双歧杆菌协同TIL细胞体内杀瘤活性的研究

本研究应用从小鼠Ｓ１８０癌性腹水分离诱导的ＴＩＬ癌内注射与活的双歧杆菌腹腔内注射共同治疗荷Ｓ１８０实体瘤小鼠,结果表明单用ＴＩＬ和ＴＩＬ合用ＩＬ－２早期抑瘤效果,能延缓肿瘤的发生和发展,而晚期抑瘤效果尚不及单用双歧杆菌组。ＴＩＬ与双歧杆菌、ＴＩＬ、双歧杆菌及低剂量ＩＬ－２,荷瘤早、晚期抑瘤效果均较好,且毒副作用低,表明双歧杆菌有可能通过刺激机产生内源性ＩＬ－２维持ＴＩＬ的生物学活性从而协同ＴＩＬ细     

双歧杆菌及其发酵液的抗肿瘤机制的研究

目的 通过比较双歧杆菌及其发酵液的抗肿瘤作用,对其抑瘤作用和相关机制进行初步探讨。方法 取BALB／c小鼠,分别予H22细胞和S180细胞腹腔荷瘤,荷瘤后给予不同的治疗。分别观察2种肿瘤细胞荷瘤小鼠的生存期。右腋下荷瘤后,进行病理切片观察。MTT法计算给予不同方法后的抑瘤率。并计算淋巴细胞转化率。制备电镜标本。观察其超微结构。结果 双歧杆菌死菌液、活菌液能够延长荷瘤小鼠的生存期,而双歧杆菌发酵液不能延长其生存期,病理切片可见作用后的肿瘤组织内部和间质有大量炎性细胞浸润。双歧杆菌死菌液、活菌液对肿瘤细胞株有抑杀作用。电镜观察死菌液作用后的H22细胞可见典型的凋亡表现。结论 双歧杆菌死菌液、活菌液在体内外均有较好的抑瘤作用,其发酵液并未显示出抑瘤作用。说明双歧杆菌的抗肿瘤作用主要来源于菌体的作用。     

微生物防治癌症研究

日本信州大学和东京药物大学研究人员利用转基因技术开发一种双歧杆菌(Bifidobacterium)其生命活动能断切癌细胞的营养供应,进而抑制肿瘤组织的生长,这项技术将可用于治疗癌症。双歧杆菌是人体肠道中的常见细菌,易在缺氧环境中生存,而乳房和胸部癌症组织的内部就属于缺氧状态,     

双歧杆菌在家兔实验性肝坏死模型中的靶向增殖研究

目的 探讨双歧杆菌在海扶超声聚焦刀（HIFU）制作的肝凝固性坏死模型中的靶向性增殖的可能性。方法 用HIFU制作成家兔肝凝固性坏死模型,经耳缘静脉注射两歧双歧杆菌活菌,通过检测注射前后家兔体温、红细胞、白细胞和血小板等生理指标的变化和注射后主要器官的组织切片来评价双歧杆菌作为基因治疗载体系统的安全性,同时对肝坏死模型等组织切片还做了革兰染色检测,证明了双歧杆菌在坏死组织中的增殖。结果 双歧杆菌能够在HIFU制作的肝凝固性坏死模型中增殖、而这一增殖过程并不影响家兔的生命安全。结论 双歧杆菌作为肿瘤基因治疗的靶向载体系统是安全和可行的,HIFU制作的肝坏死模型可以用于双歧杆菌基因治疗的靶向载体系统的辅助研究。     

大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭载体的构建及PTEN在长双歧杆菌中的表达

长双歧杆菌可特异地定植于实体瘤低氧区,可用做肿瘤靶向性基因治疗的载体,而构建大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭质粒则被证明是外源基因在长双歧杆菌中稳定表达的有效途径。为了构建能在长双歧杆菌中稳定表达外源基因的穿梭质粒并检测携带抑癌基因的工程菌对小鼠实体瘤的抑制效果,利用软件设计并合成了48条部分序列相互重叠的引物,通过PCR合成了长双歧杆菌质粒pMB1序列及长双歧杆菌HU启动子区序列,插入克隆载体pMD18-T,构建穿梭载体pMB-HU,该载体可在大肠杆菌DH5α及长双歧杆菌L17中稳定复制。PTEN基因编码具有蛋白质和酯类双重特异性磷酸酶活性的抑癌因子。将PTEN基因cDNA序列插入载体pMB-HU中HU启动子下游,构建重组质粒pMB-HU-PTEN,电击转化长双歧杆菌后,Western blot检测表明,表达产物中存在55kDa的PTEN蛋白特异条带。抑癌试验表明:与对照组相比,携带PTEN基因的长双歧杆菌可显著抑制小鼠实体瘤的生长。上述结果为以长双歧杆菌为载体的实体瘤靶向性基因治疗研究奠定了基础。     

婴儿肠道双歧杆菌种群多样性分析

使用分子生物学方法,对4例出生时间为17～120h婴儿的肠道双歧杆菌种群多样性进行分析。肠道中剖腹产婴儿在出生17h后,双歧杆菌就已定植;另外,婴儿肠道中双歧杆菌群有短双歧杆（Bifidobacterium breve）和长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）,分别占双歧杆菌种群的65％和35％。     

双歧杆菌的厌氧机理及其基因调控

自从 18 99年法国学者 Tissier发现双歧杆菌以来 ,至今已有 10 0多年历史。研究表明 ,双歧杆菌是人体肠道菌群的重要组成部分 ,是人体肠道中主要的生理性细菌。有关双歧杆菌的生理功能的研究已经有很多的报道 ,也取得了巨大的研究成果。然而 ,由于双歧杆菌是专性厌氧的、革兰阳性细菌 ,对营养要求比较严格 ,生产操作比较困难 ,极大地限制了它在食品中的应用。目前对双歧杆菌的分子生物学研究比较滞后 ,双歧杆菌的厌氧机理还不是十分清楚 ,因此制约了从分子水平上对双歧杆菌进行研究。本文就双歧杆菌的厌氧机理和基因调控方面的最新研究情况…     

耐氧双歧杆菌rDNA ISR序列测定及特征分析

目的 对4种耐氧双歧杆菌16S-23S rDNA ISR序列进行克隆和序列分析。方法采用凝胶分离PCR产物的方法。结果长双歧杆菌和短双歧杆菌16S-23S rDNA ISR序列一致,全长568个碱基对;青春双歧杆菌与婴儿双歧杆菌序列一致,全长510个碱基对。通过19种双歧杆菌和4种耐氧双歧杆菌ISR序列分析表明,该序列中含有一个保守的特征序列,可作为双歧杆菌属的分子标记,此外还含有3个基因高变区,可用双歧杆菌种间分子鉴定的基础。结论对23种双歧杆菌聚类分析表明,耐氧双歧杆菌ISR序列已发生改变,为进一步研究双歧杆菌在有氧条件下进化机制奠定了基础。     

激活蛋白1在双歧杆菌预防大肠癌生长中的作用

目的 :探索青春型双歧杆菌体内预防大肠癌的机制。方法 :首先建立大肠癌裸鼠移植瘤动物模型 ,将实验动物分为双歧杆菌预防组和肿瘤对照组 ,以激光共聚焦显微镜定量检测了大肠癌组织激活蛋白1(AP-1)中的 c-fos和 c-jun的含量。结果 :双歧杆菌预防组大肠癌移植瘤 c-jun和 c-fos的含量均明显低于肿瘤对照组 (P<0 .0 1)。结论 :青春型双歧杆菌可通过降低大肠癌移植瘤组织 AP-1中的 c-jun和 c-fos的表达这一途径来预防大肠癌的生长     

双歧杆菌的遗传学分类方法研究进展

双歧杆菌(Bifidobacterium)是人和动物肠道内最主要的生理性细菌之一,在微生态学上属于原籍菌群,它与其它生理性细菌成员构成一个微生物群落,并与宿主构成一个微生态系统。因为双歧杆菌具有维持微生态平衡、生物拮抗、免疫调节、营养等多方面的生理功能,所以双歧杆菌被开发成微生态制剂广泛应用于医疗、保健、食品等并已成为微生态制剂的核心。目前双歧杆菌可分为32个种型[1]。其中已用于微生态制剂的生产菌种有两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌和青春型双歧杆菌等。自从1899年Tissier发现双歧杆菌至今,双歧杆菌的分类…     

双歧杆菌及微生态制剂

自 Tissier于 1899首先发现双歧杆菌 (Bif idobacterrium)以来 ,双歧杆菌及其制品与人们的日常生活间的关系日趋紧密。已报道双歧杆菌属的 3 2个种 [1]栖居于人和动物 (牛、羊、兔、鼠、猪、鸡和蜜蜂等 )的肠道、反刍动物的瘤胃、人的齿缝和阴道等部位。其中除齿双歧杆菌可能是病原菌外 ,其他种尚无致病性的报道。近年 ,含有一定数目活菌的微生态制剂的研究取得了很大的进展 ,尤其是含有双歧杆菌的微生态制剂。据19 94年统计 ,国内约有 60多种含双歧杆菌的产品投入市场。在国外 ,含双歧杆菌的食品也十分流行 ,特别是在日本、欧洲和北美。据…     

双歧杆菌固定化的研究

双歧杆菌固定化的研究杨基础,刘佳（清华大学化学工程系,北京１０００８４）目前市场上的大多数双歧杆菌产品活菌量很低,保存不到一个月就全部死亡,这是当前亟待解决的问题之一。本文对双歧杆菌的固定化进行了研究,旨在提供一种制备高活性双歧杆菌片剂或胶囊的新方法...     

双歧因子对双歧杆菌增殖的影响

应用含有不同浓度的双歧因子(微维乐)的培养基对双歧杆菌进行了定性、定量观察。其结果表明,微维乐对双歧杆菌有明显的促进作用;在双歧杆菌制剂的生产过程中,添加一定量的微维乐,不仅可以提高双歧杆菌收率,而且还可以缩短菌种发酵时间。最佳添加量为1.5%,最佳发酵时间为1.5 h。     

双歧杆菌对改善胃肠道功能的研究现状与展望

自从１８９９年Ｔｉｓｅｒ首次从母乳婴儿粪便中分离出双歧杆菌近一百年历史中,国内外学者便对其进行了广泛的研究,发现双歧杆菌是正常人肠道中的优势菌,对人体微生态平衡有巨大作用,特别是在改善胃肠道功能方面,创造了细菌学上极其辉煌的篇章。下面就对双歧杆菌改善...     

一株双歧杆菌质粒聚合酶基因的PCR扩增和鉴定

目的PCR扩增人双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因。方法用改良型MRS双歧杆菌选择培养基,从人新鲜粪便分离长双歧杆菌,PCR扩增长双歧杆菌质粒聚合酶(Bifidobacterium plasmid polymerase,BPP)基因,对BPP基因检测阳性的PCR产物通过序列分析,进行鉴定。结果人长双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因PCR扩增后,经1.0%琼脂糖凝胶电泳,测得BPP基因的相对分子质量约为1.9 kb。通过BLAST序列比对分析与GenBank中相应基因同源性为96%。结论成功克隆了1株双歧杆菌天然质粒的聚合酶基因,为构建与双歧杆菌宿主质粒相适应的载体奠定了基础。     

双歧番茄醋的实验研究

目的以番茄为主要原料,对双歧杆菌和醋酸杆菌共同发酵研制双歧番茄醋的工艺进行研究。方法通过正交试验筛选最适工艺。结果双歧番茄醋的最终醋酸度为27 g/L,含双歧杆菌总菌为1.9×1011CFU/mL,5 d内双歧杆菌活菌为5.5×107CFU/mL。双歧番茄醋棕黄色,光泽度好,有成熟番茄香味,入口酸甜适中。结论双歧杆菌与醋酸杆菌在可以番茄汁中共生,此方法制备双歧番茄醋可行。     

婴儿肠道双歧杆菌多样性的研究进展

双歧杆菌是婴儿肠道中最丰富的微生物,对婴儿肠道微生物的成熟和稳定有显著影响,与婴儿健康紧密相关。大量研究表明,婴儿肠道中最广泛存在的双歧杆菌有长双歧杆菌、短双歧杆菌和两歧双歧杆菌。母婴之间垂直传递可直接影响婴儿肠道中双歧杆菌各种属的早期定植和相对丰度变化,特别是分娩方式和喂养方式会显著影响婴儿肠道双歧杆菌。此外,胎龄和辅食等因素对婴儿肠道中双歧杆菌的组成与多样性也有一定影响。本文对婴儿肠道双歧杆菌的种属组成、相对丰度变化以及影响其多样性的因素进行了综述,为婴儿双歧杆菌群落的认识提供一定的理论依据。     

双歧杆菌及中药对小鼠血中抗氧化酶,T3,TSH和吞噬细胞功能的影响

本文用双歧杆菌、中药及复方双歧杆菌制剂饲喂ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,发现中药及复方双歧杆菌制剂对老龄鼠血中ＳＯＤ、ＧＳＨ—Ｐｘ活性有明显增高作用,而对ＬＰＯ含量有明显减低作用,双歧杆菌及复方双歧杆菌能增强ＢＡＬＢ／ｃ小鼠内分泌功能及免疫功能,本试验中尚发现双歧杆菌与中药制成的复方双歧杆菌制剂能明显协同促进ＧＳＨ—Ｐｘ及吞噬细胞功能。说明双歧杆菌与一些传统补益类中药具有协同抗衰老作用。     

健康老年人肠道双歧杆菌和乳杆菌种群多样性分析

从31个60岁以上的符合中华医学会老年医学分会健康老年人标准的健康老人中随机选取4例作为研究对象,使用分子生物学方法,对他们的肠道双歧杆菌和乳杆菌种群多样性进行分析.研究结果表明,健康老人肠道中双歧杆菌的优势种群为长双歧杆菌（Bifi∥dobacterium longum）和假小链双歧杆菌（Bifidobacterium pseudocatenulatum）,分别占双歧杆菌种群的55%和45%;而肠道乳杆菌则有唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）50%、Lactobacillus mocosae 31.1%、口腔乳杆菌（Lactobacillus oris）6.3%、鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）6.3%和瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）6.3%,其中唾液乳杆菌、Lactobacillus mocosae为健康老人肠道优势乳杆菌种群.     

双歧杆菌抗体制备方法的探讨

本文对双歧杆菌抗体的制备方法进行了探讨,并建立了检测双歧杆菌抗体的ＥＬＩＳＡ方法。结果表明,采用完整菌体、粉碎菌体、脂磷壁酸粗提物,获得的抗体效价均很低。先用活的卡介苗对动物进行多克隆刺激,再用活的双歧杆菌加福氏不完全佐剂获得的双歧杆菌抗体效价达１：２５６０,该抗体对双歧杆菌属的菌种能起免疫反应,与所试的其它种属细菌无交叉反应。此外,将免疫过双歧杆菌的小鼠用福氏不完全佐剂和ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞诱生腹水,从腹水中测得双歧杆菌抗体效价为１：１０００。此过程类似于单克隆抗体的生产过程,可用于制备大量的双歧杆菌多克隆抗体。