聚己内酯/壳聚糖神经导管复合骨髓间充质干细胞促进大鼠坐骨神经损伤修复的研究

目的:观察聚己内酯/壳聚糖神经导管复合骨髓间充质干细胞修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法:将24只SD大鼠随机分为4组,制备右侧坐骨神经5mm缺损模型,A组聚己内酯/壳聚糖神经导管复合骨髓间充质干细胞移植组;B组聚己内酯神经导管复合骨髓间充质干细胞移植组;C组壳聚糖神经导管复合骨髓间充质干细胞移植组;D组自体神经移植组。术后每2周进行坐骨神经功能指数检测,12周时行电生理、腓肠肌湿重恢复率、组织学观察和免疫组织化学检测。结果:坐骨神经功能指数显示,A组运动功能恢复速度较B、C组快,但比D组慢。A组电生理和腓肠肌湿重恢复率的检测结果与C、D组相比无统计学意义(P0.05),但优于B组(P0.05)。组织学观察,A组再生神经纤维排列密集。S-100免疫组织化学结果表明A组有大量雪旺细胞增生。结论:聚己内酯/壳聚糖神经导管复合骨髓间充质干细胞能够促进周围神经损伤修复,效果与壳聚糖神经导管、自体神经相同,优于聚己内酯神经导管。     

移植途径对大鼠骨髓间充质干细胞归巢及肝功能恢复的影响

目的 探讨移植途径对骨髓间充质干细胞(MSCs)归巢及促进肝切除大鼠肝再生的影响.方法 建立肝切除大鼠模型,随机分为3 组,即肝切除对照组、尾静脉移植组和门静脉移植组.移植组分别经尾静脉和门静脉注射DAPI 标记的MSCs 约1.5×106/ 只,分别于第3 天和第9 天后采血清检测肝功能,第9 天处死大鼠取肝脏标本,...     

骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植于大鼠肝硬化模型的动物实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞应用于肝硬化模型的的实验疗效,为临床试验提供数据。方法:制作大鼠肝硬化模型,将肝硬化大鼠随机分为两组,实验组和对照组,每组25只。将骨髓间充质干细胞通过门静脉注射入实验组大鼠肝脏,术后两组大鼠仍然以0.5mL/100g的维持剂量腹腔注射40%CCl4植物油溶液,3周后处死所有实验动物,取其静脉血检测ALT、TBIL、ALB、AFP,并取大鼠肝脏做组织切片观察。结果:实验大鼠肝脏可观察到诱导分化的肝细胞。实验组大鼠死亡3只,对照组死亡2只。对照组与实验组肝功能指标ALT、ALB、TBIL、AFP有显著差异,P<0.05,具有统计学意义,AST差异无统计学意义,P>0.05。结论:BMSCs注入肝硬化大鼠模型中能有效改善肝脏的生理功能,对临床试验有很好的指导作用。     

移植骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞治疗大鼠脊髓损伤

目的:研究骨髓间充质干细胞源性神经元样细胞移植治疗成鼠脊髓损伤的可行性。方法:选取成年SD大鼠32只,两只用以提取骨髓间充质干细胞,其余被分为3组,其中细胞移植组10只,PBS缓冲液组10只,空白对照组10只。骨髓间充质干细胞分离传代培养并诱导成神经元样细胞后用Hoechst33342标记,损伤1周后采取静脉注射移植的方法移植于大鼠脊髓损伤区,移植六周后用免疫荧光方法检测细胞的存活及与宿主脊髓的整合情况。脊髓损伤后的1~6周对各组动物进行BBB评分,用SPSS12.0进行数据分析。结果:细胞移植组动物的BBB评分提高显著,于其他两组差异有统计学意义。细胞移植组免疫荧光显示,移植细胞在体内大量存活并桥接于脊髓损伤区的两端,存活的多数细胞神经元特异性标记物NSE、NF-200、星形胶质细胞特异性标记物GFAP表达呈阳性。结论:移植定向诱导的神经元样细胞有助于大鼠脊髓损伤后的功能恢复。     

骨髓间充质干细胞在氨气致大鼠吸入性肺损伤的疗效观察

目的:观察骨髓间充质干细胞在氨气致大鼠吸入性肺损伤的疗效。方法:随机选取69只普通SD大鼠,随机将这些大鼠分为正常组(n=23)、地塞米松治疗组(n=23)、干细胞治疗组三组(n=23),正常组给予尾静脉注射生理盐水,地塞米松治疗组给予注射地塞米松,干细胞治疗组给予干细胞注射。结果:干细胞治疗组大鼠治疗后1 d、3 d的肺组织病理学评分及肺W/D、BALF白细胞数量及蛋白浓度、TNF-α、IL-8水平均显著低于地塞米松治疗组(P0.05),均显著高于正常组(P0.05)。结论:骨髓间充质干细胞在氨气致大鼠吸入性肺损伤的疗效较地塞米松显著。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头无菌性坏死的临床观察

目的:观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头无菌性坏死的临床效果及安全性.方法:对2012年9月至2013年1月期间在我院骨科住院治疗的55例患者随机分成两组,对照组接受常规治疗,治疗组接受自体骨髓间充质干细胞移植治疗治疗.结果:治疗组的临床疗效优于对照组,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);治疗组治疗后的DSA检查结果与对照相比,差异有统计学意义(P＜0.05);两组不良反应相互比较,无统计学意义(P＞0.05).结论:自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头无菌性坏死效果显著,优于常规治疗.     

骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞移植促进血流重建的比较

目的:比较骨髓间充质细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BM/MSC)和骨髓源内皮祖细胞(Bone Marrow Endothelialprogenitor cells,BM/EPC)移植促进血流重建的效果,为进一步优化骨髓干细胞移植治疗肢体缺血提供理论基础。方法:获取Lewis大鼠骨髓单个核细胞,在体外培养分化为MSC和EPC。采用Lewis大鼠建立单侧后肢缺血模型。在模型建立后3天,将0.8mlD-Hanks液注入大鼠缺血侧后肢,为对照组(n=6);将8×106个骨髓MSC植入大鼠缺血侧后肢,为MSC组(n=6);将体外培养的8×106个EPC植入大鼠缺血侧后肢,为EPC组(n=6)。细胞移植后3周行缺血大鼠后肢动脉造影,检测缺血侧后肢侧支血管数;获取缺血侧后肢腓肠肌,分别行CD31和α-SMA免疫组化染色,计算毛细血管密度和小动脉密度。结果:MSC组与EPC组侧支血管数无显著性差异,二者均高于对照组;EPC组毛细血管密度明显高于MSC组,二者均高于对照组;MSC组与EPC组小动脉密度无显著性差异,二者均高于对照组。结论:骨髓间充质干细胞移植和内皮祖细胞移植均能够明显促进血流重建,而且骨髓间充质干细胞在治疗肢体缺血性疾病中的优势应该受到重视。     

骨髓间充质干细胞移植对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响,并对其相关机制进行探讨。方法:90只大鼠随机分为3组:假手术组、对照组、BMSC移植组,每组30只。对照组和BMSC移植组建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,假手术组只需要分离大鼠颈部组织,而不造MCAO模型。BMSC移植组在MCAO模型术后1天经尾静脉注射1 mL/3×10~6 BMSC,对照组注射同剂量的生理盐水,于MCAO术后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d、49 d分别对各组大鼠进行神经功能评分(mNSS),术后2个月对BMSC移植组及对照组大鼠脑组织进行免疫组化染色,检测MAP2、TUJ1、Ⅷ因子、GFAP的表达情况。结果:在治疗后的第7天至第35天,BMSC移植组mNSS均显著低于对照组(P0.05)。术后2个月,BMSC移植组MAP2、TUJ1、Ⅷ因子表达量显著高于对照组,而GFAP表达量显著低于于BMSC对照组(P0.01)。结论:BMSC移植可以促进脑梗死神经功能的恢复。     

不同龄大鼠骨髓间充质干细胞活性对比

目的:分别在低氧环境和正常氧环境下研究不同周龄SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的细胞活性以及细胞分化能力的差别,并观察和检测不同周龄大鼠的骨髓间充质干细胞成骨活性有何差异。方法:1)、进行不同周龄SD大鼠骨髓间充质干细胞的提取及在低氧环境及正常氧环境下的培养。2)、进行细胞生物活性的测定及比较。结果:低氧环境下培养的2周4周龄大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs)活性好于常氧状态下培养的2周4周龄大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs)。结论:低氧环境下培养的年轻大鼠的骨髓间充质干细胞活性较好。     

骨髓移植小鼠二甲基亚硝胺肝纤维化模型的建立

目的构建绿色荧光蛋白(GFP)标记骨髓细胞的小鼠,并复制其二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化模型。方法 ICR雄性小鼠32只,随机分为正常组6只和移植组26只。移植组接受致死量γ射线照射后,经尾静脉输入GFP转基因小鼠的骨髓细胞;正常组不进行照射和移植,仅尾静脉注射等量生理盐水。两个月后制备血涂片,观察移植组造血重建情况,造血重建动物再分为对照组和造模组,造模组用DMN按每次10mg/kg体重腹腔注射制备肝纤维化模型,隔日一次,正常组和对照组给予等量生理盐水。设染毒后3周和4周两个时间观察点,生化法测定肝功能;Jamall法检测肝组织羟脯氨酸含量;HE染色及天狼猩红染色观察肝组织炎症、坏死及纤维组织增生情况;GFP免疫荧光组织化学观察骨髓源性细胞在肝脏的归巢特点。结果骨髓移植两个月后,移植组外周血中出现满视野GFP+细胞。与正常组比较,两个时间观察点造模组肝功能(ALT、AST、Alb及T.Bil)均明显异常(P<0.05),肝组织羟脯氨酸含量显著增高(P<0.05),造模3周末肝组织出血性坏死,有炎性细胞浸润,但尚未形成完全的纤维间隔;造模4周末肝组织炎症、坏死程度加重,可见完全的纤维间隔,在DMN造模动物肝组...     

复方高支链氨基酸对肝硬化大鼠肝功能及营养状况的影响

将SD雄性大鼠用四氯化碳处理建立肝硬化大鼠模型,并随机分为A、B、C三组,A组大鼠给予静脉输注生理盐水,B组、C组大鼠分别给予输注等量的普通氨基酸注射液和复方高支链氨基酸注射液,分别于实验第0d、第14d测定大鼠体质量、肝功能指标及营养学指标水平。实验结束后,B、C两组大鼠体质量明显增加,与A组相比,B、C两组大鼠肝功能各指标水平显著降低,血清蛋白水平显著升高,且C组相比,B组大鼠肝功能水平与血清蛋白水平改善作用更为明显(p<0.05)。说明复方高支链氨基酸能改善肝硬化大鼠的肝功能指标,抑制血浆蛋白分解,有效控制肝硬化病症的进一步恶化。     

小茴香对肝纤维化大鼠脂质过氧化水平的影响

目的:研究小茴香对肝纤维化大鼠的脂质过氧化水平的影响。方法:取Wister大鼠100只,随机取12只设为正常组,其余采用四氯化碳(CCL4)复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,复制成功后随机分为模型对照组、小茴香组和复方丹参组(n=12);相应药物干预8周后,镜检肝组织形态学改变;全自动生化分析仪检测外周血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平与血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量;生化法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)与血清丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果:HE结果显示:模型组肝脏炎症与脂肪变性明显,经小茴香干预后明显改善。生化检测结果显示:与正常组比较,模型组ALT、AST水平显著升高(P<0.05),TP、ALB含量显著降低(P<0.05),HYP、MDA含量显著增加(P<0.05),而SOD、GSH-PX和CAT活性显著降低(P<0.05);与模型组比较,小茴香组ALT、AST水平显著下降(P<0.05),TP、ALB水平显著升高(P<0.05);HYP、MDA含量显著降低(P<0.05),SOD、GSH-PX和CAT活性显著提高(P<0.05)。结论:小茴香的抗肝纤维化作用可能与调节大鼠脂质过氧化水平有关。     

视黄醇结合蛋白4在非酒精性脂肪肝病大鼠组织中的表达

目的:视黄醇结合蛋白4(RBP4)在非酒精性肝脂肪变模型大鼠中的表达情况,以探求其在疾病发生、发展中的意义。方法:40只wistar大鼠随机分为对照组和造模组,分析各组在2、4、6、8周4个时间点血清ALT、AST、TG、TC的变化及肝组织RBP4的表达情况。结果:随着造模时间延长,造模组大鼠肝脏脂肪变越来越明显,血清ALT、AST、TG、TC逐渐升高(p<0.05)。造模组肝组织RBP4的mRNA的表达随造模时间逐渐增强;造模组免疫组化结果发现,RBP4的表达随造模时间逐渐增强(p<0.05)。结论:在大鼠非酒精性脂肪肝模型中,RBP4的表达随造模时间延长而增加,与同期对照组相比有统计学差异,因此RBP4可能作为一个敏感的指标反映非酒精性脂肪肝的发生及发展情况。     

鹿茸多肽对缺铁性贫血大鼠的治疗作用及机制研究

摘要 目的：研究鹿茸多肽（PAP）对缺铁性贫血（IDA）大鼠的治疗作用并探讨其可能机制。方法：使用缺铁饲料诱导IDA大鼠模型,将40只IDA大鼠随机分为模型组（灌胃等体积的生理盐水）,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组（分别灌胃30、60和120 mg/kg的PAP）,每组10只,另选取10只正常饲料喂养的同龄健康大鼠作为对照组（灌胃等体积的生理盐水）。每天灌胃1次,疗程为4周。末次给药24 h后,测量各组大鼠的体重、肝脏和脾脏指数,对肝脏和脾脏组织进行苏木素伊红（HE）染色。通过ELISA法检测血红蛋白（Hb）和促红细胞生成素（EPO）含量,通过比色法检测血清铁（SI）含量,通过透射电子显微镜观察肝脏和脾脏线粒体超微结构。使用相应试剂盒检测血清氧化应激指标水平。通过Western blot检测骨髓转铁蛋白受体（TFR）蛋白表达水平。结果：与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠体重均升高,肝脏和脾脏指数均降低（P<0.05）,且大鼠的肝脏和脾脏形态和线粒体超微结构明显改善,Hb、EPO和SI水平均升高（P<0.05）。与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠的血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）水平均升高,而丙二醛（MDA）降低（P<0.05）。与模型组相比,Low-PAP组、Medium-PAP组和High-PAP组大鼠的骨髓TFR蛋白相对表达量降低（P<0.05）。结论：本研究表明PAP可有效减轻IDA大鼠的临床症状,促进红细胞生成,增强造血功能,改善铁代谢,提高抗氧化能力,促进线粒体合成。     

高脂喂养大鼠肝脏的NF-κBp65表达与胰岛素抵抗的相关性

目的探讨高脂饲料喂养大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达与胰岛素抵抗的关系。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估。应用Western blotting方法检测大鼠肝脏中NF-κBp65蛋白的表达。结果①高脂饲料组大鼠的葡萄糖输注率明显低于基础饲料组[GIR60~120（0.76±0.28vs4.26±0.70）mg/（kg.min）,P〈0.01]。②高脂饲料组大鼠肝脏NF-κBp65蛋白的表达明显高于基础饲料组（A值118.48±1.45vs68.13±4.84,P〈0.01）。③高脂胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κBp65蛋白表达与GIR60-120（r=-0.993,P=0.000）和ISI（r=-0.773,P=0.009）负相关。结论高脂诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κB的激活可能是产生肝脏和全身胰岛素抵抗的根源。     

双歧醋对高脂饮食大鼠血脂的影响

目的 探讨双歧醋对高脂饮食大鼠血脂的影响作用.方法 48只SD大鼠被随机分成双歧醋低剂量组[1.8 mL/( kg·BW)]、中剂量组[3.4 mL/(kg · BW)]、高剂量组[6.8 mL/(kg · BW)]和市售醋组[3.4 mL/( kg·BW)]、高脂模型组以及正常组,观察双歧醋对高脂饮食大鼠血脂的影响作用,测定指标包括大鼠体重、肝指数、体脂指数、病理学观察肝脏脂肪变性等.结果 实验结果显示,双歧醋各组所有测定指标值都较高脂模型组有明显好转,特别是甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平双歧杆菌醋的高、中量组与市售醋组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 双歧醋能有效预防高脂饮食大鼠的血脂水平升高,对预防体重、肝指数升高和肝脏脂肪变性也有一定作用.     

中药提取物水苏糖对实验性肝硬化大鼠血浆内毒素及肠道菌群的影响

目的探讨中药提取物水苏糖对肝硬化大鼠血浆内毒素及肠道菌群的影响.方法36只SD大鼠随机分为正常对照组（n=6）,模型组,预防组,晚期治疗组.采用CCL4复合因素法建立肝硬化模型;实验第9周末处死所有大鼠,观察药物对肝硬化大鼠内毒素,肠道菌群,AST、ALT肝功能及肝组织病理学等的影响.结果中药提取物水苏糖对内毒素及其它指标都有明显的改善,预防组,晚期治疗组病理都有改善,预防组优于治疗组.结论中药提取物水苏糖能有效调整肝硬化肠道菌群失调,并降低血浆内毒素.对肝脏有保护作用.     

熊果酸对酒精性骨质疏松大鼠骨形成、骨矿化的影响

目的：探讨熊果酸对酒精所致骨质疏松大鼠骨形成、骨矿化的影响。方法：雄性Wistar大鼠60只,按体重随机分为空白对照 组、熊果酸对照组、模型组、熊果酸低、中、高剂量组,同时分别给予生理盐水、150 mg/kg 熊果酸、50%酒精,50 mg/kg 熊果酸,100 mg/kg 熊果酸,150 mg/kg 熊果酸灌胃。熊果酸对照组生理盐水剂量同空白组,熊果酸低、中、高剂量组酒精剂量同模型组。灌胃共 持续8 周。磷钼酸法检测血清磷(P)含量,比色法检测血清钙(Ca)含量,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清骨钙素(BGP)、骨形成蛋 白-2(BMP-2)浓度;HE 染色法观察股骨结构的病理学变化。结果：与空白对照组相比较,模型组血清BGP、BMP-2 和Ca、P 均明显 降低,且有统计学差异(P < 0.05),但熊果酸对照与空白对照组各项指标结果相近。熊果酸中、高剂量组大鼠血清BGP、Ca 和P 水 平均较模型组有显著升高,差异具有统计学意义(P < 0.05),但仅熊果酸高剂量组血清BMP-2 显著升高(P < 0.05)。股骨组织HE 染色结果显示,空白对照组骨小梁致密、规则且较粗,粗细均匀;模型组骨小梁稀松、不规则、粗细不均匀,甚至可见骨小梁断裂; 熊果酸中、高剂量组骨小梁致密、规则、较厚、粗细均匀,未见骨小梁断裂。结论：熊果酸能够促进酒精性骨质疏松大鼠的骨形成, 抑制骨矿物质的流失,在改善酒精致骨质疏松方面有一定的保护作用。     

双歧醋对高脂饮食大鼠血脂影响的机制探讨

目的 探讨双歧醋对高脂饮食大鼠血脂的影响机制.方法 48只SD大鼠被随机分成双歧醋低剂量组[1.8 mL/(kg·BW)]、中剂量组[3.4 mL/(kg· BW)]、高剂量组[6.8 mL/(kg·BW)]和市售醋组[3.4 mL/(kg·BW)]、高脂模型组以及基础对照组,观察双歧醋对高脂饮食大鼠血脂的影响作用机制,测定指标包括大鼠肝脏脂质、大鼠LDLR的免疫组化分析,HMGCoA还原酶和LDLR的RT-PCR分析.结果 双歧醋各组对于HMGCoA还原酶表达有抑制作用,但可以上调LDLR的基因和蛋白质表达.结论 双歧醋可以通过调节HMGCoA还原酶和LDLR的表达预防高脂饮食大鼠高血脂的发生.