新疆贝母属8种药用贝母地上部位与鳞茎生物碱含量差异研究

目的:对新疆贝母属8种药用贝母地上茎、叶与地下鳞茎部位总生物碱含量进行对比研究。方法:采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量。结果:新疆贝母属8种药用贝母不同部位生物碱含量由高到低的顺序为:叶鳞茎茎;新疆贝母属8种药用贝母总生物碱含量由高到低的顺序为:伊犁贝母裕民贝母新疆贝母黄花贝母托里贝母大白花贝母滩贝母小花贝母;地上部位中总生物碱含量为地下鳞茎中的1.174~1.499倍。结论:新疆贝母属8种药用贝母植株中总生物碱含量因品种及部位不同而存在差异,但总体上地上茎叶的总生物碱含量高于地下鳞茎,存在进一步研究与开发的价值。     

新疆贝母属药用贝母ISSR-PCR体系的确立和优化

目的:建立适合新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR优化反应体系,为新疆贝母属8种药用贝母品种鉴定和遗传多样性研究提供依据。方法:综合利用单因素实验和L16(45)正交试验,对因素Taq DNA聚合酶、d NTPs、Mg2+、引物浓度、模板DNA含量进行优化,并考察循环次数、延长时间及退火温度。结果:每个因素的不同水平对PCR反应有显著影响,其中Mg2+影响最大。新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR最适体系为50μL:5μL 10×Buffer、2.5 mmol/L Mg2+、0.30 mmol/L d NTPs、0.8μmol/L引物、0.75 U Taq酶、1.0 ng/μL模板DNA、33.35μL dd H2O。循环次数为45 cycle,延伸时间10 min,引物UBC853的最适退火温度为49.8℃。结论:建立的新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR反应体系经23份新疆贝母属8种药用贝母样品检验,ISSR-PCR扩增效果显著,证明该体系具有较高的稳定性和可重现性,为新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性的分子标记研究奠定基础。     

新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性ISSR分析

目的:对新疆贝母属8种药用贝母进行遗传多样性分析及评价。方法:采用ISSR分子标记技术综合分析8种药用贝母23份样品的遗传多样性。结果:16条引物共扩增出199条条带,其中多态性条带为195条,占97.99%。8种药用贝母遗传多样性水平为:Na=1.979 9,Ne=1.523 0,H=0.308 4,I=0.466 9,Gst=0.698 5,基因流(Nm*)为0.215 9,遗传一致度(I)和遗传距离(D)分别为0.747 4和0.301 4。表明8种药用贝母品种整体上有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于不同种间,基因交流程度比较有限。聚类结果显示,所有贝母均可明显区分开来,并聚为4组,遗传相似系数范围在0.58~0.99。结论:揭示了新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性水平及亲缘关系,为其品种分类及种质保护提供理论依据。     

中药贝母类的资源利用研究

贝母为传统中药,中国药典（1990）收载了川贝母（Fritillaria cirrhosa D.Don.)、暗紫贝母（F. unibracteata Hsiao et K.C.Hsia)、甘肃贝母（F.przeuxalskii Maxim ex Batak.）、梭砂贝母（F.delapayiFranch.）、浙贝母（F.thambergii Miq.）和平贝母（F.ussuriensis Maxim）.等8种。最近对四川、甘肃、新疆、湖北、浙江和江苏等省区的药源调查结果表明,各地药用的贝母有25个种和变种,其中最常用的有暗紫贝母、甘肃贝母、梭砂贝母、伊贝母、新疆贝母、托理贝母、平贝母和湖北贝母。20余种贝母所含生物碱的TLC和HPLC分析结果表明各种贝母所含生物碱有一定区别,并与产地有关,产于湖北、浙江和江苏省的种类都含有去氢贝母碱,大多含贝母碱和异贝母碱;产于四川、甘肃和新疆的种类都含有西贝素和去氢梭砂贝母碱,大多含茄次碱,产于四川的种类都含去氢川贝碱,产于新疆的种类都含梭砂贝母碱。本研究为建立贝母的品质评价方法和开发药用资源提供了科学依据。     

观察比较贝母类生物碱分布的3种切片方法

目的:建立一种能更清楚有效地观察贝母鳞茎中生物碱沉淀分布及含量的切片方法。方法:以新疆贝母为供试材料,利用石蜡切片法、徒手切片法及改良切片法制备植物鳞茎组织切片;切片经改良碘化铋钾处理,并通过Mikroskop Primo Star X2005显微镜观察和比较3种不同切片中生物碱沉淀分布。结果:改良切片法处理的切片中生物碱沉淀分布观察清晰,可用于定性及定量分析,并且实验过程中试剂对生物碱的影响较小,操作方法简便、快速、有效。结论:贝母鳞茎生物碱的观测适合采用改良切片法制片。     

酸性染料比色法测定花椒总生物碱的含量

建立了酸性染料比色法测定花椒中总生物碱的含量的方法.以白屈菜红碱作为对照品,加入pH值=7.6缓冲溶液,溴甲酚绿指示液、氯仿混合振摇,静置分层,于 425 nm 波长处测定氯仿层吸收度.得到标准曲线:y= 4.2566 x-0.006 6,R2 = 0.999 4,生物碱检测浓度在0 ～ 0.2 mg/mL 范围内与吸收度线性关系良好,此方法具有较好的稳定性和精密度.用此方法测定花椒中总生物碱含量为0.95%.本方法操作简便、准确,可用于花椒的质量控制.     

新疆贝母属的订正

本文根据所收集到的标本和有关文献资料,对新疆贝母属进行了整理。归并9种和21变种。确认新疆贝母属有7种,包括一新分布种,裕民贝母F．stenanthera。     

组织培养暗紫贝母的药理作用

以组织培养的暗紫贝母为材料,野生暗紫贝母为对照,用不同溶剂提取,得４个化学组人 生物碱部分,总皂甙部分,水溶性部分和脂溶性部分,并以生药粉为阳性对照进行药效学试验。结果表明：组培贝母与野生贝母有相似的止咳、祛痰作用;总皂甙部分与总生物碱部分均为川贝有效活性成分,ｔ得之间无显著性差异;经ＴＬＣ是乌头总生物碱部分与总皂甙部分无化学成分重叠。     

乙醇渗漉法提取青花椒生物碱的工艺参数

对酸性染料比色法来测定提取液的总生物碱的方法加以改进;并对以SFME法提取精油后的青花椒作原料、用不同浓度的乙醇渗漉法提取生物碱进行含量测定,确定乙醇渗漉法提取生物碱的相关工艺参数。结果表明:青花椒生物碱提取的最佳操作条件是控制渗漉液的流速在每秒2滴左右,每15 min收集约60 m L左右渗漉液,渗漉时间为2.5 h,乙醇浓度为70%~75%。     

伊犁贝母药用资源研究现状与开发前景

伊犁贝母的主要药用部位是鳞茎,具有清热化痰、润肺止咳的功效,野生伊犁贝母资源曾被滥采滥挖,导致其药用资源短缺,新疆多地开展了人工伊犁贝母培育工作,但仍有许多不尽人意之处。本文就伊犁贝母鳞茎中以西贝素为主要代表的生物碱的化学成分、药理活性、临床作用、栽培工艺、开发应用现状及前景等方面进行全面的综述,为伊犁贝母药用资源的进一步深入研究和开发提供有益的参考和对策。     

不同产地浙贝母生物碱含量及其合成相关基因表达研究

为了探究浙贝母(Fritillaria thunbergii)药效成分积累量与生物碱合成相关基因表达水平之间的关系,该研究采用UPLC-MS、qPCR技术分别测定不同产地11个样品中总生物碱(贝母素甲和贝母素乙之和)含量和3个参与生物碱合成途径相关基因(HMGR、FPS和DXR)的表达量,同时运用生物统计学方法分析成熟期鳞茎生物碱含量与各基因表达量之间的相关性。结果表明:不同产地浙贝母成熟期鳞茎总生物碱含量存在显著差异(P<0.05),为0.2105%～0.4612%; HMGR和FPS基因在盛花期组织表达、盛花期至成熟期鳞茎表达变化趋势同生物碱含量变化趋势基本一致; DXR基因在成熟期鳞茎中表达量最高,盛花期组织表达、盛花期至成熟期鳞茎表达变化趋势同生物碱含量变化趋势大体不一致; HMGR、FPS基因表达量分别与贝母素甲、贝母素乙和总生物碱含量呈显著或极显著正相关性(P<0.05或P<0.01),以FPS基因表达量与生物碱含量相关系数为最高,相关系数分别为0.672,0.631,0.664,DXR基因与生物碱含量呈低度相关性。由此可以推断,生物碱的积累受MVA途径中...     

基于HPLC-ELSD指纹图谱和多成分定量的浙贝母与湖北贝母质量差异研究CSCD

建立浙贝母、湖北贝母HPLC-ELSD指纹图谱,结合多成分定量分析,比较两种贝母属药材的差异。采用Waters ACQUITY HSS T3(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%三乙胺溶液为流动相,流速为1.1 mL/min,梯度洗脱;柱温为38℃;蒸发光散射检测;建立浙贝母和湖北贝母HPLC-ELSD指纹图谱,通过化学计量学方法和5种生物碱类成分的含量测定比较浙贝母和湖北贝母的差异。结果显示,浙贝母指纹图谱标定7个共有峰,而湖北贝母有8个;指认出其中6个峰,分别为伊贝辛、贝母辛、贝母素甲、贝母素乙、异贝母甲素、湖贝甲素,其中湖贝甲素为湖北贝母的专属性成分;HCA和PCA均能很好地区分浙贝母和湖北贝母,OPLS-DA共找到4个差异性标志物,含测结果显示,浙贝母中贝母素甲的含量明显高于湖北贝母,而贝母辛、贝母素乙和异贝母甲素的含量则明显低于湖北贝母。该方法可以有效鉴别浙贝母和湖北贝母质量的差异性,为其质量控制提供参考。     

不同栽培年限伊贝母组织化学研究

目的:研究伊贝母鳞茎组织结构及主要药用成分在鳞茎中的分布部位。方法:采用植物解剖学和组织化学方法对不同栽培年限伊贝母鳞茎的显微组织结构以及生物碱、皂苷成分的分布进行观察研究。结果:伊贝母鳞茎主要由表皮、皮层薄壁组织、有限外韧型维管束组成。维管束的数目在伊贝母种间上有一定的差异,新疆贝母的维管束数目略大于伊犁贝母;生物碱主要存在于不同栽培年限伊贝母鳞茎的皮层薄壁组织细胞及维管束周围的薄壁组织细胞上,其总生物碱含量从高到低的顺序为:3年生的伊贝母≥4年生的伊贝母5年生的伊贝母;皂苷主要存在于不同栽培年限伊贝母鳞茎的表皮细胞和维管束周围的薄壁组织细胞上,其总皂苷含量从高到低的顺序为:5年生的伊贝母≥4年生的伊贝母3年生的伊贝母,在种间及同种植物的不同栽培年限或不同组织结构中,其生物碱与皂苷的含量存在差异。其中,以4年生伊贝母药材中的生物碱与皂苷含量较高,表明其药用价值也较高,因此推断第4年为最佳采收期。结论:伊贝母鳞茎中大量薄壁细胞是主要药用成分的分布部位,同时研究结果可为合理采收提供依据。     

卷叶贝母法尼基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析

为了探究卷叶贝母(Fritillaria cirrhosa)法尼基焦磷酸合酶基因(FcFPPS)是否参与甾类生物碱合成、萜类合成等代谢过程,该研究基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母FPPS基因(FcFPPS)开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过qRT-PCR检测FcFPPS基因在野生鳞茎和再生鳞茎(通过激素组合刺激获得的组织培养物)中的表达情况,以及利用煎煮法测定野生鳞茎和再生鳞茎的总生物碱含量。结果表明:获得了1 059bp的FcFPPS ORF片段,编码352个氨基酸,并与NCBI上公布的麝香百合、虎眼万年青、春兰等植物FPPS蛋白的相似性在85%以上;对FcFPPS蛋白的二级、三级结构预测发现FcFPPS蛋白主要由α螺旋构成;qRT-PCR与总生物碱含量测定结果显示FcFPPS基因的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致,都是再生鳞茎高于野生鳞茎。FcFPPS蛋白质特征区及同源性等生物信息学分析结合qRT-PCR的测定结果证明FcFPPS可能是一个有生物学功能的蛋白质,这为后续利用基因工程手段提高卷叶贝母中生物碱含量奠定了理论基础。     

安徽贝母属植物的研究现状及展望

贝母属（Fritillaria L．）植物是一类重要的药用和观赏植物,具有较高的经济价值。据资料记载,安徽省共有贝母属植物11种,2变种和1变型。由于对贝母属植物的种系划分上存在很大的分歧,因此,在大量的实地调查和资料研究的基础上。对安徽贝母属植物的分类等研究现状进行了综述,并对未来的研究利用进行了展望,旨在为安徽贝母属植物的进一步研究和开发利用提供参考依据。     

安徽贝母属植物的核型研究

对安徽产7种贝母属(FritillariaL.)植物的核型进行了分析,结果如下:(1)浙贝母:2n=24=4m 20 t(1SAT);(2)天目贝母:2n=24 3Bs=4m 20 t 3Bs;(3)黄山贝母:2n=24=4m 20 t(1SAT);(4)宁国贝母:2n=24=4m 20 t(2SAT);(5)窄叶小贝母:2个细胞型,细胞型Ⅰ为2n=25=2m 2 sm 4 st 16 t(1SAT) 1Bs,细胞型Ⅱ为2n=24=2m 4 sm 2 st 16 t(2SAT);(6)祁门贝母:2n=24=2m 2 sm 6 st 14 t;(7)安徽贝母:2n=24=2m 2 sm 2 st 18。t除窄叶小贝母的2个细胞型为“3C”型外,其余种皆为“3B”型。与前人的研究结果相比较,贝母属植物的核型多态现象显著;同种植物在不同研究中,核型表现出一定的差异。     

秦贝母野生变家种生物碱成分比较

本文报道了原生长于高山草甸的秦贝母,从高海拔(2400米)地区引种栽培到低海拔(1000米)地区,通过总碱含量测定、薄层层析比较和薄层扫描西贝素含量测定,结果表明:野生和家种秦贝母均无明显差异,为扩大秦贝母栽培提供了科学依据。     

对叶百部药材中四种主要生物碱的分布规律

目的:了解百部药材中主要生物碱的含量和分布规律,为百部药材的质量控制提供依据。方法:采用反向HPLC-ELSD方法对百部药材中4种主要生物碱金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的含量就行了测定,以0.1%三乙胺-甲醇(43∶57)为流动相,Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流速1m L/min;ELSD漂移管温度为80℃,氮气流速为2.1 m L/min,增益为8。结果:83批百部药材含金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的药材分别有27、48、22和48批,其平均含量分别为1.98、4.75、3.73和5.34 mg/g;含有1~4种生物碱的药材分别有38、28、17和0批次,其中对叶百部碱与其余三种生物碱中任意一种同时出现的概率较高;购于安徽亳州和广州清平药市的药材不含新对叶百部碱。结论:本文建立的含量测定方法简便、准确、可靠;含量测定结果说明4种生物碱在药材中的分布具有趋单性,仅含一种生物碱的药材占45.8%,含2种及以上生物碱的药材占54.2%。本文研究结果对于对照品短缺情况下,对购买百部药材化学成分的预测具有一定的指导意义。     

国产多轮贝母订正

作者通过新疆贝母属植物种质资源调查,引种驯化对比观察和译照原始文献反复核对查出:国产多轮贝母(黄花贝母)与原始文献描述的F. verticillata Willd.形态差异甚大;经过在该种产地之一的塔尔巴哈台上多年寻找,1987年终于采集到与原文献形态描述相符的多轮贝母原种,从而鉴别出误定的国产“多轮贝母”(黄花贝母)是一     

甘肃贝母属新植物

贝母属(Fritillaria)大多数种类的鳞茎在我国供药用,即中药“贝母”,有清热润肺,化痰止咳之功效。据记载该属国产种类约有28种和一些变种,资源比较丰富。但由于需要量大,挖掘过量,近年供不应求,新资源亟待调查与开发。本文将报道甘肃贝母资源调查的部分结果:2个新种、1个新变种和1个新栽培变种。兹描述如下: