法国全球生物能源公司开发用可再生原料制造生物丙烯

2012年10月9日，法国全球生物能源（GlobalBioenergies）公司宣布，证实了能直接将可再生原料转化成生物丙烯的新型代谢途径。丙烯是石油化学工业的重要产品之一。为了制造包装和汽车产业使用的塑料聚丙烯，主要用的是丙烯单体。从体积上讲，丙烯是第二号大宗石油化工产品，现在拥有930亿美元的市场规模。     

平颏海蛇PLA2在大肠杆菌中的融合表达

将编码平颏海蛇磷脂酶A2的基因(PLA29)分别克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pThioHisC和pTRX的HP\|trxA和trxA基因的3′末端,构建符合读码框的融合表达载体pThioHisC\|PLA2和pTRX\|PLA2。25℃下经IPTG诱导,PLA2融合蛋白在两种原核系统中均能获得较高表达,但PLA2在pTRX系统下的表达量和蛋白溶解性优于pThioHisC系统。将两种系统下的表达产物进行金属螯合亲和层析纯化,Trx\|PLA2融合蛋白的纯度可达85%以上,而HPTrxPLA2不表现出对介质的亲和性,难以得到纯化。由此,将pTRX\|PLA2载体系统确立为进一步大量表达和纯化的载体系统。     

聚乳酸的生物降解

聚乳酸(polylactic acid, PLA)因其良好的理化性能、生物相容性和生物降解性而备受关注，已被认为是石油基塑料最具潜力的替代者，但在实际应用中仍然存在降解缓慢循环周期长的问题，因此对PLA的生物降解深入研究对于解决塑料垃圾污染和缓解能源危机至关重要。近年来，有关微生物(放线菌、细菌和真菌)和酶(蛋白酶、脂肪酶、酯酶和角质酶)降解PLA的研究已经取得了一定的进展。本文从降解微生物、降解酶和降解机制等方面综述了PLA生物降解的研究进展，并展望了PLA生物降解研究未来的发展趋势。     

g-HA/PLA复合材料的细胞反应和血液相容性研究

将表面改性后的羟基磷灰石颗粒同聚乳酸复合得到新型复合材料可望用于骨替代领域, 本文旨在研究此种复合材料的血液相容性和细胞反应. 将L-乳酸低聚物接枝到羟基磷灰石表面, 得到接枝羟基磷灰石颗粒. 之后, 将g-HA颗粒同PLA进行共混获得g-HA/PLA复合材料. 先前研究表明, 由于提高了聚合物基体和HA颗粒之间的界面黏附力, 这些材料的拉伸性能得到了明显提高. 为进一步考察这些材料在骨修复及其他整形外科方面的潜在应用, 进行了一系列体内和体外实验来测试其细胞反应及血液相容性. 体外实验表明, g-HA/PLA复合材料有利于L-929细胞的生长. 复合材料的溶血率低于纯PLA. 皮下植入实验表明, g-HA/PLA复合材料的软组织反应比较合适. 以上结果提示, g-HA/PLA复合材料是一种安全的材料, 有望用于组织工程研究.     

日本蝮蛇蛇毒磷脂酶A2(Gln49-PLA2)的细胞毒性

从日本蝮蛇(Agkistrodonblomhoffiiussurens)蛇毒中分离得到PLA2同源物Gln49PLA2,该蛋白具有抗凝血活性、肌肉毒性,缺乏磷脂酶A2活性。分析了该蛋白质对不同培养细胞生长的影响,探讨其细胞毒性。结果表明:贴壁细胞的Gln49PLA2半致死量(LD50)明显低于悬浮细胞,肝素可以明显抑制Gln49PLA2的细胞毒性。将其作用于K562细胞,随着Gln49PLA2用量的增加乳酸脱氢酶(LDH)释放量增加,细胞凋亡率增大,线粒体膜电位下降,但Bcl2蛋白的表达量无明显变化。     

平颏海蛇碱性磷脂酶A_2的融合表达、纯化及活性特征

 将编码平颏海蛇碱性磷脂酶A2 的基因 (PLA2 9)克隆于硫氧还蛋白基因融合表达载体pPETTRX的trxA基因的 3′末端 ,构建符合读码框的融合基因 .2 5℃下经IPTG诱导 ,该融合蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达 ,表达量达 2 0 %以上 .利用金属螯合亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化 ,得到纯度 85%的融合蛋白 .经肠激酶切割和离子交换柱层析进一步纯化后 ,得到浓度 95%以上的成熟PLA2 9.对重组PLA2 9进行了Western印迹检测 .重组PLA2 9具有与天然PLA2 相近的酶活性 ;并具有对HL60等几种肿瘤细胞的细胞毒作用 ,这在海蛇PLA2 中是首次报道 .平颏海蛇碱性PLA2 融合表达及快速纯化系统的建立 ,为深入开展其结构与功能关系研究奠定了基础     

磷脂酶A2激活对中性粒细胞趋化和粘附的作用

外源性磷脂酶A2(Ⅰ型PLA2)和钙离子载体(A23187)可明显促进中性粒细胞对TNF,FMLP的趋化及同玻璃球的粘附.PLA2抑制剂二溴苯乙酮(PBPB)和PLA2抗体对PLA2诱发的趋化和粘附具有浓度相关的抑制作用,而对A23187的相同作用并无影响.提示PBPB和PLA2抗体可能通过直接同PLA2作用而抑制PMN趋化和粘附,A23187诱导的促趋化及粘附作用可能不同于PLA2.     

磷脂酶PLA2-Ⅰ B在胃癌组织中的表达下降

目的:明确磷脂酶PLA2-ⅠB在正常小鼠胃组织中的细胞表达类型,检测PLA2-ⅠB在人胃癌组织中的表达情况。方法:利用Northern印迹验证PLA2-ⅠB在小鼠胃组织中的表达;利用原位杂交明确PLA2-ⅠB在正常小鼠胃组织中的细胞表达类型;利用反转录PCR检测14例人胃癌组织中PLA2-ⅠB的表达情况。结果:PLA2-ⅠB主要表达在小鼠腺胃的主细胞;与癌旁相比,PLA2-ⅠB的表达在93%的人胃癌标本中显著下降。结论:磷脂酶PLA2-ⅠB在胃癌组织中的表达下降。     

平颏海蛇毒磷脂酶A2基因的多样性

通过对平颏海蛇毒腺cDNA文库的随机测序和PCR筛选,分离到3种未曾报道的磷脂酶A2（PLA3）cDNA,分别命名为PLA2－8,PLA2－9,PLA2－384。这些cDNA均含有完整的读码框（长度分别为456bp、438bp和438bp）,编码含27个氨基酸残基的信号肽和长度分别为4．8、7．8和8．4。氨基酸序列分析和二级结构预测表明,3种PLA2均属I类磷酯酶A2家族,其中PLA2－8与来自澳大利亚虎蛇Notechis scutatus scutatus的PLA2有81％的同源性;而PLA2－9和PLA2－384则与来自海蛇Enhydrina schistosa的肌毒PLA2有90％的同源性,这不仅预示着他们在功能上可能存在某些相似性,也反映出平颏海蛇PLA2的结构多样性。这组海蛇PLA2同功酶基因的成功克隆为进一步揭示PLA2的结构与功能关系及的分子机制提供了新的信息。     

浙江蝮蛇毒磷脂酶A抗凝作用的研究

本文研究分析了从浙江产蝮蛇毒提纯的三种磷脂酶A(PLA)的抗凝活性,结果只有碱性PLA具有抗凝作用,而酸性PLA与中性PLA(Agkistrodotoxin)均无此作用。碱性PLA能显著延长血浆复钙时间和凝血酶原时间,影响血液凝血活酶的生成,抑制血小板磷脂与红细胞磷脂的促凝活性,但对凝血酶时间及纤维蛋白平板溶解试验无影响。这些结果表明,碱性PLA可能通过对膜磷脂的作用而干扰凝血酶原酶的形成。碱性PLA明显改变了血小板和红细胞的电泳速率,而酸性及中性PLA则影响较小,提示碱性PLA抗凝活性可能与膜磷脂特异活性部位的结合反应有关。     

分泌型磷脂酶PLA2G5的生物学功能及其抑制剂研究进展

分泌型磷脂酶PLA2G5属于磷脂酶A2超家族的一员,在免疫细胞和非免疫细胞中均有表达.研究表明,PLA2G5参与生物学事件的发生发展,在特定的病理条件下具有诱导作用.本文简要阐述了PLA2G5的来源、结构特征、生物学功能和在疾病中的作用,以及现有或潜在的PLA2G5抑制剂,以期探索基于PLA2G5的治疗新靶标.     

静电纺丝法构建食道上皮组织

为了模拟食道上皮基膜构造,促进上皮组织的再生,以聚乳酸 (PLA) 和丝素蛋白 (SF) 为材料,利用静电纺丝法制备了PLA及PLA/SF等多孔纤维膜支架;并从猪食道粘膜组织中分离提取包括IV型胶原蛋白、层粘连蛋白、巢蛋白及蛋白聚糖等基膜蛋白的提取液,涂覆接枝于支架表面。通过扫描电镜 (SEM)、力学测试系统、体外降解等手段对支架材料的特征和性能进行检测。结果显示这两种支架的力学性能、纤维特性等均与基膜相仿;而细胞培养实验与CK14抗体进行的免疫组化分析表明,PLA/SF相对于PLA支架更能促进上皮细胞的增殖和粘附,基膜蛋白提取液的包被是有利于上皮细胞的生长和功能表达,研究结果将为工程化食道的构建提供重要的实验依据。     

一株高产苯乳酸的古墓土壤葡糖醋杆菌FBFS97的全基因组测序与分析

【背景】苯乳酸(phenyllactic acid,PLA)是一种应用潜力巨大的天然广谱抑菌物质。本课题组前期分离得到一株高产PLA的醋酸菌(acetic acid bacteria,AAB)——葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter sp.)FBFS97,但尚未鉴定到种,而且其产PLA的分子机理尚不清楚。【目的】确定FBFS97的种属关系,解析FBFS97的遗传信息,特别是与PLA产生相关的基因。【方法】采用光学显微镜和扫描电镜对FBFS97的菌体形态进行表征,通过16S rRNA基因序列分析对FBFS97进行分类鉴定,并以高效液相色谱分析苯丙氨酸对其产PLA的影响。在此基础上,对FBFS97进行全基因组测序、拼接和基因预测,并进行GO/COG聚类、KEGG代谢通路和VFDB毒力等分析,以及PLA生物合成途径的预测。【结果】根据16S rRNA基因序列的比对结果,结合形态学分析,该菌被鉴定为古墓土壤葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter tumulisoli)。将1 000 mg/L苯丙氨酸添加到FBFS97液体培养基中,发酵液中PLA最高浓度可达400 mg/L,为对照组的8倍。该菌的基因组大小为3 988 308 bp,(G+C)mol%含量为66.62%,编码基因3 500个;KEGG代谢通路分析表明,该菌基因组中存在经莽草酸途径合成PLA的所有基因;VFDB毒力预测结果显示,该菌基因组中不存在产生毒素的相关基因。【结论】首次报道了一株高产PLA的AAB——古墓土壤葡糖醋杆菌FBFS97的全基因组序列信息,并发现该菌株的基因组中含有合成PLA的所有相关基因,为后续进一步研究FBFS97产生PLA的生物合成途径提供了理论依据。     

Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅹ型磷脂酶A2 mRNA在大鼠循环系统中的分布

目的：探讨Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅹ型磷脂酶A2（PLA2）mRNA在正常大鼠循环系统中的分布情况。方法：利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增大鼠各型PLA2DNA。结果：在所检测循环系统的几个组织中均能测到Ⅱ、Ⅳ型PLA2mRNA;Ⅴ型PLA2mRNA在大鼠心肌、主动脉弓、下腔静脉近心段中可测到;Ⅹ型PLA2mRNA只在心肌中检测到。结论：Ⅱ、Ⅳ型PLA2广泛存在于循环系统中,在宿主防御细菌感染及炎症中发挥作用。Ⅴ型PLA2分布在心脏及近心脏的血管中,可能与心血管内皮细胞的病变有关。     

聚乳酸纳米粒穿透血脑屏障的分析电镜研究

观察以聚乳酸 (D ,L-polylacticacid,PLA)为材料制备、经吐温-80(T-80)表面改性的纳米粒对血脑屏障的穿透效果并探讨其机制 ,分别将FITC-Dextran、叶绿素铜作为PLA纳米粒的示踪标记 ,应用荧光显微镜、透射电镜及分析电镜观察经静脉注射入小鼠体内的PLA纳米粒在脑组织中的分布、穿透血脑屏障的特性。荧光显微镜观察到小鼠脑组织中散在及沿毛细血管壁分布的荧光颗粒 ,透射电镜可观察到小鼠脑毛细血管内皮细胞及周围脑组织中圆形或类圆形的外源性纳米粒 ;进一步采用分析电镜对颗粒处组织进行能谱分析证实其为叶绿素铜标记的PLA纳米粒。证实了T-80修饰的PLA纳米粒具有穿透血脑屏障的特性 ,机制可能是毛细血管内皮细胞的胞吞转运作用 ,同时 ,为研究纳米粒在组织内的定位提供了新的标记方法.     

棉酚抗生育新机制——对磷脂酶A_2活力的抑制作用(英文)

 采用微孔比色法及荧光分析法 ,研究抗男性生育化合物棉酚与猪胰腺磷脂酶A2 (phospho lipaseA2 ,PLA2 ,EC3 1 1 4 )温育并透析前后对酶活力及荧光的影响 .结果表明 ,棉酚与PLA2 不可逆地结合明显地降低了PLA2 活力及荧光强度 .棉酚对酶活力抑制作用的IC50 为 35μmol L ;当其浓度达到 80 μmol L时 ,能够完全抑制PLA2 ( 4 11μmol L)对合成底物 2 硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC ,0 .2 5mmol L)的水解作用 .PLA2 的最大激发波长与发射波长分别为 2 75nm ,34 3nm ,荧光强度与酶浓度呈良好的线性关系 .棉酚对PLA2 的荧光具有较强的淬灭作用 .由于PLA2 与男性生育密切相关 ,棉酚对PLA2 活力的影响可能是其避孕作用及伴随的副作用的一种新的重要机制     

美国乙醇生产进展

美国对可再生燃料不断增长的兴趣正在促使或继续改变目前美国联邦政府的乙醇政策，尤其是：①指令将使可再生燃料使用量从现在的130亿加仑（1加仑=3．78541升，下同）增加到2022年的360亿加仑；②对乙醇汽油调合物给予45美分／）OH仑的税收优惠减免；     

全髋关节置换术中直接前入路与后外侧入路的疗效比较及对假体位置和血清疼痛介质的影响

摘要 目的：对比全髋关节置换术（THA）中直接前入路（DAA）与后外侧入路（PLA）的疗效,并分析两种入路方式对假体位置和血清疼痛介质的影响。方法：选取2019年3月-2021年7月我院收治的80例THA患者,据入路方式的不同将患者分为PLA组37例和DAA组43例,对比两组手术相关指标、髋关节功能评分、疼痛评分、影像学指标、步态参数、血清疼痛介质水平、并发症发生率。结果：DAA组的切口长度、术后下地时间短于PLA组,手术时间长于PLA组,术后引流量、术中出血量少于PLA组（P<0.05）。两组术后3个月、术后6个月Harris髋关节功能评分均升高,视觉疼痛模拟评分法（VAS）评分均下降（P<0.05）;DAA组术后3个月、术后6个月Harris 髋关节功能评分高于PLA组,VAS评分低于PLA组（P<0.05）。DAA组臼杯位于安全区的比例高于PLA组（P<0.05）;两组髋臼外展角、髋臼前倾角、股骨假体居中率组间对比无差异（P>0.05）。DAA组的单腿支撑时间长于PLA组,步频大于PLA组,Foot off高于PLA组（P<0.05）。两组术后7 d 5-羟色胺（5-HT）、一氧化氮（NO）、前列腺素E₂（PGE₂）水平均较术前升高（P<0.05）;DAA组术后7 d的5-HT、PGE₂、NO水平低于PLA组（P<0.05）。两组术后并发症发生率对比无差异（P>0.05）。结论：THA患者采用DAA的入路方式,除手术时间较长外,其在手术切口、术中损伤、髋关节功能恢复、步态参数、减轻术后疼痛、臼杯位于安全区的比例等方面均优于PLA,且不会增加并发症发生率。     

中华蜜蜂PLA2基因的生物信息学分析及响应高温胁迫的表达模式

磷脂酶A2 (PLA2)对细胞膜流动性、膜蛋白活性等细胞生理功能有重要调节作用。高温等环境压力对细胞的生理代谢有较大的影响,其在生物体抗逆过程中的调控作用一直备受关注。本研究以中华蜜蜂Hymenoptera: Apidae: Apis cerana cerana PLA2基因序列为基础,对其蛋白结构进行预测,分析该基因在不同温度和高温不同胁迫时间下的表达差异,以揭示该基因在中华蜜蜂抗高温过程中的生理功能。结果显示,中华蜜蜂PLA2基因包含745 bp的开放阅读框,编码169个氨基酸,蛋白分子量为19.3 kDa,无跨膜结构,不属于膜蛋白。氨基酸同源序列比对结果显示,中华蜜蜂PLA2序列与蜜蜂科昆虫的相似性最高,与其他膜翅目昆虫的相似性存在差异。qRT-PCR结果显示,PLA2在35℃、40℃和45℃处理下的表达量较高,较高的温度能诱导该基因表达的增加。同时,PLA2的表达受高温胁迫时间的影响,较长时间的高温胁迫导致PLA2基因的表达增加。本研究结果表明PLA2在中华蜜蜂应对高温胁迫时发挥重要生理功能。     

长白山白眉蝮蛇蛇毒PLA2分离纯化及性质鉴定

目的 从长白山自眉蝮蛇粗毒中分离提取了一种新的PLA2,并对其进行了性质鉴定.方法 采用DEAE Sephadex A-25、Sephadex G-75、HPLC等层析方法 ;聚丙烯酰胺凝胶电泳;磷脂酶A2活性测定.结果 得到了一种新的PLA2,分子量在14 kD左右,PLA2比活力为41μmol·mg-1·min-1,最适温度50℃,最适pH8.5左右.结论 长白山白眉蝮蛇毒存在一种新的PLA2同源物,具有PLA2活性,有较好的耐热、耐酸性.