2-庚基,4-羟喹啉-N-氧化物在叶绿体电子传递链上的抑制位置

利用人工电子供、受体和已知的专一性抑制剂,研究了2-庚基,4-羟喹啉-N-氧化物(HOQNO)在菠菜叶绿体光合电子传递链上的抑制部位。通过光系统Ⅰ的还原态DCPIP或TMPD的光氧化反应,受KCN强烈抑制,却不受HOQNO的影响。通过光系统Ⅱ,以氧化态PD或TMPD作脂溶性人工受体时,电子传递受HOQNO强烈抑制,但对DBMIB不敏感。二价汞化合物的光还原对DCMU敏感,而不受HOQNO抑制。综合上述结果,初步确定HOQNO在光合电子传递链上的一个抑制部位,是靠近PSII的还原端,在DCMU抑制点与质醌之间。     

光合磷酸化的研究——Ⅺ.2-庚基,4-羟喹啉-N-氧化物在不同的电子受体或递体存在下对叶绿体光促电子传递的抑制作用

近年来,对离体叶绿体光化学反应的研究有了很大的发展,发现了许多物质如NADP,铁氰化钾,2,6-二氯酚靛酚等非但都可作电子受体,而且在它们的还原过程中都伴随有磷酸化反应;FMN,Vit-K~(**),PMS等都能作为辅助因子促进光合磷酸化的进行。但     

2-甲基-4-硝基-吡啶-N-氧化物的合成方法研究

对2-甲基-4-硝基-吡啶-N-氧化物的合成方法进行了工艺改进,以2-甲基吡啶为原料,经氧化、硝化合成目标产物。总产率达到70.36%。     

(2R,3S,4S)-2-(N,N-二乙氨基)甲酰氧基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-γ-内酰胺的合成及工艺研究

目的：通过对黄皮酰胺全合成中间体（2R,3S,4S）-2-羟基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-γ-内酰胺（化合物A）2位羟基的酯化,提高脂水分配系数（kP）,考察对谷丙转氨酶活性的影响。方法：以化合物A为原料,通过酰化反应合成（2R,3S,4S）-2-（N,N-二乙氨基）甲酰氧基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-γ-内酰胺（化合物B）,重点考察了摩尔比、反应温度、反应时间等条件对反应的影响。化合物B结构已经元素分析、红外光谱、质谱及核磁共振氢谱确证。结果：化合物A和酰化剂以摩尔比2：3,在160℃下反应1h,目标化合物B。收率78．42％。结论：本合成路线及具体反应方法,具有试剂廉价易得、反应条件温和、后处理简便等优点,是一种较为实用的合成方法。     

(2R,3S,4S)-2-(N,N-二乙氨基)甲酰氧基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-Y-内酰胺的合成及工艺研究

目的:通过对黄皮酰胺全合成中间体(2R,3s,4S)-2-羟基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-Y-内酰胺(化合物A)2位羟基的酯化,提高脂水分配系数(1gP),考察对谷丙转氨酶活性的影响。方法:以化合物A为原料,通过酰化反应合成(2R,3S,4S)-2-(N,N-二乙氨基)甲酰氧基-3-苯基-4-苯甲酰基-N-甲基-Y-内酰胺(化合物B),重点考察了摩尔比、反应温度、反应时间等条件对反应的影响。化合物B结构已经元素分析、红外光谱、质谱及核磁共振氢谱确证。结果:化合物A和酰化剂以摩尔比2:3,在160℃下反应1h,目标化合物B,收率78．42%。结论:本合成路线及具体反应方法,具有试剂廉价易得、反应条件温和、后处理简便等优点,是一种较为实用的合成方法。     

基质金属蛋白酶-2,-9及其组织抑制因子在恒河猴黄体中的表达

基质金属蛋白酶-2,-9及其组织抑制因子在恒河猴黄体中的表达@李庆雷$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080哈尔滨医科大学生殖内分泌研究室　中国哈尔滨150086 @王红梅$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @邵龙江$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国北京100080 @于晓光$哈尔滨医科大学生殖内分泌研究室!　中国哈尔滨150086 @倪江$哈尔滨医科大学生殖内分泌研究室!　中国哈尔滨150086 @祝诚$中国科学院动物研究所计划生育…     

4-[(R,S)-1-氨基(2’,4’-二甲氧苄基)]苯氧乙酸的合成

合成了４－［（Ｒ,Ｓ）－１－氨基（２’,４’－二甲氧苄基）］苯氧乙酸以及４个中间体,其结构分别通过红外光谱、核磁共振、折光率、熔点等测试手段得到确证。     

4-异硫氰酸盐-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基抑制白血病细胞DNA,RNA,蛋白质,核蛋白和ATP代谢的动力学研究

4—异硫氰酸盐—Tempo 3μg/ml对白血病7712细胞DNA,RNA和蛋白质合成抑制的动力学研究表明,首先抑制DNA的合成,然后逐步抑制RNA与蛋白质的合成。对18种氨基酸代谢均有抑制作用,大部分抑制率在30％左右,唯对蛋氨酸的抑制率高达45.8％,似有一定选择性。对核蛋白与ATP代谢的抑制动力学过程,有较好的相关性,表明其对癌细胞生长及DNA合成的抑制作用与对细胞ATP合成的抑制有关。     

4-异硫氰酸盐-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基抑制白血病细胞DNA,RNA,蛋白质,核蛋白和ATP代谢的动力学研究

4—异硫氰酸盐—Tempo 3μg/ml对白血病7712细胞DNA,RNA和蛋白质合成抑制的动力学研究表明,首先抑制DNA的合成,然后逐步抑制RNA与蛋白质的合成。对18种氨基酸代谢均有抑制作用,大部分抑制率在30％左右,唯对蛋氨酸的抑制率高达45.8％,似有一定选择性。对核蛋白与ATP代谢的抑制动力学过程,有较好的相关性,表明其对癌细胞生长及DNA合成的抑制作用与对细胞ATP合成的抑制有关。     

小麦苗期对1, 2, 4-三氯苯胁迫的生理响应

通过砂培试验,研究了6种浓度(0、0.3、0.6、1.0、1.5 mmol/kg沙和2.0 mmol/kg沙)的1, 2, 4-三氯苯(TCB)对两种小麦烟辐188(耐性基因型)和扬麦16(敏感基因型)种子发芽率、发芽指数、幼苗生物量、以及叶片和根系的蛋白质含量、丙二醛含量(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性等生理指标的影响.结果表明两种小麦基因型具有显著的差异,在TCB胁迫下,烟辐188的种子发芽率、发芽指数、幼苗生物量均高于扬麦16,烟辐188和扬麦16的叶片可溶性蛋白含量分别与对照差异不显著和显著偏低.随着TCB浓度的升高,烟辐188根系的可溶性蛋白含量呈上升趋势,与对照差异显著,而扬麦16先略有上升然后呈下降趋势,且显著低于对照.TCB胁迫导致扬麦16叶片SOD、POD活性小于对照,CAT活性显著小于对照;而烟辐188叶片SOD活性与对照间差异不明显,POD和CAT活性在低浓度TCB胁迫时与对照差异不大,在高浓度时小于对照,其MDA含量低于扬麦16.烟辐188根系SOD、POD活性对TCB胁迫不敏感,扬麦16 SOD、POD活性受O-·2诱导而上升,但由于其O-·2产生速率要大于烟辐188,仍然不能清除多余的O-·2,最终其根系MDA含量高于烟辐188.总体而言,TCB胁迫下烟辐188的发芽情况、幼苗生长情况和生理指标均好于扬麦16,表现出对TCB胁迫有较强的耐受性和适应性.     

(2E,4 E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1,3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2,4-二烯酰胺的合成及其降血脂作用

以金属钠为催化剂,加热回流合成(2E,4E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1. 3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2,4-二烯酰胺(C14H16N2O3,胡椒酸乙二胺,EPA),利用XRD、IR、1H、13C NMR对产物结构进行了表征和确认。以EPA的产率为指标,研究其最佳合成工艺参数。实验结果表明:当催化剂用量为1. 0 g(通氮气保护),加热回流温度65~70oC,反应时间45~48 h,为较好的合成工艺条件,EPA的合成收率达62. 93%以上,论文研究结果可为工业化生产提供设计依据。同时,EPA能显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG和LDL-C水平,且呈剂量依赖性; 2. 5 mg/kg剂量时显著升高HDL-C水平;并能显著升高高脂血症大鼠血清SOD和GSH-PX活力降低MDA含量。由此可知,降血脂作用与传统降血脂药物辛伐他汀相比,以降LDL-C作用更为明显。EPA具有一定的辅助降血脂功能及抗氧化作用。     

2-N,N-双羟甲基氨基-1,3,4-噻二唑对妊娠大白鼠和小白鼠致畸敏感期的测定

本文主要讨论了大、小白鼠的致畸敏感期。根据我们的实验结果认为:大白鼠胚胎对Bis-HM-A-TDA 的反应以妊娠的第9、10和11天者最为敏感;在畸形发生上则以妊娠的第10、11和12天的胚胎最为敏感。小白鼠的胚胎以妊娠的第7、8和9天者反应最为敏感;在畸形发生上又以妊娠第9、10和11天的胚胎为敏感,尤其妊娠第9天的胚胎反应更为强烈。随着胚胎发育时间的延长,胚胎对于致畸因素的抵抗力逐渐提高。     

SYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF NUCLEOSIDE DERIVATIVES,N-(BENZOYL)-N-(DEOXYGUANOSIN-8-YL)-4-AMINOBIPHENYL AND N-(2′-DEOXYGUANOSIN-8-YL)-4-AMINOBIPHENYL VIA α-PHENYL-N-(4-BIPHENYL)NITRONE

ABSTRACT

Lead tetraacetate (LTA) oxidation of α-Phenyl-N-(4-biphenyl)nitrone (8) to give a new ultimate carcinogen, N-acetoxy-N-benzoyl-4-aminobiphenyl (9) which was reacted with deoxyguanosine (dG) at pH 6.9 to give nucleoside derivative, N-(benzoyl)-N-(deoxyguanosin-8-yl)-4-aminobiphenyl (10). Following debenzoylation with sodium carbonate-methanol leads to N-(2′-deoxyguanosin-8-yl)-4-aminobiphenyl (11).     

金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1,-3)mRNA在小鼠胎盘中的表达

本实验利用原位杂交对小鼠妊娠不同时期胎盘中MMP－2,TIMP－2,－3mRNA的表达进行了研究。结果表明;MMP－2主要在具有很强的侵润能力的海绵滋养层细胞中表达,到妊娠13．5天时,MMP－2的表达明显降低,说明此时的滋养层细胞基本上失去侵润能力。TMIP－1和TMIP－3在滋养层细胞和蜕膜细胞中都有表达,这两种抑制因子的协同表达,一方面能够调控滋养层细胞侵入子宫内膜的深度,另一方面,滋养层细胞自身既表达MMP－2又表达TIMPs,可能对其自身有保护作用,使得MMP的水解功能局限于子宫蜕膜的特定区域。在妊娠10．5天,滋养层巨细胞同时表达TIMP－1,－3mRNA,这可能与其功能的转换是一致的;因为此时小鼠滋养层巨细胞体积最大,且不再增殖,同时其功能屯从侵入型向内分泌型转换。所以,MMPs和TIMPs在小鼠滋养层细胞和子宫蜕膜中的协同表达表明其在着床过程中可能发挥重要作用。     

HSV-2 miR-H4-5p负调节CDKL2基因表达并抑制Act D引起的Vero细胞凋亡

单纯疱疹病毒Ⅱ型（herpes simplex virus Ⅱ,HSV-2）编码的microRNA-H4-5p (miR-H4- 5p)可与病毒神经毒力蛋白ICP34-5mRNA互补结合并抑制其表达,从而降低病毒感染对细胞的毒力作用,以减弱细胞对病毒的免疫作用．但miR-H4-5p是否可靶向作用于宿主细胞基因目前仍不十分清楚．本研究证明,miR-H4-5p可通过靶向细胞周期依赖性激酶（cyclin- dependent kinase like 2, CDKL2）基因表达抗防线菌素D（actinomycin D, ActD）诱导的非洲绿猴肾上皮细胞（African green monkey kidney cells ,Vero）细胞凋亡．生物信息学方法在线预测miR-H4-5p潜在靶基因CDKL2的结合位点,并构建双萤光素酶报告系统检测miR-H4-5p靶向作用. 数据表明,miR-H4-5p可有效抑制萤光素酶的表达．qPCR和Western印迹数据表明,miR-H4-5p 可在 mRNA水平和蛋白水平抑制CDKL2表达．构建过表达载体pmR- mcherry/miR-H4-5p（cherry/H4-5p）,将cherry/H4-5p与pmR-mcherry空质粒转染至Vero细胞,转染24 h后加入终浓度为1 μg/mL放线菌素D诱导细胞凋亡．MTT法、流式细胞术和Western印迹检测Bax、Bcl-2表达.数据表明,miR-H4-5p可抑制ActD诱导的Vero细胞活性降低．本实验提示,miR-H4-5p可通过靶向调节宿主细胞基因抑制细胞凋亡,可能以此方式共同参与HSV 2潜伏感染的建立．但是这种抑制凋亡作用的通路及其机制目前仍不清楚,miR-H4-5p是否可靶向更多的宿主基因仍需要进一步实验验证．     

nif HDK基因在W80-2上的初步定位

对几种质粒检测方法进行了比较 ,发现原位裂解法能比较满意地检测到巴西固氮螺菌 (Azospirillumbrasilense)的巨大质粒。利用改进后的原位裂解法能比较稳定地检测到W 80 2菌株中的巨大质粒。通过Southern blotting的方法将W 80 2菌的染色体及巨大质粒转到尼龙膜上 ,与用地高辛标记的含nifHDK基因的 pSA30质粒杂交 ,发现W80 2菌株的nifHDK基因定位在染色体上。     

基质金属蛋白酶-2,-9在子宫腺肌病的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 , 9(MMP 2 , 9)在子宫腺肌病的表达及与发病机制的关系。方法　采用免疫组织化学SP法对 2 8例子宫腺肌病 (疾病组 )异位及原位内膜 ,35例子宫肌瘤 (对照组 )原位内膜中MMP 2 , 9的表达进行测定 ,应用图像分析系统分析MMP 2 , 9平均光密度值。结果　MMP 2 , 9于两组原位内膜中表达均呈月经周期依赖性 ,分泌期的表达强度高于增生期 (P <0 0 5 ) ;于疾病组异位内膜中表达无周期性显著差异 (P >0 0 5 )。疾病组内增生期异位内膜MMP 2 , 9的表达强度高于原位内膜 (P <0 0 5 )。疾病组整个月经周期中 ,MMP 2 , 9于原位及异位内膜的表达皆持续明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　研究显示子宫腺肌病原位和异位内膜MMP 2 , 9的过度表达可能与其发病机制有关     

2N一4N嵌合体小鼠及其在基因功能研究上的应用

2N-4N嵌合体是由二倍体(2N)的胚胎细胞(或ES细胞)与四倍体(4N)的胚胎细胞组构成的一种拯救型嵌合体。这种嵌合体由于4N胚胎细胞独特的胚外组织发育特性,从而可获得完全源自2N细胞成份的仔鼠(或胎儿)。这一特性最终在ES细胞转基因的基因功能研究中极具重要价值。综述了2N-4N嵌合体研究进展及其在基因功能研究领域的应用。     

基因组信息指导的星海链霉菌中2-甲硫基-N6-(4-羟基异戊烯基)-腺苷的分离鉴定

【目的】研究海洋链霉菌新种星海链霉菌Streptomyces xinghaiensis NRRL B24674~T次级代谢物中是否存在2-甲硫基-N~6-异戊烯基修饰的腺苷。【方法】通过生物信息学分析星海链霉菌S.xinghaiensis NRRL B24674~T基因组序列,寻找这类化合物的生物合成相关基因;采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等分离技术对该菌株的发酵粗提物进行分离纯化;利用质谱与核磁共振等波谱技术鉴定化合物的结构。【结果】在星海链霉菌基因组中找到含有2-甲硫基-N~6-异戊烯基修饰的化合物生物合成途径中的2个同源蛋白;从该菌的发酵液中分离鉴定了2-甲硫基-N~6-(4-羟基异戊烯基)-腺苷(ms2io6A)。【结论】星海链霉菌S.xinghaiensis NRRL B24674~T存在此类腺苷修饰反应,并且是首次在链霉菌中发现此类腺苷修饰。生物信息学分析预示着链霉菌中可能普遍存在此类核酸或者核苷修饰。