平滑肌收缩调节的信号转导

平滑肌细胞内信号转导主要有肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）途径。前者通过肌浆内Ｃａ＾２＋浓度升高,激活钙调蛋白（ＣａＭ）依赖性ＭＬＣＫ,催化肌球蛋白轻链丝氨酸（Ｓｅｒ）－１９磷酸化,肌球蛋白ＡＴＰ酶活性增加,肌丝滑行,肌肉收缩。肌浆内Ｃａ＾２＋浓度的恢复使ＭＬＣＫ失活,肌球蛋白轻链磷酸酶（ＭＬＣＰ）使肌球蛋白脱磷酸化,肌肉舒张。近来有证据表明ＰＫＣ信号转导途径通过影响细肌丝相关蛋     

凝溶蛋白对骨骼肌天然细肌丝的作用

凝溶蛋白是Ｆ－肌动蛋白丝的钙依赖性切割性蛋白质,经过焦磷酸溶液选择性抽提和微酸性介质的有效分离,可以得到纯度较高的天然细肌丝。在Ｃａ＾２＋存在时,凝溶蛋白可以切割天然细肌丝。但是,凝溶蛋白对天然细肌丝的作用时程与其对Ｆ－肌动蛋白丝的作用有着显差异,提示细肌丝中的非肌动蛋白蛋白质可能影响了凝溶蛋白对天然细肌丝的结合或切割速率。     

凝溶蛋白对骨骼肌天然细肌丝的作用

凝溶蛋白是Ｆ－肌动蛋白丝的钙依赖性切割性蛋白质．经过焦磷酸溶液选择性抽提和微酸性介质的有效分离,可以得到纯度较高的天然细肌丝．在Ｃａ２＋存在时,凝溶蛋白可以切割天然细肌丝．但是,凝溶蛋白对天然细肌丝的作用时程与其对Ｆ－肌动蛋白丝的作用有着显著差异,提示细肌丝中的非肌动蛋白蛋白质可能影响了凝溶蛋白对天然细肌丝的结合或者切割速率．     

平滑肌非钙依赖性收缩的生化机理

平滑肌收缩的原发信号一般来自肌浆中游离Ｃａ２＋浓度的增高．在调钙蛋白（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）参与下,肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）被激活,从而催化肌球蛋白的磷酸化,启动平滑肌的横桥循环（ｃｒｏｓｓｂｒｉｄｇｅｃｙｃｌｉｎｇ）．除平滑肌收缩的钙依赖性调控外,也存在非钙依赖性调控的生化机理．这一条信号转导途径,可经由Ｇ蛋白以激活非钙依赖性蛋白激酶Ｃ的同工酶ＰＫＣ－ε,其下游步骤有两种钙结合蛋白（ｃａｌｐｏｎｉｎＣａＰ与Ｃａｌｄｅｓｍｏｎ,ＣａＤ）发挥了直接或间接靶蛋白的重要作用．     

蜜蜂飞翔肌收缩蛋白的电子显微镜鉴定

自五十年代肌丝滑行模型建立以来,关于脊椎动物骨胳肌的蛋白质成分,肌丝排列以及肌肉收缩时结构变化的研究取得了很大的进展。骨胳肌肌原纤维由粗、细肌丝有规律地排列所组成。对于肌肉收缩蛋白的选择性抽提,专一性抗体标记以及重组肌丝的研究,证实肌球蛋白存在于粗肌丝;肌动蛋白、原肌球蛋白和原宁蛋白存在于细肌丝(Huxley,A.F.,1957;Huxley,H.E;,1972)。昆虫间接飞翔肌的结构和生理特性有许多不同于脊椎动物骨胳肌的特点。蜜蜂飞翔肌肌原纤维虽然也包含有粗、细两     

Caldesmon及其磷酸化调节肠道平滑肌收缩舒张功能研究进展

肠道平滑肌的收缩和舒张与粗细肌丝的调节密切相关。Caldesmon作为一种肌动蛋白结合蛋白,是参与肠道平滑肌粗细肌丝调节的重要收缩蛋白之一,可通过与肌动蛋白、肌球蛋白和原肌球蛋白交联,阻碍肌动蛋白与肌球蛋白的结合,从而抑制肠道平滑肌的收缩。然而, Caldesmon的磷酸化修饰可以逆转这种抑制作用。Caldesmon可以被不同信号通路中的蛋白激酶刺激,引起自身的磷酸化,促进肌动蛋白与肌球蛋白的结合,进一步导致肠道平滑肌的收缩,在肠道动力障碍疾病中起到关键作用。分别以“Caldesmon”、“平滑肌”、“磷酸化”和以“Caldesmon”、“smooth muscle”、“phosphorylation”、“actin”、“myosin”、“contraction and relaxation”为主题词在中国知网(CNKI)、百度学术和PubMed数据库中查找Caldesmon与平滑肌或肠道平滑肌相关文献。该文就Caldesmon及其磷酸化参与调节肠道平滑肌收缩舒张的功能以及介导Caldesmon磷酸化的相关上游信号通路等方面进行综述,旨在为以基于Caldesmon及其磷酸化调节肠道平滑...     

RU486对兔输卵管平滑肌的收缩效应

应用肌肉机械－电换能器和Ｇｉｌｓｏｎ生理记录仪,观察ＲＵ４８６对假孕４ｄ兔离体输卵管平滑肌的收缩效应。结果显示：（１）ＲＵ４８６可直接作用输卵管平滑肌,使其收缩频率增加,而未明显改变收缩张力及振幅,与在体肌内注射ＲＵ４８６观察到的结果相似;（２）ＲＵ４８６部分抑制ｃａ~（２＋）诱发的平滑肌收缩活动,它还与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ诱发的抑制效应有协同作用,与ＮＥ诱发的收缩张力有拮抗作用,而对Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱发的效应未产生任何影响。以上结果表明,ＲＵ４８６对输卵管平滑肌的作用似乎是改变细胞内游离Ｃａ（２＋）的结果,可能干扰Ｃａ（２＋）的流入、或／和内质网Ｃａ（２＋）释放以及Ｃａ（２＋）－Ｉｐ３信息传递机制。     

大鼠基底动脉和尾动脉平滑肌G蛋白的异质性

用离体血管收缩功能实验法分析了大鼠基底动脉（ＢＡ）和尾动脉（ＣＡ）平滑肌细胞Ｇ蛋白的异质性。结果显示,当ＢＡ和ＣＡ平滑肌被精氨酸血管加压素（ＡＶＰ）激动后,该两种血管对Ｇ蛋白非选择性激活剂ＧＴＰγＳ的收缩反应发生了相反的变化：ＢＡ对ＧＴＰγＳ的收缩增强,并且这种收缩增强不受百日咳毒素（ＰＴ,Ｇｉ和Ｇｏ抑制剂）的影响。而霍乱毒素（ＣＴ,Ｇｓ激活剂）则完全抑制这种收缩,呈单相反应。与ＢＡ相反,ＣＡ对ＧＴＰγＳ的收缩减弱,后者可被ＰＴ预温育反转为收缩增强,而且ＣＴ对这种收缩的抑制作用短暂,呈双相反应。结果提示,ＢＡ和ＣＡ平滑肌细胞介导激动剂收缩反应的Ｇ蚕白存在异质性。     

平滑肌收缩原理

平滑肌收缩原理较心肌、骨骼肌复杂。本文比较了平滑肌与心肌、骨骼肌的超微结构和收缩蛋白的特征,这些特征决定了平滑肌收缩的特性。平滑肌收缩的分子机制有依赖 Ca~( )-肌纤凝蛋白系统-粗、细肌丝的滑行收缩,也有不依赖Ca~( )-肌纤凝蛋白系统、不消耗能量的被动系统。平滑肌张力与膜的通透性相偶联。平滑肌的张力决定于肌浆内 Ca~( )的浓度水平。肌膜上有两类 Ca~( )通道,电位敏感 Ca~( )通道和受体活化 Ca~( )通道。递质、激素和药物等都是通过改变肌膜上这两类通道,升高[Ca~( )]_i 的水平,使平滑肌产生张力,并在此基础上产生各种位相性收缩。     

缺氧心肌收缩蛋白Ca~（2＋），Mg~（2＋）－ATP酶活性研究

将大鼠置于模拟海拔８ｋｍ高度的低压舱内缺氧１周及缺氧后空气中常氧恢复１周和２周,观察了左右心室功能、心肌肥厚、心肌收缩蛋白含量及其Ｃａ￣（２＋）,Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰ酶活性的动态变化。结果表明,８ｋｍ缺氧１周后肺动脉压及右心室收缩压明显升高,左右心室±ｄｐ／ｄｔｍａｘ及收缩指数明显降低。左右心室肌明显肥厚,心肌收缩蛋白Ｃａ￣（２＋）,Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰ酶活性明显减低。缺氧后常氧恢复１和２周后,左右心室功能逐渐恢复达到或接近正常水平,心肌肥厚逐渐减轻或恢复正常,心肌收缩蛋白Ｃａ￣（２＋）,Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰ酶活性也逐渐升高。因此说明：心肌收缩蛋白Ｃａ￣（２＋）,Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰ酶活性的改变是心功能变化的重要生化基础之一,它的减低是缺氧心肌对环境的代偿适应。     

肌球蛋白轻链激酶及其抑制剂

肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）是三磷酸肌醇（ＩＰ３）、Ｃａ２＋－钙调蛋白（ＣａＭ）信息转导途径的一种重要蛋白质，也是第一个被发现的依赖于ＣａＭ的激酶，对肌肉收缩起着重要作用［１］。ＭＬＣＫ抑制剂从ＣａＭ水平或ＭＬＣＫ自身水平上抑制ＭＬＣＫ的活性，可抑制或减弱平滑肌的收缩。天然植物中的多种化合物对ＭＬＣＫ有较强的抑制作用，有吖啶类、黄酮类、蒽醌类、菲类和喹啉类化合物等，为植物资源的开发利用提供了有价值的依据。１．ＭＬＣＫ的结构和酶促反应动力学研究ＭＬＣＫ的活性型是由Ｃａ２＋、ＣａＭ和全酶组成的三元复…     

经G—蛋白敏感的跨膜信号通路调控心血管肌源性张力

本研究探讨低氧和ＡｌＦ－４等药物经Ｇ－蛋白敏感的跨膜信号通路对心血管肌源性张力的调控作用。在含有稳定表达Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换蛋白的ＣＫ１．４细胞中,用ｆｕｒａ－２荧光影像确定细胞低氧对胞浆游离Ｃａ２＋［Ｃａ２＋］ｉ的影响。在离体犬心乳头肌、颈动脉、主动脉及肺动脉恒温灌流样本中,用张力－电换能器测量低氧灌流和ＡｌＦ－４等药物对心血管肌源性张力的影响。在整体犬体内,按拉丁方设计,用１２５Ｉｓｏｄ－１获得不同剂量ＶＩＳＡ高效剂细胞内分布等药代动力学参数。结果表明：①在ＣＫ１．４细胞中,低氧抑制Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换蛋白,产生Ｃａ２＋内流,升高［Ｃａ２＋］ｉ;②低氧灌流削弱ＡｌＦ－４所致的血管收缩而明显易化Ｃａ２＋内流所致的心乳头肌收缩,与结果１）吻合;③ＶＩＳＡ高效剂分布至细胞内,协同ＡｌＦ－４,模拟并激活Ｇ－蛋白敏感的跨膜信号通路,显著改善低氧所致的Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换蛋白等跨膜大分子和心血管收缩蛋白氧化损害。     

心衰时心肌收缩蛋白分子基因表达和心肌收缩力的相互关系

目的和方法：本文通过ＤＯＣＡ硅胶管皮下埋入法建立大鼠心力衰竭模型,比较正常与心衰大鼠心肌收缩力的变化。采用ＲＮＡｓｌｏｔｂｌｏｔ杂交从基因转录水平检测正常与心衰大鼠心肌组织中心肌收缩蛋白分子基因αｃａｒｄｉａｃａｃｔｉｎ与αＭＨＣ表达的变化。结果：（１）心衰大鼠心肌收缩力较正常大鼠明显降低;（２）心衰大鼠与正常大鼠相比,心肌收缩蛋白分子基因αｃａｒｄｉａｃａｃｔｉｎ表达水平未见有统计学意义的变化,而αＭＨＣ表达水平呈显著降低（下降２１．３０％,Ｐ＜０．０５）;（３）αＭＨＣｍＲＮＡ的含量与心肌收缩力的大小存在线性正相关（ｒ＝０．４１４３,ｎ＝４３,Ｐ＜０．０５）。结论：αＭＨＣ基因表达水平的下降是心衰时心肌收缩力减退的主要分子基础之一,且与心肌收缩力的大小存在线性正相关     

脑缺血及复灌中胞浆50kD蛋白反磷酸化变化

目的和方法：采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎（ＢＣＡＯ） 前脑缺血／复灌模型,通过放射性自显影,观察脑缺血及复灌时胞浆５０ ｋＤ等蛋白在有Ｃａ２ ＋／ＣａＭ 及无Ｃａ２ ＋／ＣａＭ 两种反应条件下反磷酸化（ｂａｃｋｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ） 水平的变化。结果：缺血后,总蛋白激酶介导的５０ ｋＤ蛋白反磷酸化水平逐渐下降,其中,Ｃａ２＋／ＣａＭ 依赖性蛋白激酶介导的５０ ｋＤ蛋白反磷酸化水平逐渐下降,而Ｃａ２＋／ＣａＭ 非依赖性蛋白激酶介导的５０ ｋＤ 蛋白反磷酸化水平逐渐上升;复灌后,上述变化均逐渐有所恢复。结论：脑缺血时,５０ ｋＤ 蛋白在体磷酸化水平逐渐增强,蛋白激酶活性由Ｃａ２ ＋／ＣａＭ 依赖性向Ｃａ２ ＋／ＣａＭ 非依赖性转化,复灌后上述变化均有所恢复     

云南松花粉中钙调素结合蛋白的分离和鉴定

通过ＣａＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析方法从云南松花粉中提取出１０种ＣａＭ结合蛋白。它们均能抑制ＣａＭ对ＰＤＥ的激活,但这种抑制可被随后加入的过量的ＣａＭ所消除。酶活测定表明ＣａＭ结合蛋白中有Ｃａ２＋－依赖的ＡＴＰａｓｅ活力,但无植酸酶、过氧化物酶、酸性磷酸酶和磷脂酶Ｄ活性。     

生物素标记钙调素用于植物钙调素结合蛋白的检测

用生物素标了己了花椰菜ＣａＭ。生物素标记的ＣａＭ具有与天然ＣａＭ相似的Ｃａ２＋依赖电泳特性,可激活ＣａＭ依赖性磷酸二酯酶,能够检测出５０ｎｇ的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物ＣａＭ结合蛋白的生物素－覆盖法（Ｂｉｏｔｉｎ－ｏｖｅｒｌａｙ）并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内６４ｋＤ蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必需设置酶标亲和素处理的对照。用生物素－覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形成过程中的ＣａＭ结合蛋白时可检出２,４－Ｄ诱导的ＣａＭ结合蛋白。     

不同钙-醇溶解体系丝素蛋白的制备及表征研究

采用 ４种中性盐溶液 Ｃａ（ＮＯ３）２４Ｈ２Ｏ 甲醇、Ｃａ（ＮＯ３）２４Ｈ２Ｏ 乙醇、ＣａＣｌ２ 甲醇 水和 ＣａＣｌ２ 乙醇 水（摩尔比分别为 １∶２、１∶２、１∶２∶８、１∶２∶８）处理蚕丝纤维,透析后经冷冻干燥制成固体,利用ＳＤＳ ＰＡＧＥ、电镜扫描和红外光谱对制得的固体进行表征。ＳＤＳ ＰＡＧＥ结果表明：Ｃａ（ＮＯ３）２４Ｈ２Ｏ 醇体系降解丝素蛋白较 ＣａＣｌ２ 醇 水体系降解程度高;电镜扫描的结果表明 Ｃａ（ＮＯ３）２４Ｈ２Ｏ 甲醇和 ＣａＣｌ２ 乙醇 水溶解体系处理的丝素蛋白溶解比较完全,Ｃａ（ＮＯ３）２４Ｈ２Ｏ 甲醇处理的丝素蛋白冻干后为颗粒状,而 ＣａＣｌ２ 乙醇 水处理的丝素蛋白冻干后为片状。红外光谱的结果表明：４种溶液处理后的丝素蛋白构象均介于 β折叠和无规则卷曲之间,从而为丝素蛋白在药物缓释载体领域的应用提供了一定的理论依据。     

平滑肌肌球蛋白磷酸化与肌动球蛋白功能调节

在有Ｃａ２＋和钙调蛋白存在时,肌球蛋白轻链激酶催化肌球蛋白磷酸化,促使肌动蛋白激活的肌球蛋白（肌动球蛋白）Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性显著增加．然而,肌球蛋白磷酸化水平与Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶之间的关系是非线性的,原肌球蛋白可以进一步增加Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性,但仍不改变它们之间的非线性关系．肌球蛋白轻链激酶的合成肽抑制剂抑制了肌球蛋白磷酸化和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性,并导致平滑肌去膜肌纤维的等长收缩张力与速度的降低．结果提示肌球蛋白轻链激酶参与脊椎动物平滑肌收缩的调节过程,肌球蛋白轻链磷酸化作用会引起平滑肌收缩     

碱性调宁蛋白的研究进展

碱性调宁蛋白是一个首先从鸡砂囊和牛主动脉中分离出的相对分子质量为34×103的碱性蛋白。它在平滑肌中特异表达,结合钙调蛋白,肌动蛋白,肌球蛋白,抑制肌球蛋白的ATP酶活性,参与平滑肌收缩、细胞信号转导、维持细胞骨架、抑制细胞增生等。     

生物素标记钙调素用于植物钙调素结合蛋白的检测

用生物素标记了花椰菜ＣａＭ。生物素标记的ＣａＭ具有与天然ＣａＭ相似的Ｃａ＾２＋依赖电泳特性,可激活ＣａＭ依赖性磷酸二酯酶,能够检测出５０ｎｇ的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物ＣａＭ结合蛋白的生物素－覆盖法并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内６４ｋＤ蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必要设置酶标亲和素处理的对照。用生物素－覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形态过程中的ＣａＭ结合蛋白时可检出２,４－Ｄ