野生黄芩内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

从野生黄芩的根、茎、叶中分离出97株内生真菌, 其中33株来自生长期植株, 64株来自成熟期植株。经分类鉴定, 隶属于38个属, 优势属为Alternaria, 成熟期的属种多样性高于生长期。将其中的95株内生真菌对14种指示菌进行抑菌试验, 发现其中91株内生真菌对一种或多种指示菌具有抑菌活性, 占分离菌株总数的95.8%。野生黄芩内生真菌对大肠杆菌CGMCC1.1103、枯草芽孢杆菌CGMCC1.769、蜡样芽孢杆菌ATCC1361、致病性大肠埃希氏菌ATCC49105、白色假丝酵母ATCC10231、小孢拟盘多毛孢CNUMB2PM01等6个指示菌菌株抑菌效果较好; 对单核细胞增生李斯特菌ATCC27708、普通变形杆菌ATCC33420、肠炎沙门氏菌ATCC14208、副溶血型弧菌ATCC27519、宋内氏痢疾杆菌ATCC51060、九州镰孢霉CNUMB2FK01等6个指示菌菌株抑菌效果较差; 对深红酵母CGMCC2.282和金黄色葡萄球菌ATCC12600没有抑制作用。     

白木香内生真菌的分离鉴定及其抑菌活性

从白木香Aquilaria sinensis（Lour．）Gilg木质部的树脂形成部位和健康部位中共分离获得42株内生真菌,经初步鉴定,产孢的33株分属于3目4科7属,其余未产孢的9株暂归为无孢菌群。采用杯碟法和MTT法分别测定了各菌株的发酵上清液对3种病原菌的体外抑菌活性和2种肿瘤细胞的体外细胞毒活性。结果表明,白木香木质部健康部位内生真菌以枝顶孢霉属为优势属,而树脂形成部位的内生真菌种类比健康部位要多,且以青霉属为优势属。其中26株至少能抑制一种指示菌,占总数的61．9％;7株对指示瘤株具有细胞毒活性,占总数的16．7％。抑菌活性菌株主要分布在枝顶孢霉属和青霉属。枝顶孢霉属菌株抑菌活性较强,其抗菌活性成分值得进一步研究。     

杜仲内生真菌的分离鉴定及抗菌活性研究

采用组织分离法从秦岭药用植物杜仲茎部共分离到内生真菌38株,经形态学鉴定分属于9属,其中青霉属为杜仲内生真菌中的优势菌群,拟青霉属、交链孢属和无孢群属为常见属。对分离得到的杜仲内生真菌发酵液进行了抑菌实验,其中61%的菌株对测试细菌具有抗菌活性,表明杜仲内生真菌的抗菌活性十分普遍;34%的菌株对烟草赤星病菌、苹果炭疽病菌及辣椒炭疽病菌等多种植物病原菌具有较强的抑制活性,表明杜仲内生真菌在植物病害的生物防治领域具有进一步开发的价值。     

南极适冷菌Pseudomonassp．C抑菌活性物质的分离纯化与结构鉴定北大核心CSCD

本文对南极适冷菌Pseudomonassp．c发酵液上清中的抗植物病原菌活性物质进行了研究,结果表明在温度40-70℃和pH5—9的范围内发酵液上清的抑菌活性稳定。根据活性追踪,通过硅胶柱层析和高效液相色谱对发酵液上清中的抑菌活性物质进行了分离纯化,得到了3个对常见植物病原真菌尖孢镰刀菌具有抑菌活性的化合物,并对其中的两个化合物进行了结构鉴定。化合物1为环二肽类（环（苯丙氨酸-脯氨酸））,化合物2为壬基酚聚氧乙烯醚类（14-壬基苯氧基．3,6,9,12．四氧十四烷-1-醇）,两者对枯草芽孢杆菌也具有一定的抑菌活性。     

红树植物内生真菌的分离鉴定及抗菌活性菌株的筛选

本文对厦门集美红树植物无瓣海桑(Sonneratia apetala),海马齿(Sesuvium portulacastrum)和秋茄(Kan-delia candel)的多个部位进行内生真菌的分离和形态鉴定,并采用菌饼法对分离到的内生真菌进行抗菌活性筛选。结果显示,从3种红树植物的根、茎、叶中分离得到25株内生真菌,分别隶属8个类群,以链格孢属和曲霉属为主,分别占菌株总数的28.0%和24.0%;有19株菌株对至少一种指示菌有抑制作用,占菌株总数的76.0%。研究结果表明,红树植物来源的内生真菌数量多,种属丰富,同时具有良好的抗菌活性,是研究抗菌活性化合物的重要资源。     

絮凝活性产紫青霉EL-02的分离鉴定及其絮凝活性初探

【目的】分离鉴定有絮凝活性真菌,同时对其絮凝活性进行初步研究。【方法】采用梯度稀释、平板划线、18SrDNA检测等方法分离鉴定絮凝活性菌株。通过高速离心、超声破碎、乙醇沉淀、定性试验等方法确定絮凝活性物质性质。【结果】从渤海湾海岸土壤样品中分离筛选出一株有较高絮凝活性的真菌,经鉴定为产紫青霉(Penicillium purpurogenum),命名为产紫青霉EL-02(P.purpurogenum EL-02)。超声破碎试验证实其絮凝活性主要存在于发酵上清液。根据絮凝活性曲线,确定4d为积累絮凝活性产物的最佳发酵时间。乙醇沉淀法获得该菌株絮凝活性物质。经鉴定该菌株所产絮凝活性物质为糖类,且其活性在pH2-11,温度-70℃-100℃范围内保持稳定。【结论】分离筛选到一株有絮凝活性的产紫青霉EL-02,经鉴定其产生糖类絮凝活性物质。     

产紫青霉EL-02的分离鉴定及其絮凝活性

摘要：【目的】分离鉴定有絮凝活性真菌,同时对其絮凝活性进行初步研究。【方法】采用梯度稀释、平板划线、18S rDNA检测等方法分离鉴定絮凝活性菌株。通过高速离心、超声破碎、乙醇沉淀、定性试验等方法确定絮凝活性物质性质。【结果】从渤海湾海岸土壤样品中分离筛选出一株有较高絮凝活性的真菌,经鉴定为产紫青霉（Penicillium purpurogenum）,命名为产紫青霉EL-02（P. purpurogenum EL-02）。超声破碎试验证实其絮凝活性主要存在于发酵上清液。根据絮凝活性曲线,确定4 d为积累絮     

远志内生真菌分离鉴定及活性筛选

从两个不同生长时期野生远志中分离内生真菌菌株88株,隶属于28个属,研究了各菌株对3种指示菌的拮抗作用。结果表明,远志不同生长时期不同部位的内生真菌数量、分布、种群存在差异,其优势属为Alternaria Nees。茎中内生真菌种类较多。88株内生真菌中有73株菌至少能拮抗1种指示菌,占总菌数的83.0%。4株抗性较强的菌株分别隶属于Trichothecium Link、Cephalosporium Corda、Alternaria Nees、Dactuliophora C.L.等。     

远志内生真菌分离鉴定及活性筛选

从两个不同生长时期野生远志中分离内生真菌菌株88株,隶属于28个属,研究了各菌株对3种指示菌的拮抗作用。结果表明,远志不同生长时期不同部位的内生真菌数量、分布、种群存在差异,其优势属为Alternaria Nees。茎中内生真菌种类较多。88株内生真菌中有73株菌至少能拮抗1种指示菌,占总菌数的83.0%。4株抗性较强的菌株分别隶属于Trichothecium Link、Cephalosporium Corda、Alternaria Nees、Dactuliophora C.L.等。     

濒危植物七子花内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

首先从濒危植物七子花中分离到38株内生真菌,综合运用形态特征和分子生物学技术,明确其分类地位。38株植物内生真菌分属于6个属和1个无孢子群,其中交链孢属和刺盘孢属为优势菌群,葡萄座腔菌属、镰刀菌属、赤霉菌属、拟茎点霉属和无孢子群为常见属。以大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌为靶标菌对获得菌株发酵液粗提物进行抑菌试验,发现95%以上的菌株对试测细菌具有一定的抗菌活性,表明七子花内生真菌的抗菌活性十分普遍;其中QZHⅡ10对大肠埃希菌具有较好的抑菌活性,抑菌圈直径为12.0 mm;而QZHⅡ07则对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,抑菌圈达到15.5 mm。这表明七子花内生真菌具有开发为微生物源杀菌剂的价值。     

N-Formyllapatin A,a new N-formylspiroquinazoline derivative from the marine-derived fungus Penicillium adametzioides AS-53

N-Formyllapatin A (1), a new spiroquinazoline derivative, and four known quinazoline metabolites, lapatins A (2) and B (3), prelapatin B (4), and glyantrypine (5), along with two known indolediketopiperazine derivatives, fumitremorgin B (6) and verruculogen (7), were characterized from Penicillium adametzioides AS-53, a fungus obtained from the fresh tissue of an unidentified marine sponge. The structure of compound 1 was established by detailed interpretation of NMR and MS data, and its absolute configuration was established by a single-crystal X-ray diffraction analysis. N-Formyllapatin A (1) represents the first N-formylspiroquinazoline secondary metabolite. Compounds 3 and 5–7 showed moderate inhibitory activity against aqua-pathogenic bacterial Vibrio harveyi.     

黄河三角洲耐盐真菌Penicillium chrysogenum HK14-01的次生代谢产物

【目的】从黄河三角洲耐盐微生物的代谢产物中寻找具有抗菌和抗肿瘤活性的化合物。【方法】应用化学与生物活性相集成的筛选方法,从耐盐微生物中筛选获得代谢产物丰富并具有生物活性的目标菌株;通过高盐胁迫目标菌株,利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等方法对发酵产物进行分离、纯化,运用波谱解析、钼靶X-射线单晶衍射分析、圆二色散谱(CD)和密度泛函数(DFT)-ECD的计算鉴定化合物的结构。【结果】从采自黄河三角洲的泥土样品中得到一株耐盐真菌HK14-01,鉴定为产黄青霉Penicilliumchrysogenum;从其发酵产物中分离鉴定了8个化合物:(2S,3R)-oxaline(1,主产物)、(3R,4R)-3,4,8-trihydroxy-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one(2)、(Z)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(3)、(E)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(4)、emodin(5)、4-(2-hydroxyethyl)benzene-1,2-diol(6)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate(7)和2-(4-hydroxy phenyl)acetonitrile(8);化合物1、3和4对大肠杆菌以及化合物1和5对金黄色葡萄球菌表现出抑菌活性,化合物5对P388细胞表现出微弱的细胞增殖抑制活性。【结论】首次确定了化合物2的绝对构型、首次报道了化合物1和2的CD数据;从黄河三角洲的耐盐微生物的次生代谢产物中可以得到活性化合物,这一区域的耐盐微生物资源值得深入研究。     

红豆杉内生真菌次生代谢物的分离鉴定及其抗菌活性 分析

以产紫杉醇类化合物的云南红豆杉内生真菌12.3.2为目标菌株,对其次生代谢物进行分离鉴定和抗菌活性研究。通过硅胶柱层析,共分离得到3个主要成分,红外光谱、质谱、核磁共振氢谱等光谱解析鉴定其分别为松柏烯、邻苯二甲酸二异辛酯、油酸乙酯。生物活性试验表明3种化合物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色链球菌这5种致病菌都有一定的抑制作用。其中松柏烯对金黄色葡球菌、枯草杆菌和白色念珠菌有较强的抑制作用。松柏烯是首次报道从植物内生真菌次生代谢物中分离得到,这为松柏烯的来源开辟了一条重要的途径,同时也为松柏烯的进一步开发利用奠定了基础。     

Neuroprotective metabolites from the endophytic fungus Penicillium citrinum of the mangrove Bruguiera gymnorrhiza

Two new compounds, named as (Z)-7,4′-dimethoxy-6-hydroxy-aurone-4-O-β-glucopyranoside (1), and (1S,3R,4S)-1-(4′-hydroxyl-phenyl)-3,4-dihydro-3,4,5-trimethyl-1H-2-benzopyran-6,8-diol (2), were isolated from the endophytic fungus Penicillium citrinum of Bruguiera gymnorrhiza. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic analysis. Additionally, compound 1 exhibited potent neuroprotective activity in 1-methyl-4-phenylpyridinium-induced oxidative damage in PC12 cells.     

椿根皮的化学成分及抑菌活性研究

为探寻椿根皮抑菌的物质基础，该研究采用硅胶、Sephadex LH-20等方法对椿根皮甲醇提取物进行分离和纯化，通过理化性质和波谱数据分析单体化合物的结构，并以卡那霉素为对照组采用流式细胞法测试化合物的抑菌活性。结果表明：从椿根皮中得到22个化合物，分别鉴定为pleuchiol (1)、withastramonolide (2)、7-ketositosterol (3)、白桦酯醇(4)、桦木酸甲酯(5)、1, 2, 4-trimethoxybenzene (6)、顺丁烯二酸二甲酯(7)、sonderianol (8)、dibutyl phthalate (9)、pinoresinol (10)、对羟基苯甲酸乙酯(11)、avenalumic acid methyl ester (12)、5,3′-dihydroxy-3,7,4′-trimethoxy-flavone (13)、spathulenol (14)、2-甲基-5-丙基酮-7-羟基色原酮(15)、 7,4′-dihydroxyflavone (16)、annphenone (17)、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸(18)、5,3′...     

Identification and antibacterial characteristics of an endophytic fungus Fusarium oxysporum from Lilium lancifolium

Aims: The aim of this study is to isolate and identify an endophytic fungus with antibacterial activity from the Asian medicinal and culinary plant Lilium lancifolium and to study the characteristics of its major antibacterial fractions. Methods and Results: After strict sample sterilization, an endophytic fungus BH‐3 with great antibacterial activity against Leuconostoc mesenteroides was isolated from the bulbs of L. lancifolium and was identified as Fusarium oxysporum on the basis of internal transcribed spacer (ITS) rDNA sequence and morphological traits. After partial purification including superfiltration and gel filtration, the major antibacterial fractions were found to be the substances with the molecular mass ranging from 35 to 60 kDa, mainly 55 kDa. The partially purified antibacterial fractions were stable at thermal processes, with more than 80% of activity left at 60°C for 1 h, and even 70·75% left at 121°C for 15 min. 90·33–98·97% of activity was observed in the pH range of 4·0–7·0. But the fractions were sensitive to different proteases. Conclusions: Endophytic strain F. oxysporum BH‐3 isolated from the bulbs of L. lancifolium produced protein‐like antibacterial metabolites. The antibacterial assay against Leuc. mesenteroides indicated that the fractions were stable at thermal processes and wide pH conditions, but sensitive to proteolyses. Significance and Impact of the Study: This study provides an increasing understanding of endophytic F. oxysporum in L. lancifolium and its metabolites, which have a great potential in food industry as antibacterial agents.     

一株海洋真菌Aspergillus jensenii LW128的次级代谢产物及其抗菌活性研究

【目的】研究一株西北太平洋深海沉积物来源真菌Aspergillus jensenii LW128的次级代谢产物及其抗菌活性。【方法】利用硅胶柱色谱(silica gel column chromatography)、凝胶柱色谱(Sephadex LH-20 column chromatography)和反相高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography, RP-HPLC)等方法对菌株的发酵粗提物进行分离纯化得到单体化合物;将核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance, NMR)、质谱(mass spectrometry, MS)数据与相关文献报道数据进行比对后确定化合物结构;采用肉汤微量稀释法测定化合物的抗菌活性。【结果】从海洋真菌Aspergillus jensenii LW128中分离并鉴定了10个已知化合物,分别为diorcinol D(1)、diorcinol K(2)、diorcinol I(3)、(+)-(7S)-7-O-methylsydonic acid (4)、(+)-s...     

一色齿毛菌漆酶的酶学特性及染料脱色研究

染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解。本文从白腐菌一色齿毛菌LS0547中纯化出胞外漆酶并用于染料脱色实验。SDS-PAGE结果显示纯化的漆酶分子量大小为63.7kDa。漆酶氧化底物ABTS的最适pH为2.2,最适温度为50℃。叠氮钠可强烈抑制漆酶活性,半胱氨酸和二硫苏糖醇可部分抑制漆酶活性。漆酶氧化ABTS,丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的米氏常数分别为0.217,0.306和0.199mmol/L。粗酶和纯化的漆酶用于不同化学结构的染料的脱色研究,结果表明一色齿毛菌纯化漆酶可快速对RB亮蓝进行脱色,偶氮胭脂红和结晶紫的脱色效果低于RB亮蓝,测试的三种染料均可在没有介体存在的条件下被漆酶脱色,显示出一色齿毛菌漆酶在染料废水处理中的应用前景。     

海绵内/共生稀有放线菌Dermacoccus sp. X4次级代谢产物分离纯化及结构解析

从中国南海西沙群岛10 m深海水中采集得到一株未鉴定海绵样品,对其进行共附生微生物的分离,得到真菌及细菌共16株。通过分子生物学鉴定及菌株发酵液抑菌活性测定,发现其中一株稀有放线菌皮生球属菌株Dermacoccus sp.X4对金黄色葡萄球菌具有较好抑菌活性。大量发酵制备该菌株发酵液,通过硅胶分配层析、ODS反相层析、SephadexTMLH-20凝胶过滤层析及C18反相层析等分离方法对发酵液成分进行分离,并使用液相质谱连用、一维核磁及二维核磁分析对分离得到的单一化合物进行鉴定,确定二酮哌嗪类化合物1个,吲哚酸酯类化合物2个。本研究中吲哚酸酯类化合物为首次从微生物次级代谢产物中得到,为丰富海洋微生物药用资源作出贡献。     

粗毛栓菌木聚糖酶的纯化及性质

以麦草粉为基质培养粗毛栓菌Trametes gallica,浸提固态培养物得浸提液,后经超滤浓缩、硫酸铵盐析、Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析、DEAE Sepharose fast flow阴离子交换层析和Sephadex G-150分子筛层析等分离与纯化步骤,获得部分纯化的木聚糖酶,其回收率和纯化倍数分别为1.45%和15.6。进一步经活性-PAGE回收,获得三种SDS-PAGE电泳纯级的木聚糖酶同工酶组分:XⅠ、XⅡ和XⅢ(按等电点从大到小排列)。三种组分分子量均约为19.0kDa;等电点分别为:5.6、4.7和4.0;含糖量分别为:0.25%、0.63%和3.4%;XⅠ既能降解木聚糖,又能降解纤维素;XⅡ的最适作用pH值为5.0,最适作用温度45℃;Mg2+、Fe2+对XⅡ有激活作用;Mn2+和Co2+有抑制作用;测得XⅡ的Km值为0.75mg/mL,Vmax为5,000mmoL/min·mg。