病毒感染激活和抑制炎症小体的研究进展

促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)主要由巨噬细胞和树突细胞产生,是宿主针对各种侵入病原体产生先天免疫应答的重要介质。这些促炎细胞因子从病毒感染的细胞中分泌,被称为炎症小体的多蛋白复合物严格调控。根据炎症小体识别蛋白的种类,炎症小体主要分为两类,即核苷酸结合寡聚结构域样受体(NOD-like receptors,NLRs)和黑色素瘤缺乏因子2样受体(Absent in melanoma 2,AIM2)炎症小体。与其他宿主防御机制不同,炎症小体活化后,会诱导促炎细胞因子IL-1β、IL-18的成熟及分泌。适量的促炎细胞因子有利于控制病理性感染,但如果过量,则会对机体造成一定免疫损伤。本文主要对近几年有关病毒感染对炎症小体的激活和抑制机制进行了综述,总结分析了炎症小体在参与天然免疫反应及病毒感染致病过程中具有的重要作用。     

炎症和纤维标志物在痤疮增生性瘢痕形成中的表达

本研究旨在考察炎症和纤维标志物在痤疮增生性瘢痕形成中的表达模式及其在瘢痕形成中的作用。采用免疫组化和RT-PCR检测了20份痤疮增生性瘢痕组织和20份正常组织中抗炎细胞因子(IL-4和IL-10)、促炎细胞因子(IL-1β和TNF-α)和纤维化标志物(TGF-β1, TGF-β3, IGF-1R和SMAD2)的表达情况。研究显示,增生性瘢痕组织中IL-4和IL-10的阳性染色强度分别下降了36.13%和47.86%(p0.05),而IL-1β和TNF-α的阳性染色强度分别升高了1.34倍和5.37倍(p0.05)。增生性瘢痕组织中IL-4和IL-10的m RNA相对表达量分别下降了53.57%和62.28%(p0.05),而IL-1β和TNF-α的mRNA相对表达量分别升高了2.45倍和1.75倍(p0.05)。增生性瘢痕组织中TGF-β1、TGF-β3、IGF-1R和SMAD2的阳性染色强度分别显著升高了2.46倍、1.18倍、2.65倍和1.54倍(p0.05)。增生性瘢痕组织中TGF-β1、TGF-β3、IGF-1R和SMAD2的mRNA相对表达量均分别升高了4.02倍、2.11倍、3.78倍和2.45倍(p0.05)。本研究表明,增生性瘢痕组织中抗炎细胞因子IL-4和IL-10为低表达模式,而促炎细胞因子IL-1β和TNF-α为高表达模式,另外,纤维化标志物TGF-β1、TGF-β3、IGF-1R和SMAD2均为高表达模式。上述炎症和纤维化标志物均参与调节增生性瘢痕的形成。     

高压氧疗法对创伤性脑损伤大鼠氧化应激指标及促／抗炎细胞因子水平的影响

目的：研究高压氧（HBO）疗法对创伤性脑损伤（TBI）大鼠氧化应激指标及促／抗炎细胞因子水平的影响方法：SD雄性大鼠18只,随机分为3组（n=6）：假手术组、损伤对照组和HBO治疗组采用Feency法建立大鼠TBI模型,假手术组只开放骨面,不予打击HBO治疗组大鼠于脑损伤后6h采用动物高压舱,以3ATA压力纯氧治疗60min。所有动物于手术后24h处死,分离脑组织,取伤侧脑半球行组织匀浆,分别测定匀浆上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、NO的含量以及促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β及抗炎细胞因子IL-10的水平,结果：与损伤对照组相比,HBO治疗使SOD、NO以及IL-10水平升高,同时降低脑内MDA及TNF-α、IL-6、IL-1β的含量结论：HBO治疗可抑制TBI后自由基的生成,从而减轻脂质过氧化反应;同时,HBO治疗可减少促炎细胞因子的生成,促进抗炎细胞因子的产生,从而可减轻损伤脑组织的炎症反应,有助于减轻TBI后脑组织的继发性损伤.     

白介素1β对培养的大鼠皮层神经元钙通道电流的抑制作用

白细胞介素1β（IL-1β）是重要的促炎细胞因子,在中枢神经系统（CNS）中发挥广泛的生物学功能。在病理条件下,细胞膜上电压门控钙通道的变化与疾病发展过程密切相关。虽然IL-1β和钙通道都在脑损伤和脑疾病过程中发挥重要作用,但目前还很少有两者之间相互关系的研究报道。该研究使用了培养的大鼠胎鼠皮层神经元和膜片钳记录技术,研究了长时间的IL-1β处理对电压门控钙通道电流的作用。结果表明,IL-1β在10和50 ng/mL剂量下都可以抑制钙电流,这种抑制作用具有时间和剂量依赖性的模式,并且不改变钙通道的激活性质。     

白介素1β抑制培养的大鼠皮层神经元钠电流峰值和动作电位幅度

白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)是重要的促炎细胞因子,在中枢神经系统的生理学和病理学过程中发挥关键作用.电压门控钠通道是可兴奋细胞电学活动的基础,控制神经元的兴奋性和动作电位.最近的研究又显示了IL-1β与电压门控通道之间的相互作用.为考察中枢神经元中IL-1β与电压门控钠通道之间的相互作用,本研...     

金银花抗炎免疫活性研究进展

金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干躁花蕾及初开的花,具有清热解毒,疏散风热的功效,主治热性病,具有抗炎免疫的作用,为治一切内痈外痈之要药。金银花提取物具有免疫抑制作用,通过抑制TNF-α,IL-1β,和IL-6等促炎细胞因子来抑制或减轻炎症反应。研究认为金银花的免疫调节作用是通过调节TH1/TH2的平衡实现的,机理主要是增加TH1细胞分泌的细胞因子或降低TH2细胞分泌的细胞因子,但物质基础及作用机制尚不明确。炎症与免疫密不可分,研发具有抗炎和免疫调节作用的药物意义重大。金银花的临床疗效与药理作用研究结果是相一致的,提示金银花可用于研发抗炎免疫药物,有待进一步研究。     

运动损伤后人膝关节液促炎细胞因子动态趋势

为观察运动损伤对人体膝关节液中促炎细胞因子的影响,本研究选取2013年6月至2016年6月贵州省骨科医院收治的膝关节运动损伤患者180例作为观察组,观察组分别于运动损伤发生1周、2周、3周和4周后,穿刺取膝关节液,采用ELISA法检测膝关节液中的IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α等促炎细胞因子含量水平。选取同时期于该院进行体检的健康个体180例作为对照。和正常组相比,观察组运动损伤后1、2、3、4周IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α含量水平均显著高于对照组(p0.05)。正常组IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α水平随着时间推移无显著变化;而观察组运动损伤发生后,随着时间的推移,IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α含量水平先急剧升高后缓慢降低。综上所述,运动损伤造成膝关节液中的促炎细胞因子分泌量增加;随着病情逐渐好转,促炎细胞因子分泌量减少。本研究为运动损伤的临床诊断、治疗和预后指导提供参考。     

非洲猪瘟病毒C717R蛋白诱导小鼠炎症应答

【目的】通过炎症应答系统筛选,发现非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV) C717R蛋白可诱导炎症反应,本研究旨在首次鉴定C717R蛋白功能,通过构建C717R重组慢病毒并感染BALB/c小鼠,探究其对炎症应答产生的影响。【方法】通过炎症小体表达系统筛选出诱导炎症应答的C717R蛋白,并构建C717R重组慢病毒。利用C717R重组慢病毒感染小鼠,使C717R在小鼠组织中表达。经实时荧光定量、蛋白质免疫印迹等方法检测C717R慢病毒包装、蛋白表达以及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β的变化。【结果】C717R蛋白在小鼠组织中正常表达。酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测发现,表达C717R蛋白的小鼠,血清中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-β及IFN-γ分泌水平显著升高。实时荧光定量检测表达C717R蛋白的小鼠组织证实,C717R、TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA转录水平显著上调;蛋白质免疫印迹证实,C717R可诱导小鼠不同组织caspase-1和IL-1β的成熟。组织病理切片结果显示,表达C717R蛋白的BALB/c小鼠和对照组和相比,肝脏、心脏、肺脏等器官炎性细胞浸润程度较对照组更严重。【结论】ASFV的C717R蛋白表达诱导BALB/c小鼠产生炎症应答,为鉴定和阐明C717R蛋白介导的促炎新机制提供了重要依据。     

白介素1β抑制培养的大鼠皮层神经元钠电流峰值和动作电位幅度

白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)是重要的促炎细胞因子,在中枢神经系统的生理学和病理学过程中发挥关键作用。电压门控钠通道是可兴奋细胞电学活动的基础,控制神经元的兴奋性和动作电位。最近的研究又显示了IL-1β与电压门控通道之间的相互作用。为考察中枢神经元中IL-1β与电压门控钠通道之间的相互作用,本研究使用10ng/mL的IL-1β处理培养的大鼠皮层神经元24h,通过电压钳技术测定电压门控钠电流,结果表明IL-1β处理抑制钠电流幅度,但不改变其激活和失活性质。与电压钳记录结果相一致,电流钳记录表明IL-1β降低动作电位幅度但不影响阈值。这些结果显示长时间的IL-1β处理可以抑制电压门控钠电流,这种抑制作用减小了动作电位幅度,这可能改变神经元的电学性质、突触传导等基本功能,并提示了IL-1β在神经系统损伤和疾病中作用的新的思路。     

EV-A71感染小鼠巨噬细胞诱导促炎细胞因子和趋化因子反应

为初步探索EV-A71在小鼠巨噬细胞中的复制情况和抗病毒的固有免疫应答,本文以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为细胞模型,通过建立EV-A71绝对定量qPCR方法检测EV-A71病毒载量;EV-A71和紫外灭活的EV-A71感染RAW264.7,不同时间点提取总RNA,RT-qPCR检测促炎细胞因子、趋化因子和模式识别受体的mRNA表达变化水平。本研究成功建立了EV-A71的绝对定量qPCR检测方法,并发现EV-A71感染RAW264.7后随着感染时间的延长,EV-A71病毒载量呈递减趋势;EV-A71和紫外灭活的EV-A71可以引起IL-1β、IL-6、TNF-α促炎细胞因子和IP-10、MCP-1、MIP-1α趋化因子反应,上调TLR2、TLR1、TLR6、MDA5和RIG-I mRNA表达。研究结果显示,EV-A71在小鼠巨噬细胞中具有较低水平的复制,同时产生促炎细胞因子和趋化因子反应。     

白介素1β对大鼠皮层神经元钠电流的急性作用

白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)是重要的促炎细胞因子,在多种中枢神经系统的损伤和疾病过程中发挥关键作用。电压门控的钠通道是神经元中最重要的离子通道之一,是产生再生性动作电位的基础,决定了神经元的兴奋性等电学性质,也与多种中枢疾病过程相关。然而,现在还没有直接关于IL-1β与中枢钠通道的相互关系的研究。在该研究中,使用全细胞膜片钳记录测定了IL-1β对培养的皮层神经元钠电流的急性作用,并分析了由此对动作电位的影响。结果显示,IL-1β对钠电流幅度只有较小的抑制,而显著降低钠通道的半激活电压,不改变激活的斜率因子和失活性质,这个作用引起动作电位阈值显著降低。这些结果提示在损伤和疾病过程中,快速释放的IL-1β可能会增加神经元兴奋性,从而恶化神经损伤过程。     

白细胞介素-37与风湿性疾病

白细胞介素(interleukin,IL)-37是近期发现的一种细胞因子,共有a~e五种不同的亚型,IL-37b是目前研究的热点。IL-37可抑制体内多种促炎细胞因子的表达及增强抗炎细胞因子的活性。近期研究发现,IL-37在风湿性疾病中起到重要作用,但其具体作用机制尚不完全清楚。本文主要综述IL-37的生物学功能及其在风湿性疾病中的作用,旨在为风湿性疾病发病机制和诊断积累基础理论资料。     

桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺细胞中的IL-1β和TNF-α表达的影响

探讨炎性细胞因子在慢性支气管炎小鼠肺细胞中的表达及桔梗皂苷(kikyosaponin,KS)治疗慢性支气管炎的作用机制。将50只健康小鼠分成正常对照组、模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常对照组外,其余四组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢性支气管炎模型,然后分别用药物进行治疗。实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,HE染色光镜观察支气管和肺组织病理形态的变化;免疫组化分析肺细胞中IL-1β和TNF-α的表达。Western blot检测肺组织中IL-1β和TNF-α的表达。免疫组化检测显示,与正常对照组相比,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达非常显著。在连续用药30天后,与模型组相比,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。蛋白印迹术检测显示,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达水平明显增加,与正常对照组比较,差异十分显著(P<0.01)。而连续用药30天后,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达量明显下降,且呈较好的量效关系。结果表明,桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺组织中炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的表达有明显的抑制作用。推测其作用机制可能是通过抑制肺组织中炎性细胞因子和自由基的生成而达到抗炎、止咳平喘作用的。     

不同麻醉方法对肝癌手术患者炎性细胞因子基因表达的影响

目的:探讨不同麻醉方法对肝癌手术患者外周血炎性细胞因子基因表达的影响。方法:选择肝癌手术患者48例,随机分为单纯全麻和全麻复合硬膜外麻醉两组,在麻醉前和麻醉后4h抽取静脉血,Trizol法抽提RNA,RT-PCR检测IL-1β、IL-6、IL-8的TNF-α的mRNA表达水平。结果:麻醉前两组患者间外周血炎性细胞因子基因表达无差别,麻醉4h后全麻组外周血IL-1β、IL-6、IL-8的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),并高于联合组(P<0.05)。结论:不同麻醉方法对细胞因子的分泌会产生不同的影响,单纯全麻将增强肝癌手术病人外周血炎性细胞因子基因的表达。     

秦岭滑蜥断尾再生伤口愈合阶段细胞因子的时空分布特征

细胞因子参与免疫应答、介导炎症反应,进而在损伤组织的再生修复过程中发挥调控作用。通过切割法建立秦岭滑蜥（Scincella tsinlingensis）断尾再生模型,针对伤口愈合阶段,采用免疫组织化学方法检测促炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-1受体1(IL-1R1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和抗炎细胞因子白细胞介素-10(IL-10)的组织细胞定位及表达变化。结果显示：6种细胞因子在断尾脊髓和椎骨中的骨系细胞中均呈阳性。断尾创面组织及其附近鳞片下方真皮层中IL-6阳性细胞数量先增加后减少,断尾后3 d达峰值194.3±24.9。断尾后3 d,创面IL-8阳性细胞数目为107.7±12.7,超过真皮层的43.7±9.1。IL-1β和IL-1R1阳性细胞数量先增后减,伤口部位的阳性细胞明显多于真皮层（P<0.05）。TNF-α阳性细胞由0.5 d的126.3±35.0增至3 d的190.3±12.1。IL-10阳性细胞断尾后总体呈现先增后减的趋势,断尾后0.5 d伤口部位阳性细胞达201±17.8,显著...     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯抑制脂多糖诱导的巨噬细胞促炎因子TNF-α和IL-1β基因表达

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物学特性,但对巨噬细胞中表达TNF-α及IL-1β的报告尚存在争议.本文旨在探索EGCG对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β基因表达的影响.MTT结果显示,0~100μmol/L EGCG对RAW264.7细胞活力没有影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA分析显示,1 mg/L LPS可显著升高小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞Tnf-α和Il-1βmRNA和蛋白水平,EGCG单独处理对巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成没有影响,但可以抑制LPS诱导的巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成,并存在剂量依赖效应.上述结果提示,EGCG可以剂量依赖方式抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β的表达,这可能与EGCG的抗炎效应有关.     

白介素-1β诱导关节软骨细胞凋亡的分子机理

骨关节炎(OA)是一种退行性病变,表现为局限性、进行性关节软骨破坏及关节边缘骨赘形成,并伴有不同程度的滑膜炎症。软骨细胞是成熟关节软骨中唯一的细胞类型,它负责细胞外基质的合成和更新,并维持基质的完整。目前OA的发病机制尚不明确,但越来越多的研究发现致炎细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)起着重要的作用。IL-1β能诱导软骨细胞凋亡,其机制有一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等途径。IL-1β也是OA病变进展中破坏软骨细胞代谢平衡的主要细胞因子之一。对IL-1β诱导关节软骨细胞凋亡的分子机理的深入研究,将有助于新药的研发和骨关节病的治疗。     

白介素-17A在小鼠慢性胰腺炎中的作用研究

目的:研究白细胞介素-17A在小鼠慢性胰腺炎模型中的表达及其对小鼠星状细胞的影响。方法:建立雨蛙肽诱导的小鼠实验性慢性胰腺炎动物模型,利用实时荧光定量PCR、ELISA、免疫组化和Western-blot等手段检测白介素-17A在雨蛙肽诱导的小鼠慢性胰腺炎模型中的表达变化及免疫活性。用重组白介素-17A作用于小鼠胰腺星状细胞,检测其对星状细胞活化的作用,并进一步探究其对促胰腺纤维化炎症因子白介素-6、白介素-1β、TGF-β在mRNA水平的表达变化。结果:慢性胰腺炎胰腺组织中白介素-17A受体IL-17RA及IL-17RC mRNA水平的表达较正常胰腺明显升高,慢性胰腺炎小鼠胰腺组织中IL-17A蛋白水平较正常小鼠明显升高,CP小鼠血清中IL-17A蛋白水平(56.40±10.50 pg/L)较NC组(27.88±5.74pg/L)亦明显升高,IL-17A在正常胰腺组织中鲜有表达(8.9±2.72%),而在CP组织中呈强阳性表达(55.84±5.71%),其免疫活性主要定位于间质炎性细胞及导管样复合体中;重组白介素-17A可促进小鼠星状细胞活化,并直接诱导星状细胞表达白介素-6、白介素-1β以及TGF-β等促纤维化细胞因子。结论:白介素-17A在雨蛙肽诱导的小鼠慢性胰腺炎模型中表达上调,并可能通过诱导小鼠星状细胞表达促炎细胞因子白介素-6、白介素-1β和TGF-β,促进胰腺星状细胞活化以及胰腺纤维化。     

不依赖IL-15的人类NK细胞的体内稳态

<正>IL-15是一种促炎细胞因子,在NK细胞的发育和活化作用中起重要作用,IL-15是炎性疾病治疗的潜在靶点。用IL-15-和IL-15R基因敲除的小鼠进行研究,证明了IL-15是维持NK细胞稳态的一种重要细胞因子,与基因改良小鼠的信息相吻合,作者证明了用小鼠抗-鼠IL-15单克隆抗体(M96)来中和IL-15的确减少了C57BL/6小鼠的NK细胞数量。针     

趋化因子CXCL10在心肌细胞及巨噬细胞中的表达机制

目的探讨心肌缺血-再灌注损伤中趋化因子CXCL10的产生机制。方法分别用LPS、H2O2、Ca2+载体A23187刺激原代培养的心肌细胞、骨髓来源的巨噬细胞或二者混合培养的共培养系统后,ELISA检测培养基上清中的趋化因子CXCL10和促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,观察其表达动力学。结果①大剂量(10μg/mL)的LPS刺激心肌细胞主要产生趋化因子CXCL10;刺激骨髓来源巨噬细胞主要产生促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α。②H2 O2、Ca2+通道激活剂并不能使产生趋化因子CXCL10或IL-1β、IL-6、TNF-α这些促炎性细胞因子。③骨髓来源的巨噬细胞促进心肌细胞表达趋化因子CXCL10;心肌细胞促进骨髓来源的巨噬细胞表达IL-6、TNF-α,但抑制IL-1β的表达。结论心肌细胞是心肌缺血-再灌注损伤中CXCL10潜在的细胞来源;CXCL10的表达,主要依赖于TLR4的激活。