仙鹤藓属（Atrichum）藓类植物组织培养再生体系的建立

报道了仙鹤藓（Atrichum undulatum(Hedw.)P.Beauv.)和仙鹤藓小形变种（Atrichum undulatum var.minus(Hedw.)Par.)的组织培养再生体系的建立。为研究仙鹤藓属（Atrichum)藓类愈伤组织的诱导和再分化,将仙鹤藓和仙鹤藓小形变种原丝体接种在含有4%葡萄糖和0.2-2.0mg/L 6-BA的MS培养基上,培养一个月后,成功地诱导出疏松、易碎的绿色愈伤组织。愈伤组织诱导和常规继代培养较适合的培养基为含4%葡萄糖和1-2mg/L 6-BA的MS培养基。当将继代培养5次的脱分化藓类愈伤组织转移到含4%葡萄糖但无任何激素的MS培养基上时,能再分化形成原丝体,而在无任何碳源的Benecke培养基土培养时,能再分化形成经原丝体阶段发育来的直立配子体。     

仙鹤藓属(Atrichum)藓类植物组织培养再生体系的建立

报道了仙鹤藓(Atrichum undulatum(Hedw.)P.Beauv.)和仙鹤藓小形变种(Atrichum undulatum var.minus(Hedw.)Par.)的组织培养再生体系的建立.为研究仙鹤藓属(Atrichum)藓类愈伤组织的诱导和再分化,将仙鹤鲜和仙鹤藓小形变种原丝体接种在含有4%葡萄糖和0.2～2.0 mg/L 6-BA的MS培养基上,培养一个月后,成功地诱导出疏松、易碎的绿色愈伤组织.愈伤组织诱导和常规继代培养较适合的培养基为含4%葡萄糖和1～2 mg/L6-BA的MS培养基.当将继代培养5次的脱分化藓类愈伤组织转移到含4%葡萄糖但无任何激素的MS培养基上时,能再分化形成原丝体,而在无任何碳源的Benecke培养基上培养时,能再分化形成经原丝体阶段发育来的直立配子体.     

双色真藓的组织培养和发育研究

对双色真藓(Bryum dichotomum Hedw.)的孢子发育过程及愈伤组织的诱导和培养进行了研究。结果表明,双色真藓孢子萌发和原丝体发育属于典型的真藓型。将双色真藓原丝体接种在含有2.0 mg L-1的硅酸钠和3.0 mg L-1 6-BA的MS固体培养基上,可诱导双色真藓原丝体分化为愈伤组织。愈伤组织在含有2.0 mg L-1的硅酸钠、1.0 mg L-12,4-D和1.0 mg L-1 6-BA的MS固体培养基上可以长期继代培养。而愈伤组织在含有2.0 mg L-1的硅酸钠、1.0 mg L-1 2,4-D和1.0 mg L-1 6-BA的MS液体培养基中可以悬浮培养,且生长迅速,培养28 d达到接种鲜重的9.25倍。     

球子蕨孢子的无菌繁殖

以球子蕨成熟孢子为外植体,研究了不同激素及浓度对其孢子萌发、愈伤组织诱导、丛生芽分化及生根的影响。结果表明：孢子萌发最适培养基为1／2MS＋2％蔗糖,20d后萌发率达55．7％;诱导愈伤组织的最适培养基为MS＋0．5mg·L-1 KT＋0．5mg·L～2,4-D,诱导率达36％,愈伤组织为绿色颗粒状;颗粒状愈伤组织在不添加激素的MS培养基中即可生长出大量丛生芽,转化率可达49．3％;低浓度（0．2mg·L-1）的IAA可有效促进幼孢子体苗生根。     

中华缩叶藓孢子萌发与原丝体发育特征研究

通过室内人工培养中华缩叶藓的孢子,在光学显微镜下详细观察了其孢子萌发、原丝体发育及配子体发生的全过程.结果表明:中华缩叶藓的孢子在壁内萌发,随后分裂产生块状原丝体;块状原丝体上可产生两种丝状体,一种是具疣的棒状原丝体,另一种是由长圆柱状细胞组成的轴丝体;配子体原始细胞只产生于块状原丝体上.根据中华缩叶藓的孢子萌发和原丝体发育特征,并参照Nishida对藓类植物孢子萌发类型的划分,确定中华缩叶藓的萌发孢子型应属于缩叶藓型(Ptychomitrium-type).     

大帽藓(Encalypta ciliata Hedw.)原丝体发育特征的实验研究

在人工培养大帽藓(Encalypta ciliata Hedw．)孢子的基础上,对其孢子萌发、原丝体发育及配子体发生的全过程进行行了观察、描绘和照相。实验结果表明：在大帽藓的原丝体系统中主要包括两种成分,即：粗短的丝状绿丝体和细长的柳枝状轴丝体。丝状绿丝体一般由4～6个短粗柱状细胞组成,而轴丝体则是由多数细长柱形细胞构成,其上间隔分布有2～5个细胞组成的棒状体,初生假根有或者无。同时,还对大帽藓原丝体发育的特征进行了分析和讨论,初步确定大帽藓孢子萌发属于新的孢子萌发类型——大帽藓型(Encalypta-type)。     

球子蕨孢子的无菌繁殖

以球子蕨成熟孢子为外植体,研究了不同激素及浓度对其孢子萌发、愈伤组织诱导、丛生芽分化及生根的影响。结果表明:孢子萌发最适培养基为1/2MS+2%蔗糖,20d后萌发率达55.7%;诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.5mg·L-1KT+0.5mg·L-12,4-D,诱导率达36%,愈伤组织为绿色颗粒状;颗粒状愈伤组织在不添加激素的MS培养基中即可生长出大量丛生芽,转化率可达49.3%;低浓度(0.2mg·L-1)的IAA可有效促进幼孢子体苗生根。     

大帽藓(Encalypta ciliata Hedw.)原丝体发育特征的实验研究

在人工培养大帽藓(Encalypta ciliata Hedw.)孢子的基础上,对其孢子萌发、原丝体发育及配子体发生的全过程进行了观察、描绘和照相。实验结果表明:在大帽藓的原丝体系统中主要包括两种成分,即:粗短的丝状绿丝体和细长的柳枝状轴丝体。丝状绿丝体一般由4～6个短粗柱状细胞组成;而轴丝体则是由多数细长柱形细胞构成,其上间隔分布有2～5个细胞组成的棒状体,初生假根有或者无。同时,还对大帽藓原丝体发育的特征进行了分析和讨论,初步确定大帽藓孢子萌发属于新的孢子萌发类型——大帽藓型(Encalypta-type)。     

红蒴立碗藓愈伤组织的诱导和植株再生

1植物名称红蒴立碗藓（Plryscomitriun eurystomum Sendtn.）,也称尖口立碗藓、广口立碗藓。2材料类别配子体。3培养条件脱毒培养基：Knop（张献龙和唐克轩2004）;愈伤组织诱导培养：MS＋6-BA0．05mg·L-1;再分化培养基：MS。以上培养基均添加2％葡萄糖和1％琼脂。培养温度为（25±1）℃,光照强度为60-80μmol．m-2．s-1,光照时间为12h．d-1。4生长与分化情况4．1无菌材料的获得对采集得到的配子体植株先用75％酒精溶液消毒5S,无菌水清洗1次;再用0．25％新沽尔灭溶液表面消毒10S,无菌水漂洗3次;在无菌滤纸上将材料水分吸干,接种到不添加任何激素的Knop培养基上,培育获得无菌材料（图1）。     

光照和温度对尖叶拟船叶藓孢子萌发及原丝体发育的影响

用组织培养法和光学显微镜技术初步研究了光照和温度对尖叶拟船叶藓孢子萌发及原丝体发育的影响。结果表明：（1）光照是影响孢子萌发的主要环境因子,20℃环境下,24h光照4d的孢子萌发率达83.3％;温度下黑暗培养的孢子30d也不能萌发,转光照后4d的萌发率可达84.6％;（2）温度是影响原丝体发育的主要环境因子,连续光照下,20℃的原丝体生长最快、分枝最多、分化最早,第31天可长达651.64μm;25℃次之,只有379.12μm;而自然光照下5-10℃环境下的孢子萌发率（18d为70.2％）和原丝体生长速度（127.44μm）均最慢;（3）原丝体发育到一定阶段,断裂为单个细胞,单个细胞再萌芽出新原丝体。     

尖叶拟船叶藓原丝体发育特征研究

将尖叶拟船叶藓[Dolichomitriopsis diversiformis(Mitt.)Nog.]孢子接种于Knop培养基上,置于恒温培养箱中培养,在光学显微镜下对其原丝体(protonema)发育特征进行了详细观察和记录。结果表明:孢子第2天就开始萌发,第6天时其萌发率达90%以上;原丝体系统由绿丝体(chloronema)和轴丝体(caulonema)构成,假根(rhizoides)产生于芽体基部,由轴丝体退化而成;配子枝原始细胞产生于绿丝体分枝的基部或轴丝体上的斜壁细胞;配子枝(game tophore)形成后其上各部位都可形成假根;孢子萌发类型为真藓型(Bryum-type)。     

不同培养基及激素对铁线蕨孢子离体繁殖的影响

铁线蕨Adiantum capillus-veneris L.是一种常绿草本,植株高15—40厘米,叶片小、纸质,叶片排裂似云片状,是一种优雅的室内观叶植物。多年来,在生产上我国仍采用分株繁殖的方法。用组织培养的方法进行蕨类植物的孢子繁殖工作,国内做得很少。现将我们所做的铁线蕨孢子离体繁殖工作,报道如下。     

DETERMINATION OF RHIZOID ORIENTATION BY LIGHT AND DARKNESS IN GERMINATING SPORES OF ONOCLEA SENSIBILIS

When spores of the fern, Onoclea sensibilis L., are allowed to germinate in darkness, the rhizoid and the protonema are positioned at close to a right angle. If the spores are exposed initially to light and allowed to germinate, the rhizoid and protonema are positioned nearly axially, at opposite ends of the spore. The greater the duration and intensity of the initial illumination, the greater the tendency towards axial arrangement. All colors of light are active to some degree, and the effects are intensity-dependent. The response occurs in a uniform light field and is not dependent on a directional stimulus; the phenomenon reflects the relative arrangement of one part of the gametophyte to another part but not the orientation of growth with respect to an external stimulus. Direct tests show that neither the relative rhizoid orientation nor initial polarity of germination are affected by unilateral white light or polarized red light; the subsequent growth of the protonema, however, is oriented perpendicular to the plane of light polarization. The effects of light in determining the positional relationship between rhizoid and protonema are interpreted in terms of a hypothesis proposing light-induced changes in the structure and mechanical properties of the spore wall.     

Establishment of a Tissue Culture and Rapid Propagation System of Dryopteris fragrans

香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans)是一种多年生野生草本蕨类植物, 具有抗氧化、抑菌、抗银屑病和抗肿瘤等多种功效。香鳞毛蕨的野生资源匮乏, 通过组织培养建立其人工再生体系, 是保护香鳞毛蕨资源可持续利用的有效途径。通过对香鳞毛蕨孢子的无菌培养, 比较分析不同因素对原叶体增殖、孢子体诱导、愈伤组织诱导与增殖、丛生芽分化及生根的影响, 建立了快速繁殖体系, 为香鳞毛蕨规模化生产奠定基础。研究结果表明, 当培养基组分为1/2MS时, 原叶体生长状态较好, 颜色翠绿, 增殖倍数最高可达5.67±0.59, 此时有大量幼孢子体产生, 孢子体诱导率为(37.50±2.04)%; 愈伤组织诱导最佳培养基为1/2MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-12,4-D, 诱导率可达(96.67%±5.77)%; 愈伤组织增殖最佳培养基为1/2MS+ 1.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 2,4-D, 增殖倍数达13.30; 颗粒状愈伤组织在1/2MS培养基中生长出大量丛生芽, 诱导率为(53.33±3.33)%; 1/2MS+0.2 mg·L^-1 NAA培养基促进幼孢子体苗生根, 移栽成活率约为60%。     

金灰藓(Pylaisiella polyantha)配子体发生的实验观察

金灰藓Pylaisiella polyantha(Hedw.)Grout孢子在光照培养箱中进行培养,实验组为含有Knop培养液的琼脂培养基质,对照组为无营养成分的琼脂培养基质。在光学显微镜下对配子体发生进行了观察、描绘和照相。结果表明:实验组和对照组孢子萌发所需时间相同,均为53.5h,萌发极相为1～4极。4d时,实验组萌发率为85.4%,对照组为54.1%;20d时,开始形成配子体芽原基;40d时,形成具假根、茎、叶的配子体,并形成两性器官。并对配子体发生过程的特点进行了分析和讨论。     

香鳞毛蕨的组织培养和快速繁殖体系构建

香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans)是一种多年生野生草本蕨类植物, 具有抗氧化、抑菌、抗银屑病和抗肿瘤等多种功效。香鳞毛蕨的野生资源匮乏, 通过组织培养建立其人工再生体系, 是保护香鳞毛蕨资源可持续利用的有效途径。通过对香鳞毛蕨孢子的无菌培养, 比较分析不同因素对原叶体增殖、孢子体诱导、愈伤组织诱导与增殖、丛生芽分化及生根的影响, 建立了快速繁殖体系, 为香鳞毛蕨规模化生产奠定基础。研究结果表明, 当培养基组分为1/2MS时, 原叶体生长状态较好, 颜色翠绿, 增殖倍数最高可达5.67±0.59, 此时有大量幼孢子体产生, 孢子体诱导率为(37.50±2.04)%; 愈伤组织诱导最佳培养基为1/2MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-12,4-D, 诱导率可达(96.67%±5.77)%; 愈伤组织增殖最佳培养基为1/2MS+ 1.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 2,4-D, 增殖倍数达13.30; 颗粒状愈伤组织在1/2MS培养基中生长出大量丛生芽, 诱导率为(53.33±3.33)%; 1/2MS+0.2 mg·L^-1 NAA培养基促进幼孢子体苗生根, 移栽成活率约为60%。     

球孢白僵菌Bb174固态发酵产几丁质酶产酶及酶学特征研究

对球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb174产几丁质酶进行了固态发酵条件及酶学特征的研究.结果表明,以4:1麸皮:蚕蛹粉、蛋白胨1g·L^-1作为产酶最适培养基,在75g培养基中接种3ml液态种子,自然pH下28℃培养2d,酶活可达最高,为126U·g^-1(干培养基).粗酶液的最适反应温度为40℃,最适反应pH5.0,在30～70℃保温1h,得半失活温度48℃.在30～40℃、pH4～6范围内,酶的性质最稳定.根据Lineweaver-Burk作图法,得到该酶的动力学参数K_m为0.52mg·ml^-1,V_m为0.7△E₆₈₀·h^-1.