大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体的纯化

本文利用抗大鼠肝细胞内糖皮质激素受体的单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱,将大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体纯化了约1150倍,SDS聚丙烯酰胺簿层梯度凝胶电泳显示,在约67kD处有一较明显的染色条带。     

大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点测定

利用离子交换层析法测定了大鼠脑突触质膜糖皮质激素结合位点的等电点,结果表明,膜糖皮质激素结合位点的等电点为5.5,与细胞内糖皮质激素受体的等电点(pI6.7)不同。     

猪脑突触质膜糖皮质激素膜结合位点的测定

利用放射配体结合法,测定了猪脑六个不同脑区突触质膜糖皮质激素膜结合位点(GCM-BS)的最大结合量(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。结果表明:猪的大脑、小脑、中脑、丘脑、下丘脑和尾状核的突触质膜GCMBS的Kd都在200nmol/L左右,提示它们对[~3H]皮质酮的亲和力基本相同;而各脑区内GCMBS的Bmax相差较大,从218.98fmol/mg蛋白至486.95fmol/mg蛋白不等,说明不同脑区内所含有的GCMBS的数量不同。     

猪大脑皮层突触质膜糖皮质激素结合位点的测定

利用放射配体结合测定法,测得猪大脑皮层突触质膜上存在有皮质酮特异结合位点,该皮质酮膜结合位点的最大结合量（Ｂｍａｘ）为３３１．８±３６．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白,平衡解离常数（Ｋｄ）为１８５．０±６２．７ｎｍｏｌ／Ｌ。竞争取代实验表明,它具有较高的甾体结合特异性,按亲和力大小排列为：皮质酮＞孕酮＞１７β－雌二醇≈醛固酮＞睾酮。     

淋巴细胞糖皮质激素受体与免疫的相互关系

糖上质激素受体介导信号是免疫细胞发育分化,克隆选择,生存与死亡平衡调节的主要机制之一,对免疫功能既有抑制作用又有促进作用,其免疫调节作用具有组织或细胞特异性和浓度依赖性。免疫功能异常影响ＧＲ表达,ＧＲ异常也引起免疫功能改变,ＧＲ结构或功能异常是某些疾病发生的直接或间接原因。     

大鼠胸腺细胞糖皮质激素受体结合与糖皮质激素效应的定量关系

本文通过糖皮质激素拮抗剂 RU486阻断不同分数的糖皮质激素受体(GR)后,GR 结合与糖皮质激素(GC)效应的比较,研究于两者的量的关系。在地塞米松(Dex)10_(-9)—10_(-5)mol/L浓度范围内,Dex 和大鼠胸腺细胞 GR 的特异结合与 Dex 抑制细胞尿嘧啶核苷(Urd)参入效应呈正向平行趋势。用 RU486阻断5×10_(-8)mol/L 浓度的 Dex与 GR 结合的不同分数,比较 Dex 特异结合与抑制效应的关系,发现两者表现为线性正相关(P<0.01)。将 Dex 结合-效应直线外推,结果提示 GR 有约20%的占领阈但几乎没有备用受体。     

人脑胶质瘤细胞质膜的制备和鉴定

 本文介绍以手术摘除的人脑胶质瘤为标本,应用蔗糖梯度离心建立的一种较为简便的人脑胶质瘤细胞质膜制备法。经标记酶测定,化学组成分析及电镜检查,证实质膜具有一定的纯度。质膜中5’-核苷酸酶(质膜标记酶)活性为全匀浆的8.2倍,其它亚细胞组份污染较小。质膜收量为24.6％。生化测定还显示质膜5’-核苷酸酶活性随着胶质瘤恶性程度升高而下降。     

大鼠肝细胞膜高密度脂蛋白受体的研究

以 ¹²⁵碘标记不含apoE的人HDL₃为配体,采用简便的聚乙二醇沉淀分离法,建立了纯化的大鼠肝细胞膜HDL受体分析法,并对膜HDL受体的性质进行了研究。     

致病性暗色霉的浆膜超微结构分类学意义初探

对致病性暗色霉中的着色霉(Fonsecaea Negroni)外瓶霉(Exophiala Charmichael)瓶霉(Phialophoro Medlar)中的五种真菌浆膜超微结构进行了冰冻蚀刻研究,发现裴氏着色霉(Fonsecaea pedrosoi)和紧密着色霉(F.compacta)的内折长而宽,较深,略有弯曲,数量少,多呈平行或垂直排列。皮炎外瓶霉(Exophiala dermatitidis)的内折数量多,密集而分布均匀,呈圆点状或圆棒状。棘状外瓶霉(Exophiala spinifera)的内折少而表浅,多为圆形。疣状瓶霉(Phialophora verrucosa)的内折数量,排列,形状无一定规律。据上述特征,着色霉可以与外瓶霉,疣状瓶霉区别开来,皮炎外瓶霉也可与棘状外瓶霉区分。浆膜超微结构的性状有一定的分类学意义。     

糖皮质激素受体的光亲和标记

利用[~3H]去炎松缩酮([~3H]TA)进行了糖皮质激素受体(GCR)的光亲和标记。[~3H]TA和GCR共价交联的证据有:(1)光照后,10％的三氯醋酸不能使[~3H]TA和GCR解离;(2)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时,有单一的放射活性峰;(3)用地塞米松保护后,GCR不被标记。采用本方法测定的GCR分子量为94000±3000 dalton,该方法可用于GCR分子量的测定、提纯和配基结合区的分析。     

STUDIES ON ACETYLCHOLINESTERASE OF RAT BRAIN SYNAPTOSOMAL PLASMA MEMBRANES

Abstract— A fluorimetric assay has been used to examine some kinetic properties of AChE from synaptosomal plasma membranes prepared from rat brain. The AChE bound to the plasma membranes was compared to that solubilized with Triton X-100 and found to be essentially the same with respect to Michaelis constant and inhibitor constants for several AChE inhibitors. The two forms of the enzyme had slightly different pH optima. The kinetic studies revealed no evidence that synaptosomal plasma membrane AChE has allosteric properties. The solubilized enzyme was further purified by affinity chromatography.     

胰岛素对糖皮质激素受体的调节作用

在人体白细胞培养基质中加入不同浓度的胰岛素,3h 和24h 后以[~3H]标记的地塞米松([~3H] Dex)特异结合力为指标,研究了胰岛素对糖皮质激素受体(GR)的抑制作用。在基质中分别加入 20mU/L(生理浓度),200mU/L(生理调节时最高血浓度)及2000mU/L(药理浓度),3h 后和不含胰岛素的对照值比,[~3H] Dex 的特异结合力分别减少23.3±10.0,32.2±13.2及54.3±9.2%(P>0.05,P>0.05及P<0.01;24h 后,和对照值相比,特异结合力分别减少43.5±19.0,56.1±20.7和80.2±15.5(P<0.05,P7<0.01,P<0.01)。胰岛素对 GR 特异结合力的抑制效应呈剂量和时间依赖性,它提示了胰岛素浓度在生理条件下对 GR 有紧张性调控作用。