磷脂酶C-γ功能研究进展

磷脂酶C-γ(PLC-γ)被激活后,通过两种不同的活化机制催化水解PIP2,产生IP3和DAG。IP3和DAG分别介导钙离子从钙泵中释放以及激活蛋白激酶C,从而形成一个关键的跨膜转导信号组分。现已知道,PLC-γ在细胞周期、细胞转化、生长和发育、细胞凋亡以及调控细胞肌动蛋白骨架等生命活动过程中起着重要的调节作用。另外,PLC-γ与其他转导信号,如PKC、Ras、Ca^2 等存在cross-talk关系。     

磷脂酶C-γ_2对鼠成纤维细胞株迁移能力的影响

通过对敲除磷脂酶 C-γ1 基因的鼠成纤维细胞株及其转染磷脂酶 C-γ2 基因后的迁移指标的统计学分析 ,揭示出磷脂酶 C-γ1 和γ2 在 PDGF引起的细胞迁移信号传导中均有正调控作用 ,前者作用显著而后者作用微小 ,并且仅在磷脂酶 C-γ1 功能缺失的条件下方可发挥出来 ;同时进一步证明敲除磷脂酶 C-γ1 基因的细胞株中 ,未见出现磷脂酶 C-γ2 的代偿 ,说明磷脂酶 C-γ2 与 γ1 在功能上不可相互取代 ,反映了一种信号可由多种途径传导即细胞信号传导的交互性、冗余性     

磷脂酶C-γ2在鼠成纤维细胞株克隆形成中的作用

通过对敲除磷脂酶C-γ1基因的细胞株及其转染磷脂酶C-γ2基因后克隆形成能力的统计学分析揭示出磷脂酶C-γ2有显著的促克隆形成作用,磷脂酶C-γ1作用微小,但与磷脂酶C-γ2有协同作用,提示磷脂酶C-γ2与γ1在功能上有一定的交互性、冗余性,但不可相互取代.     

拟南芥中磷脂酶Dγ2的低温信号转导作用途径分析

磷脂酶D(PLD)的磷脂降解功能和信号转导功能均能影响植物的抗冻性.本研究以PLDγ2基因被敲除的拟南芥突变体及其野生型为材料,进行低温驯化和冻害胁迫处理,随后由这两种植株的表型及其离子渗透率等来分析PLDγ2基因对拟南芥抗冻性.结果发现,经直接冻害处理后,PLDγ2敲除型的抗冻性与野生型基本一致;但经过低温驯化后的冻害处理,PLDγ2敲除型的抗冻性弱于野生型,即表明PLDγ2基因参与了低温信号转导作用.进一步的实验结果表明PLDγ2基因介导脯氨酸调控的可溶性物质调控途径和过氧化物酶(POD)活性调控的抗氧化系统途径;但是与低温信号激素ABA不在同一条信号转导途径.     

精子顶体反应期间磷脂酶A2的信号转导及其调节

磷脂酶A2是精子重要的脂解酶类,包括多种不同亚型。在精子顶体反应期间磷脂酶A2受天然激动剂卵透明带、孕酮和γ-氨基丁酸激活,引起胞外Ca2 内流,使磷脂水解为花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱,从而促进膜的融合即顶体反应。天然激动剂引起PLA2激活受Gi蛋白、甘油二酯、蛋白激酶A、蛋白激酶C、促分裂原蛋白激酶和活性氧等多条信号通路的调节,此外,磷脂酶A2与特异性磷酯酶C之间可以发生信号串话。研究PLA2的信号通路为了解受精机制、男性不育之病因和开发男性避孕药提供依据。     

植物中的磷脂酶D信号转导

文章介绍磷脂酶D（PLD）跨膜信号转导作用的研究进展。     

磷脂酶C-β研究进展

磷脂酶Ｃ β(ＰＬＣ β)是磷脂酶Ｃ的β型同工酶。它与磷脂酶Ｃ γ(ＰＬＣ γ)同是肌醇磷脂信号途径的关键酶。虽然它们同属ＰＬＣ家族 ,但所介导的信号途径及引起的生理效应却有很大差异。ＰＬＣ γ需要酪氨酸激酶激活 ,最终引起细胞的生长和分化等效应 ,而ＰＬＣ β的活化却要靠Ｇ蛋白 ,目前主要发现其介导一些神经内分泌的信息传递。本文对ＰＬＣ β的新进展作一综述。1 .ＰＬＣ β的生物特性迄今为止 ,发现ＰＬＣ β有 4个亚型 :β1、β2 、β3和β4,它们的基因定位于不同的染色体区段。由于ｍＲＮＡ剪接的不同 ,β1和β3各有两种剪接变…     

磷脂酶C—γ2对鼠成纤维细胞株迁移能力的影响

通过对敲除磷脂酶C－γ1基因的鼠成纤维细胞株及其转染磷脂酶C-γ2的迁移指标的统计学分析,揭示出磷脂酶C－γ1和γ2在PDGF引起的细胞迁移信号传导中均有正调控作用,前者作用显著而后者作用微小,并且仅在磷脂酶C-γ1功能缺失的条件下方可发挥出来,同时进一步证明敲除磷脂酶C－γ1基因的细胞株中,未见出现磷脂酶C－γ2的代偿,说明磷脂酶C－γ2与在功能上不可相互取代,反映了一种信号可由多种途径传导即细胞信号传导的交互性,沉余性。     

磷脂酶C—γ2在鼠成纤维细胞株克隆形成中的作用

通过对敲除磷脂酶C－γ1基因的细胞株及其转染磷脂酶C－γ2基因后克隆形成能力的统计学分析揭示出磷脂酶C－γ2有显著的促克隆形成作用,磷脂酶C－γ1作用微小,但与磷脂酶C－γ2有协同作用,提示磷脂酶C－γ2与γ1有功能上有一定的交互性、冗余性,但不可相互取代。     

信号转导蛋白——磷脂酶C—δ

PLG-δ是PLC家族中最基本的成员,能水解肌醇磷脂,产生肌醇三磷酸和二酰基甘油,参与信号转导.并与某些病理状态有关.     

磷脂酶A2亚型及其与男性生殖相关性研究

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是参与细胞代谢活动、信号转导等过程的重要酶类之一,广泛分布于哺乳动物机体内。随着对磷脂酶A2研究的深入,目前已有30余种磷脂酶A2亚型被逐一鉴定,磷脂酶A2亚型与男性生殖相关性研究也有了新的发现。该文通过对磷脂酶A2的最新亚型分类及其特征、磷脂酶A2在男性生殖系统中的分布、磷脂酶A2参与精子顶体反应及其信号转导通路以及与男性生殖相关的磷脂酶A2亚型等内容进行分析,研究磷脂酶A2在男性生殖系统中发挥的作用及其机制,为男性不育的诊断和治疗提供理论依据和思路策略。     

哺乳动物细胞液磷脂酶A2

哺乳动物细胞液磷脂酶Ａ_２杨在清,甘莉（华中农业大学,武汉４３００７０）关键词细胞液磷脂酶Ａ_２细胞液磷脂酶Ａ２（ｃｙｔｏｓｏｌｉｃｐｈｏｓｐｈｏ－ｌｉｐａｓｅＡ２,ｃＰＬＡ２）是动物非胰腺磷脂酶Ａ２的一种,存在于哺乳动物的细胞液中,在花生四烯酸的代谢...     

PPAR-γ作用及其相关信号转导途径

过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisomeproliferater-activatedreceptor,PPAR)是一类配体激活的核转录因子超家族成员,包括PPAR-α、PPAR-β/δ和PPAR-γ三种表型,其中以PPAR-γ的研究最为深入。PPAR-γ通过JAK-STAT、激活蛋白-1(AP-1)、NF-κB、活化T细胞核因子信号通路(NFAT)来抑制炎症反应;通过抑制泡沫细胞(foamcell)的分化、炎症反应以及细胞增殖来抑制动脉粥样硬化的发生发展;通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、瘦素、脂链素等信号通路来参与糖稳态的调节;通过细胞周期的调控来影响肿瘤生长;参与脂肪细胞分化并与肥胖密切相关。明确这些相关信号通路以及相关细胞因子的作用,可对相关疾病机制及防治进一步提供有力依据和干预途径。     

反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因转化美洲黑杨G2的研究

通过农杆菌介导法将反义磷脂酶DT(Anti-PLDγ)基因转入美洲黑杨G2中以提高其耐盐性。本研究建立了美洲黑杨G2组培再生体系,确立了美洲黑杨G2叶片分化最适宜培养基和生根培养基,进行了卡那霉素(选择性抗生素)敏感性试验,改良了传统的农杆菌介导转化法。经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株,抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中。耐盐性实验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照有不同程度提高。     

磷脂酶D与病原微生物感染

磷脂酶D(phospholipase D,PLD)普遍存在于细菌,真菌以及哺乳动物中.在病原微生物中,PLD作为毒力决定因子在减数分裂、孢子形成等过程中起作用;在哺乳动物细胞中,PLD主要在胞膜转运、调节有丝分裂和细胞肌动蛋白骨架等一些信号转导中起作用.在病原菌感染宿主细胞的过程中,病原体和宿主细胞的PLD都被激活并发生级联反应,病原菌PLD可调节自身肌动蛋白丝的聚合和重排,并引起宿主细胞局部肌动蛋白丝的集聚,诱导宿主细胞对其吞噬.深入探讨PLD激活对感染发生的调控作用对透彻理解病原菌感染宿主细胞的分子机制具有重要意义.     

反义磷脂酶Dγ基因转化小麦的研究

目的:获得抗寒、耐盐等能力增强的小麦新种质或新品种。方法:利用穗茎注射法将含有反义磷脂酶Dγ基因(PLDγ)的根癌农杆菌菌液注入到春小麦富硒乌麦旗叶鞘内,T1代经田间表型选择筛选到10株变异株,通过特异PCR扩增和Southern杂交技术对获得的变异株进行分子检测,并对转基因植株进行耐盐性鉴定。结果:变异株均扩增出大小为430bp的目的片段,Southern印迹结果与其一致,证实反义PLDγ基因已经整合到小麦的核基因组中;6株转基因植株的抗寒力比对照显著增强,4株的熟期提早3～4d;在室内耐盐性筛选中,2株变异植株耐NaCl的能力比对照有不同程度的提高。结论:反义PLDγ基因在提高小麦的抗寒、耐盐性上具有很大的应用价值。     

磷脂酶A2的应用

磷脂酶Ａ2 (ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ2 ,ＰＬＡ2 ,ＥＣ 3 .1 .1 .4)即磷脂 2 酰基水解酶 ,是专一催化 3 Ｓｎ 磷酸甘油脂Ｃ 2位酯键的水解反应的酶 ,酶解产物为溶血磷脂和脂肪酸。ＰＬＡ2 不仅在生物体内具有很重要的生理功能 ,而且具有很高的应用价值 ,可广泛地应用在科学研究、磷脂改性、油脂精练、饲料添加剂、医疗等诸多方面。1 .用ＰＬＡ2 研究酶学、脂代谢和生物膜结构与功能ＰＬＡ2 (尤其是外分泌型的ＰＬＡ2 )的分子量较小 ,一般在 1 0～ 2 0ｋＤ之间 ,相对而言 ,结构较为简单。在蛇毒中 ,存在许多ＰＬＡ2 的同工酶 ,它们之…     

蜂毒过敏原磷脂酶A2

蜂毒 (ｂｅｅｖｅｎｏｍ)是由工蜂毒腺和副腺分泌的、具有芳香气味的一种透明液体 ,贮藏在毒囊中 ,在蜜蜂蛰刺时由蛰针排出[1] 。蜂毒具有抗菌、消炎、镇痛、降血压、抗辐射、预防癌症等药理作用 ,可用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、哮喘、神经痛等多种疑难杂症。目前世界上许多国家都已开展蜂针疗法 ,并有各种类型的蜂毒软膏和针剂生产。但由于蜂毒易使人产生过敏反应 ,致使蜂针疗法不能得到广泛推广。鉴于这一点 ,国内外许多学者对主要引起人类过敏的蜂毒组分———磷脂酶Ａ2 (ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ2 )进行了研究 ,并且取…     

农杆菌介导法获得转反义磷脂酶Dγ基因大麦

在含有反义磷脂酶Dγ基因（PLDγ）的根癌农杆菌介导下,以自然状态下生长的大麦作受体进行转基因实验。对获得的T1代种子进行抗生素筛选、PCR和PCR—Southern杂交鉴定,证实反义PLDγ基因已整合到大麦基因组中。通过对转基因植株的耐盐性鉴定,获得了一批可耐0．7％NaCl的植株。     

白介素—2对心肌细胞[Ca^2＋]i的作用及其信号转导途径

为研究白介素－2（interleukin-2,IL-2）对心肌细胞内钙浓度（[Ca^2 ]i）的影响及其信号转导途径,实验采用酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,以Fura-2/AM为钙探针,用细胞内双波长钙荧光系统检测细胞[Ca^2 ]i的变化。结果发现：（1）IL－2（0.5-200U/ml）浓度依赖性地降低单个心室肌细胞内钙态,IL－2（200U／ml）对咖啡因诱导的肌浆网内储钙的释放无影响;（2）纳洛酮(naloxone,Nal)(10^-8mol/L）和nor-binaltorphimine(nor-BNI,10^-8mol/L）可阻断IL－2对心肌细胞钙瞬态的作用,而纳曲吲哚（naltrindole,NTI）（10^-6mol/L）不能阻断此作用;（3）κ阿片受体激动剂U50488H（10^-6mol/L）降低心肌细胞钙瞬态,nor-BNI(10^-8mol/L）可阻断此作用;（4）5mg/L百日咳毒素（PTX）预处理可取消IL－2降低心肌细胞钙瞬态的作用,而酪氨酸激酶抑制剂genistein(10^-4mol/L）不能取消IL－2的作用;（5）U73122预处理可阻断IL－2的作用。研究结果表明,IL－2降低心肌细胞钙瞬态的作用,是通过心肌细胞上κ阿片受体介导的,其下游途径包括PTX敏感的G蛋白和磷脂酶C。