转基因番茄口服疫苗的现状,问题及对策

日趋成熟的植物基因工程技术为转基因植物口服疫苗的研究提供了基础并带来了广阔的发展前景.番茄是最常用的转基因植物受体材料之一,可以直接生食避免了加热过程对外源蛋白的损伤.随着转基因植物免疫保护机制的进一步阐明以及国际番茄基因组测序计划的完成,转基因番茄口服疫苗的发展也迎来了新的机遇.但与此同时,我们也应看到转基因番茄口服疫苗仍存在诸多不确定的因素,如外源蛋白表达量不高、口服时可能被消化以及转基因植物安全性问题等.如何成功解决这些问题将成为转基因番茄口服疫苗发展过程中的重大考验.综述了植物口服疫苗这一概念出现后的近二十年中,番茄作为受体材料研制口服疫苗的现状,问题及对策,旨在为转基因番茄口服疫苗的进一步研究提供思路.     

利用转基因植物生产口服疫苗

通过免疫预防某些疾病是人类将人体本身的免疫功能进行外延扩展的一种尝试,为人类的健康作出了巨大贡献。目前这种尝试仍在继续,以期能研制出更有效、更便利、更便宜的疫苗。所谓植物性口服疫苗就是运用转基因技术,如通过农杆菌,将抗原基因（如霍乱毒素蛋白基因、乙型肝炎表面抗原基因等等）导人植物细胞,从而得到带有抗原基因的植物。人类（也可以推广到动物身上）生吃这些植物就可以达到免疫。从转基因植物的角度来看,植物性口服疫苗不过是转基因植物的一种手段,但在免疫学上则是一次革命。在这之前,疫苗的生产主要通过微生物发酵…     

医药转基因植物研究新进展

转基因植物生产可食用疫苗（1）“工程番茄”植物生产糖蛋白：口服狂犬病病毒疫苗为人类大规模免疫提供一条廉价途径．美国研究人员利用一种可食用植物（番茄）生产理想的植物衍生物制备口服疫苗,通过根瘤农杆菌介导转化法使番茄植物表达糖蛋白基因K卜蛋白）,其表达产物G一蛋     

人A组轮状病毒地方株外壳蛋白VP4的原核表达

目的：制备轮状病毒外壳蛋白VP4。方法：从病人粪便中分离的毒株中提取病毒dsRNA为模板,经RT—PCR获得编码VP4截短蛋白基因片段cDNA(1—1253bp),将VP4基因片段克隆于pGEX-4T-2融合表达载体中,经dot印迹筛出阳性重组子,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。工程菌经IPTG诱导,11％聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果：Western印迹分析表明,工程菌能正确表达VP4蛋白片段,且具有良好的抗原性。结论：为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备。     

疫苗生产的新途径——转基因植物

与发酵生产方式相比,转基因植物疫苗生产技术具有高效、经济和简便等特点。植物表达系统生产外源蛋白一般采用两种方式：（１）编码外源抗原基因与植物基因组稳定整合;（２）利用植物病毒载体,使外源蛋白在植物细胞中瞬时表达。植物系统生产的抗原疫苗可保持自然免疫原性质,口服后能够诱发体液和粘膜免疫反应。     

植物口服疫苗的动物和临床实验*

利用转基因植物生产亚单位疫苗用于口服主动免疫具有安全、廉价和方便等优点。植物可以正确地表达细菌和病毒抗原基因,对动物及人类的临床实验研究表明：食用表达某种抗原的转基因植物可在实验动物或人群体内激起系统免疫和粘膜免疫,产生相应的特异性抗体,这些结果表明了植物口服疫苗的可行性。此外,在治疗自身免疫疾病以及癌症等方面,植物口服疫苗也具有值得关注的作用。     

转基因番茄生产狂犬病病毒外壳蛋白

口服狂犬病疫苗的开发为人类大规模免疫提供了一条廉价途径。据美国Thomas Jefferson大学和美农部的P.B.McGarvey及其同事介绍,利用一种食用植物可生产理想的植物衍生的口服疫苗。目前,该大学研究小组利用根癌土壤杆菌介导转化方法遗传工程获得了表达糖蛋白(G-蛋白)基因的番茄植株。这种蛋白包被于狂犬病病毒ERA病毒株的外表面。转化番茄子叶及组培物再生植株的果实和叶中似乎均含有G-     

朝圣者接种四价脑膜炎球菌TT结合疫苗前后施用Tdap对脑膜炎球菌多糖抗体应答的影响

<正>朝圣者易受多重严重感染,需要接种多种疫苗。多糖蛋白结合疫苗含有破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素或白喉类毒素突变体(CRM197)等载体蛋白。这些载体蛋白可能会与其他结合疫苗或含有破伤风或白喉的联合疫苗在同时或连续给药时发生相互作用。作者研究了在2015年参加朝圣前的澳大利亚成年朝圣者中单独和联合使用破伤风/白喉/无细胞百日咳(Tdap)疫苗与四价脑膜炎球菌TT结合疫苗(MCV4)与13价肺炎球菌CRM197结合疫苗(PCV13)联合使用时的免疫相互作用。将每个参     

国外科技简讯

利用植物生产疫苗 据 AgBiotech News and In-formation 1995年3月报道:美国加利福尼亚州生物资源技术公司和美国马里兰州海军医学研究所的科学家构建了重组烟草花叶病毒(TMV)表面上的疟疾表位(抗原决定簇)。他们通过生物工程把疟疾序列表达于TMV衣壳蛋白。选择B细胞疟疾表位或是被插入 TMV衣壳蛋白的环区,或是被融合于其C末端。用上述任何一种形式的修饰病毒感染烟草植株,都可产生大量的衣壳蛋白。重组植物病毒有可能满足亚单位疫苗生产的需要。这种植物疫苗不仅生产成本低廉,而且可在室温下贮存。一个植株所生     

植物生物技术的现状及展望

1　大田转基因植物研究现状1.1　病原体诱导的病毒抗性自从Beachy等发现转基因植物表达烟草花叶病毒外壳蛋白基因可以抑制或延缓病毒病的发生之后 ,又发现许多病毒序列可以产生一定水平的抗病性。病原体诱导的病毒抗性 (PDR)基因包括一些非编码蛋白序列 (如缺陷干扰型RNAs和DNA     

利用转基因植物生产口服疫苗的研究进展

人和动物的许多疾病是通过病原微生物与消化道、呼吸道和生殖道的表面粘膜接触而引起的〔1〕,如通过消化道传染的疾病有乙型肝炎、伤寒、霍乱、痢疾和胃肠炎等。在发展中国家 ,因为缺少资金购买或生产昂贵的疫苗和医疗设备 ,患病情况尤为严重。因此 ,急需生产价格低廉且不需要复杂医疗设备的口服疫苗。目前 ,利用转基因植物生产口服疫苗越来越受到重视〔1～ 12〕。这种技术已较成熟 ,主要涉及到口服疫苗抗原的选择、目标植物的选择、表达载体的构建、转化和检测及动物和人体试验。1　口服疫苗抗原的选择利用转基因植物生产的口服疫苗抗原一…     

美国计划放松管制

美国农业部(USDA)已宣布要“拆除行政障碍,加快授权对生物技术植物进行野外试验”。我们正在拟定的系统将会缩短审批时间、降低成本、鼓励生物技术革新,并将 USDA 管理部门的力量放在最复杂的领域”。副部长 Ann M Veneman 说,“我们已审批了300例大田试验。在此基础上,我们将简化审批基因工程植物大田试验的程序,同时仍将保证大田试验安全进行。按照现行条例,公司或研究者若要移栽或大田测试基因工程改造的作物,必须向美农部的动植物检疫     

表达乙型脑炎病毒E蛋白重组减毒沙门菌活载体疫苗株的构建

目的:构建表达乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株。方法:克隆JEV E基因,将其插入表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-E,将重组质粒电转入鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550(缺失asd、cya、crp基因),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-E);鉴定重组菌E蛋白的表达,测定重组菌的稳定性、生长曲线、安全性,以及小鼠的免疫试验和血清中和试验。结果:酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功;SDS-PAGE检测有目的蛋白条带;Western印迹证实表达的E蛋白能与猪抗JEV阳性血清特异性结合;重组菌株在体外营养选择压力下,可稳定地携带重组质粒传代繁殖,在体内可较稳定地定居于肠系膜淋巴结和脾脏;小鼠口服试验证实重组菌无毒性作用,安全可靠;小鼠口服重组菌免疫,ELISA检测产生了抗JEV抗体;中和试验表明产生的抗体具有中和活性。结论:构建了能稳定表达JEV E蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550(pYA3341-E),为研究乙型脑炎口服基因工程疫苗奠定基础。     

利用转基因植物表达药用蛋白

随着药物生物技术和植物基因工程迅速发展 ,转基因植物被用作生物反应器生产具有医疗价值的多肽和蛋白质已成为生物医学研究的热点。研究表明转基因植物表达的蛋白质能够保持原有的结构和功能 ,这预示它将为药用蛋白的生产提供一条安全和廉价的新途径。主要概述了近年来国内外转基因植物生产诸如疫苗、抗体和其他药用蛋白或多肽等的研究进展 ,并着重探讨了存在的问题和解决策略。     

利用转基因植物生产口服疫苗的研究现状

本文概述了利用转基因植物生产口服疫苗的研究现状,分别对转基因植物生产口服疫苗的优点、作用原理,研究方法,已研究的口服疫苗及问题和前景进行了介绍。     

植物口服疫苗的研究进展

植物口服疫苗是通过转基因植物生产,通过口服的方式预防疾病的生物制品.作为一种新型疫苗,其研究开始于三十几年前.由于植物口服疫苗可以最大程度地降低传统疫苗的潜在风险,在疫苗生产中具有优势,因此拥有良好的商业生产前景.植物疫苗价格低廉,生产过程安全,可产生与注射疫苗相似效价效果,无论是在控制养殖业抗生素滥用的情况下作为替代...     

转基因植物生产疫苗和药物的研发进展

与传统的生产方式相比,以转基因植物作为生物反应器生产药用蛋白和疫苗,被认为是成本低廉、安全便捷的技术途径。目前,若干以转基因植物生产的药用蛋白已通过行政审批准予上市,一批转基因植物表达的人用或畜禽用疫苗也进入临床试验。综述了转基因植物生产疫苗和药用蛋白的研发进展与代表性案例,讨论了目前面临的问题与挑战,展望了未来技术发展方向。     

细菌蛋白的免疫学特性及其作为多糖蛋白结合疫苗载体的可行性

多糖蛋白结合疫苗(polysaccharide-protein conjugate vaccine)是将病原菌的荚膜多糖与载体蛋白通过共价结合的方式制备而成的疫苗。在上市的多糖蛋白结合疫苗中,载体蛋白(carrier protein)预先接种或共同接种时可能介导免疫干扰,降低结合物中多糖的免疫应答,影响疫苗接种效果。另外,多糖作为疫苗抗原有血清型别的限制,疫苗中所含的血清型别无法保护所有型别的细菌感染。因此,考虑将细菌自身具有保护性的抗原蛋白作为载体蛋白,其中,肺炎链球菌溶血素蛋白、金黄色葡萄球菌蛋白、B群链球菌菌毛蛋白和沙门菌表面蛋白都是目前经过实验室证实的具有免疫原性的载体蛋白。现对这些细菌蛋白的免疫学特性及其作为多糖蛋白结合疫苗载体的可行性作一概述。     

利用转基因技术生产可预防霍乱的可食性番茄疫苗

TrangenicResearch 2 0 0 2年 1 0月 1 1卷 5期 4 47～ 4 5 4页报道 :霍乱是一种由霍乱弧菌 (Vibriocholerae)引起的烈性传染病。霍乱弧菌所分泌的毒素可导致严重腹泻。霍乱毒素由 1个A单位和 5个B单位组成。五聚B部分是有效的免疫辅剂。目前正在研制霍乱疫苗。已研制成功了由霍乱毒素亚单位B(CTB)与灭活的霍乱弧菌细胞混合而成的口服疫苗 ,可预防霍乱 (Sanchez等 ,1 993)。但由于CTB的造价太高 ,故不适于发展中国家生产疫苗使用。为此 ,近年来已开始利用转基因植物生产用于防治疾病的蛋白 (例如Fischer等 ,2 0 0 0 )。由于将抗原表达…     

生物反应器植物工厂

正利用植物生产疫苗、抗肿瘤抗体以及其他蛋白?听起来是否感觉到不可思议?没错,利用整株植物或者植物细胞作为生产工具,生产高价值的药物蛋白,目前已经成为现实,这便是生物反应器植物工厂。生物反应器植物工厂是在植物工厂中,利用植物自身的生化反应过程,来规模化生产具有重要功能的药物蛋白或小分子化合物。传统的生物反应器,是利用动物细胞或者微生物,在巨大的金属发酵罐里生产蛋白,由于蛋白修饰加工、产品安全、工艺放大与控制、生产成本等问题,限