促红细胞生成素(EPO)

一、产品概述 促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)主要是在肾脏中产生的一种造血激素,是具有166个氨基酸残基,分子量为35000的糖蛋白。 EPO对原红细胞集落生成细胞CFU-E或其早幼阶段的BFU-E起作用,具有促进向红细胞前体细胞--网状红细胞,原红细胞的分化,并生成红细胞的作用。     

促红细胞生成素在脑缺血动物模型治疗中的研究进展

促红细胞生成素是一种促进红系造血前体细胞增殖、分化的细胞因子,主要作用为促进红细胞增殖,应用于临床各种贫血治疗。随着研究进展,学者发现促红细胞生成素为一种多功能营养因子及神经保护因子,具有调节中枢神经系统发育、神经营养及神经保护作用。脑缺血性卒中实验研究显示,促红细胞生成素可有效改善中枢神经系统疾病所致的神经功能缺损,本文主要概述促红细胞生成素在脑缺血性卒中动物模型的研究进展,及其发挥神经保护作用所经由的分子机制。相信随着实验研究进展,其在脑缺血性卒中临床治疗方面将拥有更广阔的前景。     

山羊乳腺生物反应器表达人促红细胞生成素的分离纯化

以离子交换、疏水作用、HPLC和凝胶过滤层析等方法对山羊乳腺生物反应器表达的人促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行了分离纯化 ,初步探讨了其分离工艺 ,结果得到了纯度达到 96%以上的纯品 ,所纯化的EPO分子质量为 32kDa ,糖基化程度根据理论分子质量测算为40 %。Western blot证明所得纯化产品具有天然EPO免疫原性 ,N端氨基酸序列测定与文献报道一致 ,ELISA检测免疫活性为 2 4 0 0 0 0IU mg,表明通过 4步纯化步骤可以得到高纯度的产品 ,为今后工艺放大提供了有力的实验依据。     

促红细胞生成素对脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的:探讨促红细胞生成素(Epo)对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:32只SD大鼠,采用夹闭双侧颈总动脉30min再灌注24h制作脑缺血/再灌注模型。随机分为4组(n=8):假手术组、脑缺血/再灌注组、Epo组及阳性对照组(尼莫地平),观察缺血/再灌注后血清一氧化氮(NO)和脑组织匀浆中超氧化歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织含水量的变化。结果:Epo组血清NO和脑组织匀浆中MDA含量显著下降,SOD活性显著升高,脑组织含水量显著下降,与缺血/再灌注组相比有显著性差异。结论:大鼠脑缺血/再灌注后,Epo能减轻脑组织的含水量,减少自由基的生成,减轻脂质过氧化反应,对脑缺血/再灌注损伤有保护作用。     

稳定表达促红细胞生或素的重组腺病毒的构建及其对大鼠的促红细胞生成作用

用EPO基因组基因构建了腺病毒质粒型载体psp1B/hEPO,该质粒含有以RSV-LTR为启动子的完整的EPO基因表达盒.单独转染CHO细胞,经暂态表达检测到EPO的表达。用psp1B/hEPO与腺病毒拯救型载体pBHG11共转染293细胞,获得了表达EPO的重组腺病毒AdhEPO.经Southern杂交证实AdhEPO中有EPO表达盒,ELISA检测到了EPO阳性表达.用5×108pfu的AdhEPO给大鼠作一次性肌肉注射,观察到了其促进大鼠红细胞生成的短期效应。在注射后第1,3,5,7,10d分别检测了大鼠的红细胞压积、血红蛋白含量和红细胞计数等指标,发现大鼠的红细胞数量显著提高。在第10d红细胞压积从46±4%上升至65±6%。证实了重组腺病毒AdhEPO具有潜在的临床应用价值,可用于贫血症的基因治疗。     

重组红细胞生成素对小鼠巨核细胞后期成熟及血小板生成的影响

本文应用血小板生成液体培养体系,检测了重组人红细胞生成素(r-EPO)对巨核细胞成熟及血小板生成的影响。r-EPO 能在1U 至6~U/ml 浓度范围内增加体系血小板数,r-EPO剂量与血小板数之间呈线性关系。r-EPO 还能促进巨核细胞 DNA 合成,并使 Ⅱ、Ⅳ 期巨核细胞比例增加,Ⅰ、Ⅱ 期巨核细胞比例减少。结果表明:r-EPO 可以促进巨核细胞成熟,并作为一种主要刺激因子,以增加血小板数的方式促进血小板生成。     

促红细胞生成素在神经损伤中的作用

促红细胞生成素是控制红细胞生成的细胞因子,促红细胞生成素及受体在中枢和外周神经系统均有表达,发挥神经保护作用,有潜在的临床应用前景.本文对促红细胞生成素在外周神经损伤中的作用及机制作一综述,以求为外周神经损伤治疗提供新思路.     

促红细胞生成素对腹膜间皮细胞凋亡的保护作用

目的:观察重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对腹膜间皮细胞(PMCs)的抗凋亡作用及其机制.方法:体外分离小鼠PMCs并给予rHuEPO干预,观察起对JAK2,STAT5,ERK1/2和P38磷酸化的影响.体内试验采用5000U/kg的rHuEPO顸处理后再予以4.25%的腹透液腹腔内注射后4小时,取小鼠脏层腹膜组织检测活性凋亡蛋白酶-3表达.结果:小鼠PMCs上表达EPO受体mRNA和蛋白,5 U/mL的rHuEPO可诱导PMCs的JAK2,STAT5和ERK1/2磷酸化上调.rHuEPO预处理1小时后再予腹透液处理的PMCs较单独予腹透液处理的PMCs,凋亡蛋白酶-3活化降低,DNA碎裂减少.rHuEPO干预可提高ERK1/2磷酸化水平而抑制腹透液诱导的P38磷酸化.特异性的ERK活化抑制剂PD98059可完全阻断rHuEPO的保护作用.通过检测凋亡蛋白酶-3证实rHuEPO可在小鼠体内降低腹透液引起的PMCs凋亡水平.结论:本研究为rHuEPO在腹透临床治疗中的临床应用开辟了新途径,rHuEPO可通过ERK1/2依赖途径减少PMCs的凋亡发挥保护性作用.rHuEPO及其衍生物可能成为维护腹膜完整性的新治疗手段.     

辛伐他汀对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗效果研究

目的:观察辛伐他汀对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗效果并探讨其可能机制。方法:将48只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组,每组各16只。模型组以及辛伐他汀组给予枕大池注入自体动脉血法以建立大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的动物模型,辛伐他汀组于第1次注血后开始给予辛伐他汀皮下注射,其余两组给予等体积生理盐水皮下注射。比较各组大鼠情况、组织学检查结果、蛛网膜下腔出血量评分、神经功能缺损评分、血管内径、血管舒张度、血管痉挛程度、eNOS以及TNF-α蛋白表达水平。结果:实验过程中,正常对照组无大鼠死亡,模型组大鼠死亡率为33.33%,辛伐他汀死亡率为6.67%,较模型组显著降低(P0.05)。治疗后,与正常对照组相比,模型组及辛伐他汀组大鼠蛛网膜下腔出血量评分及TNF-α阳性表达率较高(P0.05),神经功能缺损评分、血管内径、D/T及eNOS阳性表达率较低(P0.05);与模型组相比,辛伐他汀组蛛网膜下腔出血量评分及TNF-α阳性表达率较低(P0.05),神经功能缺损评分、血管内径、D/T及eNOS阳性表达率较高(P0.05)。结论:辛伐他汀可有效改善蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛,这可能与其上调eNOS蛋白表达并下调TNF-α蛋白表达有关。     

促红细胞生成素的抗炎症作用研究进展

促红细胞生成素是一种造血因子,临床中广泛应用于治疗各种原因造成的贫血。近年的研究发现,EPO具有多种非造血生物作用．其中对各组织以及全身炎症反应的保护作用已成为目前的研究热点之一。但目前EPO抗炎症作用相关的机制尚不明确。本文对EPO的抗炎症作用及其可能机制作一综述,并对EPO在临床中的应用前景进行了展望。     

蛛网膜下腔出血合并脑积水的治疗方法探讨

目的:探讨蛛网膜下腔出血(SAH)合并脑积水的治疗方法。方法:回顾性分析31例SAH合并脑积水患者的临床资料,除常规脱水、防治血管痉挛、营养神经等治疗方法外,其中10例给予行脑室-腹腔分流术,21例行侧脑室外引流术,对比分析两种治疗方案的利弊。结果:10例脑室-腹腔分流术患者9例手术效果良好,术后复查颅脑CT显示脑室明显减小,间质水肿消失,1例患者术后1月内再次出现脑积水,给予行同侧分流管探查再通、对侧脑室-腹腔分流术,术后效果良好,颅脑CT示脑室减小。21例行侧脑室外引流术患者,术后感染2例,全部患者均术后7天内拔除引流管,术后1月9例复发脑积水,给予再次行脑室-腹腔分流术,术后效果良好。结论:在手术指征明确的情况下,早期给予SAH合并脑积水患者行脑室腹腔分流术,分流管堵塞可能性小,术后感染发生率低,临床效果令人满意。     

食欲素A减少急性脑缺血大鼠的睡眠与运动障碍和迟发性神经元损伤

目的探讨食欲素A(orexin-A,OX-A)对急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)大鼠的迟发性神经元损伤、睡眠障碍和运动功能恢复的影响。方法用线栓法制作大鼠短暂性大脑中动脉闭塞模型,并于术后1d侧脑室内注射30μg/kgOX-A。注射后7d,用脑电-肌电图来评估大鼠睡眠功能,用转棒实验和爬梯实验评估大鼠运动功能,用Nissl染色、Neu N染色和Fluro-Jade C染色观察大鼠神经元病理学改变。结果 AIS大鼠的快动眼(rapid eye movement,REM)睡眠入睡潜伏期增加,睡眠片段化,觉醒次数增加,REM和非快动眼(non-rapid eye movement,NREM)睡眠的数量减少,神经元损伤增加,运动能力降低。外源性OX-A能缓解AIS大鼠睡眠变化,减轻神经元损伤,促进运动能力恢复。结论 OX-A可明显减轻AIS大鼠的迟发性神经元损伤并改善睡眠和促进运动恢复。     

老年蛛网膜下腔出血的治疗方法和预后分析

目的:探讨70岁以上老年蛛网膜下腔出血患者的治疗方法和预后。方法:回顾性分析我院2006-2012年收治的49例老年蛛网膜下腔出血患者的临床资料及其预后。结果:49例患者入院时Hunt-Hess分级:Ⅰ级14例,Ⅱ级8例,Ⅲ级6例,Ⅳ级6例,Ⅴ级15例,其中14例采用开颅动脉瘤夹闭术,10例采用血管内介入栓塞术,25例采用内科保守治疗。治疗后6月,根据ADL量表评价预后(ADL≥60分为预后良好):内科保守治疗者仅3例预后良好,手术及栓塞术者17例预后良好。结论:对于老年蛛网膜下腔出血患者而言,影响患者预后的原因主要是出血导致的脑损伤和症状性脑血管痉挛,通过手术或栓塞术积极治疗破裂动脉瘤是预后良好的重要因素。     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血的治疗进展与探讨

颅内动脉瘤破裂导致的自发性蛛网膜下腔出血是一种致残率以及病死率都非常高的一种疾病,其中动脉瘤性蛛网膜下腔出血Hunt-Hess和世界神经外科医师联盟Ⅳ、V级的患者为高分级颅内动脉瘤性蛛网膜下腔出血,这部分患者,无论采取何种治疗方案,预后仍较差。目前对高分级动脉瘤性蛛网膜下腔出血的治疗仍处于探索阶段,并没有形成统一的临床治疗指导规范或临床路径,其中是在采取保守治疗或者手术治疗的问题上存在较大争议,而在选择手术治疗时又存在手术时机的问题,并且随着显微颅内动脉瘤夹闭术的成熟以及颅内动脉瘤的血管内治疗材料和技术的迅速发展及治疗经验的积累,对于患者采取何种手术方式已成为近年来的争议热点,所以如何对这部分患者实施积极有效的治疗而改善其预后,已成为目前神经外科医生必须要解决的焦点问题。     

促红细胞生成素对神经干细胞缺氧性损伤保护作用的实验研究

目的观察外源性EPO对神经干细胞缺氧性损伤的保护作用,为缺氧缺血性脑损伤的治疗提供新思路。方法从孕11.5d（E11.5d）大鼠获得神经干细胞,经无血清培养基悬浮培养并传代,对所获细胞的自我增殖、自我更新及其多分化潜能进行检测。取传3代神经干细胞中添加不同剂量的EPO,在5%O2培养箱中培养120h。通过计数干细胞克隆形成率和MTT法检测神经干细胞的增殖情况。于含血清分化培养基中加入不同剂量的EPO,用NSE和GFAP免疫细胞化学染色观察神经干细胞的分化情况。采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色,激光扫描共聚焦显微镜观察、检测细胞凋亡率。结果加入EPO后神经干细胞的克隆形成率和MTT检测的OD值显著增高,细胞凋亡率显著下降,NSE阳性细胞的比例明显升高,其作用随剂量增加而增大,50U/ml时作用最大。结论EPO对神经干细胞缺氧性损伤具有明显的保护作用,并可促进神经干细胞向神经元方向分化。EPO的这种作用随剂量增加而增大,50U/ml时达高峰。     

母乳中的促红细胞生成素的生理功能

母乳中存在促红细胞生成素.该文介绍母乳中促红细胞生成素的含量以及来源,并着重探讨促红细胞生成素对幼仔的生理作用.     

人参总皂苷对K562细胞促红细胞生成素受体的作用

目的:研究人参总皂苷(TSPG)对人红白血病细胞株(K562)促红细胞生成素受体(EpoR)的作用.方法:以50、100、200、300、500mg/L TSPG刺激K562细胞24h,采用流式细胞仪检测细胞膜EpoR表达的变化;Elisa检测K562细胞膜、细胞浆EpoR表达量的改变;激光共聚焦显微镜观察K562细胞EpoR表达的分布.结果:以不同剂量,TSPG作用K562细胞24h,流式细胞仪检测显示K562细胞膜表面EpoR呈剂量依赖性下降;细胞Elisa实验结果也显示K562细胞膜表面EpoR表达呈剂量依赖性下降,而细胞浆内EpoR表达呈剂量依赖性增加;激光共聚焦显微镜观察可见K562细胞经200mg/L TSPG作用24h后其膜上的EpoR数量明显减少,荧光强度明显减弱.结论:TSPG可使K562细胞浆EpoR的表达增强,且随着剂量的加大更加明显,而使细胞膜中EpoR的表达减少,这可能是,TSPG抑制K562细胞增殖的作用机制之一.     

蛛网膜下腔出血病人的观察及护理

我科于2006年5月～2007年12月共收治蛛网膜下腔出血（SAH）患者44例,现将护理体会总结如下。     

热习服对大鼠肾脏促红细胞生成素的影响

目的:探讨热习服对大鼠肾脏促红细胞生成素的影响.方法:雄性SD大鼠21只,按体重配对随机分为对照组、单次高温暴露组(高温组)和热习服组,每组7只,各组在各自的实验条件下进行10天,对照组大鼠第11天留取肾脏组织标本;高温组和热习服组第11天进行相同条件的标准热负荷实验后留取肾脏组织标本.采用用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定肾脏组织中促红细胞生成素(Epo)含量,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测肾脏促红细胞生成素mRNA的表达,Western blot技术检测肾脏组织中促红细胞生成素蛋白表达水平的变化.结果:高温组与热习服大鼠肾脏促红细胞生成素水平明显高于对照大鼠(p＜0.05).热习服与高温组大鼠肾脏促红细胞生成素水平无明显差别.经RT-PCR检测,与对照组相比,高温组肾组织Epo mRNA表达显著增强(P＜0.05),而热习服组较高温组明显降低(P＜0.05),但仍然明显高于对照组的水平.Western blot实验中对照大鼠、高温组与热习服大鼠肾脏组织均有明显的Epo蛋白表达.与对照组相比,高温组Epo表达显著增强(P＜0.01),而热习服组较高温组明显降低(P＜0.05),但高于对照组的水平.结论:热习服后大鼠肾脏组织中促红细胞生成素含量明显升高,大鼠肾脏组织中促红细胞生成素mRNA与蛋白的表达均明显增强.提示热习服能显著提高肾脏Epo的表达水平,热习服后红细胞代谢变化可能与Epo水平提高有关.     

促红细胞生成素治疗慢性心力衰竭156例临床观察

目的:观察EPO对慢性充血性心力衰竭(CHF)治疗效果。方法:选择CHF患者212例,随机分为非EPO治疗组(56例)和EPO治疗组(156例)。其中非EPO治疗组采用常规抗心衰治疗,EPO治疗组接受常规抗心衰治疗和EPO治疗,直至临床观察结束。治疗后观察心功能指标改变。结果:156例心衰患者经过EPO治疗后,左室射血分数,每搏输出量,每分输出量,心指数均较非EPO治疗对照组患者明显改善(P<0.05),其中尤以左室射血分数改善最为明显(P<0.01)。156例EPO治疗组患者中116例心衰伴贫血患者心功能各项指标的改善较40例心衰不伴贫血患者更为明显,具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:EPO对CHF患者心功能的改善主要是因为EPO的促红细胞生成作用。EPO对于慢性心功能不全有独立于促红细胞生成以外的治疗作用。