东方蝾螈早期原肠胚外胚层细胞的细胞周期与反应能力——Ⅱ.阻断细胞周期后的反应能力

两栖类早期原肠胚外胚层细胞具有广泛的潜能,经不同的诱导刺激能向不同的方向分化,例如经缺钙处理可分化成神经组织,而豚鼠骨髓抽提液则可诱导出中胚层组织。但是,不论是哪种情况,诱导作用的强弱程度,都取决于外胚层细胞在接受诱导时的反应能力。Holtfreter首先发现,外胚层对诱导作用的反应能力随年龄不同而有改变。用轻度细胞解体的方法,庄孝僡证明,     

东方蝾螈早期原肠胚外胚层细胞的细胞周期与反应能力——Ⅰ.外胚层细胞的细胞周期和细胞同步化

在胚胎诱导的研究中,不少工作证明,外胚层细胞经同一种诱导物质处理,细胞能否接受诱导刺激,反应的强度如何,以及分化出哪些组织,是取决于外胚层细胞的年龄。受到中胚层诱导物质的刺激,早期原肠胚外胚层反应较强,分化出脊索、肌肉等构造,晚期原肠胚外胚层反应变弱,只能分化出血球、间质细胞等。其所以有这种差别,一般地都笼统地归之     

外胚层细胞诱导后的间隙连接

用电镜观察了经受诱导作用之后胚胎细胞的冷冻蚀刻复型膜。和未经诱导作用的对照组比较,早期和中期神经胚的神经上皮细胞以及经过豚鼠骨髓粗提液(BME)——一种有效的异源中胚层诱导物——处理过的早期原肠胚外胚层,它们的间隙连接都处于活跃的动态状态。用图像分析仪测得的间隙连接连接子的排列密度,指出经受过诱导作用的三组分别和未经受诱导作用的对照组比较,计算求出P值,神经上皮两组和对照组的差别为非常显著,BME处理过的细胞和对照组的差别为显著。结合对照组与诱导后胚胎细胞间隙连接连接子的变化讨论了它们在信息传递上可能起的作用。     

东方蝾螈早期原肠胚外胚层细胞的细胞周期与反应能力——Ⅲ.在不同时相中的反应能力

我们在以前的报道中指出东方蝾螈原肠胚外胚层细胞的细胞周期是17.6小时,从原肠早期到末期,外胚层是由同一代细胞组成的。Suzuki等在赤腹蝾螈,用计算细胞增殖数量的方法也达到相同的结论。这就是说,外胚层细胞在一个细胞周期的过程中逐渐失去对诱导刺激的反应能力。我们也报道了嘲虽然外胚层随着发育的进展失去对诱导刺激的反应,但是如果用胸腺嘧啶核苷处理离体的早期原肠胚     

蛋白质双向电泳图谱的计算机处理和数量化分析

本文叙述了通过计算机硬件和软件的方法,对蛋白质的二维电泳图谱进行图像处理和数量化分析的工作.采用计算机图像处理的方法从电泳图谱的斑点图中抽取有用的信息,采用图像分析技术确定电泳图谱蛋白斑点的强度,比较几个凝胶的斑点图案.图谱的计算机处理和数量化分析技术,在许多生物物理和生物化学的研究中都可以应用,以给研究工作带来帮助.     

蛋白质双向电泳图谱的计算机处理和数量化分析

本文叙述了通过计算机硬件和软件的方法,对蛋白质的二维电泳图谱进行图像处理和数量化分析的工作.采用计算机图像处理的方法从电泳图谱的斑点图中抽取有用的信息,采用图像分析技术确定电泳图谱蛋白斑点的强度,比较几个凝胶的斑点图案.图谱的计算机处理和数量化分析技术,在许多生物物理和生物化学的研究中都可以应用,以给研究工作带来帮助.     

蛋白质双向电泳图像分析

随着人类基因组计划的接近完成,蛋白质组（proteome）研究成为新的热点.其中高分辨率的双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）技术使对组织或细胞的整个蛋白质组的综合分析成为可能.近年来这一技术有了很大的改进和提高,特别是图像分析系统,算法更为先进,功能日益强大,操作也更简便,为大规模研究提供了良好的工具.使用新一代的2D图像分析系统,对离体培养的雪旺氏细胞的蛋白质样品双向电泳结果进行了初步分析,探讨了在图像扫描、点检测、背景消除、匹配、结果报告和数据分析各步中的技术问题,并报告了进行2D图像分析的体会.     

蛋白质双向电泳图像分析

随着人类基因组计划的接近完成,蛋白质组（proteome）研究成为新的热点.其中高分辨率的双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）技术使对组织或细胞的整个蛋白质组的综合分析成为可能.近年来这一技术有了很大的改进和提高,特别是图像分析系统,算法更为先进,功能日益强大,操作也更简便,为大规模研究提供了良好的工具.使用新一代的2D图像分析系统,对离体培养的雪旺氏细胞的蛋白质样品双向电泳结果进行了初步分析,探讨了在图像扫描、点检测、背景消除、匹配、结果报告和数据分析各步中的技术问题,并报告了进行2D图像分析的体会.     

~(125)Ⅰ-中胚层诱导蛋白在东方蝾螈外胚层细胞内的定位

用放射自显影方法观察了外胚层细胞经~(125)Ⅰ-中胚层诱导蛋白处理不同时间的参入部位。随处理时间的不同~(125)Ⅰ-中胚层诱导蛋白的参入量和参入部位有所变化。处理1小时,约51%的外胚层细胞内出现标记蛋白,银颗粒多在细胞质内。处理3小时,标记细胞总数增至74%,而其中45%在核内观察到标记蛋白,每个核内平均为10个银颗粒。处理12小时,90%的反应细胞核内参入了标记蛋白,参入量增加为每个核内平均为21个银颗粒。实验结果表明,~(125)Ⅰ-中胚层诱导蛋白先是进入细胞质,然后转入细胞核。这似乎提示,中胚层诱导蛋白是在细胞核内行使其生理功能。     

用实验方法反转原肠胚外胚层细胞的极性(英文)

过去的工作指出,在紧密连接形成的时候,紧密连接本身也经历了极性化的过程,而且这一过程在时间上和囊胚腔的出现和扩张是相互关连的。为了进一步探讨紧密连接的极性化和外胚层细胞极性之间的关系,进行了原肠胚外胚层细胞内外反转的实验,结合扫描和透射电镜的观察,指出反转后的外胚层细胞表面发生了明显的变化,在原来没有紧密连接的内层细胞的外缘形成了发育完善的紧密连接。内外反转的这一实验操作,使外胚层细胞和内外环境的关系发生了变化。很可能外胚层细胞的极性先发生了反转,然后影响紧密连接在新的向外的一极形成。     

结肠癌蛋白质双向电泳技术的建立

目的:建立结肠癌13cm和24cm非线性分离系统的2-D图谱,分析比较两者的分辨率.方法:提取结肠癌总蛋白,用pH3-10非线性干胶条对样品进行等电聚焦分离,并分别使用13cm和24cm电泳系统进行双向电泳,考马斯亮蓝G250染色,图像分析,比较对比两组2-D图谱,量化分析两种系统的分辨率差异.结果:在等点电3-10,分子量20-170 kD范围内分别分离得到蛋白质斑点873个(13 cm电泳系统)和1349个(24cm电泳系统).对于24cm电泳系统,1 mg蛋白质上样量的电泳图谱清晰,分辨率较好.结论:成功建立了高分辨率、简便易控的结肠癌蛋白质组双向电泳技术平台.     

植物叶片蛋白质的双向电泳分析

本文介绍一种提取植物叶片蛋白质的方法及电泳分析条件,可以很好地用来分析绿色组织中的全蛋白质组分。     

植物叶片蛋白质的双向电泳分析

本文介绍一种提取植物叶片蛋白质的方法及电泳分析条件,可以很好地用来分析绿色组织中的全蛋白质组分。     

激光照射对中华大蟾蜍原肠胚蛋白质表达的影响

用YAG倍频激光器选择不同能量密度对中华大蟾蜍原肠胚进行照射,对各组样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析,结果表明:激光照射对蛋白质点数及其分布影响显著,影响程度与照射激光密度有关。各激光照射组与对照组相比,有些蛋白质点变化明显,有些蛋白质点在对照组未发现,而在各激光照射组皆新出现。结论:激光照射可对原肠胚一些蛋白质的表达产生明显的影响。     

蝴蝶兰叶片蛋白质双向电泳方法初探

针对蝴蝶兰叶片蛋白质含量少且含有大量色素和酚等干扰物质的特点,通过对总蛋白提取方法、银染方法的改进,以及双向电泳实验条件的比较选择,初步建立一套适用于蝴蝶兰叶片蛋白质组分析的双向电泳技术。     

白桦花芽蛋白质双向电泳技术的建立

目的:初步建立白桦花芽蛋白质组研究的双向电泳(2-DE)技术,以提高其分辨率及重复性。方法:以白桦花芽为实验材料,对关键环节如样品处理、上样量和染色方法等进行一系列优化。结果:蛋白上样量为50～60μg、银染剂中采用0.16%的AgNO3染色12min,即可获得蛋白点的形态规则、稳定性高、重复性好的2-DE图谱。结论:建立了适合多糖、醌类等次生代谢物质含量较多的白桦花芽蛋白提取方法,为开展白桦发育生物学研究奠定了基础。     

普通小麦线粒体蛋白质的双向电泳分析

采用改良的IEF-SDS双向电泳技术对普通小麦(T.aestivum L.)线粒体蛋白质进行了分析。电泳结果表明:改良后的电泳系统稳定性和重复性较好,并且分辨率较高;考马斯亮蓝染色图谱中线粒体多肽呈现150—180个斑点;本文还就一些技术理论等问题进行了讨论。     

植物绿色组织蛋白质组分双向电泳分析

双向电泳是在单向电泳基础上结合蛋白质等电点和分子量两种不同特性而发展起来的一项具有较高分辩率的蛋白质分离技术。由于分辩率高,可以用来分离复杂蛋白质组分,观察蛋白质组成变化及检测特异蛋白质的存在。不过,在植物上,这项技术应用较为成功的报道多以无色或非绿色组织作为研究材料。绿色组织富含色素及酚、醌等类杂质,对电泳过程干扰作用较大且不易去     

黄瓜叶片蛋白质双向电泳样品分级优化

以‘津研4号’苗期叶片为材料,采用聚乙二醇(PEG)分级沉淀法对黄瓜叶片蛋白质样品进行分级分离,将黄瓜叶片中存在的高丰度蛋白1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶特异性地集中于一个组分之中,以提高对黄瓜叶片蛋白质双向电泳中低丰度蛋白质的检测率.结果表明:(1)分级后各组分和全蛋白在SDS-PAGE谱带中差异显著,全蛋白得到了有效的分离.(2)二维电泳图谱上点的分辨率有很大的提高,所有组分的点数是未分级前的3倍之多.(3)浓度为24％的PEG-4000富集高丰度蛋白Rubisco的效果最好.该方法可推广应用于黄瓜叶片蛋白质组分析的样品制备.     

水稻叶片蛋白质快速双向电泳分析的新方法

介绍了利用PhastSystem全自动快速电泳仪进行水稻叶片蛋白质双向电泳的方法。此方法具有快速(电泳全过程仅需3.5h),操作简单和成本低廉的特点,同时具有良好的重复性和高分辨率。