紫陀螺菌化学成分及其抑制肿瘤细胞增殖活性的研究

以紫陀螺菌为对象,研究其子实体的化学成分及其抑制肿瘤细胞增殖活性。采用溶剂提取、柱层析和高效液相色谱等方法分离纯化化学成分,通过核磁共振和质谱技术鉴定单体化合物结构,运用结晶紫法评价单体化合物抑制肿瘤细胞增殖活性。从乙酸乙酯提取物中共分离鉴定6个单体化合物,分别为(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(1)、3β,5α-二羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(2)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(3)、吲哚-3-甲酸甲酯(4)、4,4-二甲基-1,7-庚二酸(5)和(8E,10E)-12羰基十八碳-8,10-二烯酸(6),其中化合物1为主要成分,相对含量为23.8%。活性测试结果表明3对人乳腺癌细胞株MCF-7 细胞、人胰腺癌细胞株PANC-1细胞和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞具有微弱的细胞增殖抑制活性。本研究首次报道了紫陀螺菌化学成分,对深入挖掘其在健康领域中的开发价值具有重要意义。     

朱红栓菌提取物抗氧化、抗肿瘤活性评价及相关化学成分分析

采用石油醚、乙酸乙酯、乙醇浸提朱红栓菌 Trametes cinnabarina 子实体干粉,得到不同极性提取物;采用清除DPPH 自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基能力,测定提取物的体外抗氧化活性;MTT法检测提取物对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的抑制作用。结果表明,朱红栓菌石油醚、乙酸乙酯、乙醇提取物均具有一定的抗氧化、抗肿瘤活性;各提取物在浓度为4-5mg/mL时,对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力大小依次为乙酸乙酯提取物>乙醇提取物>石油醚提取物;乙酸乙酯提取物对3种自由基的最高清除率分别为60.23%、74.49%、63.84%。各提取物对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖抑制作用大小依次为乙酸乙酯提取物>乙醇提取物>石油醚提取物;乙酸乙酯提取物的抑制率最高达55.93%。采用硅胶和凝胶等柱色谱方法结合核磁、波谱和质谱等技术对乙酸乙酯提取物的化学组分进行分析,共分离纯化出11种化合物,分别鉴定为：麦角甾醇（1）,邻苯二甲酸二丁酯（2）,对羟基苯甲酸甲酯（3）,麦角甾-7,22,二烯-3-酮（4）,1-[(12E,16E)-12,16-二十碳二烯酰基]-2-[(E,E)-7,11-十八碳二烯酰基]-3-硬脂酰基甘油（5）,cinnabarin（6）,过氧麦角甾醇（7）,尿嘧啶（8）,甘露醇（9）,腺嘌呤核苷（10）,豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇（11）。除化合物6外均为首次从朱红栓菌子实体中分离得到。研究结果为开发利用朱红栓菌子实体提供了科学依据。     

木蹄层孔菌子实体化学成分及对肿瘤细胞的抑制作用的研究

运用硅胶、sephadex LH-20等柱色谱,从木蹄层孔菌子实体的乙醇提取物分离得到12个化合物,通过单体的理化性质、NMR和MS技术鉴定单体的结构为3-十六碳酸酯-7,22-二烯麦角甾醇（1）,十八烷酸（2）,棕榈酸（3）,7,22-二烯麦角甾-3-酮（4）,麦角甾-7,22-二烯-3-醇（5）,5,8-过氧麦角甾-6,22-二烯-3-醇（6）,3,3-二甲氧基-7,22-二烯麦角烷（7）,28-乙酰白桦脂醇（8）,白桦脂醇（9）,β-羟基十八烷酸（10）,9,10-二羟基十八烷酸（11）,瑞香素（12）。采用Alamar Blue法检测单体化合物对人肺癌细胞NCI-H 460和人胃癌细胞SGC-7901的抑制活性。结果表明,化合物4对NCI-H 460细胞株的抑制活性最高,化合物9对SGC-7901的抑制活性最高。     

乳孔硫磺菌的化学成分和抗氧化活性

对乳孔硫磺菌子实体不同极性提取物进行了DPPH和ABTS自由基清除能力的测定,并对氯仿和乙酸乙酯提取物进行了分离纯化。结果表明,乳孔硫磺菌的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物均有一定的抗氧化活性,各提取物对两种自由基的清除能力均表现为甲醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞氯仿提取物＞石油醚提取物,甲醇提取物对DPPH自由基的清除率最高可达到93.78%;对ABTS自由基的清除率最高可达到62.06%;从氯仿和乙酸乙酯提取物中分离得到10个化合物,分别是：(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（1）,阿里红酸 A（2）,麦角甾-7,22-二烯-3β-醇（3）,啤酒甾醇（4）,硫色多孔菌酸（5）,(4E,8E)-N-d-2′-hydroxypalmitoyl-1-O-β-d-glycopyranosyl- 9-methyl-4,8-sphingadienine（6）,麦角甾醇（7）,N-(2′-羟基二十四碳酰基)-1,3,4-三羟基-2-氨基-十八烷（8）,烟酸（9）和齿孔酸（10）。其中,化合物2、6、8和9为首次从硫磺菌属真菌中分离得到。     

海南灵芝化学成分研究

为探讨海南灵芝(Ganoderma hainanense Zhao,Xu et Zhang)的化学成分,采用柱层析技术从海南灵芝乙醇提取物中分离得到14个化合物。经波谱分析鉴定其结构分别为:巴西红厚壳素(1)、6-脱氧巴西红厚壳素(2)、7,8-二甲基咯嗪(3)、5,8-过氧麦角固醇(4)、3β,5α,9α-三羟基麦角甾-7,22-二烯-6-酮(5)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(6)、麦角甾-7,22-二烯-3-酮(7)、7α-甲氧基-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β-醇(8)、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α-6β-三醇(9)、3-吲哚甲酸(10)、3,4-二羟基苯甲酸(11)、对羟基苯甲酸(12)、3,4-二羟基苯甲酸甲酯(13)和正二十六烷酸(14)。所有化合物均为首次从海南灵芝中分离得到。     

根霉3078的代谢产物的研究

从根霉3078菌丝体的甲醇提取物中分离得到9个化合物,通过波谱分析,鉴定为5α,8α-表二氧-(20S,22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(1)、甘油醇-1-单油酸酯(2)、4-羟基苯乙酮(3)、4-羟基苯乙酸(4)、(20S,22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β三醇(5)、(S)-3-羟基-3-苯基丙酸(6)、胸腺嘧啶(7)、尿嘧啶(8)和腺苷(9)。     

硬孔灵芝的化学成分研究

采用硅胶柱层析法进行分离纯化,从硬孔灵芝Ganoderma duropora的氯仿萃取物中分离得到甾类化合物8种。根据波谱数据,化合物1-8结构分别被鉴定为:麦角甾醇、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇、麦角甾-7,22-二烯-3-酮、6,9-环氧麦角甾-7,22-二烯-3β-醇、过氧麦角甾醇、3,5-二羟基麦角甾-7,22-二烯-6-酮、β-谷甾醇和胡萝卜苷。     

中药脱皮马勃的化学成分研究

为了研究脱皮马勃Lasiosphaera fenzliiReich.子实体的化学成分,通过石油醚索氏提取、硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶色谱、重结晶分离纯化,从脱皮马勃子实体中分离得到了6个化合物,通过波谱数据分析分别鉴定它们为(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(1),麦角甾-7,22-二烯-3,6-二酮(2),麦角甾-5α,8α-环二氧-6,22-二烯-3β-醇(3),麦角甾-5,7,22-三烯-3-醇(4),麦角甾-7,22-二烯-3-酮(5),硬脂酸(6),其中化合物1~3、6是首次从脱皮马勃中分离得到。     

拟白蘑子实体化学成分研究

从高等真菌拟白蘑(Tricholomopsis rutalis)干燥子实体的甲醇提取物中分离并鉴定了6个化合物,它们分别是软脂酸甲酯(1)、软脂酸(2)、麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(3)、5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(4)、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(5)和5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-O-葡萄糖苷(6).以上化合物均为首次从拟白蘑中获得.     

雪茶化学成分研究

由管枝衣科地茶属植物雪茶（Thamnolia vermicularis)丙酮提取物中分离得到10个成分,通过波谱分析及与已知品对照等方法,最终确定其中的9个化合物分别为:Thamnolin(1),鳞片衣酸（2）,坝巴酸（3）,羊角衣酸（4）,3β－羟基－5α,8α－桥二氧麦角甾－6,22－二烯（5）,3β－羟基－5α,8α－桥二氧麦角甾－6,9,22－三烯（6）,麦角甾烷－7,22－二烯－3－醇（7）,麦角甾烷－5,8,22－三烯－3－醇（8）,亚油酸(9)。其中,化合物1为新化合物,化合物3和6－9系首次由该种植物中分离得到。研究结果初步明确了云南中甸地区产雪茶为主要含有坝巴酸（3）和羊角衣酸（4）等酚性成分,而非主含地茶酸等酚性成分的植物品种类型,这为合理开发利用当地植物资源提供了科学依据。     

苋科植物的丛枝菌根

有些种子植物如莎草科、十字花科、灯心草科、藜科、石竹科等20余科,以往曾被认为不能或不易形成丛枝菌根(郭秀珍等,1989;刘润进等,2000).随着对菌根的深入研究,曾被认为是不易与菌根菌组合的湿地生植物、寄生性植物、或一年生植物都被发现是可以形成内生菌根的(Trappe等,1992).此外,Allen等(1989)研究证实,Salsola kali,Atriplex roseum等生长于沙漠、海滨的藜科植物,进行接种处理后,也能形成丛枝菌根.我们在西双版纳调查热带雨林植物的丛枝菌根状况时,偶然发现刺苋(Amaranthus spinosus Linn.)的根系受到了丛枝菌根真菌的侵染,因此,对苋科植物作了扩大采样调查.本文主要报道从热带采集的5属6种苋科植物的根受丛枝菌根真菌感染形成丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)和这些植物根际士壤中的丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)的状况.     

高等真菌黑虎掌子实体的化学成分

黑虎掌 (Ｓａｒｃｏｄｏｎａｓｐｒａｔｕｍ (Ｂｅｒｋ .)Ｓ .Ｉｔｏ) ,又名香茸 ,是一种美味食用菌。近年来发现该属Ｓ .ｓｃａｂｒｏ ｓｕｓ (Ｆｒ.)Ｐ .Ｋａｒｓｔ.中含有对神经生长因子 (ＮＧＦ)的合成具有诱导作用的生物活性二萜 (Ｏｈｔ等 ,1998)。作为“高等真菌生物活性代谢产物研究”的一部分 ,我们对采自云南武定的样品进行了化学分析。从黑虎掌的新鲜子实体中分得 15个化合物。它们分别为ｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄｅＢ (1) (12 0ｍｇ) ,阿洛酮糖腺苷(2 ) (12ｍｇ) ,三磷酸尿苷 (3) (7ｍｇ) ,尿嘧啶 (4 ) (12ｍｇ) ,腺嘌呤 (5 ) (8ｍ…     

Chemical characterization,antidiabetic and anticancer activities of Santolina chamaecyparissus

Santolina chamaecyparissus is an important medicinal plant growing in the Mediterranean region and has been reported as a potent anti-inflammatory, antibacterial, antioxidant, and antifungal agent. The purpose of the current research is to identify the chemical constituents in ethyl acetate extract (EAE) from the leaves of S. chamaecyparissus, and to evaluate antidiabetic, and anticancer activity. Chemical constituents of EAE were identified by GC-MS, and the antidiabetic activity was evaluated by α-glucosidase inhibition assay. The anticancer activity was assessed by Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) expression in human breast cancer cell line (MCF7) by using quantitative RT-PCR method. GC-MS analysis of EAE of S. chamaecyparissus yielded 44 compounds. Tetrapentacontane (27.15%), eicosyl acetate (8.40%), 2-methylhexacosane (6.87%), and n-pentadecanol (5.44%) were found as major chemical constituents. The EAE of S. chamaecyparissus showed concentration dependant inhibition of α-glucosidase enzyme and the IC₅₀ value (IC₅₀ 110 ± 4.25 µg/mL) was found comparable with standard acarbose (IC₅₀ 105 ± 3.74 µg/mL). The real-time qRT-PCR results showed that the EGFR protein (bcl-2) in human breast cancer cell line (MCF7) was negatively expressed with a value of −0.69297105 after treatment with EAE (100 µg/mL). The study results are suggesting the possible use of S. chamaecyparissus in the management of diabetes, and human breast cancer.     

Gammaherpesvirus Latency Accentuates EAE Pathogenesis: Relevance to Epstein-Barr Virus and Multiple Sclerosis

Epstein-Barr virus (EBV) has been identified as a putative environmental trigger of multiple sclerosis (MS), yet EBV''s role in MS remains elusive. We utilized murine gamma herpesvirus 68 (γHV-68), the murine homolog to EBV, to examine how infection by a virus like EBV could enhance CNS autoimmunity. Mice latently infected with γHV-68 developed more severe EAE including heightened paralysis and mortality. Similar to MS, γHV-68EAE mice developed lesions composed of CD4 and CD8 T cells, macrophages and loss of myelin in the brain and spinal cord. Further, T cells from the CNS of γHV-68 EAE mice were primarily Th1, producing heightened levels of IFN-γ and T-bet accompanied by IL-17 suppression, whereas a Th17 response was observed in uninfected EAE mice. Clearly, γHV-68 latency polarizes the adaptive immune response, directs a heightened CNS pathology following EAE induction reminiscent of human MS and portrays a novel mechanism by which EBV likely influences MS and other autoimmune diseases.     

角果胡椒的化学成分研究

从角果胡椒的乙醇提取物中分离得到6个甾醇,通过波谱方法鉴定它们的结构为5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(1),(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(2),(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(3),豆甾醇-5,11-二烯-3β-醇(4),豆甾醇-3,6-二酮(5),sitoindosideΙ(6)。     

Synthèse de nucléosides pyrimidiques non protégés en O-2′ à partir de sulfites cycliques en C-1—C-2

Treatment of 3,5,6-tri-O-benzoyl-- -glucofuranose 1,2-sulfite with an excess of bis(trimethylsil) uracil, in fusion processes without any catalyst, afforded an excellent yield of 1-(3,5,6-tri-O-benzoyl-2-O-trimethylsilyl-β- -glucofuranosyl)uracil, which was readily hydrolyzed in slightly acid conditions to give in almost quantitative yield 1-(3,5,6-tri-O-benzoyl-β- -glucofuranosyl)uracil. This new synthetic method for nucleosides unprotected at O-2′ was also tested in other sugar series. In some cases, only the 1′,2′-trans-nucleosides were obtained, but in others, small yields (3–10%) of 1′,2′-cis-nucleosides were detected. The -to-β ratio seems to be dependent on the reaction temperature. 2,4-Dimethoxypyrimidine also reacted with sugar 1,2-sulfites and 4-O-methyl-1-(3,5,6-tri-O-benzyl-β- -glucopyranosyl)-2-pyrimidinone was prepared in 85% yield from 3,5,6-tri-O-benzyl-- -glucopyranose 1,2-sulfite.     

毕赤酵母底盘芳香族氨基酸合成途径改造生产肉桂酸及对香豆酸*

目的:改造毕赤酵母使其异源合成类黄酮生物合成途径的重要中间体肉桂酸、对香豆酸,并优化前体芳香族氨基酸生物合成途径以提高毕赤酵母的生产能力。方法:在毕赤酵母GS115中利用乙醇诱导型人工转录系统表达Rhodotorula glutinis来源的苯丙氨酸解氨酶,并在该重组菌株中分别过表达胞内芳香族氨基酸生物合成途径中的关键酶或其突变体以进行优化。结果:异源表达苯丙氨酸解氨酶可使毕赤酵母将自身产生的L-苯丙氨酸、L-酪氨酸转化为肉桂酸(38.8 mg/L)、对香豆酸(34.2 mg/L),而通过过表达相关酶进行优化,最终肉桂酸和对香豆酸的产量分别达到124.1 mg/L和302.0 mg/L。结论:利用新的异源宿主毕赤酵母成功合成了肉桂酸、对香豆酸,并对胞内的芳香族氨基酸生物合成途径进行了优化,表明毕赤酵母具有生产黄酮类化合物的应用潜力,也为其他芳香族氨基酸衍生物或植物化合物在毕赤酵母中的异源合成奠定了基础。     

Stabilization of the α2 isoform of Na,K-ATPase by mutations in a phospholipid binding pocket

The α2 isoform of Na,K-ATPase plays a crucial role in Ca²⁺ handling, muscle contraction, and inotropic effects of cardiac glycosides. Thus, structural, functional, and pharmacological comparisons of α1, α2, and α3 are of great interest. In Pichia pastoris membranes expressing human α1β1, α2β1, and α3β1 isoforms, or using the purified isoform proteins, α2 is most easily inactivated by heating and detergent (α2 ≫ α3 > α1). We have examined an hypothesis that instability of α2 is caused by weak interactions with phosphatidylserine, which stabilizes the protein. Three residues, unique to α2, in trans-membrane segments M8 (Ala-920), M9 (Leu-955), and M10 (Val-981) were replaced by equivalent residues in α1, singly or together. Judged by the sensitivity of the purified proteins to heat, detergent, “affinity” for phosphatidylserine, and stabilization by FXYD1, the triple mutant (A920V/L955F/V981P, called α2VFP) has stability properties close to α1, although single mutants have only modest or insignificant effects. Functional differences between α1 and α2 are unaffected in α2VFP. A compound, 6-pentyl-2-pyrone, isolated from the marine fungus Trichoderma gamsii is a novel probe of specific phospholipid-protein interactions. 6-Pentyl-2-pyrone inactivates the isoforms in the order α2 ≫ α3 > α1, and α2VFP and FXYD1 protect the isoforms. In native rat heart sarcolemma membranes, which contain α1, α2, and α3 isoforms, a component attributable to α2 is the least stable. The data provide clear evidence for a specific phosphatidylserine binding pocket between M8, M9, and M10 and confirm that the instability of α2 is due to suboptimal interactions with phosphatidylserine. In physiological conditions, the instability of α2 may be important for its cellular regulatory functions.