耳”或“地皮菜”,可食用.发状念珠藻(Nostoc flagelliforme)形如发丝,俗称发菜,是重要的食用蓝藻,可从商店购得.取其中任何一种材料泡在水中,使其胶质鞘膨胀,用小毛笔刷净泥砂杂物,剪成3毫米左右长的小块(或段).选平整的材料置于载片中央,用另一张载片将材料压薄,用棉线捆紧两张载片. 固定将捆好的两张载片投入FAA固定液中24小时,松开棉线,分开载片.由于材料本身的胶质,它能粘贴在两张或其中的一张载片上(通常两张载片各粘一部分).将此材料染色和脱水. 洗涤与初染将固定好的材料用50％酒精洗涤2—3次,每次10分钟.再经40％→30％→20％→10％酒精洗,每级10分钟.最后经蒸馏水浸洗2次,每次2分钟.媒染用4％铁明矾1小时,蒸馏水洗2次后用海氏苏木精染色1小时.蒸馏水洗去浮色,1％铁明矾分色.边分色边显微镜检,至细胞内含物呈黑色,其它部分浅灰色或无色时为止.立即倒掉分色液,蒸馏水洗2—3次后,将材料浸泡于自来水中,使其变蓝     

偏亚硫酸钠对豌豆根尖生长发育及细胞核的影响

根据偏亚硫酸钠放出SO2溶于细胞水分形成H2SO3，H2SO3解离出H 、HSO3-、SO，解离的HSO3继续氧化形成H2SO4，以及在此过程中产生出的活性氧影响植物生长发育的现象，本文研究了偏亚硫酸钠处理根尖对豌豆根尖细胞核和生长发育的影响。豌豆（Pisumsatiuvm）种子洗净后播于花盆内，喷洒不同浓度的偏亚硫酸钠溶液，以蒸馏水作对照，在24一双℃下培育79和155h，分别测定根尖的长度。另以豌豆种子用自来水萌发，根长0．5－1cm时，分别用0．1％、0．5％。1．0％偏亚硫酸钠水溶液处理36和72h后，切取根尖放人卡诺固定液中固定24h，转入1mol…     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

小鼠眼球标本固定液及制片方法的改进

在小鼠眼球标本石蜡切片制作过程中,由于眼球组织结构的特殊,各部分组织的软硬度不同,各层组织之间连接性差,如用常规10％甲醛液固定,眼球经过固定后用乙醇脱水,各层组织由于收缩率的不同容易造成组织分离,特别是造成视网膜的分离甚至脱落。其他的一些固定液虽然可以保证眼球内部各层组织完整,但是细胞肿胀肥大,细胞着色不均匀,给在显微镜下观察带来困难。因此我们结合眼球的结构特点,总结出一种比较适合固定眼球组织的固定液以及采用适当的取材方式,有助于制作高质量的眼球组织HE片,介绍如下。     

不同固定液和染色方法显示山羊子宫内肥大细胞效果的比较

目的探讨用不同固定液和染色方法对显示处于间情期山羊子宫肥大细胞的影响。方法用四种不同的固定方法,应用改良甲苯胺蓝（MTB）染色法和阿尔辛蓝-番红花红（AB-S）染色法显示处于间情期山羊子宫肥大细胞。结果山羊子宫组织采用Carnoy氏液固定,MTB和AB-S染色对所有的肥大细胞均可获得良好的染色反应,但10％中性福尔马林,4％多聚甲醛,Bouin氏液固定的组织仅有少量肥大细胞着染。结论MTB和AB-S染色法均是山羊子宫肥大细胞良好的染色方法。     

做减数分裂实验的几种好材料

1.大葱花序在地里越冬的大葱(2n=16),第二年春天三四月便可长出花序,待花序长到象枣大小时,颜色呈绿色(呈黄色时已晚),采摘花序,置于卡诺固定液中(3份酒精:1份冰醋酸),固定24小时,然后取出花序,挑取小花即可制片。如不及时制片,可将固定后的花序,用95％酒精冲洗后(直至闻不到醋酸味为止),放入70％酒精中,存于冰箱内,可随时取用。     

哺乳动物脑和脊髓灰白质标本制作法

取哺乳动物的新鲜羊脑组织和牛颈部脊髓,先用逐渐增加浓度(75％、85％、96％)的酒精溶液将材料固定,在每一种酒精溶液中要固定3—4天。从酒精溶液中将脑组织和牛脊髓取出,用锋利的刀片切成薄片和小段,再转入1％硫酸铜溶液中浸泡,经半小时后,     

整块染色法在生物切片制作中的应用

整块染色法在生物切片制作中的应用为了制作大量教学切片，我们用块染法略加改进将羊和兔的肝、脾、胃肠、软骨等２０余种不同器官组织块固定于Ａ、Ｄ、Ｎ固定液（无水酒精、蒸馏水和硝酸）中固定２４ｈ、经７０％和５０％酒精以及蒸馏水洗涤，染于０．１％碘酸钠—一苏木...     

桡骨远端不稳定骨折的治疗策略

目的：探讨桡骨远端不稳定骨折的最佳治疗方案,以便能够获取更好的功能康复。方法：2007年1月-2011年12月共收治桡骨远端不稳定骨折51例,其中采用外支架撑开复位外固定5例,后路复位钢板内固定治疗23例,前路钢板固定17例,前后路联合固定6例,术后均早期进行关节功能锻炼。结果：51例均获得随访,X片提示均已骨性愈合。采用Gartland和Werley评分系统评估腕关节功能,其中外支架固定,优1例,良1例,中2例,差1例,优良率40％;后路固定,优12例,良6例,中3例,差2例,优良率78-3％;前路固定,优9例,良6例,中1例,差1例,优良率88．2％;前后路联合,优2例,良1例,中2例。差1例,优良率50％。结论：桡骨远端不稳定骨折正确的手术策略能够获得更好的功能恢复,其中前路手术固定效果优于后路固定。     

光呼吸研究进展——Ⅰ.光呼吸和氮代谢的关系与光呼吸的生理功能

光呼吸乙醇酸途径的阐明,使人们对光合碳途径的认识前进了一步。从现知的乙醇酸途径来看,它似乎是一个损耗光合固定的碳素和能量的过程。据推算,在正常的大气条件下(此时 RuDP 羧化酶和加氧酶活性比例为4:1),由乙醇酸途径放出的C0_2占光合固定的 CO_2 14％。实测的结果表明,C_3植物光呼吸放CO_2可达净光合所固定的CO_2的14—75％。因此人们曾设想,若用某些     

蛙类简单的染色体标本制备方法

进行染色体组型分析时,都要制备有丝分裂中期染色体标本。在实验工作中,我用蝌蚪尾部制备染色体标本,方法简便,且效果非常满意。现介绍如下: 1.前处理将刚出卵膜的小蝌蚪放在含有0.2％秋水仙碱的清水中,室温下(25℃左右)培养3小时。 2.低渗将前处理过的蝌蚪尾尖切下,放在蒸馏水或0.075molKCl溶液中30分钟。 3.固定将低渗处理过的尾尖置于固定液[甲醇(或乙醇):冰醋酸=3:1]中固定30分钟。 4.染色压片将经固定的尾尖放在载玻片上,加一     

不同固定液及保存温度、时间对小鼠组织DNA的影响

比较10％甲醛、95％乙醇、Saccomanno3种固定液及不同保存温度、保存时间对小鼠肝、肺组织DNA的影响。取材后将标本分为无固定液组、甲醛组、乙醇组和Saccomanno组,不同温度保存至一定时间后提取DNA进行比较。结果无固定液时,保存3d后,室温且与低温组差别不大。甲醛固定时,对不同保存温度、时间、不同组织的DNA影响不同。乙醇、Saccomanno法室温放置1个月后DNA仍保存良好。短时间室温保存对DNA影响不大。10％甲醛使DNA降解,95％乙醇、Saccomanno法固定则可以保护DNA的完整性。     

大蒜根的扫描电镜图象

将蒜根切成1-2毫米长的小段,放在2%戌二醛固定液中固定4小时,并用抽气泵抽去组织中的空气;用缓冲液冲洗几次后放入5-6%高锰酸钾固定液中固定48小时,再用缓冲液冲洗后,乙酸逐级脱水,然后喷碳喷金.这种二次固定制取的样品很脆,一碰就碎,这有利于