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本文研究了辣根过氧化物酶[EC1.11.1.7]同工酶的联苯胺动力学。结果表明:其酸性酶和碱性酶的最适pH均为5.8左右。二者最适有机溶剂浓度略有差异:酸性酶最适乙醇浓度为50%,最适二氧六环浓度为40%;而碱性酶则分别为60%和50%。在水溶剂中,酸性酶为米氏酶,碱性酶为正协同的别构酶;在有机溶剂(如:乙醇、二氧六环)中,酸性酶为正协同的别构酶,碱性酶则仍为正协同的别构酶。即有机溶剂可能使酶构象发生变化。 相似文献
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辣根过氧化物酶同工酶在不同介质中的动力学 总被引:1,自引:0,他引:1
本文研究了辣根过氧化物酶[EC1.11.1.7]同工酶的联苯胺动力学。结果表明:其酸性酶和碱性酶的最适pH均为5.8左右。二者最适有机溶剂浓度略有差异:酸性酶最适乙醇浓度为50%,最适二氧六环浓度为40%;而碱性酶则分别为60%和50%。在水溶剂中,酸性酶为米氏酶,碱性酶为正协同的别构酶;在有机溶剂(如:乙醇、二氧六环)中,酸性酶为正协同的别构酶,碱性酶则仍为正协同的别构酶。即有机溶剂可能使酶构象 相似文献
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酸性和碱性酶稳定性机制及其识别 总被引:1,自引:0,他引:1
了解酸性和碱性酶稳定性机制并对其进行识别具有重要理论和实践意义。通过分析105条酸性酶和111条碱性酶序列的氨基酸组成, 结果表明: 酸性酶中Trp、Tyr、Thr和Ser的含量明显高于平均值, 而Glu、Lys、Met和Arg的含量则明显低于平均值; 碱性酶中Trp、Ala和Cys的含量略高于平均值, 而Lys、Arg和Glu的含量则略低于平均值; 酸性和碱性酶中Ala、Glu、Leu、Asn、Arg、Ser和Thr的含量存在较大差异。在此基础上, 发展了一种加权氨基酸组成的方法对两种酶进行识别, 其自一致性检验的识别精度可达86.1%, 5倍交叉验证的精度为83.3%。建立了一种基于序列识别酸性和碱性酶的新方法。 相似文献
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碱性脂肪酶的研究——Ⅰ.菌株的分离和筛选 总被引:7,自引:0,他引:7
碱性脂肪酶是在碱性条件下水解脂肪分子中甘油脂键的一种分解代谢酶。国外从60年代后期陆续有关于碱性脂肪酶研究的报道。国内至目前尚未见到由微生物中筛选到这类酶的报道,本文主要介绍从霉菌和细菌中,筛选产碱性脂肪酶菌株的研究结果。 相似文献
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碱性纤维素酶革兰氏阴性菌株筛选及酶学性质研究 总被引:14,自引:0,他引:14
用CMC平板筛选方法,从造纸厂碱性淤泥中获得透明圈直径大于30mm的产碱性纤维素酶革兰氏阴性菌H8005。液体摇瓶培养产生碱性CMC酶活力高达4.2IU/mL。酶学性质初步研究显示,H8005产生的CMC酶反应的pH值以8.0左右为适;在碱性条件下具有较高的酶活和一定的稳定性;反应温度以55℃左右为宜;且具有较好的温度稳定性。Mn^2+与Fe^3+对酶反应有促进作用,Cu^2+和Pb^2+对酶反应有抑制作用。该菌产生的纤维素酶在棉织品的水洗整理及洗涤剂工业中具有非常良好的应用前景。 相似文献
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选用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法对螺旋藻蛋白进行水解。其中,对木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的工艺进行优化。以水解度为指标,研究了酶解时间、酶与底物比、pH和酶解温度4种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、酶解温度和pH)3水平的响应面试验。结果表明碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最佳酶解条件为:加酶量4300 U/g,pH 7.0,酶解温度55℃,酶解时间160 min;木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为:酶底比为4.5%,酶解温度60℃,pH 6.5,酶解时间210 min。利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法制得的多肽水解度可达32.90%,与单酶法相比,水解度明显提高。 相似文献
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碱性蛋白酶工程菌发酵条件及重组酶的纯化和性质的研究 总被引:16,自引:0,他引:16
在5L发酵罐中对重组碱性蛋白酶工程菌株BP071高产碱性蛋白酶的条件进行了研究,通过提高通气量和改变搅拌转速,BP071可在发酵40 h内达到产酶高峰,酶活力最高可达24480 u/mL。利用快速蛋白液相层析(FPLC)技术,建立了快速高效纯化碱性蛋白酶的方案。发酵液通过硫酸铵沉淀、DEAE-A-50脱色及聚乙二醇浓缩得粗酶,再经过CM-Sephadex-C-50、Sephadex-G-75柱层析后得到了单一组份的重组碱性蛋白酶,酶纯度提高了76.2倍。SDS-PAGE显示重组碱性蛋白酶分子量为28 kD。酶学性质研究表明,酶的最适作用pH为11,最适作用温度为60℃,具有良好的pH稳定性和热稳定性。Ca2+、Mg2+对酶的稳定性有促进作用,Hg2+、Ag+、PMFS和DFP能强烈抑制酶的活力。SDS和Urea对酶的活力无影响。 相似文献
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从Bacillus pumilus M-26发酵液中分离纯化碱性木聚糖酶,进行酶学性质研究,同时制备工业用碱性木聚糖酶制剂。首先将M-26发酵液进行硫酸铵盐析,制备工业用碱性木聚糖酶干品;然后进行sephadexG-25层析脱盐和cellulose DE-52层析得以纯化。硫酸铵的饱和度50%,酶制剂的酶活可达9 000 IU/g,收率为85%;分离纯化使酶的比活为126.32 IU/mg蛋白,纯化倍数为19.89,酶的回收率12.83%;分子量约为20 ku;M-26碱性木聚糖酶的最适温度和pH分别是55℃和pH 8.0,具有一定的耐碱性;该酶无纤维素酶活性,Fe2+对其有激活作用;Mn2+、Zn2+、Fe3+、Cu2+对其具有抑制作用。短小芽胞杆菌M-26碱性木聚糖酶具有纸浆生物漂白应用前景。 相似文献
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耐碱芽胞杆菌木聚糖酶的形成条件及特性 总被引:7,自引:0,他引:7
通过碱性选择平板分离到耐碱的芽胞杆菌B-141菌株。该菌在碱性(pH10)条件及木聚糖存在下能产生胞外木聚精酶。该酶最适反应温度为60℃,在60℃以下基本稳定;酶反应的最适pH为3~7,但在碱性条件下稳定,在pH10环境处理60min,仍保持约70%的活性。从TLC分析可知,该酶作用于燕麦木聚糖时,主要产物为大于三体的寡糖。 相似文献
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低纯度的NADP+ 中含有一种在pH 9.2能够激活蛇肌果糖- 1 ,6 -二磷酸酯酶活力的物质 .经过分离鉴定 ,证明它就是 5′- AMP .该激活作用只有当较高浓度的Mg 2+ 存在时才表现出来 .在AMP的存在下 ,果糖 -1 ,6 -二磷酸酯酶的行为很像碱性酶 .Mg 2+ 激活动力学表明 ,AMP和Mg 2+ 在对蛇肌酶活力调节上存在着竞争关系 .AMP能解除高浓度Mg 2+对酶在碱性pH活力的抑制作用 .以往认为果糖- 1 ,6 -二磷酸酯酶由中性酶变成碱性酶均是由蛋白水解酶限制性酶解引起的 ;现报道 5′- AMP也能将蛇肌酶变成碱性酶 ,指出蛋白水解酶限制性酶解作用不是造成该酶由中性酶变为碱性酶的唯一原因 ,并且也可能有生理调节作用 . 相似文献
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采用CMC碱性平板筛选方法,从造纸厂碱性淤泥中获得产中性纤维素酶的耐碱枯草芽孢杆菌C3004。根据其形态特征、生理生化特性和16S rRNA序列分析鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌,并命名为Bacillus subtilis C3004。液体摇瓶培养24 h产生CMC酶活力达46.6 U/mL。酶学性质初步研究显示,CMC酶反应的pH值以7.0左右为适;在弱酸和碱性条件下也具有较高的酶活和一定的稳定性;反应温度以50℃左右为宜;且具有较好的热稳定性。Mn~(2+)与Fe~(3+)对酶反应有促进作用,Cu~(2+)、Mg~(2+)和Zn~(2+)对酶反应有抑制作用。该菌可在碱性(pH 8.5~10)条件下培养,具有不易被杂菌污染的特点。 相似文献
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【背景】微生物蛋白酶在工业生物技术上具有广阔的应用前景。在微生物蛋白酶中,碱性蛋白酶占全球酶总产量的50%以上,获取产碱性蛋白酶的新微生物资源意义重要。【目的】在海南近海贝类养殖基地海泥中筛选获得高产碱性蛋白酶的菌株,对其生长特性进行探究并优化菌株产酶条件,获得新的蛋白酶生产资源。【方法】以酪素培养基为筛选培养基,采用形态学结合系统发育分析鉴定菌株,通过响应面实验优化菌株的产酶条件。【结果】筛选获得一株高产碱性蛋白酶的菌株F3,鉴定为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)。菌株在最优产酶条件下发酵酶活达到(339.36±4.30) U/mL。【结论】筛选获得的菌株粘质沙雷氏菌F3有较好的产碱性蛋白酶的能力。 相似文献
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酶法提取金乌贼墨汁中黑色素的工艺条件研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以金乌贼墨汁为原料,采用单因素试验,对胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,胃蛋白酶,中性蛋白酶和碱性蛋白酶等五种酶提取黑色素的效果进行比较分析,筛选出水解效果较好的碱性蛋白酶。并通过正交试验,优化了碱性蛋白酶酶解金乌贼墨汁的最佳工艺,实验结果表明,在底物浓度2%、水解温度50℃、pH值为7.4,加酶量4200U/g和水解8h的条件下进行水解的效果较好。 相似文献
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考察了碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解效果,探讨了水解度(DH)与酶解产物抗氧化活性间的关系。通过单因素试验和响应面分析法,得到碱性蛋白酶酶解工艺的最佳条件。结果表明,温度50℃、pH8.0、酶底比8%、底物浓度3%条件下酶解3h,水解度0~22%内,碱性蛋白酶较胰蛋白酶和中性蛋白酶水解蚕豆蛋白效果好;DH与还原能力(R2=0.68~0.81)及ABTS清除能力(R2=0.98~0.99)具有较好的相关性,碱性蛋白酶酶解液较其他2个酶解液有较好的还原能力和ABTS清除能力;优化后的最佳酶解工艺参数为:酶底比8%,温度50℃、pH 7.6,对蚕豆蛋白还原能力的影响顺序为酶底比>pH>温度;在此条件下,蚕豆蛋白酶解液的还原能力理论值为0.174,验证试验测得还原能力为0.173,与理论值接近。 相似文献
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目的:探讨碱性含酶清洗剂与中性含酶清洗剂清洗医疗器械的效果。方法:随机抽取污染医疗器械420件,分成观察组与对照组,每组210件,观察组器械浸泡于1:200的碱性含酶清洗剂中,对照组器械浸泡于1:200的中性含酶清洗剂中,5min后分别取出在流动水下彻底冲洗,观察并比较两组器械洁净度以及潜血阳性率。结果:观察组洁净度明显优于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);潜血阳性率显著低于对照组,差异有显著统计学意义(P〈0.01)。结论:碱性含酶清洗剂清洗医疗器械的效果明显优于中性含酶清洗剂,适合推广应用。 相似文献