金钗石斛生物碱的组织化学定位研究

利用组织化学定位方法对金钗石斛不同生长年限和不同营养器官的生物碱分布和积累进行比较分析。结果表明,金钗石斛茎生物碱主要分布于基本组织,三年生金钗石斛的生物碱含量高于一年生和二年生金钗石斛。金钗石斛根部生物碱含量同样较多,主要分布于皮层薄壁细胞中;金钗石斛叶片生物碱含量较低,存在于上下表皮细胞中,与铁皮石斛和铜皮石斛完全不同。说明三年生金钗石斛作为最适宜采收期,而且金钗石斛根部具有很好的开发利用价值。金钗石斛叶片表皮细胞中呈现生物碱的原因尚未清楚,需要进一步研究。     

金钗石斛生物碱抗糖性白内障作用及蛋白质组学效应的实验研究

为观察金钗石斛生物碱抗糖性自内障作用及其相关蛋白谱.将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、样品高、低剂量组和阳性对照组,每组10只,模型组腹腔注射D-半乳糖诱导大鼠白内障模型,样品高、低剂量组和阳性对照组在注射D-半乳糖26 d后形成Ⅱ级白内障后每天分别给予0.36、0.18 g/kg金钗石斛总生物碱灌胃进行实验性治疗,阳性对照组每天以0.22 g/kg石斛夜光丸灌胃,正常对照组每天仅灌胃生理盐水;用裂隙灯观察观察晶状体浑浊度;46 d后处死动物后检测晶状体水溶性蛋白、GSH的含量及T-SOD和MDA的活性;使用双向电泳技术提取分离大鼠晶状体总蛋白及糖基化蛋白,分析比较双向电泳图谱,寻找正常组与模型组、生物碱治疗组大鼠晶状体蛋白质组学差异.结果金钗石斛生物碱高剂量组能明显减轻晶状体混浊度,显著升高晶状体水溶性蛋白、GSH含量及T-SOD活性,降低MDA的活性;2-DE获得了较好的大鼠晶状体总蛋白质及糖基化蛋白质的双向电泳图谱,并观察到模型组有大量蛋白质点表达上调或下调或新蛋白,蛋白质糖基化水平升高,给予高剂量石斛生物碱后,大部分达上调或下调蛋白质恢复到正常的水平,糖基化蛋白降低.表明金钗石斛生物碱具有较好的抗糖性白内障作用,并伴随一系列晶状体蛋白质表达水平的改变,其差异蛋白可能参与了晶状体浑浊过程.     

不同光照强度和温度对金钗石斛生长的影响

为了系统地研究不同光照强度下温度对金钗石斛(Dendrobium nobile)生长的影响,在金钗石斛分蘖期,于80μmol·m-2·s-1、160μmol·m-2·s-1、320μmol·m-2·s-1、640μmol·m-2·s-1的不同光强下,各设置5个温度(15℃、20℃、25℃、30℃、35℃)梯度对石斛进行处理。结果表明：石斛的生长与代谢随温度由低到高,表现出弱—强—弱的变化规律;80μmol·m-2·S-1光强下,石斛生长以25～30℃较为适宜;160μmol·m-2·s-1光强下则以20～25℃为适宜温度范围;320μmol·m-2·s-1与640μmol·m-2·s-1的中、强光照下,25℃处理石斛的生长优势尤为明显;不同光强下,石斛鲜重的增长大多以25℃处理更快,繁殖力则以20℃与25℃处理较高,各光强下的MDA含量随温度升高而先降后升,且均以25℃最低;可溶性蛋白质、可溶性总糖及叶绿素含量则表现出随温度由低到高而先增后减的趋势,其含量最高点均出现在25℃左右;净光合速率和叶绿素含量随光强和温度的变化趋势基本一致;各种光强下的暗呼吸速率均随温度升高而增大。因此,在不同的光照条件下,石斛生长的适宜温度均在25℃左右。光温处理引起石斛生理生化过程明显的相应变化表现出：高温和弱光照条件有利于石斛的株高增长,但不利于产量和质量提高;石斛的生长与MDA含量呈显著负相关(r80＝-0.9082、r160＝-0.9816、r320＝-0.8075、r640＝-0.8586),与可溶性糖含量呈一定正相关(r80＝0.7673、r160＝0.8892、r320＝0.8179、r640＝0.9278),并且石斛的生长与可溶性蛋白质含量、叶绿素含量、光合速率之间的变化趋势基本一致。     

6-BA、GA3调控春石斛花芽分化的效应

调查了春石斛假鳞茎封顶和增粗的生长情况,并以不同浓度6-BA、GA₃溶液进行灌根处理,观测其对花芽分化的效应。结果表明,假鳞茎的增粗阶段在9月15日至10月10日,经过约50 d增粗生长,假鳞茎粗度迅速增加。其间,6-BA、6-BA+GA₃处理对春石斛花芽分化有促进作用。3种6-BA浓度作用效果明显,最佳为400 mg/L;6-BA添加低浓度GA₃,对花芽分化有增效作用,其中以6-BA 200 mg/L添加GA₃ 50 mg/L效果最佳。GA₃作用效果不稳定,浓度为25 mg/L时叶片脱落不明显,高于50 mg/L则叶片大量脱落。     

秦巴山区石斛属亲缘关系及金钗石斛遗传多样性ISSR分析

为研究秦巴山区石斛属亲缘关系,利用5条ISSR引物对秦巴地区石斛属植物12个居群的遗传多样性进行了初步探讨。结果表明：（1）UPGMA聚类分析结果显示,金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl）、曲茎石斛（D.flexicaule Z. H. Tsi）和细叶石斛（D.hancockii Rolfe）分别聚为三支,在分子水平上出现了明显的分化,揭示三者是独立物种。（2）金钗石斛种下6个居群可明显分为2支,LJ、MT、YP和WF遗传一致度较近聚为一支;YJ和PT遗传高度一致,遗传距离最近聚在一起。（3）金钗石斛种下居群间Neis总基因多样性（H_t）为0.388,基因分化系数(G_st)为0.934,显示金钗石斛居群间存在较高的遗传分化。研究结果揭示了秦巴山区石斛属植物的亲缘关系,从分子水平上为其鉴定提供了依据,并为金钗石斛的资源利用和遗传改良奠定理论基础。     

太空诱变对金钗石斛光合特性和生长的影响

为了解太空诱变对金钗石斛(Dendrobium nobile)生长发育的影响,对太空诱变和野生金钗石斛的叶片结构、光合特性和生长指标进行了比较研究。结果表明,太空诱变后的金钗石斛叶片较厚,叶气孔密度大、气孔器长轴和短轴长度均变长。两种金钗石斛的光合速率日变化趋势相似,均为双峰型曲线,但太空诱变的净光合速率低于野生的。太空诱变和野生金钗石斛最大净光合速率分别为4.6和6.8μmol m~(–2)s~(–1),光补偿点分别为18.3和12.6μmol m~(–2)s~(–1),光饱和点分别为1180和720μmol m~(–2)s~(–1)。太空诱变和野生金钗石斛的CO_2补偿点分别为100和102μmol mol(–1),CO_2饱和点分别为2215和2090μmol mol(–1)。太空诱变的金钗石斛单茎鲜重和干重均低于野生种,但由于其分蘖数增加,每盆的总生物量反而增加;太空诱变的金钗石斛生物碱和石斛多糖含量显著高于野生种。因此,太空诱变为金钗石斛育种和品质改良提供了新途径。     

诱导子CuSO4对金钗石斛原球茎产石斛碱的影响

为了探究在金钗石斛原球茎培养过程中,添加诱导子CuSO₄对其石斛碱产量的影响,并获得原球茎产石斛碱的优化条件,为后续多因素胁迫金钗石斛原球茎高产石斛碱提供数据支撑。采用液体悬浮培养的方式,研究了诱导子CuSO₄在不同添加时间、不同浓度、添加后不同培养时间3种处理因素对金钗石斛原球茎生物量和产石斛碱的影响。结果表明:添加0.25 mmol/L CuSO₄培养10～20 d,对原球茎的抑制作用强于培养30～40 d,其中培养20 d为最佳添加时间,石斛碱含量最高达29.65μg/g。CuSO₄浓度为0.25 mmol/L时,石斛碱含量最高达35.10μg/g,原球茎生物量也最多,达2.72 g,增殖系数达到了0.36;随着CuSO₄浓度的增加,经不同处理的原球茎抑制程度逐渐增加,原球茎也出现褐化死亡。添加诱导子后培养时间处理因素对原球茎的影响不明显,当培养至20 d时,石斛碱含量最高达29.37μg/g。最优的CuSO₄胁迫条件:在原球茎培养20 d时,加入浓...     

菌根真菌促进金钗石斛的生长及氮利用

菌根在兰科的生命周期和进化史上起着关键作用。兰科中大多数是附生兰,但它们的菌根研究相对缺乏。为了探讨菌根对附生兰的影响,本研究用金钗石斛（Dendrobium nobile）与通过形态学特征和分子生物学鉴定的分属于瘤菌根菌属（Epulorhiza）的s1和胶膜菌属（Tulasnella）的S3真菌共培养。共培养结果表明,S1和S3与金钗石斛形成了共生关系,且不同程度地促进了其生长。15N稳定同位素标记实验证实,S1菌株显著促进了金钗石斛对有机氮的利用,而S3菌株没有显著的促进作用。同时．S1和S3真菌均能提高金钗石斛中石斛碱的含量。研究结果表明,菌根真菌能促进附生兰幼苗的生长、有机氮的利用和次生代射产物的积累。     

多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响

多效唑是一种高效的植物生长延缓剂,通过不同浓度的多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响进行研究。结果表明多效唑能明显提高金钗石斛试管苗再生芽分化的数量,促进再生苗根的分化,提高生根的数量;同时,多效唑能使再生苗的叶片变短,对再生植株有显著的矮化作用,使植株的茎段变粗,抑制根的伸长生长。多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响具有明显的规律性,其作用效果均随着其使用浓度的升高而增强,并在3~4mg/L的范围处达到最强效果,再提高浓度则趋于饱和。     

金钗石斛濒危原因及其野生资源保护

对珍稀濒危植物金钗石斛的生物学特性及其野生资源现状进行了简述,分析了金钗石斛濒危的原因,主要有:金钗石斛自身的生长、繁殖特性及其特殊生境的限制和人为的破坏等方面.并在此基础上提出了野生资源保护的措施.     

外源施加GA和6-BA对棉纤维发育过程中细胞凋亡的影响

主要通过对棉纤维发育过程中的细胞总DNA的生化特征和SOD、MDA和可溶性蛋白三种生理指标的研究,确定了棉纤维发育过程中细胞凋亡的大致时间。通过施加不同浓度的GA和6-BA,我们发现10mg/L的GA能使细胞凋亡出现的时间提前3d左右,而5mmol/L的6-BA能使细胞凋亡出现的时间推迟3d左右,高于以上浓度的植物生长调节剂可能会由于刺激过度,而使细胞的总DNA在凝胶电泳时呈现模糊状条带。以上实验,对未来利用分子生物学手段改善棉纤维品质具有重要的意义。     

外源6-BA对缺镁胁迫下两优培九幼苗的缓解效应

以三叶一心期的两优培九幼苗为材料,比较研究了缺镁及叶面喷施6-BA对缺镁胁迫下两优培九叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、硝酸还原酶(NR)活性,可溶性蛋白含量及细胞膜透性的影响。结果表明:随着两优培九缺镁胁迫程度的加剧,叶绿素含量、可溶性蛋白含量呈下降趋势,SOD、POD、CAT活性呈现先上升后下降的趋势,而细胞膜透性、NR活性则呈现升高的趋势;喷施6-BA对缺镁胁迫具有一定程度的缓解作用。因而可推测外源6-BA可在一定程度上改善由于缺镁而造成的营养缺乏症。     

6-BA和氨基酸对黄瓜子叶离体培养成花的影响

在基本培养基的筛选中,1/2MS培养基中附加0.10 mg·L-16-BA能显著提高离体黄瓜子叶的开花率,White培养基中附加2.00mg·L-1的KT下开花率也有明显提高,但植株矮小、瘦弱,整株变黄,甚至透明化,长势极差.浓度在一定范围的6-BA(0.01～0.50mg·L-1)对黄瓜子叶开花率影响不大,但在高浓度(0.50 mg·L-1)下,植株生长势差,开花迟,低浓度(0.01 mg·L-1)下,生长势较好.相同浓度的L-丙氨酸和L-酪氨酸均明显促进黄瓜子叶开花,且开花早;而甘氨酸对黄瓜子叶开花则有一定的抑制,开花率低.     

NAA和6-BA对蝴蝶兰原球茎增殖的影响(简报)

以"瑞丽美人"蝴蝶兰(Phalaenopsis wilsonii)幼嫩花梗侧芽为外植体诱导原球茎,在附加6组不同浓度植物生长调节剂的MS培养基进行原球茎增殖培养。结果表明,添加6-BA 2.0mg/L、6-BA 0.5mg/L NAA 1.0mg/L、NAA 2.0mg/L的繁殖系数较高,均达4倍以上,其中6-BA 0.5mg/L NAA 1.0mg/L的增殖效果最明显,繁殖系数达4.806;体积大的接种外植体比体积小的繁殖系数高;5%椰乳有利于原球茎增殖。     

6-BA对红掌组织培养中红叶变异的影响

以红掌盆栽品种‘Avo-Gloria’为试材,以MS＋0.2mg·L^-12,4-D为基本培养基,分别在添加1～10mg·L^-16-BA的10种脱分化培养基上,诱导其叶柄外植体产生愈伤组织;再以MS＋2mg·L^-16-BA＋0.2mg·L^-1 NAA为分化培养基诱导分化不定芽;以MS＋0.2mg·L^-1 NAA为生根培养基,从不定芽获得再生植株。结果显示：（1）在MS＋0.2mg·L^-12,4-D＋8～10mg·L^-16-BA的3种脱分化培养基上可产生9%～10%的绿色、质地较硬的愈伤组织;（2）愈伤组织在MS＋2mg·L^-16-BA＋0.2mg·L^-1 NAA的分化培养基上,经6～8次继代培养,可获得3%～7%的不定芽,并可生根长成再生植株;（3）再生植株定植3个月后,有3%～7%植株出现红叶变异,此红叶可终生表现为红色。     

灌浆期喷施6-BA对甜玉米一些生理指标的影响

甜玉米灌浆期喷施不同浓度6-BA后,叶片叶绿素含量、光合速率、比叶重均提高,丙二醛含量和外渗电导率明显降低,籽粒中可溶性糖和维生素C含量均提高.     

外源赤霉素、6-苄基腺嘌呤及矿物质对水培绿豆芽生长的影响

以‘中绿一号’绿豆为原料用水培法制作豆芽,研究赤霉素、6-苄基腺嘌呤和矿物质对其生长的影响,优化绿豆芽营养液的配方。结果表明,使用由100mg·L-1赤霉素、5mg·L-16-苄基腺嘌呤、0.810g·L-1硝酸钾、0.950g·L-1硝酸钙、0.500g·L-1硫酸镁复配而成的营养液可以缩短豆芽生长周期,且培养出的绿豆芽芽长适宜（4.25cm±0.44cm）、根长较短（1.15cm±0.23cm）、轴径较粗（2.78cm±0.16mm）,芽体洁白而脆嫩。     

外源脱落酸和赤霉素对红肉脐橙果肉糖含量的影响

在红肉脐橙幼果期和着色前分2次喷施不同浓度的外源ABA和GA3,研究其对红肉脐橙果肉糖含量的影响.结果表明:10mg.L-1ABA处理显著或极显著提高了果实成熟时的葡萄糖、果糖和总糖含量,50mg.L-1ABA处理极显著提高了果实蔗糖含量,而100mg.L-1ABA处理极显著降低了果实葡萄糖含量;中低浓度的GA3(10、50和250mg.L-1)极显著提高了果实蔗糖含量,10mg.L-1GA3处理对果实葡萄糖和果糖含量无明显影响,但极显著提高了果实总糖含量,50、250和500mg.L-1GA3处理极显著降低了果实葡萄糖、果糖和总糖含量.表明着色前较低浓度的外源ABA处理(10和50mg.L-1)可提高果实中一种或几种糖的含量,而较高浓度的GA3处理(250和500mg.L-1)则严重阻碍了果肉中糖的积累.     

4-PU和6-BA对'汕油523'花生上胚轴愈伤组织诱导及不定芽发生的影响

以'汕油523'花生上胚轴为外植体,研究细胞分裂素4-PU和6-BA对愈伤组织诱导及不定芽发生的效应.结果表明,当MS培养基含有4-PU 0.1mg/L和6-BA4mg/L培育20d时,愈伤组织形成率为100%:0.1mg/L4-PU与适宜浓度的6-BA(1～4mg/L)共同作用,促进上胚轴不定芽发生,不定芽形成与芽伸长的适宜培养基配方分别为MS+4-PU 0.1mg/L+6-BA2mg/L和MS+4.Pu 0.1mg/L+6-BA 4mg/L;0.5mg/L4-PU对不定芽出芽率、芽数与长度的作用均大于其与不同浓度6-BA混合作用的效果.