β_2微球蛋白的固相放免测定

β_2微球蛋白(β_2mG)放射免疫测定方法已成为临床肾功能测定,预测肾移植成活的一种较可靠的灵敏指标。此法对某些肿瘤、免疫系统疾病、肝脏病诊断也有一定实用价值,因此在临床和科研中的应用日益广泛。固相放免分析法在国外已经成为很有前途的分析手段,有相当一部分检测RIA药盒由液相改为固相。本文将β_2mG固相测定和初步结果作一介绍。一、固相抗体包被利用国产塑料小珠,经简单处理后,将它浸泡于1∶10~3稀释度的β_2mG抗体IgG中,室温放置一天,4℃再放置2天;用PB缓冲液洗去     

人类HLA抗原之轻链—β_2微球蛋白的分离、提纯和鉴定

β_2微球蛋白(β_2m)是分子量为12000的小分子球蛋白,电泳中位于β_2区。β_2m在细胞膜上以非共价键的形式和一个表现为HLA抗原的特异性大分子糖肽相连。肾移植病人在排异期的尿中β_2m含量较高,是提取β_2m很好的材料。本文报道了利用SephadexG-100凝胶过滤、DEAE-32离子交换梯度层析等方法从这类尿样中纯化了β_2m。对纯化的样品进行鉴定,发现在醋酸纤维素薄膜电泳中,在SDS-PAGE及无SDS的PAGE中都呈现一条色带,示成分单一。分子量测定为12,000,电泳移动在β_2区,最大和最小的紫外吸收分别为277nm和250nm,免疫双扩散和免疫电泳揭示纯化样品不是IgG,IgA和转铁蛋白,鉴定结果表示:所纯化之样品之物化性质和文献报道的标准β_2m相同。     

人类HLA抗原之轻链—β_2微球蛋白的分离、提纯和鉴定

β_2微球蛋白(β_2m)是分子量为12000的小分子球蛋白,电泳中位于β_2区。β_2m在细胞膜上以非共价键的形式和一个表现为HLA 抗原的特异性大分子糖肽相连。肾移植病人在排异期的尿中β_2m 含量较高,是提取β_2m 很好的材料。本文报道了利用SephadexG-100凝胶过滤、DEAE-32离子交换梯度层析等方法从这类尿样中纯化了β_2m。对纯化的样品进行鉴定,发现在醋酸纤维素薄膜电泳中,在SDS-PAGE 及无SDS 的PAGE 中都呈现一条色带,示成分单一。分子量测定为12,000,电泳移动在β_2区,最大和最小的紫外吸收分别为277nm 和250nm,免疫双扩散和免疫电泳揭示纯化样品不是IgG,lgA 和转铁蛋白,鉴定结果表示:所纯化之样品之物化性质和文献报道的标准β_2m 相同。     

β_2-微球蛋白放射免疫测定的质量控制

放射免疫分析法(RIA)在临床检验中占有重要地位,目前人们越来越重视RIA结果的准确性和可靠性。本文以β_2mG为例阐述建立RIA质量控制方法和制定质量控制指标。采用自制质控血清和国产微机放免仪的数据处理程序,均能满足WHO对质控的要求。     

转化生长因子β1在肾小管上皮细胞的信号介导分子

本研究在人肾小管上皮细胞系(HK-2)上探讨了介导转化生长因子β_1(TGFβ_1)生物学效应的信号介导分子。结果表明SMADs信号蛋白及ERK激酶均参与TGFβ_1的信号转导;通路特异性Smad2于TGFβ_1作用4小时后开始增加,持续至48小时;而抑制性Smad6于TGFβ_1作用1小时开始减少,4小时达到最低值,以后逐渐恢复;ERK只参与TGFβ抑制增殖效应,对TGFβ促进FN分泌无影响。     

关于高等植物两种光系统Ⅱ反应中心及其在叶绿体膜中分配的探讨

探究了暗适应的蓖麻叶绿体及其放氧光系统Ⅱ制剂的光诱导荧光上升动力学,这种放氧制剂几乎只含基粒片层。PSⅡ_β的相对数量(β_(max))及PSⅡ_α和PSⅡ_β的光反应速度常数(k_α和k_α),在蓖麻的基粒片层中和整个叶绿体片层中没有什么差别。也研究了几种阴生和阳生植物的叶绿体的荧光诱导动力学,这些植物叶绿体的Chla/b比值和β_(max)之间没有什么相关性。这些结果是一致的,但与Melis等人的研究结果不同,他们假定PSⅡ_β在基粒隔片,PSⅡ_β在暴露於间质的片层中。 除此以外,也检测了诱导光强度及预照光后的暗间隔对β_(max)的影响。PSⅡ_β的电子受体Q_β似乎是与Joliot & Joliot所说的Q_2及Echert和Meiburg等人所说的X_α相应的。     

脉络膜黑色素瘤中整合素α_vβ_3表达的研究

目的:整合素α_vβ_3为整合素家族成员之一,是一类跨膜粘附分子,其在多种肿瘤细胞及新生内皮血管细胞中高表达而在成熟血管内皮、上皮细胞及正常细胞中表达较低或无表达。基于这些特征,整合素α_vβ_3近年来成为分子影像研究的热点之一。鉴于整合素α_vβ_3在人眼脉络膜黑色素瘤中是否存在表达尚不可知,本课题拟研究整合素α_vβ_3在人脉络膜黑色素瘤中表达情况,为以整合素α_vβ_3为基础的分子显像提供理论基础。方法:培养人源脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1,使用蛋白免疫印迹方法检测整合素α_vβ_3在OCM-1中表达水平,并使用免疫组化方法检测人脉络膜黑色素瘤病理切片中整合素α_vβ_3表达分布。结果:蛋白免疫印迹实验表明在OCM-1细胞株中存在整合素α_vβ_3表达,其表达水平介于已知高表达整合素α_vβ_3的头颈鳞癌细胞株HEP-2和较低表达整合素α_vβ_3的头颈鳞癌细胞株CNE-1之间,免疫组化方法检测人脉络膜黑色素瘤病理切片中也存在整合素α_vβ_3表达。结论:人脉络膜黑色素瘤中具有整合素α_vβ_3表达,可以为后期研究基于整合素α_vβ_3的分子显像技术提供依据。     

Ghrelin、KGF、TGF-β(β2、β3)在大鵟胃肠道中的表达

应用免疫组织化学方法和体视学半定量方法,检测了ghrelin、KGF、TGF-β(TGF-β_2,TGF-β_3)在大鵟(Buteo hemilasius)胃肠道中的表达,利用IPP专业图像分析软件对其表达强度进行了定量分析.结果表明,ghrelin免疫反应阳性物质分布在十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠的黏膜层,主要分布于黏膜上皮、肠腺上皮和固有层.从十二指肠到盲肠阳性细胞的分布密度逐渐减小,直肠阳性细胞的分布密度高于盲肠.胃肠道呈KGF免疫反应阳性,胃内阳性物质分布于腺胃浅腺和深腺、肌胃黏膜、肌胃单管腺的上皮细胞;肠内阳性物质分布于固有层的血管、淋巴和平滑肌纤维.胃黏膜、腺胃深腺、肌胃单管腺、肠道黏膜、肠腺呈TGF-β_2及TGF-β_3免疫反应阳性,阳性物质分布于黏膜、肠腺上皮细胞胞质中.图像分析显示,KGF的阳性表达水平呈波浪形变化,在空肠和直肠处达到峰值;TGF-β2的阳性表达水平呈波浪形变化,分别在肌胃和空肠处有峰值;TGF-β_3从腺胃到空肠阳性表达水平逐渐增强,之后阳性表达水平又逐渐下降,到盲肠阳性表达水平回升.ghrelin、KGF、TGF-β_2和TGF-β_3的阳性表达强弱可能与胃肠道的消化能力有关,它们的协同表达调控鸟类胃肠道的生长和发育.     

血红蛋白种间分子杂交以及树鼩进化地位的探讨

为了探讨树鼩(Tupaia belangeri chinensis)的分类地位及其与灵长类动物的亲缘关系,本文利用血红蛋白种间分子杂交技术,以人类血红蛋白HbA为标准,分析比较了树鼩血红蛋白与原始灵长类动物懒猴(Nycticebus coucang)血红蛋白的结构异同。在碱性条件下,三种血红蛋白的电泳迁移率大小为:人>懒猴>树鼩。树鼩Hb(α_2~(Tup)和β_2~(Tup))和HbA(α_2~Aβ_2~A)杂交可以产生两种杂种分子 (α_2~(Tup)β_2~A和α_2~Aβ_2~(Tup))。HbA和懒猴Hb (α_2~(Nyc)β_2~(Nyc)) 杂交也可产生两种杂种分子(α_2~(Nyc)β_2~A和α_2~Aβ_2~(Nyc))。结果表明,树鼩Hb与懒猴Hb的α链净电荷相似。认为树鼩与懒猴的分类地位相近。     

川麦冬中的新C_(27)甾体甙(英文)

从百合科植物川麦冬 (OphiopogonjaponicusKer_Gawl.)块根中分离得到 4个C2 7甾体甙类化合物 ,其中两个为新化合物 :ophiopojaponinA ( 1)和B ( 2 )。它们的结构通过波谱和化学方法鉴定为 :pennogenin 3_O_[2′_O_acetyl_α_L_rhamnopyranosyl ( 1→ 2 ) ]_β_D_xylopyranosyl ( 1→ 3)_β_D_glucopyranoside ( 1) ,2 6_O_β_D_glucopyranosyl_( 2 2 ξ,2 5R)_3β ,14α ,2 2 ξ ,2 6_tetrahydroxyfurost_5_ene 3_O_α_L_rhamnopyranosyl ( 1→ 2 )_β_D_glucopyranoside ( 2 ) ,diosgenin 3_O_[α_L_rhamnopyra nosyl( 1→ 2 ) ]_β_D_xylopyrano_syl ( 1→ 3)_β_D_glucopyranoside ( 3)andruscogenin 1_O_[α_L_rhamnopyranosyl( 1→ 2 ) ]_β_D_xy lopyranosyl ( 1→ 3)_β_D_fucopyranoside ( 4)。     

慢性肾功能衰竭早期患者血清CysC、RBP、β2-MG水平的关系及其诊断价值分析

目的:分析慢性肾功能衰竭(CRF)早期患者血清胱抑素C(CysC)、视黄醇结合蛋白(RBP)、β_2-微球蛋白水平(β_2-MG)的关系,探讨其对CRF早期的诊断价值。方法:选取2016年8月至2018年10月新疆医科大学第二附属医院收治的CRF早期患者240例作为研究组,同期体检的健康者240例作为对照组,比较两组血肌酐(Scr)、血清CysC、RBP、β_2-MG水平,并分析CysC、RBP、β_2-MG的相关性以及其对CRF早期的诊断价值。结果:研究组血清SCr、CysC、RBP、β_2-MG水平及阳性率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析显示,CRF患者血清CysC与RBP、β_2-MG水平呈正相关(r=0.532,0.784,P=0.012,0.000),RBP与β_2-MG水平呈正相关(r=0.518,P=0.015)。CysC、RBP、β_2-MG联合诊断的特异度、敏感度和准确度分别为98.75%、88.33%和93.54%。结论:CRF早期患者血清CysC、RBP、β_2-MG水平升高,三指标之间具有一定的相关性,CysC、RBP、β_2-MG联合检测对CRF早期具有较高的诊断价值。     

小鼠子宫平滑肌肾上腺素β受体亚型的研究

本实验分析小鼠子宫平滑肌的肾上腺素β受体亚型,以去甲肾上腺素(NA)、异丙肾上腺(ISO)及舒喘灵(SAL)为激动剂,其pD_2值分别为7.34,8.43与7.30。其中ISO的pD_2值显著大于NA及SAL(P<0.01);NA与SAL的pD_2值无显著性差别(P>0.05),提示小鼠子宫平滑肌具有β_1与β_2受体,且β_1与β_2的数量与/或活性不会相差过大。以心得安为竞争性拮抗剂,NA,ISO及SAL为激动剂,用Schild作图法得出三条不重合且几乎平行的直线,横轴上截距分别为9.01,9.17及9.68,pA_2值按激动剂顺序为SAL>ISO>NA,此结果进一步提示小鼠子宫平滑肌具有β_1与β_2受体,且β_2的数量略大于β_1     

简易血液透析滤过的临床应用

本文介绍了用普通血液透析机、恒温箱、床称(Patient Weighing monitor)及血泵进行的简易血液透析滤过方法(simplified hemodiafiltration,SHDF)。对比了不同的透析膜、不同血液净化方法对BUN、Cr、中分子物质(middle molecule substances,MMS)及β_(2m)的清除结果。发现用聚砜(polysulfone,ps)膜进行的SHDF对小分子毒物清除效果与HD相似,优于HF:对MMS及β_(2m)清除率与HF相似,优于HD及HDF(high flux dialysis)。SFDF是一种简便、有效的血液净化方法,且一机多用特点,可以在一般血液净化单位开展。     

Aβ_(1-42)寡聚体通过PI3K-AKT信号通路诱导神经胶质细胞内TNF-α表达的机制研究

本文主要应用Western blot和Real-Time PCR等实验方法考察Aβ_(1-42)寡聚体通过AKT信号通路对人源胶质母细胞瘤A172和鼠源胶质母细胞瘤D1A细胞中TNF-α表达的影响,同时应用免疫荧光的实验方法,进一步检测Aβ_(1-42)寡聚体诱导TNF-α表达的具体调控机制。结果发现,A172和D1A细胞经Aβ_(1-42)寡聚体处理后,Aβ_(1-42)寡聚体可上调炎症因子TNF-α的表达,并且免疫荧光结果显示,此诱导作用是通过PI3K-AKT信号通路实现的。基于本实验研究,说明Aβ_(1-42)寡聚体参与AD患者脑内炎症反应的发生,提示抗炎及抗Aβ形成在阿尔茨海默病的临床治疗方面具有重要的理论意义。     

子宫内膜癌中TGF-β_1及受体TβRI的表达及其临床意义

目的:研究转化生长因子(TGF-β_1)及其Ⅰ型受体(TβRI)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR方法检测36例子宫内膜癌及31例正常子宫内膜组织中TGF-β_1及TβRI基因的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果:子宫内膜癌组织中TGF-β_1mRNA的表达明显高于正常组织(P<0.05),而TβRI mRNA的表达水平明显低于正常内膜组织(P<0.05)。TGF-β_1mRNA及TβRImRNA在子宫内膜癌中的表达均与肿瘤的临床分期、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移呈显著性相关(P<0.05),差别有统计学意义。结论:TGF-β_1及其Ⅰ型受体TβRI在子宫内膜癌的发生、发展中可能起重要作用,检测TGF-β_1及TβRI对评价子宫内膜癌的转移及预后有重要价值。     

小花盾叶薯蓣甙的酶降解

从小花盾叶薯蓣 (DioscoreaparvifloraC .T .Ting)的新鲜根状茎中分离到一个新的呋甾烷型配糖体 ,命名为小花盾叶薯蓣甙 (parvifloside) (1) ,其结构通过波谱和化学方法鉴定为 :(2 5R)_2 6_O_β_glucopyranosyl_furost_5_en_3β ,2 2 ξ ,2 6_triol 3_O_β_D_glucopyranosyl (1→ 3)_β_D_glucopyranosyl (1→ 4 )_[α_L_rhamnopyranosyl (1→ 2 ) ]_β_D_glucopyra noside。化合物 1在纤维素酶粗酶和 β_葡萄糖苷酶中进行水解 ,得到降解产物 2 - 7。对 1的酶解现象进行了讨论。同时 ,对所分离的甾体皂甙的抗稻瘟霉菌活性进行了初步筛选。     

β-肾上腺素受体与视紫红质在结构上相似

Richard Dixon 等在1986年5月报告,他们已将哺乳动物β-肾上腺素受体(β-adrenegic receptors,βAR)的基因按顺序排列成功,并确信不是假基因。通过仓鼠肺βAR 基因序列的分析,得出二个结论:一是βAR 和光敏色素视紫红质(rhodopsin)在结构上有相似性;二是仑鼠βAR 基因密码子序列中未发现有非密码片段(内含子introns)插入。药理学家把AR 分为α_1、α_2、β_1和β_2几个亚型,并已认识到AR 与儿茶酚胺接触后所发生的几种反应,例如受体的敏感性降低和受体总数减少。生化学家阐明了儿茶酚胺与受体结合后最初的几步反应:儿茶酚胺与βAR 结合引起受体与G(或N)蛋白发生偶联,并进一步引起GTP 与G 蛋白的α亚单位结合。这     

靶向探针追踪Aβ_(25-35)的亚细胞定位并基于Nrf2通路探讨阿里红多糖对线粒体损伤的保护机制

用靶向探针追踪淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))的亚细胞定位情况,同时基于Nrf2信号通路探讨阿里红多糖组分(FOAPs-a)和(FOAPs-b)对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞线粒体损伤通路的保护作用机制。采用40μmol/L Aβ_(25-35)诱导PC12细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,将PC12细胞分为空白组、模型组(加40μmol/L Aβ_(25-35))、阳性组(加50μmol/L盐酸多奈哌齐)、不同浓度的FOAPs-a和FOAPs-b干预组(各50、100、200μg/mL)。以靶向探针追踪Aβ_(25-35)在各组PC12细胞中的亚细胞定位情况;通过试剂盒检测PC12细胞中活性氧自由基ROS的变化情况;Western blotting法测定细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达量以及和Nrf2通路相关的Nrf2、APK1和磷酸化的APK1蛋白的表达情况。结果发现,Aβ_(25-35)处理PC12细胞会影响线粒体的完整性;在200μg/mL FOAPs-a/b预处理PC12细胞后,能够显著缓解Aβ_(25-35)对线粒体的损伤,同时使Aβ_(25-35)的亚细胞共定位减弱;与空白组比较,模型组细胞中ROS含量增加,与模型组比较,FOAPs-a及FOAPs-b干预组均能降低ROS的沉积,差异有统计学意义;Western blotting结果显示:与模型组比较FOAPs-a及FOAPs-b均能减少APK1的磷酸化水平,上调Nrf2的蛋白表达水平。总之Aβ_(25-35)可进入到PC12细胞的线粒体中引起其损伤,阿里红多糖组分能够通过激活Nrf2信号通路显著缓解Aβ_(25-35)对PC12细胞线粒体的损伤。     

CEA、CA125、CA-50、β2-MG对腮腺粘液表皮样癌的诊断价值分析

目的:探讨CEA、CA125、CA-50、β_2-MG对腮腺粘液表皮样癌的诊断价值。方法:选择2015年6月至2017年5月本院收治的腮腺粘液表皮样癌患者30例为恶性肿瘤组及同期收治的良性腮腺肿瘤患者30例为良性肿瘤组,并选择30例健康体检者为健康对照组。采用酶促化学发光免疫分析法检测各组血清、混合唾液、健侧/患侧腮腺液中CEA、CA125含量;放射免疫分析法检测血清、混合唾液、健侧/患侧腮腺液中CA-50、β_2-MG水平。比较各组腮腺液、唾液、血清中CEA、CA125、CA-50、β_2-MG水平;分别对健侧及患侧腮腺液、混合唾液、血清中的CA-50、β_2-MG水平与CEA、CA125水平进行相关性分析。结果:肿瘤组腮腺液、唾液、血清CEA水平均明显高于健康对照组(P0.05),恶性肿瘤组患侧腮腺液、血清CEA水平明显高于良性肿瘤组(P0.05)。肿瘤组患侧腮腺液、混合唾液中CA125水平明显高于健康对照组,且恶性肿瘤组明显高于良性肿瘤组(P0.01)。肿瘤组各检测标本中CA-50水平均明显高于健康对照组(β_2-MG水平均明显低于健康对照组),恶性肿瘤组高于良性肿瘤组(P0.01)。健侧腮腺液及血清中CA-50水平与CEA水平呈显著正相关,β_2-MG水平与CEA水平呈显著负相关(P0.05)。患侧腮腺液及混合唾液中CA-50水平与CEA、CA125水平呈显著正相关,β_2-MG水平与CEA、CA125水平呈显著负相关(P0.05)。结论:患侧腮腺液、混合唾液中CEA、CA125、CA-50、β_2-MG水平检测对腮腺粘液表皮样癌的诊断有较高的参考价值。     

β2-微球蛋白放射免疫测定的质量控制

放射免疫分析法(RIA)在临床检验中占有重要地位,目前人们越来越重视RIA结果的准确性和可靠性。本文以β₂mG为例阐述建立RIA质量控制方法和制定质量控制指标。采用自制质控血清和国产微机放免仪的数据处理程序,均能满足WHO对质控的要求。