D1／D2／Cyt—559复合物的共振拉曼光谱

光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９复合物在４８８ｎｍ处激发的共振拉曼谱显示４个主要谱带,其峰位分别在１５３２（ｖｌ）１１６５（ｖ２）１０１０（ｖ３）和９７０（ｖ４）ｃｍ＾－１处,表明ＰＳⅡ反应中心结合的β－胡萝卜素分子是全反式构型。Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９复合物在色素抽提液的拉曼光谱也显示４个主要的拉曼峰,其中ｖ４谱带的强度急剧下降,说明ＰＳⅡ反应中心内部结合的β－胡萝卜素     

D1/D2/Cytb-559复合物的共振拉曼光谱

光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９ 复合物在４８８ ｎｍ 处激发的共振拉曼光谱显示４ 个主要谱带,其峰位分别在１５３２（υ１）、１１６５（υ２）、１０１０（υ３）和９７０（υ４） ｃｍ － １处,表明ＰＳⅡ反应中心结合的β－胡萝卜素分子是全反式构型。Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ－５５９ 复合物的色素抽提液的拉曼光谱也显示４ 个主要的拉曼峰,其中υ４ 谱带的强度急剧下降,说明ＰＳⅡ反应中心内部结合的β－胡萝卜素分子与抽提液中自由的β－胡萝卜素分子的构象不同,而与光合细菌反应中心内部的类胡萝卜素分子的构象相似,其共轭多烯链的平面也处于扭曲状态     

光破坏的光系统Ⅱ反应中心D1／D2／Cytb559复合物的CD光谱

ＰＳⅡ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９ 复合物的圆二色（ＣＤ）光谱在红区有一个反向带，其正峰在６８０ ｎｍ ，负峰在６６０ ｎｍ 处。光破坏后，该反应中心复合物的ＣＤ信号明显下降，而且当正峰完全消失后，负峰仍然存在，说明该反应中心的ＣＤ信号不仅来源于原初电子供体Ｐ６８０，而且可能来源于其它色素分子     

质体醌重组的D1／D2／Cytb559复合物的荧光衰减动力学和光破坏作用

光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９ 在分离纯化过程中失去了电子受体ＱＡ 和ＱＢ,人工合成的质体醌可以与Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９ 复合物发生重组。癸基质体醌（ＤＰＱ）与Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５９９ 复合物的重组导致该复合物的荧光强度下降及发射光谱蓝移,同时两个与光化学活性相关的长寿命（２４ ｎｓ和７３ ｎｓ）荧光衰减组分占整个荧光的百分数下降,这些结果表明ＤＰＱ作为Ｐｈｅｏ－ 的电子受体,限制了Ｐ６８０＋ ·Ｐｈｅｏ－ 的电荷重组。ＤＰＱ 的加入对Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９复合物中Ｃｈｌａ 分子的光破坏敏感性影响不大,但β－胡萝卜素在加入ＤＰＱ 之后可以被光照破坏,这个过程可能与β－胡萝卜素的生理功能相关。     

光系统Ⅱ反应中心CP47/D1/D2/Cyt b-559复合物中色素分子空间取向的线二色光谱研究

线二色光谱(LD)是研究色素分子在光合膜上空间取向和排布的重要手段.采用低温(100K)吸收光谱和线二色光谱技术研究光系统Ⅱ核心复合物CP47/D1/D2/Cyt b-559中色素分子的空间取向.结果表明,在光系统Ⅱ核心复合物CP47/D1/D2/Cyt b-559中680 nm处有吸收的叶绿素分子Qy跃迁与光合膜平面平行.β-胡萝卜素分子有两种不同的空间取向,其中在470和505nm处有吸收的β-胡萝卜素分子(Ⅰ)与光合膜平面近似平行,而在460和490nm处有吸收的β-胡萝卜素分子(Ⅱ)与光合膜垂直.光破坏实验显示垂直取向的β-胡萝卜素分子对强光敏感.680nm处吸收的叶绿素分子成分复杂,可能包含有P680和核心天线CP47蛋白上的色素分子.     

脓青素促进叶绿体中细胞色素b－559的光还原

当脓青素存在时，可以观察到菠菜叶绿体中光诱导的５５９ｎｍ吸收增加。此反应可以被光（波长６５０ｎｍ）诱导，但远红光（波长７２０ｎｍ）则无作用．光暗差示光谱表明被还原的物质为细胞色素ｂ－５５９。脓青素的作用在１μｍｏｌ／Ｌ接近饱和．并且其作用与跨膜质子梯度无关．脓青素所促进的细胞色素ｂ－５５９光还原被抑制剂ＤＣＭＵ和ＤＢＭＩＢ所抑制，但在氰化钾处理过的叶绿体中，脓青素依然促进细胞色素ｂ－５５９的光还原．在ＣＣＣＰ处理的叶绿体中，可以看到低光强红光诱导的细胞色素ｂ－５５９氧化。脓青素可以逆转ＣＣＣＰ的作用；促进细胞色素ｂ－５５９在高光强或低光强下都为红光还原。我们推测脓青素通过质子化作用，影响了细胞色素ｂ－５５９的光氧化还原反应．     

光系统Ⅱ反应中心CP47/D1/D2/Cyt b-559复合物中色素分子空间取向的线二色光谱研究(英文)

线二色光谱(LD)是研究色素分子在光合膜上空间取向和排布的重要手段。采用低温(1 0 0K)吸收光谱和线二色光谱技术研究光系统Ⅱ核心复合物CP47/D1/D2/Cytb_5 5 9中色素分子的空间取向。结果表明,在光系统Ⅱ核心复合物CP47/D1/D2/Cytb_5 5 9中 6 80nm处有吸收的叶绿素分子Qy 跃迁与光合膜平面平行。β_胡萝卜素分子有两种不同的空间取向,其中在 470和 5 0 5nm处有吸收的 β_胡萝卜素分子(Ⅰ)与光合膜平面近似平行,而在 46 0和 490nm处有吸收的 β_胡萝卜素分子(Ⅱ)与光合膜垂直。光破坏实验显示垂直取向的 β_胡萝卜素分子对强光敏感。6 80nm处吸收的叶绿素分子成分复杂,可能包含有P6 80和核心天线CP47蛋白上的色素分子。     

干旱胁迫对黄瓜PSⅡ颗粒铁组分Mossbauer谱的影响

黄瓜（Ｇｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ）叶片ＰＳⅡ颗粒的Ｍｏｓｓｂａｕｅｒ谱呈现４套双峰,依它们的化学位移相四敬矩劈塑数值,分别属于氧化态Ｃｙｔ－ｂ５５９,还原态Ｃｙｌ－ｂ５５９、Ｆｅ＾３＋－Ｑ画物和Ｆｅ＾２＋－Ｑ复合物。干埋胁迫旱影响ＱＡ／ＱＢ中铁（Ｆｅ）参与电子传递的速率,使ＰＳⅡ颗粒的ｏｓｓｂａｕｅｔ谱中Ｆｅ＾２＋的吸收双峰消失,即还原态Ｇ７ｙｔ－Ｂ５５９转变为氧化态Ｃｙｔ－ｂ５５９Ｆｅ＾２     

光下D1／D2／Cytb559复合物中氨基酸残基的破坏和多肽的降解

光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔ ｂ５５９ 复合物对光照十分敏感。不仅色素分子,而且多肽链上的氨基酸残基（如组氨酸和甲硫氨酸）均会受到破坏。光照同时引起Ｄ１ 和Ｄ２ 蛋白的降解。在ＳＤＳ聚丙烯酰胺多肽电泳图谱上,Ｄ１／Ｄ２ 二聚体的含量增多,同时有一条分子量大约为４１ ｋＤ的新带出现。在光照后的暗放置过程中,氨基酸组成不再变化,但Ｄ１ 和Ｄ２ 蛋白的降解及大分子量片段的产生仍继续进行。对组氨酸和甲硫氨酸的破坏与Ｄ１、Ｄ２ 蛋白的降解关系进行了初步的分析,推测在光破坏过程中,Ｄ１ 和Ｄ２ 蛋白也许发生了化学断裂和共价交联作用     

光系统Ⅱ反应中心D1/D2/Cytb559复合物中去镁叶绿素a的光照破坏

高等植物在强光照射下,光合作用受到抑制。光抑制的分子机理已成为目前光合作用研究中最活跃的研究领域之一［１］。由于叶绿体内色素和蛋白分子很多,其中包含有许多与光破坏不直接相关的组分,因此很难确定具体哪个分子受到破坏。用只含少数色素和多肽分子的光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９复合物［２］可以解决这个问题,现已证明用光照射该复合物能引起原初电子供体Ｐ６８０的破坏［３,４］,并且是一个多步反应［５］,同时还发现有组氨酸残基的光照破坏［６,７］,当存在电子受体的情况下反应中心内部β－ｃ…     

光系统Ⅱ反应中心D1/D2/Cytb559复合物中存在一个与光化学活性无关的去镁叶绿素a

紫色光合细菌反应中心的三维空间结构的解析，极大地推动了光合作用电子传递机理的研究。现已清楚光合细菌反应中心内部存在着两条电子传递支路［１—２］，由于高等植物光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１蛋白和Ｄ２蛋白与光合细菌反应中心Ｌ亚基和Ｍ亚基的一级结构具有很大的相似性，推测ＰＳⅡ反应中心内部也可能存在类似的结构。从高等植物叶绿体中分离纯化的ＰＳⅡ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔｂ５５９复合物具有原初电荷分离活性［３］，其中含有４—６个Ｃｈｌａ分子，２个Ｐｈｅｏａ分子，１—２个β－胡萝卜素分子，它们是否像光合细菌…     

D1／D2／Cyt b—559几个不同寿命组分的荧光发射光谱的分辨

菠菜叶绿体光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔ ｂ－５５９复合物的荧光衰减包括４个组分，其寿命分别大约为１．０ｎｓ，５．９ｎｓ，２４ｎｓ和７３ｎｓ，所占整个荧光的量子产率依次为０．０５，０．３４，０．３５和０．２６。这些不同寿命组分的荧光发射光谱相互重叠在一起，稳态光谱只显示１个发射峰。根据相调荧光测定的“硬件”分析方法，通过选择检测器的相角，可以选择性地把各个寿命组分的荧光分别滤掉。如果５．９ｎｓ     

光系统II核心天线CP43和CP47的分离纯化及光谱性质研究

采用ＤＥＡＥ－ＦｒａｃｔｏｇｅｌＴＳＫ６５０Ｓ阴离子交换树脂柱层析法从菠菜（ＳｐｉｎａｃｉａＯｌｅｒａｃｅａ）中分离纯化了ＰＳＩＩ核心天线复合物ＣＰ４３和ＣＰ４７,计算出每分子ＣＰ４３含１９－２０个Ｃｈｌａ和４－５个β－Ｃａｒ;每分子ＣＰ４７含２０－２１个Ｃｈｌａ和３－４个β－Ｃａｒ。普通及三维（３Ｄ）低温（７７Ｋ）荧光发射光谱的测定证明,纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７都具有较好的完整性。常温（２９８Ｋ）吸收光谱的测定,证明纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７的红光区最大吸收峰分别位于６７１ｎｍ和６７４ｎｍ,但是它们在该区的四阶导数光谱均给出６７０ｎｍ和６８２ｎｍ两个峰,这表明,它们均至少含有两种不同结合状态的Ｃｈｌａ分子。对ＣＰ４３和ＣＰ４７中可能的能量传递机制进行了讨论     

菠菜叶绿体光系统Ⅱ反应中心D1／D2／cyt b559长寿合荧光组分的来源

通过多频相位调制法测得菠菜叶绿体光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／ｃｙｔ ｂ５５９复合物的荧光衰减包括４个组分，其寿命分别大约为１、６、２４和７３ｎｓ，所占整个荧光的比例依次为５％、３４％、３５％和２６％。而寿命为６ｎｓ的组分来源于与电荷分离不相关的ｃｈｌ ａ分子，寿命为１ ｎｓ的组分所占的比例很小，其来源不清楚。其中两个长寿合组分都与样品的光化学活性相关，但彼此又是不相关的，很可能来源于电荷分离后的两     

纯化光系统Ⅱ（PSⅡ）核心天线复合物CP43和CP47的共振拉曼光谱

采用ＤＥＡＥ－ＦｒａｃｔｏｇｅｌＴＳＫ６５０Ｓ阴离子交换树脂柱层 从菠菜中分离纯化了ＰＳⅡ核心天线复合物ＣＰ４３和ＣＰ４７。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ）检测结果表明,纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７均只含１条蛋白带,证明样品纯度的可靠性。其常温（４６０－５００ｎｍ）较ＣＰ４３具有明显的精细结构。同时测定了它们的常温共振拉曼光谱,可以看出;类似于全反式构型的β－ｃａｒｏｔｅｎｅ分子,ＣＰ４３和ＣＰ     

茶叶片阶段性返白过程中色素蛋白复合体的变化

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ盘状电泳从温敏型阶段性返白的安吉白茶完全复绿叶中分离出２条叶绿素ａ蛋白复合物（ＣＰⅠ）、２条叶绿素ａ／ｂ捕光蛋白复合物（ＣＰⅡ：ＬＨＣＰ１、ＬＨＣＰ２）和１条游离色素带,而全白期叶片中则未发现ＣＰⅠ和ＣＰⅡ,但有很少量ＣＰⅡ的脱辅基蛋白和游离色素。此类叶片开始得绿时,ＣＰⅠ、ＬＨＣＰ１和ＬＨＣＰ２同时出现,但寡聚形式（ＣＰⅠａ）的恢复稍迟些,各种色素蛋白复合体的含量均随绿逐步上升     

纯化膜蛋白质复合体Cytb6f的新方法

建立了纯化光合膜蛋白质复合体Ｃｙｔｂ６ｆ的新方法。与现有方法相比,新方法简单明了,只包括透析离心和用硫酸铵分级沉淀两个步骤,而且适于大批量制备。按此方法从菠菜叶绿体分离纯化的制剂含９．８ｎｍｏｌＣｙｔｆ·ｍｇ－１;ＳＤＳＰＡＧＥ显示４条主要区带及１条低分子量区带,背景干净;Ｃｙｔｂ６（ｂ型血红素）∶Ｃｙｔｆ＝２∶１（ｍｏｌ∶ｍｏｌ）,Ｃｈｌａ∶Ｃｙｔｆ＝１∶１（ｍｏｌ∶ｍｏｌ）;酶活性（ＰＱ２Ｈ２→Ｃｙｔｃ）８０μｍｏｌＣｙｔｃ·ｎｍｏｌＣｙｔｆ－１·ｈ－１左右;产率可达３８％。     

光系统Ⅱ核心天线CP47的纯化及其抗血清的制备

将ＯＧ处理的ＰＳⅡ经高速离心和透析制得的ＯＥＣＣ，用ＤＭ增溶后，上ＤＥＡＥ－６５０５柱，ＬｉＣＩＯ４梯度洗脱可得ＰＳⅡ核心天线蛋白ＣＰ４７。根据Ａｍｏｎ法和Ｍａｒｋｗｅｌｌ法的结果表明，每个蛋白质分子结合１３～１４个分子的Ｃｈｌａ。室温条件下，ＣＰ４７在红光区具有６７４ｎｍ的最大吸收峰和６９３ｎｍ的荧光发射峰，以及Ｗ型的圆二色信号，表明其处于较为天然的状态。将制得的ＣＰ４７免疫家兔可制得相应的抗血     

菠菜叶绿体光系统Ⅱ反应中心D1／D2／cyt b559长寿命荧光组分的来源

通过多频相位调制法测得菠菜叶绿体光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）反应中心Ｄ１／Ｄ２／ｃｙｔｂ５５９复合物的荧光衰减包括４个组分,其寿命分别大约为１、６、２４和７３ｎｓ,所占整个荧光的比例依次为５％、３４％、３５％和２６％。而寿命为６ｎｓ的组分来源于与电荷分离不相关的ｃｈｌａ分子,寿命为１ｎｓ的组分所占的比例很小,其来源不清楚。其中两个长寿命组分都与样品的光化学活性相关,但彼此又是不相关的,很可能来源于电荷分离后的两个不同的重组过程。     

菠菜光系统Ⅱ天线组分CP29的分离及其性质

菠菜放氧的光系统Ⅱ（ＰＳⅡ）核心复合物经０．８ｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）洗涤后,用温和的非离子去垢剂ＤＭ和高浓度的ＬｉＣｌＯ４增溶,再经ＤＥＡＥ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ－６５０Ｓ离子交换柱层析分离,可得到ＰＳⅡ天线组分中的叶绿素α／ｂ结合蛋白（ＣＰ２９）。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示一条３０ｋＤ蛋白质带。根据Ａｒｎｏｎ法和Ｍａｒｋｗｅｌｌ法的结果表明,每个蛋白质分子结合有７～８个分子的叶绿素α和２～３