酿酒酵母原生质体的融合

原生质体融合技术开始于动植物细胞,特别是Willin等报道了PEG有助于高等植物细胞原生质体融合以后,这一技术广泛地应用于植物、微生物原生质体的融合和动物细胞的融合。原生质体的制备、培养、融合和发育为研究细胞分化、膜结构与功能、定向育种等生物学     

植物原生质体培养方法

1　植物原生质体培养的简史植物细胞原生质体 ,在植物学上指植物细胞通过质壁分离后 ,可以和细胞壁分开的那部分细胞物质。原生质体分离纯化后 ,须在适当的培养基上应用适当的培养方法 ,才能再生细胞壁 ,并启动细胞持续分裂 ,直至形成细胞团、长成愈伤组织或胚状体、分化和发育成苗 ,最终再生完整植株。其中 ,选择合适的培养方法始终是原生质体培养中最基础也是最关键的一环。植物原生质体培养方法起源于植物单细胞培养方法。早在 190 2年 ,Haberlant通过实验就预言 :体外培养单个细胞可通过其分裂得到培养组织。直到 1954年 ,植物单细胞培…     

二百种植物叶片细胞机械分离试验

自从 Chayen 用果胶酶分离植物细胞以来,接着 Cocking 使用纤维素酶从植物细胞分离原生质体的研究。植物细胞以及原生质体培养已经应用于细胞工程技术领域。但是在植物细胞培养和植物学教学工作中,通常需要从植物组织中分离出一定数量活的     

原生质体培养研究取得重要进展

中国科学院上海植物生理研究所在原生质体培养研究中又取得重要进展,最近在国内外首次培养成功高粱、野生大豆和小米等一批完整再生植株。这一植物生物工程研究工作的可喜进展,为进一步利用原生质体进行遗传操作和培育新品种的研究提供了重要技术。植物原生质体,即除去细胞壁的裸露细胞,利用它可以导入外源遗传物质,开展细胞杂交等植物遗传和培育良种研究。国内外众多科学工作者,对重要禾本科和豆科作物原生质体培养研究已引起很大重视。     

影响谷子原生质体看护培养的一些因素

研究了谷子原生质体看护培养中的一些问题。结果表明：不同种植物愈伤组织做看护细胞对谷子原生质体培养植板率有不同的影响。用光头种草愈伤组织对谷子胚性、非胚性或中间型意伤组织的原生质体进行看护培养,以对胚性意伤组织原生质体的效果最好。看护培养主要是作用于原生质体形成完整细胞后的生长发育。试验没有观察到明显的看护细胞数量效应。     

影响谷子原生质体看护培养的一些因素

研究了谷子原生质体看护培养中一些问题。结果表明：不同种植物愈伤组织做看护细胞对谷子原生质体培养植板率有不同的影响。用光头稗草愈伤组织对谷子胚性、非胚性或中间型愈伤组织的原生质体进行看护培养,以对胚性愈伤组织原生质体的效果最好。看护培养主要是作用于原生质体形成完整细胞后的生长发育,试验没有观察到明显的看护细胞数量效应。     

棉花原生质体再生小植株

80年代植物原生质体培养取得突破性进展,水稻、小麦、玉米和大豆等重要农作物先后获得再生植株。但棉花原生质体培养至今仍停留在细胞分裂和形成细胞团阶段,原生质体培养得到愈伤组织仅有一例。本文首次报道从陆地棉柯字棉312品种的细胞悬浮培养系原生质体培养获得再生小植株的试验结果。     

植物防御反应与原生质体培养技术的改进

介绍了脱壁酶分离原生质体操作过程中,植物细胞防御反应的发生及其对原生质体分离与早期阶段培养的影响;阐述了原生质作早期阶段培养的实质是遭受机械、生理损伤的植物细胞完成其自身修复的过程;并对改进原生质体培养技术进行了分析。     

植物细胞基因工程研究的现况和问题

现代生物学无论在理论上和方法上所取得的突飞猛进发展正给植物科学以巨大的推动。由于植物细胞培养、突变体选择、原生质体和细胞融合等方面的研究迅速进展,以及DNA分子体外重组和基因无性繁殖等技术的引入,已使利用培养的原生质体或细胞作为实验系统,来进行植物细胞的遗传操作成为     

植物原生质体培养和细胞杂交研究的近况

近廿多年来植物原生质体研究不仅已成为细胞生物学与生物工程中发展较快的一个分支;而且通过多方而探索普遍承认了原生质体做为生物试验系统的巨大潜力,在生理学、遗传学、病理学、病毒学和育种学等研究中都得到应用。植物原生质体培养和细胞杂交是其中的重要组成部分,本文简介有关的进展。     

一种简易的植物原生质体计数方法

植物原生质体培养和植物细胞悬浮培养是作物遗传改良、次生代谢物生产以及生物学基础研究中的常用技术。统计原生质体培养中的培养密度 (一般每ｍｌ培养液中应达到 10 4 ～ 10 6 个细胞 )和活力对实验的成功与否是很重要的[1] 。由于植物原生质体 ,尤其是由愈伤组织而来的原生质体直径比较大 ,用常规的血球计数板统计原生质体数存在一定的问题。如现在实验室一般采用的血球计数板为上海医用光学仪器厂的产品 ,其槽的深度为 0 .1ｍｍ ,“井”字形中央区的 2 5个大格中的液体体积只有 0 .1μｌ(0 .1ｍｍ× 1ｍｍ× 1ｍｍ) ,而要求其中的细胞数…     

第八讲 植物原生质体培养

一、前言植物原生质体就是除去细胞壁以后的裸露细胞。英国植物生理学家Cocking(1960)首先用酶解的方法降解番茄根尖的细胞壁,获得大量而完整的原生质体。植物原生质体可直接从植物各种器官、如根、茎、叶、花、果实的细胞中获得,也可以从培养细胞中获得。一般认为由叶肉组织分离的原生质体遗传性状较一致。而一般     

植物原生质体融合

植物细胞一般都包被一层坚硬的细胞壁,除某些例外,细胞壁能阻止细胞质膜间的相互接触,因而细胞间不能融合。随着适用于溶解细胞壁的酶类的开发和无壁细胞(原生质体)的产生,现已能克服这一限制植物细胞融合的困难。将不同来源的原生质体融为一体以创造新的体细胞杂种,这不仅为体细胞遗传学研究提供了新机会,还为植物的遗传操纵提供了新方法,这在目前具有更大的实际意义。现在已可以从一系列典型植物种和农作物种分离出原生质体。原生质体可培养在合适的     

植物生物技术讲座（二）：——原生质体培养与作物改良

植物生物技术讲座（二）──原生质体培养与作物改良秦明波（北京师范大学生物学系１００８７５）云月（北京植物细胞工程实验室１０００８１）原生质体没有细胞壁,可广泛应用于胞壁再生、细胞膜的离子运转、病毒侵染机理、收集细胞器和大分子等基础研究。本文仅就原生质...     

高等植物原生质体形态和生理研究的进展

原生质体研究是二十多年来在细胞生物学中比较活跃的领域之一。由于它涉及了生物学上许多基本问题,在实际应用上有较大潜力,因此引起多方面的注意。原生质体研究所涉及的对象有细菌、真菌、低等植物和高等植物。近几年来高等植物原生质体研究有不少进展,但注意力多半集中在离体培养、全能性表达和利用它进行各种细胞操作与遗传操作上、对原生质体特性的研究工作较少。应当说,深入了解原生质体的形态和生理特性是进     

植物原生质体在分子细胞生物学研究中的应用

植物原生质体是去除了细胞壁的裸露细胞,其具有细胞全能性,现广泛应用于植物分子细胞生物学的研究中,可以大大缩减实验周期,并有助于得到体内实验的实时检测数据。该文除了介绍植物原生质体的提取和纯化方法外,还对国内外利用各种植物的原生质体进行细胞瞬时转化、亚细胞定位、细胞融合和大分子复合物相互作用等试验进行了总结和讨论。植物原生质体还可用于基因表达模式的实时检测,并作为生物反应器的受体细胞进行代谢物的体外生产。此外,还对当前该技术所面临的瓶颈进行了分析,为植物原生质体在分子细胞生物学领域的应用提供帮助,为技术的优化和推广提供参考。     

第九讲 植物原生质体融合和细胞杂交

近二十年来由于植物组织和细胞培养理论及技术的进展,促使植物细胞生物学中某些研究和应用方面有所突破。其中比较主要的一个方面是:原生质体的分离、培养、融合、再生完正植株。这一方面已有不少综述和评论。本文着重介绍近年来原生质体融合和细胞杂交研究的进展,并讨论有关的某些问题。     

烟草原生质体微滴培养及细胞早期分裂的定点观察

原生质体培养的常规技术是群体培养。而建立单个(或少数)原生质体培养技术则可以跟踪每一原生质体的动态变化与研究不同类型原生质体之间的相互关系,从而使有关的细胞生物学研究更加精确深入;还可以有选择地单独培养细胞融合体、突变体、转化细胞等遗传操作     

植物细胞融合技术的研究概况

细胞融合是新崛起的一项细胞工程技术。这项工作的研究已经成为当今细胞生物学中十分活跃的领域之一。它已经在不断地向着实际应用方面迈进。植物细胞融合是指人工的方法用纤维酶、果胶酶等酶作用于植物组织,并将获得的原生质体通过聚乙二醇等诱导融合剂使相邻原生质体融合在一起。然后,经过原生质体培养、细胞壁再生、愈伤组织形成,最后培育成再生植物。1972年获得了     

豆科植物的体细胞杂交

包括许多重要粮食和饲料作物在内的豆科植物的体细胞杂交研究已有20多年历史。早在70年代，Kao等[15]即利用豌豆、大豆原生质体与其它植物原生质体进行融合，观察到可以分裂的大豆（＋）豌豆、玉米（＋）大豆、小麦（＋）大豆异核体，大麦和大豆融合细胞最后形成细胞团，同时指出核融合发生在融合后的第一次分裂过程中。1974年，Kartha等[16]将大豆（Glycinemax）悬浮培养细胞原生质体与油菜原生质体融合，也得到细胞团。1976年，Constabel等[10]得到了大豆悬浮培养细胞与豌豆、Viciahajastana（一种野豌豆）、烟草、番红花叶肉细胞原生质…