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1.
小鼠骨髓内皮细胞分泌的细胞因子对造血干/祖细胞增殖的影响 总被引:4,自引:1,他引:3
应用小鼠骨髓内皮细胞株细胞传代培养,收集无血清条件培养液(mBMEC-CM),经超滤分成大于10kD和小于10kD两组分,分别观察两组分的mBMEC-CM对小鼠骨髓造血干/祖细胞CFU-GM,HPP-CFC,CFU-E,BFU-E和CFU-Meg的影响。结果表明:含分子量大于10kD物质的mBMEC-CM的保留液能明显刺激CFU-GM,HPP-CFC,CFU-E,BFU-E和CFU-Meg生长; 相似文献
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小鼠骨髓 内皮细胞无血清条件培养液及其超滤组分对粒巨噬系祖细胞?… 总被引:1,自引:1,他引:0
本研究通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞系细胞,惧无血清条件培养液(mBMEC-CM),将其作多级串联超滤,获得分子量大于10、3 ̄10、1 ̄3、0.5 ̄1kD和小于0.5kD超滤组分。进行粒巨噬系造血祖细胞集落形成试验。检测了它们的mBMEC-CM和3 ̄10组分对粒巨噬系祖细胞(CFU-GM)生长未见明显影响,而分子量大于10kD和0.5 ̄1kD组分促进CFU-GM的增殖,分子量1 ̄3kD和小于0.5 相似文献
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本文应用造血祖细胞体外培养技术研究了重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)对正常人骨髓粒单祖细胞集落(CFU—GM)形成的影响,结果表明rhGM—CSF在体外能促进细胞集落的形成,此种效应在一定范围内呈剂量依赖关系,与LEUCOMAX各剂量组相比无显著性差异。采用NBT还原试验和APAAP法观察了rhGM—CSF对U937细胞分化的影响,结果显示rhGM—CSF能抑制U937细胞的增殖,促进其分化,部分细胞具有NBT还原能力,CD116阳性细胞数增加。 相似文献
4.
本实验对基质细胞造血刺激因子-1(SHF-1)的体外生物活性进行了研究。结果表明,SHF-1可刺激小鼠骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Mix集落的形成,它产生的这些广泛造血刺激作用是其自身所具活性的直接影响。正常小鼠骨髓细胞与SHF-1在体外孵育4h,其中CFU-S的自杀率可提高约10%,显示它对造血干细胞也有诱导增殖作用。 相似文献
5.
本文观察了锂对BALB/C小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)和粒巨噬系祖细胞CFU-GM体外增殖的影响。HPP-CFC集落由IL-1、IL-6、WEHI3条件培养液(WEHI3-CM,含有IL-3)及L929条件培养液(L929-CM,含有M-CSF)所支持,而CFU-GM由WEHI3-CM所支持。结果显示,LiCl浓度在0.4-2mmol/L时呈现剂量依赖性抑制HPP-CFC增殖;而在0.4-1mmol/L的浓度范围内,则对CFU-GM的增殖起剂量依赖性促进作用。这些结果提示LiCl对HPP-CFC和CFU-GM的作用不同,可能锂有诱导HPP-CFC向成熟细胞分化的作用 相似文献
6.
黄友章 《中国应用生理学杂志》2000,16(1):68-71
目的:探讨人脐带清(CBS)在骨髓造血祖细胞培养中的效应。方法:用人骨髓细胞进行CFU、GM、VFU-E、BFU-E、CFU-GEMM培养。结果:CBS能直接刺激骨髓细胞CEU-GM的形成。与血型相同害无关。四人份以上的混合CBS(MCBS),刺激活性高且稳定。10%MCBS相当于65.6μg/L GM-CSF、0.23、0.3、0。.46kU/L EpO对CFU-GM、CFU-E、BFU-E、C 相似文献
7.
本文比较了小鼠及人脊髓CFU-F及CFU-F集落间细胞生长的特点。结果表明人骨髓CFU-F中成纤维细胞的百分比明显高于小鼠,经2次传代培养即可获得纯的骨髓成纤维细胞。小鼠骨髓基质细胞中内皮细胞和巨噬细胞的比例及总数明显高于人。在GM-CSF的刺激作用下。小鼠骨髓内皮细胞可大量增殖,CFU-F的生长受到抑制 相似文献
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本文观察了锂对BALB/C小鼠骨髓高增殖潜能集落形成细胞和粒巨噬系祖细胞CFU-GM体外增殖的影响。HPP-CFC集落由IL-1,IL-6,WEHI3条件培养液及L929条件培养液所支持,而CFU-GM由WEHI3-CM所支持。结果显示,LiCl浓度在0.4-2mmol/L时呈现剂量依赖性抑制HPP-CFC增殖;而在0.4-1mmol/L的浓度范围内,则对CFU-GM的增殖起剂量依赖性促进作用。 相似文献
9.
为了探讨抗氧化剂对造血干细胞在低温条件下损伤的防护作用,将小鼠骨髓细胞置于4℃条件下保存,观察在保养液中加入不同浓度的Cu、Zn、SOD对细胞死伤的防护效果和马血清对细胞回收率的影响。结果表明,含20%的马血清保养液中加入SOD1.65U或0.165U/ml,保存3天,CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-Meg、CFU-Mix的产率分别为对照组(不加SOD)的6.2、2.6、2.9、4.0和5.1倍,明显提高了造血祖细胞的活存率,其中CFU-GM和CFU-Mix达到保存前水平。SOD的有效作用机理不是对造血祖细胞增殖调控作用,而是防护了细胞的死亡。这可能与其清除过氧自由基的抗氧化作用有密切关系。 相似文献
10.
通过整体实验观察国产重组白介素3(IL-3)对射线和环磷酰胺所致小鼠造血功能低下的疗效;以体外实验分析其疗效机理。实验结果表明:(1)rhIL-3腹腔或皮下连续5天注射能全面提高7Gy照射小鼠9天时股骨骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-Mix和CFU-GM的产率和数量,其效果强弱与注射途径和用药剂量有关。rhIL-3对小鼠股骨骨髓有核细胞总数和内源性脾结节数的改善影响小。(2)rhIL-3对环磷酰胺所致小鼠造血功能低下亦有改善效果,并与起用时间和剂量有关。(3)rhIL-3对人骨髓细胞和CFU-GM集落形成有明显的增强作用。小鼠骨髓细胞对rhIL-3缺乏反应;对rmIL-3有增殖分化加强的反应。rmIL-3体外共育能提高正常及照射2Gy小鼠骨髓细胞体外培养后CFU-GM的产率和数量。文中讨论了IL-3的应用前景及合理方案问题。 相似文献
11.
王佃亮 《中国生物工程杂志》2014,34(7):108-113
种子细胞也是组织工程的核心研究内容,获得足够数量和质量的种子细胞是开展体外组织工程的必要基础。用于组织工程的种子细胞必须具有形成新组织结构的能力,主要来源于自体、同种异体或异种,在具体应用时各有利弊。一些成体干细胞由于不存在伦理争议以及发育分化条件相对简单等优势是重要的种子细胞,包括造血干细胞、骨髓干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞、皮肤干细胞。人胚胎干细胞及其组织工程要真正在临床医学中得到应用,还有很长的一段路要走。其他一些细胞也可以作为组织工程种子细胞,包括内皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞、骨细胞、成骨细胞、角质细胞、前脂肪细胞、脂肪细胞、肌腱细胞等。这些细胞已分化,分裂能力有限,但仍应用于组织工程。理想的种子细胞具有一定标准。 相似文献
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Although macrophages and other immune system cells, especially T cells, have been shown to play disease-promoting roles in atherosclerosis, less is known about the role of antigen presenting cells. Functional, immune stimulating dendritic cells (DCs) have recently been detected in aortic intima, the site of origin of atherosclerosis. We had compared DCs with macrophages in mice with experimental atherosclerosis, to clearly define cell types by developmental and functional criteria. This review summarizes recent advances in studies of DCs in humans and in mouse models of atherosclerosis, as well as providing a simple strategy to measure regulatory T (Treg) cells in the mouse aorta. 相似文献
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人羊膜间充质细胞具有向心肌样细胞分化的特性 总被引:1,自引:0,他引:1
摘 要 探讨人羊膜间充质细胞(human amniotic mesenchymal cells,hAMCs)向心肌细胞分化的能力。采用胶原酶消化法分离hAMCs,用流式细胞仪进行表型鉴定;用5-氮杂胞苷和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导hAMCs向心肌细胞分化,免疫荧光染色法检测诱导后细胞中特异蛋白结蛋白和α-辅肌动蛋白的表达,RT-PCR检测心肌特异性转录因子Nkx2.5 、GATA-4和心肌特异性收缩蛋白α-肌球蛋白重链(α-myosin heavy chain,α-MHC)mRNA的表达。结果显示:①hAMCs原代培养至第6 d,贴壁细胞汇合度可达80%,呈漩涡状生长。传代后hAMCs增殖迅速,3~4 d细胞汇合度可达100%,细胞呈梭形或多角形。②hAMCs表达CD44和波形蛋白,不表达CK19。③hAMCs经诱导分化8~10 d后细胞排列紧密,多为长梭形。③hAMCs诱导2 w和4 w表达α-辅肌动蛋白和心肌特异性转录因子Nkx2.5。④诱导前后的hAMCs均表达结蛋白和GATA-4,但均未见α-MHC表达。说明hAMCs具有向心肌样细胞分化的能力,可望成为细胞心肌成形术(cellular cardiomyoplasty,CCM)的候选细胞。 相似文献
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弄清胚胎肝脏发育的分化调节机制,对指导干细胞在肝再生中的应用以及研究肝分化相关疾病分子机制具有重要意义.胚胎干细胞的全能性使得体外建立肝向分化模型成为可能,采用单层贴壁培养方式,分阶段加入成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、制瘤素(OSM)等因子,诱导小鼠胚胎干细胞D3(mESC-D3)的肝向分化.分化细胞在光镜和电镜下呈现肝样细胞形态,RT-PCR、细胞免疫荧光检测以及PAS染色分析表明,这些细胞具有肝细胞特征性的基因表达和生化功能.采用干细胞分化相关基因芯片比较早期肝定向分化前后的基因表达差异,结果显示,48个差异表达基因中(大于2倍),20个上调、28个下调.进一步的生物信息学分析发现,它们集中体现在细胞外基质、细胞连接、FGF、BMP分子及Notch、Wnt信号通路上,提示这些改变可能与胚胎早期的肝向分化密切相关. 相似文献
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Tobias Ruck Stefan Bittner Lisa Epping Alexander M. Herrmann Sven G. Meuth 《Journal of visualized experiments : JoVE》2014,(93)
The blood-brain-barrier is ultrastructurally assembled by a monolayer of brain microvascular endothelial cells (BMEC) interconnected by a junctional complex of tight and adherens junctions. Together with other cell-types such as astrocytes or pericytes, they form the neurovascular unit (NVU), which specifically regulates the interchange of fluids, molecules and cells between the peripheral blood and the CNS. Through this complex and dynamic system BMECs are involved in various processes maintaining the homeostasis of the CNS. A dysfunction of the BBB is observed as an essential step in the pathogenesis of many severe CNS diseases. However, specific and targeted therapies are very limited, as the underlying mechanisms are still far from being understood. Animal and in vitro models have been extensively used to gain in-depth understanding of complex physiological and pathophysiological processes. By reduction and simplification it is possible to focus the investigation on the subject of interest and to exclude a variety of confounding factors. However, comparability and transferability are also reduced in model systems, which have to be taken into account for evaluation. The most common animal models are based on mice, among other reasons, mainly due to the constantly increasing possibilities of methodology. In vitro studies of isolated murine BMECs might enable an in-depth analysis of their properties and of the blood-brain-barrier under physiological and pathophysiological conditions. Further insights into the complex mechanisms at the BBB potentially provide the basis for new therapeutic strategies.This protocol describes a method to isolate primary murine microvascular endothelial cells by a sequence of physical and chemical purification steps. Special considerations for purity and cultivation of MBMECs as well as quality control, potential applications and limitations are discussed. 相似文献
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芪类化合物在癌的起始、促进和发展阶段均有化学抗癌活性,对其化学结构进行改造并进行作用机制研究,提高其抗肿瘤活性,有可能发现新的抗肿瘤药物.在合成23种芪类化合物的基础上,以MTT法测定其对9种肿瘤细胞系的抑制作用,发现多种化合物对SMMC-7721、BGC-823、HepG2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901细胞系具有较明显的抑制活性.以细胞周期分析、Hoechst 33258荧光染色及线粒体膜电位变化进行检测,发现经抑制作用较强的化合物HCQ-10处理后的 Bel-7402细胞发生G2/M期阻滞,并继发细胞凋亡.实验结果说明,合成芪类化合物对SMMC-7721、BGC-823、HepG2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901细胞具有较为明显的增殖抑制作用,其抑制Bel 7402细胞增殖的作用机制为阻滞细胞于G2/M期并诱导细胞继发凋亡. 相似文献
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Qiang Xue Yang Liu Hongyi Qi Qiang Ma Ling Xu Weihai Chen Gang Chen Xiaoyu Xu 《International journal of biological sciences》2013,9(2):174-189
A novel triple cell neurovascular unit (NVU) model co-culturing with neurons, brain microvascular endothelial cells (BMECs) and astrocytes was established in this study for investigating the cerebral diseases and screening the candidates of therapeutic drug. We have first performed the cell identification and morphological characterization, analyzed the specific protein expression and determined the blood-brain barrier (BBB) function of the co-culture model under normal condition. Then, we further determined the BBB function, inflammation, cell injury and the variation of neuroprotective factor in this model after anoxia-reoxygenation. The results suggest that this model exhibited a better BBB function and significantly increased expression of P-glycoprotein (Pg-P) and ZO-1 compared with BMECs only or co-culture with astrocytes or neurons. After anoxia-reoxygenation, the pathological changes of this model were basically resemblance to the pathological changes of brain cells and BBB in vivo. And nimodipine, an antagonist of calcium, could reverse those changes as well. According to our observations, we deduce that this triple cell co-culture model exhibits the basic structure, function and cell-cell interaction of NVU, which may offer a more proper in vitro system of NVU for the further investigation of cerebral diseases and drug screening. 相似文献
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脂肪来源的间充质干细胞具有较强的体外增殖能力,因具有生物学特性稳定、来源充足、体外培养条件低等优势已引起各国学者的关注。脂肪间充质干细胞凭借其多向分化潜能,是人体干细胞库潜在的重要来源之一。目前,研究人员已成功地在体外将其诱导为内皮细胞,成骨细胞、成软骨细胞、脂肪前体细胞、平滑肌细胞,心肌细胞、神经样细胞等。就脂肪来源的间充质干细胞体外定向诱导分化血管细胞的研究进展作一综述。 相似文献