用放射免疫测定法研究性类固醇激素和棉酚对大白鼠垂体LH分泌的影响

用兔抗羊 LH 血清和放射性碘标记的羊 LH 建立了大白鼠血清中 LH 的双抗体放射免疫测定法。在这异源的系统中羊 LH 和大鼠 LH 的剂量反应曲线是平行的。当用羊LH_(2-2-1)作参考标准时测量的灵敏度为0.1ng/管。当用大鼠 LH-RP-1作参考标准时测量的灵敏度为10ng/管。大鼠的 FSH 没有交叉反应,所以 FSH 不会干扰血清 LH 的测定。用这个系统我们研究了去卵巢以及去卵巢后给予孕酮和巳烯雌酚以后大鼠血清中LH 水平的变化。结果表明性类固醇激素对大鼠垂体 LH 的分泌具有一个负反馈的调节机制。本文中还研究了棉酚对大鼠 LH 分泌的影响。我们发现成年雄鼠服用棉酚以后血浆 LH 的水平以及垂体对 LRH 的反应均无显著的变化。结果表明新的男性抗生育药物——棉酚似乎不影响垂体的 LH 分泌功能。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅲ.大白鼠灌服棉酚后血液和有关脏器中棉酚含量的测定

大白鼠灌服棉酚后,棉酚在血液和有关脏器中的滞留是不等的,肝脏中浓度较高,累积也较快;血清、睾丸与附睾浓度较低,累积也较慢。但是,在较低的剂量条件下,这种累积是有限度的,即使长期灌服棉酚,也不会造成棉酚在体内无限制的累积;已累积的棉酚在体内滞留时间也并不长久,停药一段时间便可消失,大白鼠也逐渐恢复生育能力。剂量增大时,血液或肝脏中的棉酚浓度也在一定范围内成正比地增大。大量棉酚经肝-胆系统随粪排出,而且在一定剂量范围内有多食多排泄、少食少排泄的现象。     

二苯胺棉酚中棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定二苯胺棉酚中棉酚的含量。方法回收率平均达 93.6 %以上 ,变异系数 ( CV )为1.2 %。该方法准确 ,重现性好 ,可作为二苯胺棉酚质量监控方法。     

棉酚抗生育作用的研究——Ⅳ.大白鼠长期服棉酚睾丸退化的观察

选用出生1月龄大白鼠按20毫克/公斤体重/日灌服棉酚,每周5次,连续1个月和2个月取材;性成熟大白鼠每天服棉酚5毫克/只,每周6次,给药3、4、6个月和停药1、2、3个月分别取材,睾丸称重后固定、制片作比较观察。实验结果表明,棉酚对幼龄大白鼠睾丸的发育没有影响,但使发育到变态后期的精子细胞受损伤,附睾中出现断头坏死的精子。长期服抗生育有效剂量棉酚的大白鼠中,有相当一部分出现不同程度的睾丸退化。退化通常在睾网附近最先出现,并和死精子在曲精细管中积聚相关连。第Ⅶ—Ⅷ期生精上皮退化的过程是自上皮游离缘18—19期精子细胞开始渐进地向基膜方向推进,直至上皮完全剥落或仅留以个别精原细胞和较多的媬育细胞。停服棉酚后恢复1—3个月的结果指出,已开始退化的睾丸在停药后有继续退化的趋势。严重退化的睾丸经停药3个月,虽然曲精细管排列较整齐,部分留有精原细胞的曲精细管中精原细胞显示增加数目并有B 型精原细胞,但尚未见进一步发展。对于睾丸退化可能与死精子在曲精细管内积聚有关,而不是由于棉酚对整个生精上皮的损伤问题进行了讨论。     

棉籽中游离棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定棉籽中游离棉酚的含量。脱除棉酚的棉籽乙醚提取物经石油醚和 75 %乙醇分离和纯化后 ,用 0 .5 %对氨基苯磺酸显色来检测棉籽中游离棉酚的含量 ,结果表明 ,该方法具有简便、重现性好、回收率高达 97%以上等优点 ,可作为棉籽中游离棉酚质量控制方法。     

测定棉酚的气液色谱法

棉酚(Gossypol)又名棉子醇或棉毒素,是存在于棉花植株各部位的一种多元酚化合物,其含量与棉花抗逆性有一定的相关性。由于棉酚对人及单胃动物有毒害,因而限制了棉籽蛋白的利用。近年来,棉酚作为一种医用药物得到了广泛的研究。因此,研究快速、准确的棉酚测定方法是必要的。本文在前人工作的基础上对棉酚的测定方法进行了改进。1.仪器和试剂日本国岛津公司生产的GC-9A型气相色谱仪,配C-R3A型数据处理仪;采用氢火     

在体和离体的大白鼠肝细胞经棉酚处理后的观察

性成熟的雄性Wistar大白鼠经小剂量棉酚持续处理半年,肝细胞的超微结构,无论是细胞器或是细胞内含物都和对照大白鼠的相似;但大剂量棉酚短期处理,即可引起肝细胞呈“空泡”样变。在离体条件下,棉酚对大鼠肝细胞的损伤作用,与在体肝细胞经大剂量棉酚短期处理的结果相同,受损伤的程度与棉酚浓度和处理时间成正相关。表明离体肝细胞对棉酚比在体肝细胞敏感,但和生精细胞相比,这些体细胞则是相对不敏感的。小剂量长期用药组及其对照组中部分大白鼠的肝细胞线粒体出现类晶体样内含物,可能提示肝细胞在超微结构水平受损伤,但与灌服棉酚没有必然联系。     

厚朴类中药厚朴酚及和厚朴酚含量测定

采用HPLC测定法,对几种中药厚朴及其不同地方代品中和厚朴酚、厚朴酚的含量测定分析。数据结果表明正品厚朴与地方代用品之间的和厚朴酚、厚朴酚的含量差别很大,正品厚朴也因产地不同含量存在差别。     

血清甲状腺素放射免疫测定及其临床初步应用

甲状腺素(T_4)和三碘甲状腺原氨酸(T_3)的放射免疫测定所得结果,对于诊断甲状腺功能以及估价治疗过程中病情的动态变化是一个重要指标。在疾病导致甲状腺功能改变时,T_4和T_3在血清中含量变化基本相似。只是诊断甲亢。T_3比T_4更灵敏。但是在某些特殊情况下,两者含量变化并不平行。如T_3型甲亢者,血清中T_3含量增高,而T_4正常。反之,轻度原发性甲减者,T_4含量可有降低,而T_3含量有时却显得正常。因此在临床诊断中。T_3的测定不     

脑啡肽的放射免疫测定

1975年发现亮氨酸脑啡肽(LEK)和甲硫氨酸脑啡肽(MEK)。其测定以放射免疫(RIA)最佳。作者提议并合成了多聚赖氨酸琥珀酰脑啡肽免疫原,EK结合率81～90%,每2.3或3.2个赖氨酸残基连上一个EK。免疫3或6个月时获得抗EK血清(ALS或AMS),工作稀度可达1:5000,K_(eff)10~9升/克分子。试用改进的氯胺T标记法及DEAE-Sephadex A-25柱层析制备高比放射性~(125)I-EK免疫活性良好。双抗体法分离抗体结合的和游离的~(125)I-EK。竞争抑制曲线:灵敏度LEK～11微微克,MEK～130微微克;精密度1.8%及1.4%。β-内啡肽,八种肽类激素、吗啡、纳洛酮无明显干扰;交叉反应MEK对ALS为3.3%、LEK对AMS为<1%。脑组织用0.0N盐酸抽提,中和后,直接作RIA。本方法已通过多种方法学考验。正常大鼠脑中EK浓度以下丘脑为最高,尾核次之。本法是灵敏、可靠和特异的。     

脑啡肽的放射免疫测定

1975年发现亮氨酸脑啡肽(LEK)和甲硫氮酸脑啡肽(MEK)。其测定以放射免疫(RIA)最佳。作者提议并合成了多聚赖氨酸琥珀酰脑啡肽免疫原,EK 结合率81～90%,每2.3或3.2个赖氨酸残基连上一个EK。免疫3或6个月时获得抗EK 血清(ALS 或AMS),工作稀度可达1:5000,K_(eff)10~9升/克分子。试用改进的氯胺T 标记法及DEAE-Sephadex A-25柱层析制备高比放射性~(125)I-EK,免疫活性良好。双抗体法分离抗体结合的和游离的~(125)I-EK。竞争抑制曲线:灵敏度LEK～11微微克,MEK～130微微克;精密度1.8%及1.4%。β-内啡肽,八种肽类激素、吗啡、纳洛酮无明显干扰;交叉反应MEK 对ALS 为3.3%、LEK 对AMS 为<1%。脑组织用0.1N 盐酸抽提,中和后,直接作RIA。本方法已通过多种方法学考验。正常大鼠脑中EK 浓度以下丘脑为最高,尾核次之。本法是灵敏、可靠和特异的。     

生长抑素的放射免疫测定

生长抑素(Somatostatin,SST),又称生长激素释放抑制激素(Growth hormone rclease-inhibiting hormone),系1973年由Brazeau等从羊下丘脑分离并在同年由Rivier等人工合成的14肽。生长抑素主要分布于神经系统及消化系统,除其有抑制垂体前叶生长激素释放的功能外,尚有多种生理作用,在许多病理状态下均有明显变化。研究其     

P物质放射免疫测定法及在大白鼠动情周期中垂体内P物质含量的变化

本文报道了P物质放射免疫测定方法的建立。用此方法测定了大白鼠脑不同部位(下丘脑、垂体、嗅球和小脑)中P物质的含量,还测定了大白鼠不同情期垂体中P物质含量的变化,观察到间情期垂体P物质的含量最高,动情前期显著降低,动情期仍维持在低水平。因此认为P物质在垂体水平对LH和FSH的分泌有抑制性影响。     

紫外分光光度法同时测定厚朴酚与和厚朴酚的含量及活性研究

使用pH =8.93的KH2 PO4 NaOH缓冲液 (0 .0 2 5mol/L) ,根据混合物含量测定的原理 ,在 2 89.4nm和 316 .4nm处测定溶液吸光度来测定厚朴酚与和厚朴酚的含量 ,在 5 17nm处考察厚朴酚与和厚朴酚清除DPPH·的活性 ,建立了同时测定厚朴酚与和厚朴酚含量的紫外分光光度法 ,初步考察了二者的自由基清除活性。DPPH·可作为二者抗氧化活性的研究方法。     

植物激素脱落酸的放射免疫测定

放射免疫分析是利用放射性同位素技术与免疫化学技术相结合的测定超微量物质的新技术,兼具同位素技术的高灵敏性、精确性和抗原抗体免疫反应的专一性。这一技术早已在蛋白质(酶)及动物激素的研究中应用,但是,用于各类植物内源激素的分析测定则在近年才开始,国内在这方面的应用还未见报道。我们在植物叶片脱落酸含量的测定过程中对这一技术进行了一些探索,现将获得的结果报告如下。     

凤丹愈伤组织中丹皮酚含量的测定

本文利用药用植物组织培养的方法,对凤丹子叶愈伤进行诱导,并用单因素实验和正交实验研究了愈伤组织中丹皮酚含量在不同水浴时间、超声时间及超声功率三个条件下的差异,并采用最优处理方式比较了丹皮酚在凤丹不同器官和子叶愈伤中的含量,以及不同激素配比和不同类型基本培养基对其含量的影响。结果表明:水浴2 h,超声30 min,100 W处理条件下丹皮酚含量最高,影响力大小为超声时间水浴时间超声功率,故该方法可用作愈伤组织中丹皮酚含量测定前样品的处理方法;丹皮酚含量在凤丹不同部位中差异很大,依次为:市售丹皮叶片种子果荚子叶愈伤;6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L的激素配比和B5基本培养基不同程度上提高了子叶愈伤组织中丹皮酚的含量。     

老年人血清蛋白质和总胆固醇含量测定初步报告

血清或血浆蛋白质以及血液中胆固醇含量常随生理及病理情况而改变,临床上早已利用这种变化来诊断某些疾病。近年来也有很多学者如 Chesrow E.G.(1958)、Eckerstron sten(1958)、Rafsky H.A.(1952)、Albanese A.(1958)、Keys A.M.(1950)利用测定不同年龄阶段,成年人和老年人血清蛋白质和胆固醇含量,来研究年龄和血清蛋白质和胆固醇含量变化的关系。本工作的目的是为了解老年人血清蛋白质和血清胆固醇含量及其变化范围,进而与正常成年人比较,作为探讨机体衰老过程中,在生理和生化方面所超变化的线索。     

甜菜夜蛾体内酶活性对三种棉酚含量棉花的响应

在室内用3种不同棉酚含量的棉花饲养甜菜夜蛾幼虫,并在不同取食时间测定了甜菜夜蛾幼虫的营养物质、消化酶、保护酶和解毒酶活性的变化.实验结果表明,甜菜夜蛾幼虫取食高棉酚含量的棉花M9101品种6h后,体内的游离脂肪酸较取食其他两种低酚含量棉花出现了显著性的降低.甜菜夜蛾幼虫取食高棉酚含量的棉花M9101品种24h后,体内的胰蛋白酶较取食1,4,6h后出现了显著性的增加.甜菜夜蛾幼虫取食高棉酚含量的棉花M9101品种1,4,6,24h后,体内的过氧化氢酶和总超氧化物歧化酶显著高于取食低酚棉花品种ZMS13和HZ401,但体内显著较低的羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶酶活性显著低于取食低酚棉花品种ZMS13和HZ401.多因素方差分析表明,不同棉酚含量棉花品种除对甜菜夜蛾幼虫体内淀粉酶活性无影响外,对其他消化酶、保护酶和解毒酶活性均有显著性的影响.棉花品种和甜菜夜蛾不同为害时间的交互作用可显著影响甜菜夜蛾幼虫体内的羧酸酯酶和过氧化氢酶活性.测定对甜菜夜蛾不同为害时间体内酶活性对不同棉酚含量的棉花的响应,可有效评估植食性昆虫在植物次生代谢物质压力下的生理反应和抗性变化.