深低温冷冻技术的研究进展

细胞及组织的深低温保存有较高的临床应用和研究价值,在冷冻保存技术中两个关键领域首先发展的是冷冻控制率。冷冻保护剂能增加溶液粘性,提高冷冻速率从而保护细胞及组织免受冷冻损伤。对最佳冷冻保护剂的研究为保存临床应用的组织工程产品提供了理论依据。而玻璃化冷冻近年来越来越受到人们的关注,玻璃化冷冻技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高复苏后的存活率。本文对深低温保护剂的组成、分类、应用及冷冻保存的重大进展和障碍进行了综述。     

生物样品制备的冷冻技术

在分子水平上探讨生物组成,用电子显微镜(EM)与生物化学和X线衍射等方法有着根本的差异。采用电子显微镜可以探讨活细胞及活组织是以怎样的形式存在并起作用的。如何便样品保存得近于活体状态,并能放     

冷冻核移植卵的移植技术

枥木县酪农试验场与协同饲料、东京农业大学合作将10个冷冻的核移植卵移植给牛。10月初确认妊     

生物样品冷冻超薄切片技术简介

电子显微镜超薄切片技术的发展开拓了组织学和细胞学的显微和亚显微结构的研究。但由于常规超薄切片术采用强烈化学囿定,有机溶剂脱水和塑料包埋等步骤所带来的结构损伤和分子活性散失等缺点,人们在光学显微冷冻切片和常规超薄切片基础上,近年来发展了冷冻超薄切片制样技术。七十年代初期,商品冷冻超薄切片装置先后问世,进一步促进了这一技术的发展。     

肾穿刺组织冷冻切片技术的改进方法

目的提高肾穿刺组织冷冻切片的工作效率及切片质量。方法比较应用改进方法与传统方法在肾穿刺组织冷冻切片过程中的耗时及肾小球数量差异。结果应用改进方法每例均能成功切片并且平均每例切片耗时12分1 8.7秒,而传统方法平均每例耗时18分28.4秒;改进方法平均每张冷冻切片含肾小球4.8个,传统方法平均每张冷冻切片含肾小球2.7个。结论改进方法可提高肾穿牵刺组织冷冻切片的工作效率及切片质量。     

胚胎冷冻技术在转基因动物中的应用

胚胎冷冻技术在转基因动物中的应用李劲松,成国祥,李厚达（扬州大学农学院生物技术研究所,江苏省生物工程重点实验室）１９８０年,Ｇｏｒｄｏｎ首次将外源基因导入小鼠受精卵而获得成活个体,从而开了转基因动物的先河。两年后,Ｐａｌｍｉｔｅｒ等将重组的大鼠生长激...     

攸县麻鸭DMA细管精液冷冻技术研究

为利用冷冻精液保存地方鸭品种资源,以笼养攸县麻鸭公鸭(日龄170 d)为试验对象,检测其精子密度与活力,对精液稀释液渗透压进行筛选;将活力在0.5以上的精液以6%二甲基乙酰胺(dimethylacetamide,DMA)作为冷冻保护剂,用便携式简易专利技术装置,将细管精液置于液氮面上约2 cm高度熏蒸冷冻7 min后浸入液氮10 min以上,随后40℃水浴解冻10 s,检测解冻精子活力;将精子活力在0.3以上的细管精液在液氮中保存,待收集到足够细管精液后对相近周龄临武鸭母鸭进行输精。结果显示:1)在不同渗透压稀释液中,精子体外存活时间以LR液303 m Osm/kg组最佳,其活力与273 m Osm/kg组差异不显著(P>0.05),与215 m Osm/kg组差异显著(P<0.05); 2)采集的原精平均活力中,诱情方式的为0.71,按摩方式的为0.61; 3)诱情方式冻精液的平均活力为0.33,活力在0.3以上的冻精输精组的受精率为85.93%,鲜精组为88.17%,且冻精最高批次平均受精率达93.8%。本文精液冷冻方法为我国鸭乃至禽类延长公禽在后裔测定中的种用期限,利用精液冷冻保存种质资源,弥补活体保种的不足等领域的研究与应用提供了技术支撑。     

冷冻聚焦离子束-扫描电镜成像技术研究进展

冷冻聚焦离子束-扫描电镜成像(Cryo-FIB-SEM)是一种新兴的成像检测技术,在原位进行冷冻聚焦离子束切割和冷冻扫描电镜成像,为研究天然含水状态下生物样品内部未被破坏的原始结构打开了一扇窗口。近年来,该技术在生命科学领域的应用研究取得了一系列重要进展。该文对其在冷冻体积连续成像、冷冻光电关联成像、冷冻透射扫描成像、冷冻含水切片制备监控及冷冻扫描图像处理等方面的研究进展进行综述,并展望了该技术在大体积生物样品三维原位成像研究领域的前沿性发展趋势,以期推动Cryo-FIB-SEM技术在生物样品三维结构研究中的应用。     

冷冻你

当太阳的直射点逐渐移往南半球时,冬天就开始向我们走来,生活在地球最寒冷区域之一的北极熊也即将展开它漫长的冬眠。动物在冬眠的时候,体内的物质代谢过程减缓,几乎不需要补充外界的食物就     

冷冻电镜技术在表观遗传学研究中的应用

染色质装配、修饰和重塑复合体,以及它们和核小体、染色质等一起形成的超大分子复合体的精细结构解析,对于在原子水平揭示表观遗传信息建立、维持和调控的分子机制至关重要.近年来,迅速发展的冷冻电镜三维重构技术对于解析这些多亚基、大分子质量、柔性超大分子复合体的结构带来了很好的机遇.本文综述了冷冻电镜三维重构技术在表观遗传学相关的结构研究领域中的一些应用和进展.     

冷冻电镜技术在分子植物学研究中的应用

植物体的各项生理活动依赖于分子水平上多种植物蛋白质/蛋白质复合体的相互作用和动态变化,了解这些蛋白质/蛋白质复合体的结构和功能对于研究相关植物生理活动的分子机理至关重要.得益于最近的技术进步——包括直接电子探测器的发展和先进的图像处理算法,冷冻电镜技术已经逐步发展成为研究蛋白质/蛋白质复合体的重要技术手段,这也为深入理...     

两种冷冻保护剂和冷冻程序对兔精子冷冻效果的比较

目的比较不同冷冻保护剂和冷冻程序对兔精子冷冻保护的影响,以期提高兔精子冷冻保存的效果和效率。方法用三步降温法（程序Ⅰ）和两步降温法（程序Ⅱ）两种冷冻程序与终浓度分别为2%,3%,4%,5%的甘油和乙酰胺两种冷冻保护剂配合进行精液冷冻保存,统计精子复苏率。结果使用程序Ⅱ添加3%乙酰胺的冷冻保护剂实验组的精子复苏率较高,同其它组比较差异有显著性意义（P〈0.05）;程序Ⅱ比程序Ⅰ节省约70%的时间,同种浓度冷冻保护剂的不同冷冻程序组之间精子复苏率差异无显著性意义（P〉0.05）。结论程序Ⅱ与3%乙酰胺配合可以取得良好的冷冻保存效果;用程序Ⅱ进行兔精液冷冻保存可以大幅缩短操作时间。     

猪胚胎常规冷冻及其去脂冷冻研究

1.引言 自1972年小鼠胚胎冷冻首次取得成功以来,胚胎的冷冻技术已逐渐应用到很多种哺乳动物。现在包括牛、绵羊在内的多种家畜物种的胚胎冷冻保存已经成为一种常规的技术。然而利用冷冻保存的胚胎生产出活的仔猪仍然处在摸索阶段,并且仅仅是孵出囊胚的冷冻保存获得成功。这种局限性以及胚胎移植后很低的存活率严重阻碍了猪胚胎冷冻保存技术的发展。     

胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代

目的研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用。方法对6~8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配,收集2-cell胚胎,进行胚胎冷冻。1周后进行胚胎复苏移植,通过PCR方法对仔代鉴定。结果冻存胚胎140枚,复苏获得存活胚胎98枚,移植85枚,产仔38只,获得阳性后代12只。结论通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代。     

刺梨果实冷冻贮藏保鲜及取汁技术研究

为了彻底解决刺梨(Rosa roxburghii Tratt)加工原料周年供应及提高刺梨果实出汁率问题,本试验采用速冻、缓冻果实贮藏方法,分别进行一年之久的小试、中试,并向加工生产企业推广应用。结果显示,好果率均达100%,其中速冻装袋果出汁率高达61%以上,分别比缓冻果和鲜果高出9.69%～11.71%和48.94%～54.41%,如果采用压榨性能良好的压榨机压榨取汁,出汁率可高达65%左右。     

园艺植物茎尖冷冻疗法脱毒的技术研究

超低温冷冻疗法是超低温保存技术在植物脱毒上的一个新的应用。由于其脱毒率高,操作简单,被认为是最有效脱除植物病毒的方法,为脱毒苗的生产开辟了一条新的途径。本文就超低温冷冻疗法脱毒的原理、操作程序、关键技术和在园艺植物上的最新研究进展进行综述,并对其今后的发展进行了展望。     

冷冻电镜技术的发展推动染色质高级结构的研究

染色质的结构及动态变化在基因转录及表观遗传调控中起了关键作用,但对于30 nm染色质纤维(通常认为是基因组DNA的二级结构)的高级结构组成以及细胞体内是否存在30 nm染色质的组织形式一直存在较大争议。近年来,冷冻电镜三维重构技术发展迅速,为研究30 nm染色质纤维高级结构提供了一个良好的工具,并起了较大的推动作用。该文介绍了本领域相关的一些研究进展。     

冷冻电镜技术的突破导致结构生物学发生革命性变化

最近,冷冻电镜技术的突破引起结构生物学发生了革命。这一革命导致2017年诺贝尔化学奖授予对冷冻电镜技术发展做出开创性贡献的3位科学家Jacques Dubochet、Joachim Frank和Richard Henderson。本文将综述冷冻电镜的发展历程,导致结构生物学革命的冷冻电镜关键技术,包括电镜、图像记录装置和图像处理算法方面的突破,以及中国科学家应用冷冻电镜取得的重要科学成就,涵盖基因表达/调控、蛋白质合成/降解、膜蛋白、免疫、病毒等相关蛋白复合体。最后,对冷冻电镜的未来发展方向进行展望。     

小鼠冷冻胚胎库

1972年惠廷厄姆(Whittingham)等和威尔马特(Wilmut)分別报告在超低温(-196℃)条件下冷冻保存小鼠早期胚胎获得成功。此后,这项技术又成功地用于保存大鼠、家兔、羊和牛早期胚胎。目前在国外牛早期胚胎冷冻保存已发展到商业规模,在实验室小鼠方面有些国家已经建立了相当规模的冷冻胚胎库。 小鼠是医学和生物学研究中广泛使用的实验动物,长期以来培育出大量近交系和突变系,     

大家畜的冷冻标号

在畜牧业生产实践中,畜体标号是管理畜群不可缺少的一项技术工作。尤其畜群较大时,在畜体上标志出生年度及个体编号更为重要。冷冻标号容易识辨,且与畜体共存终生,不损皮革,不易感染,操作简便,易掌握,一年四季均可进行。有条件的地方可以试用。 冷冻标号就是将特制的字号在冷却剂液态氮(或干冰)中冷却后,贴按在畜体剪去和剃去被毛的皮肤