蝮蛇毒诱导小鼠急性肾损伤的研究

目的观察蝮蛇毒诱导小鼠急性肾损伤肾脏病理变化特点,为肾损伤的防治提供理论依据。方法将小鼠分为N组（正常对照组）、L组（蛇毒低剂量组,0.50 mg/kg）、H组（蛇毒高剂量组,2.00 mg/kg）,每组按时相点又分为3、6、244、8 h四个亚组。96只小鼠随机分配到各亚组,采取肌注蝮蛇毒的方式建立动物模型。结果 SCr值,L组24 h升高（P〈0.05）,48 h下降（P〈0.05）;H组持续升高（P〈0.05）。光镜下肾损伤病理评分,L组6 h开始升高（P〈0.05）,48 h下降（P〈0.05）;H组3 h开始持续升高（P〈0.05）。SCr与光镜下,肾损伤病理评分呈正相关（L组：r=0.883,P〈0.01;H组：r=0.891,P〈0.01）。结论 SCr在一定条件下能反映肾损伤的严重程度,但急性肾损伤的发生早于SCr升高;急性肾损伤的严重程度与蝮蛇毒的剂量呈正相关。     

用尖吻蝮蛇毒蝮蛇毒及抗蛇毒血清处理小鼠S180,EAC腹水癌的初步观察

本文报道了尖吻蝮蛇毒、蝮蛇毒及抗蛇毒血清能使接种S180、EAC腹水癌的小鼠明显延长存活时间、降低接种率,但不能完全阻止癌细胞生长。体外具有较明显的导致癌细胞肿胀、膜破裂、核纤维化、坏死等。从腹水酶活力测定及抗血清初步研究结果表明,癌细胞病变中产生的某些抗原物质可能与蛇毒中的酶和毒蛋白相近。因此注射蛇毒后可在体内产生相关抗体,中和癌细胞产生的毒素以达到治疗目的。     

抗蝮蛇毒血清致过敏性休克的抢救体会

抗蝮蛇毒血清是治疗蝮蛇咬伤的唯一特效药,可引起少数人发生过敏性休克,如处理不当,将危及生命。我院于1992～2004年共收治蝮蛇咬伤患者2716例,使用抗蝮蛇毒血清治疗2358例,出现过敏性休克16例,发生率6．78％。现报告如下。     

抗蝮蛇毒血清致血清病65例临床分析

目的通过对抗蝮蛇毒血清致血清病的治疗,观察其疗效及可能的预防手段．方法回顾性分析1576例使用抗蝮蛇毒血清治疗的蝮蛇咬伤患者,常规采用抗蝮蛇毒血清分段稀释滴注法,其中65例患者在治疗后出现血清病,采用抗变态反应治疗。蛄果65例患者均治愈．临床使用抗蝮蛇毒血清治疗的同时加用糖皮质激素7天以上的532例患者无1例出现血清病．结论抗蝮蛇毒血清致血清病及时给予抗变态反应治疗,其预后良好;蝮蛇咬伤后足量、全程应用糖皮质激素是预防血清病的有效方法。     

抗蝮蛇毒血清致延缓型血清病13例治疗体会

2000年4月～2010年11月,我院共收治蝮蛇咬伤病人654例,均予以抗蝮蛇毒血清（上海赛伦生物科技有限公司生产）治疗,结果发生延缓型血清病13例,发生率1.99%,现报告如下.     

国内蝮蛇毒制剂的药理研究近况

蝮蛇毒制剂在临床上应用越来越广泛,这是由于蝮蛇毒的作用途径和机理的多样性所决定.本文介绍了国内蝮蛇毒药理作用研究近况,表明蝮蛇毒具有抗凝、去纤、溶栓、抗炎、抗癌、抗菌等功效.     

蝮蛇毒,五步蛇毒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

观察吞噬百分率及吞噬指数两指标,结果示,小鼠腹腔注入鸡红细胞后０．５ｈ和２ｈ检测,蝮蛇毒１２μｇ／２０ｇ组和６μｇ／２０ｇ组,两指标均值均明显高于对照组（用生理盐水）;五步蛇毒５０μｇ／２０ｇ组和１０μｇ／２０ｇ组,除０．５ｈ检测见吞噬指数与对照组未出现明显差异外,余项均值均明显高于对照组。认为两种蛇毒均可提高巨噬细胞的吞噬作用     

蝮蛇毒对伯氏鼠疟原虫的抑制观察

蝮蛇毒对伯氏鼠疟原虫的抑制观察李凤文,石维志,王槐芳,林珍广西区寄生虫病防治研究所５３００２１汤圣希广西医科大学蛇毒研究所５３００２１近十多年来,国内外学者对蛇毒进行了广泛地研究,并在临床上用蝮蛇毒制剂治疗脑血栓、心肌梗塞以及牛皮癣等二十余种病症［１...     

蝮蛇毒蛋白C激活物对凝血系统的影响

目的研究蝮蛇毒纯化蛋白C激活物(PCA)的抗凝机制。方法测定PCA对正常人混浆KPTT、PT、TT的影响,对血液凝血活酶生成试验(BTGT)及PA二期法的影响以及对白兔的KPTT和Fgn的影响。结果PCA在最终浓度为0.025mg/L时对正常人混浆KPTT可明显延长,但PT和TT不受影响;当它的浓度增加到50mg/L,PT也可延长,但TT依然无明显变化;最终浓度为0.0125mg/L时,血液凝血活酶生成明显受抑制;当它的浓度增加到2.5mg/L,凝血酶生成显著减少,但抗凝血酶时间始终无明显变化;PCA可明显延长白兔的KPTT。结论PCA在低浓度时首先抑制凝血系统第一阶段内凝途径,在高浓度时也妨碍外凝途径或共同途径,BTGT和PA二期法比KPTT和PT敏感;PCA具有体内抗凝作用。     

蝮蛇毒和眼镜蛇毒对全血化学发光的影响

目的研究蝮蛇毒和眼镜蛇毒对吞噬细胞的免疫抑制作用。方法以氢化可的松为阳性对照物,用化学发光法测定样品清除非细胞体系产生的活性氧,以及样品对酵母多糖诱导的全血化学发光的抑制作用。结果蝮蛇毒和眼镜蛇毒对非细胞体系产生的Ｏ·２和Ｈ２Ｏ２的清除作用都较弱;对全血化学发光有抑制作用,特别是酵母多糖起刺激作用之前加入蛇毒的抑制作用强于酵母多糖起作用之后加入蛇毒的抑制作用。这提示,这两种蛇毒使吞噬细胞的吞噬免疫功能下降,造成吞噬细胞的呼吸爆发减弱,导致活性氧产生不足,化学发光强度下降。眼镜蛇毒的这种免疫抑制作用比氢化可的松还强。结论蝮蛇毒和眼镜蛇毒具有氢化可的松样的免疫抑制作用,其中眼镜蛇毒可能具有作为临床免疫抑制剂使用的价值。     

蝮蛇毒蛋白C激活物对内毒素性离体大鼠心脏功能的影响

目的研究蝮蛇毒蛋白C激活物(PCA)组分对大鼠内毒素(LPS)性心肌损伤作用的影响。方法取SD雄性大鼠32只随机分成正常对照组、LPS组、PCA组和PCA LPS组,用Krebs-Henseleit(K-H)液对大鼠离体心脏行主动脉逆灌。在相应时点记录HR、LVSP、LVEDP、LVDP、 dp/dtmax、-dp/dtmax的变化,并测定冠脉流出液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果PCA明显减轻LPS诱导的心功能改变并抑制心肌SOD活性降低和MDA的升高(P<0.01)。结论PCA对内毒素诱导的心肌损伤改善作用明显,其机制可能是通过保护血管内皮功能,改善微循环,稳定心肌酶活性和膜相结构等途径有关。     

蛇毒清合剂治疗蝮蛇咬伤的疗效观察

目的观察蛇毒清合剂对蝮蛇咬伤的临床疗效。方法选择2008年11月～2011年11月我院收治的蝮蛇咬伤患者62例,随机分成两组,其中观察组31例,在常规治疗的基础上加服蛇毒清合剂,对照组31例采用常规治疗。比较两组患者血清酶学3项（CK、LDH、AST）、肿胀消退时间、疼痛缓解情况、肾功能衰竭、呼吸衰竭发生率、局部组织坏死发生率、致残率以及住院时间。结果观察组的血清酶学3项（CK、LDH、AST）、肿胀消退时间、疼痛缓解情况、肾功能衰竭、呼吸衰竭发生率、局部组织坏死发生率、致残率以及住院时间均明显优于对照组（均P〈0.05）。结论蛇毒清合剂治疗对蝮蛇咬伤有显著疗效。     

长白蝮蛇类凝血酶基因大肠杆菌表达研究

从长白蝮蛇克隆的类凝血酶Ussurin Cdna被克隆进入pET-32α（＋）中与5′端与Thx-Tag和6xHis相连的T7启动子下,构建成大肠杆菌表达载体pET-32α（＋）-Ussurin;再转化感受态E.coli BL（21）DE3细胞,构成表达工程菌株;于IPTG诱导下表达,在细胞质中产生约占细胞质总蛋白10％的具有生物活性的Ussurin。     

蛇伤清毒合剂治疗蝮蛇咬伤临床观察

目的观察蛇伤清毒合剂治疗蝮蛇咬伤的临床疗效。方法将82例蝮蛇咬伤患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加服蛇伤清毒合剂。观察比较两组止痛时间、肿胀消退时间、疗程时间及两组患者局部坏死发生率、呼吸肌麻痹、急性肾功能衰竭发生率。蛄果蛇伤清毒合剂治疗组能缩短止痛时间、肿胀消退时间-减少局部坏死发生率、呼吸肌麻痹、急性肾功能衰竭发生率,与对照组比较差异显著（P〈0．05）。蛄论蛇伤清毒合剂能显著提高蝮蛇咬伤的疗效。     

Crystal structure determination of basic phospholipase A_2 from venom of Agkistrodon halys pallas by molecular replacement method

Basic phospholipase A2 (BPLA2) from the venom of Agkistrodon halys pallas has a strong ability to hemolyze erythrocytes. The asymmetrical unit of P212121 crystal of BPLA2 contains two molecules. Self-rotation function was used to study the orientation relationship of these two molecules. Cross-rotation and translation functions were then used to determine the orientations and positions of the two molecules in the unit cell. The model building and preliminary structure refinement were carried out. The result shows that the two molecules in the asymmetrical unit of orthorhombic crystal are related by a non-crystallographic 2-fold symmetry axis.     

蝮蛇毒碱性磷脂酶A_2基因的克隆

从蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ．利用人工合成寡核苷酸引物作逆转录,以ｃＤＮＡ为模板进行体外扩增,获得磷脂酶Ａ２（简称ＰＬＡ２）基因,克隆至ｐＢＳ－ｋｓ载体中。通过对３个碱性ＰＬＡ２（简称ＢＰＬＡ２）基因单独克隆分别作ＤＮＡ全序列分析,推导ｐｒｏ－ＢＰＬＡ２由１３８个氨基酸残基构成,与已测定的部分氨基酸序列比较,基本相符。该基因成功的克隆,不仅推导出ＢＰＬＡ２的蛋白质全序列,也为进一步开展蛇毒功能肽蛋白质工程的研究工作打下了良好的基础。     

江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2的溶血位点

用聚合酶链式反应 (PCR)对江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2 基因进行点突变 ,使对应 34位氨基酸残基由Arg分别突变为Glu和Gln ,将其基因克隆至温敏表达载体pBLMVL2 ,并在大肠杆菌RR1中成功诱导表达 ,表达产物以包涵体的形式存在。对包涵体进行变复性后 ,用凝胶过滤的方法纯化。对纯化后的产物进行酶活力测定及溶血活性测定。实验结果表明 ,突变后的表达产物维持原有磷脂酶A2 活性 ,且溶血活性显著降低 ,表明磷脂酶A2 的34位碱性氨基酸残基在溶血过程具有重要作用