乳汁中表达单抗的转基因山羊

Genzyme Transgenics Corp.(Framinghams,MA)证实可以在转基因山羊乳汁中产生复合单克隆抗体,该公司已与Bristol-Myers Squibb Co.(BMS)(Princeton.NJ)签约在其位于Massachusetts州的转基因山羊农场生产抗癌单抗BR96。 Genzyme Transgenics已证实可以在转基因山单乳汁中大量表达人抗凝血蛋白抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。还证明了转基因小鼠可在其乳汁中产生单抗。但是在山羊乳汁中产生单抗则是此公司技术发展的一个里程碑。     

转基因山羊在其乳汁中表达单克隆抗体

Genzyme Transgenics Corp(Framingham,MA)已证实,转基因山羊可在乳汁中产生复合单克隆抗体(MAb);该公司与Bristol-Myers Squibb Co.(BMS) (Princeton,NJ)签定一项协议,使养育在马萨诸塞州农场的这些转基因山羊表达BMS的抗癌BR96 Mab。 Genzyme Transgenic公司已经证实,可以在山羊乳汁中高水平表达人抗-凝集蛋白抗-凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。它还证明,如果按相同的遗传工程方法处理小鼠胚胎,转基因小鼠也可在其乳汁中产生     

转基因山羊

经过大约３年的时间,体细胞核移植技术从科学创新转入了扩繁生产医药的转基因动物的重要商品化阶段。Ｅｃｈｅｌａｒｄ及其同事描述了这一技术在山羊上的应用。利用转基因供体的胚胎细胞核成功地培育出了乳汁中分泌人抗凝血酶Ⅲ（ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎⅢ）的无性系山羊。转基因山羊@孙雷心     

美培育出制药转基因鸡

英国《自然生物技术》杂志 4月号报道 :美国乔治亚大学和ＡｖｉＧｅｎｉｃｓ公司宣布 ,他们在家禽转基因研究领域获得突破性进展 ,已培育出能产下含人体所需蛋白质的转基因鸡蛋的克隆鸡。它将加盟能生产药用蛋白质转基因动物如绵羊、山羊和兔子等行列 ,有望成为一种新型活体生物反应合成器和动物制药工厂。由公司科学家亚历克斯·哈维领导的研究小组将一种细菌的基因片段改造后导入鸡胚胎 ,培育出了可充当 β内酰胺酶制造器的转基因鸡。他们先用这种技术对 5 4 6个孵卵鸡蛋进行处理 ,孵化出了 12 6只小鸡 ,其中 10 %携带新基因 ;然后将携带…     

Genzyme Transgenics公司用山羊奶生产药物

美国Genzyme Transgenics公司的研究人员在麻省乡村地区开发了168英亩土地及成群的健壮山羊,以此进行药物生产。据其所述,他们正在位于Charlton的农场中用转基因山羊生产至少2种治疗用蛋白及抗体。 该公司成功地繁殖出称为Grace的母山羊,并于近期为其庆贺生日。Grace是首次在实验室以外被繁殖出并发生遗传改变的动物。Genzyme公司寄希望于用Grace繁殖出在其乳汁中分泌单抗(Mab)BR96的山羊群。这种Mab是由Bristol-Moyers Squibb Co·开发,作用是将肿瘤治疗药物doxorubicin直接送至肿瘤部位。     

精子因素对精子载体法制备转基因山羊的影响

精子具有主动结合、转运、整合外源DNA的能力,并在受精时导入卵母细胞,获得转基因动物.精子介导基因转移(sperm-mediated gene transfer,SMGT)是目前获得转基因动物简单而高效的方法之一.精子因素是影响SMGT方法生产转基因动物的重要方面.本论文结合我们的研究针对转染用山羊(Capra hircus)精液的来源、精子质膜完整性、精液品质及发育阶段等精子因素影响精子结合外源DNA和SMGT方法生产转基因山羊的效率进行了论述,并从这些影响因素入手,提出了筛选精子供体、保持精液品质、调控质膜等措施,提高精子转染外源DNA能力和生产转基因动物的效率.     

用山羊生产tPA

美国Tufts大学和Geozyme Transgenics Corporation的研究人员成功地诱导人组织血纤维蛋白溶酶原激活因子(tPA)在3只转基因山羊乳腺中发生早期表达。这是首次在家畜乳汁中产生tPA,并提供适宜今后成功地生产转基因药物的动物体。 在试验中,诱导8只转基因雌山羊(第一代转基因雄山羊交配产生的后代)在出生后第11～12个月时泌乳(比正常状态早1～7个月)。通过注射一系列雌激素和黄体酮完成上述过程。产生的乳汁含有浓度与初始转基因雌性动物相似(1～3mg/ml)的人长效组织血纤维蛋白溶酶原激活因子(LAtPA)。对第一     

转基因棉花的专利及可能带来的不良影响

本文概述了美国Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司转基因棉花专利的内容,提出了这一专利对发达国家,尤其是发展中国的棉花遗传工程研究、棉花生产的影响及贸易冲击。     

Genzyme创立美国首家转基因农场

Cenzyme Corp.的子公司Genzyme Transgenies.Crop.在伍斯特以外购买了166英亩农场,计划培育在其乳汁中表达人抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)及其它人蛋白的rDNA山羊。据该公司介绍,这是美国首家商品化转基因动物农场。 这家农场正在为来此的第一批山羊做准备,这批山羊将于今年夏天运达。此处可容纳1000只山羊,     

我国转人基因山羊通过鉴定

2000年12月，我国转基因山羊首次通过专家鉴定。在北京市科委、国家生物工程开发中心、顺义区政府的支持下，北京兴绿原生物科技中心与中国农大共同努力，采取显微注射法将外源人mAAT基因导入山羊原核期胚胎内，经过精心培育，终于在2000年6月获得了三只转基因山羊。这三只转基因山羊带有人抗胰蛋白酶（mAAT）基因。我国转人基因山羊通过鉴定     

用重组植物生产治疗用抗体

美国W.R.Grace公司(佛罗里达州Boca Raton)的子公司美国Agracetus公司(维斯康星州Middleton)受美国Bristol-Myers Squibb公司(纽约州New York)的委托,并与之签订了开发生产单克隆抗体的转基因植物的合同。生产Bristol Myers Squibb公司作为治疗用抗体正在开发BR96。目前使BR96与抗癌剂的一种——阿霉素结合的产品正在进行Ⅰ期临床试验,是为了调查用于固形癌治疗时的安全性。Agracetus公司为了方便回收产生的抗体,打算培育在种子内生产抗体的重组玉米和重组大     

Genex生产重组单链抗体结合蛋白

Genex公司利用它专有的计算机辅助方法来设计出有单克隆抗体结合特性但能在大肠杆菌中生产的蛋白。公司把一单克隆抗体的可变轻链和重链的基因结合起来,以生产出单个多肽链。该多肽含有一短肽衔接物。公司的Robert Bird及其同事已生产了一种专门与牛生长激素结合。或与荧光素结合的肽。该单链结合蛋白仅是单克隆抗体大小的六分之一。它们在许多应用方面——如在肿瘤反     

整合人lactoferrin基因的山羊体细胞支持核移植克隆胚的体外发育

克隆了人lactoferrin基因和山羊[[beta]]-casein基因5′端调控区, 构建了人lactoferrin的乳腺表达载体, 并将该载体利用脂质体介导转染了奶山羊胎儿成纤维细胞, 获得了稳定整合人lactoferrin基因的转基因体细胞克隆17个, 其中PCR和Southern Blot检测阳性的细胞克隆14个, 阳性率82.4%。以转基因体细胞为供体细胞进行了核移植, 获得了能够体外发育的山羊转基因克隆胚胎, 体内成熟卵母细胞来源的核移植囊胚率为64.8%, 体外成熟卵母细胞来源的核移植囊胚率为51.7%, 证明了山羊转基因体细胞能够支持克隆胚的进一步发育。     

重组人SOD1/3转基因山羊的制备及表达产物的检测

设计了以hSOD1、hSOD3为编码序列,以山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动增强子构建乳腺特异性表达载体rhSOD1、rhSOD3,共转染母山羊胎儿成纤维细胞,采用PCR和扩增产物序列分析筛选获得SOD1/3克隆细胞株,应用体细胞核移植(SCNT)制备双转基因山羊。出生小羊经PCR和扩增产物序列分析验证是否成功整合外源基因,经Western blotting、ELISA及体外活性检来验证分析表达产物。结果表明:获得SOD1/3转基因山羊胎儿成纤维细胞系6株;原代双转基因体克隆山羊1只(♀);从该转基因羊乳汁中检测到rhSOD1、rhSOD3,浓度分别为:88.81±8.36 mg/L和267.82±12.67 mg/L;转基因羊乳汁中重组人SOD酶活性为1 432±157 U/mL。研究表明,以双载体和单标记基因转染山羊胎儿成纤维细胞可获得双基因整合转基因细胞系,并且以SOD1与SOD3功能基因均可在山羊乳腺中共同表达,表达产物具有较好的生物学活性。     

转基因小鼠产生全人抗体

GenPharm International Inc.和Cell Genesys Inc.分别研究、但几乎同时报道它们在转基因小鼠中生产了全人抗体。这一成果为利用单克隆抗体(Mab)治疗慢性病开辟了途径,而过去因小鼠的致免疫性、嵌合和“人化”Mab很难考虑这一疗法。     

转基因棉花的专利及可能带来的不良影响

本文概述了美国Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司转基因棉花专利的内容,提出了这一专利对发达国家,尤其是发展中国家的棉花遗传工程研究、棉花生产的影响及贸易冲击。并就这一专利针对我国国情提出了相应的对策。     

人类蛋白:从奶牛、山羊和绵羊上的新收获

几百年来,学龄儿童均被告知,奶牛、山羊和绵羊这些动物能提供给我们奶、奶酪和皮毛。而现在则不同了,最近有人提出了通过育种培育能大规模生产复杂的人类蛋白的转基因动物这一新概念。事实上,许多公司从本世纪八十年代后期已开始了这方面的尝试。用猪当生物反应器制造全人血红素、和用小     

牛乳铁蛋白肽转基因小鼠的构建

目的:探讨牛乳铁蛋白肽在转基因鼠乳汁中的表达及其抑菌活性。方法:将实验室构建并保存的包含山羊β-酪蛋白基因启动子和牛乳铁蛋白肽基因的乳腺特异表达载体PI-bcp-LfcinB,用Xho I和Nru I双酶切,得到含有全部表达盒的显微注射DNA片段,采用常规显微注射技术获得转基因小鼠。并通过对泌乳期转基因雌鼠乳腺组织的RT-PCR检测,确定了牛乳铁蛋白肽在mRNA水平的表达,同时利用琼脂板扩散法检测了转基因鼠乳汁中表达产物的抑菌活性。结果:获得了牛乳铁蛋白肽转基因小鼠,且转基因小鼠乳汁中能够表达具有抑菌活性的牛乳铁蛋白肽。结论:通过转基因动物乳腺可以获得具有生物活性的牛乳铁蛋白肽,为进一步研究抗菌肽转基因牛、培育抗乳房炎奶牛新品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

牛α—S1—酪蛋白—乙肝病毒表面抗原融合基因在转基因羊中的表达

利用ＤＮＡ重组技术,将牛α－Ｓ１酪蛋白调控区基因（１６ｋｂ的片段）与乙肝表面抗原基因拼接,构建了融合基因表达构件：λ１０６。构件经转基因技术转入山羊受精卵。待受精卵发育至成熟个体并分娩、泌乳,ＥＬＩＳＡ检测其乳汁中的ＨＢｓＡｇ,证明所构建的牛α－Ｓ１酪蛋白基因表达构件是可以在羊乳腺中表达乙肝表面抗原基因,并将其表达产物分泌到乳汁中。     

人抗凝血酶Ⅲ转基因羊的外源基因漂移风险分析

目的:研究转基因羊发生基因漂移的可能性.方法:利用实时荧光定量PCR技术检测人抗凝血酶Ⅲ转基因羊及与其密切接触的野生型山羊、转乙肝表面抗原基因羊、转β-干扰素转基因羊、狗、鸡和鹅的血样中人抗凝血酶Ⅲ基因的含量.结果:人抗凝血酶Ⅲ转基因只在人抗凝血酶Ⅲ转基因羊血液中检测呈阳性.结论:人抗凝血酶Ⅲ基因没有在转基因羊和非转基因羊及其它动物间发生漂移,提示转基因羊对于环境是安全的.