氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究（二）：不同浓度显色剂对氨基…

氨基酸显色剂是氨基酸分析的的重要试剂之一,主要成份是茚三酮、二甲亚砜、还原剂、氢氧化锂等有机试剂氨基酸显色剂（以下称显色剂）。目前这种显色剂依赖从国外进口,由于受价格、进口周期及有效期限等诸多因素的影响,使之远远不能满足国内用户的需要,为适应国内用户的需要,进一步认自制显色剂的可行性和可靠性,确定显色剂的最佳配方,本项目对自制显色剂的存放时间、不同浓度显色剂、以及显色剂光学试验等项指标进行了全面系     

氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究（二）──不同浓度显色剂对氨基酸含量的影响

氨基酸显色剂是氨基酸分析的重要试剂之一。主要成份是茚三酮、二甲亚砜、还原剂、氢氧化锂等有机试剂合成的氨基酸显色剂（以下称显色剂）。目前这种显色剂依赖从国外进口,由于受价格、进口周期及有效期限等诸多因素的影响,使之远远不能满足国内用户的需要,为适应国内用户的需要,进一步论证自制显色剂的可行性和可靠性,确定显色剂的最佳配方,本项目对自制显色剂的存放时间［１］、不同浓度显色剂、以及显色剂光学试验等项指标进行了全面系统地分析比较,本研究观察了１００ｍｌ溶液中显色剂含量分别为５ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、２５ｍｇ等不同浓度的自制和进口显色剂对氨基酸含量的影响,结果表明,当显色剂的浓度为１５ｍｇ／１００ｍｌ时,氨基酸可出现最大峰值、测定所得氨基酸浓度显著高于２０、２５ｍｇ／１００ｍｌ和５、１０ｍｇ／１００ｍｌ所得的结果。提示氨基酸显色剂不但与存放时间有关,而且与其浓度关系密切的有关理论：     

氨基酸显色剂茚三酮试剂的实验研究（一）茚三酮显色剂在不同存放时间内对氨基酸含量的影响

本项目采用新的技术,对茚三酮显色试剂进行了研究,利用国内新引进的６３００黄金系列氨基酸分析仪对不同存放时间内的节三酮显色剂对氨基酸含量的影响进行了实验研究。观察了第１天,第７天,第１４天,第２１天,第２８天内进口茚三酮显色剂与自制茚三酮显色剂对氨基酸含量的影响。并对３８种氨基酸与自制茚三酮试剂和进口茚三酮试剂反应后的实验结果进行了观察。实验结果表明,第１天至第２８天内,自制茚三酮试剂的稳定性、灵敏度,重度性,分辨率等项指标均优于进口的茚三酮试剂,统计结果,说明用自制的茚三酮试剂取代进口的茚三酮试剂是可靠和可行的。     

氨基酸的离子交换色谱(理论原理和实践)(续)

<正> 五、洗脱液中氨基酸的定量测定洗脱液中氨基酸的定量测定是根据洗脱液中各组分与各种显色试剂(见第一章)反应时产生的颜色强度借助光电比色计进行测量的。适合于此目的所有显色试剂中,象上面指出的最有效的是茚三酮。这种制备简单,使用方便,重复性好的茚三酮试剂由Moore 和Stein 首先提出。作为这种方法的还原剂采用氢化茚三酮—茚三酮的还原形。如所周知,在与氨基酸相互作用时茚三酮形成带颜色的物质—双配位茚酮胺(Ⅲ)和醛     

四种渗透性防冻剂在猕猴精子低温冷冻保存中对精子功能状态的影响

以冷冻精子的复苏运动度、荧光染料Hoechst 3 3 2 5 8检测的细胞膜完整率、异硫氰酸荧光素标记的花生凝集素 (FITC PNA)检测的顶体完整率作为精子功能状态的指标 ,对甘油、二甲亚砜、乙二醇和丙二醇 4种常用渗透性防冻剂在猕猴精子冷冻保存过程中的作用进行了比较。结果表明 :冷冻保存精子的复苏运动度 ,甘油 ( 4 7 3± 5 7% )和乙二醇 ( 4 4 8± 6 7% ) >二甲亚砜 ( 2 2 9± 0 9% ) >丙二醇 ( 0± 0 % ) ;细胞膜完整率 ,甘油 ( 5 4 8± 3 2 % )和乙二醇 ( 5 4 0± 6 7% ) >二甲亚砜 ( 3 7 5± 7 0 % ) >丙二醇 ( 2 8 3± 6 5 % ) ;顶体完整率 ,甘油 ( 82 2± 2 4 % )和乙二醇 ( 82 4± 2 4 % ) >二甲亚砜 ( 6 8 7± 5 7% )和丙二醇 ( 72 3±3 5 % ) (P <0 0 5 )。结果提示 :二甲亚砜和丙二醇 ,尤其是丙二醇并不适合猕猴精子的冷冻保存 ;而乙二醇具有和甘油相似的保护作用 ,是一种极具潜力的猕猴精子冷冻保存的渗透性防冻剂。     

混合醇体系中测定氨基酸的茚三酮光度法

氨基酸一般利用自动分析仪定量测定,但需高精密仪器,而基层研究单位一般难以采用,而且分析也不需要如此精密。利用茚三酮能够定量测定氨基酸,除脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮形成黄色化合物外,其它所有氨基酸均与茚三酮反应形成蓝紫色物质,溶液颜色深浅与氨基酸含量成正比。据此本文对氨基酸的茚三酮光度法测定进行了研究和改进。在混合醇体系中以醋酸钠-醋酸为缓冲溶液,加入抗坏血酸以增加反应的灵敏度,100℃水浴20分钟完成显色反应。并对酸度、试剂用量、反应时间等因素进行了研究,拟定了用于混合氨基酸总量测定的操作程序。     

一种简易的picomole水平的氨基酸定量测定法

茚三酮显色法,是氨基酸分析仪最早使用和经常使用的检测方法,但是用此法检测,氨基酸分析仪,灵敏度通常限制在nanomole水平。Beckmen 121M和D-500型氨基酸分析仪的比色分析据称能在100p mol水平进行,但这已是灵敏度的极限。随着荧光技术的应用和发展,荧光检测技术与氨基酸分析仪相结合,与高效液相色谱相结合,使氨基酸、多肽和蛋白质的检测灵敏度达到Pmol水平。本文介绍一种简单易行的改进方法,即用邻苯二甲醛/β-巯基乙醇(OPA/ME)试剂代替     

具液晶性的天然高分子—N—邻苯二甲酰化壳聚糖的合成与表征

本文在不同条件下制备了一种液晶性天然高分子——N-邻苯二甲酰化壳聚糖,定性讨论了反应条件对壳聚糖的N-邻苯二甲酰化反应的影响。研究了N一邻苯二甲酰化壳聚糖的溶解性、成膜性、结晶性,并重点研究了其液晶性,测定出室温下它在二氯乙酸和二甲亚砜溶液中的临界浓度都为24wt％,在三氟乙酸溶液中的临界浓度为14wt％。     

高压液相色谱法分析氨基酸

<正> 自从1958年Spackman Stein和Moore建立了最初的氯基酸自动分析技术以来,随着HPLC的出现和发展,氨基酸分析方面的探讨中更加广泛和深入。衍生剂的不断更新,进一步展示了新一代氨基酸分析技术的活力。从最初的荧光胺、茚三酮,茚三酮/苯乙醛,发展到如今的邻苯二甲醛/二疏基乙醇,邻苯二甲醛/疏基     

直接比色法测定发酵液中赖氨酸的含量

<正> 赖氨酸是人类和动物生长所必须的氨基酸之一。大量用作输液,营养药品,食品和饲料添加剂,目前它的制备普遍采用发酵提取法,在发酵过程中还产生多种其它氨基酸,因此要求快速测定发酵液中赖氨酸的含量比较困难,过去采用的分析方法有下述几种: 一、发酵液经泸纸层析,薄板层析或电泳分离后,将赖氨酸组份洗脱,加茚三酮试剂显     

氨基酸的简易制备方法

1　目的　学习从人的头发中制备氨基酸的原理和方法 ,验证细胞和生物体中含有氨基酸。2　原理　在氨基酸溶液中 ,当ｐＨ达到氨基酸的等电点时 ,氨基酸的溶解度最低 ,析出结晶。3　材料、用具、试剂　人的头发、烧杯 ( 1 0 0ｍｌ)、石棉网、玻璃棒、三角架、漏斗、定性滤纸、精密 ｐＨ试纸、表面皿、活性碳、浓盐酸、氨水、铁架台。4　方法、步骤、结果1 )制备氨基酸溶液 :将 1 0 0 ｇ人的头发放入烧杯(甲 ) ,加入 50ｍｌ浓盐酸。　　 2 )将装有毛发和浓盐酸的甲烧杯置于垫有石棉网的三角架上 ,用酒精灯加热 ,同时用玻璃棒搅拌 ,至毛发全部溶…     

太白草药马牙七的成分鉴定及抗氧化作用

通过采用茚三酮实验、泡沫试验、斐林试验、本尼迪哥特实验、三氯化铁实验、三氯化铝实验、碱液试验、浓硫酸实验等方法,对太白草药马牙七根、茎、叶三部分所含的化学成分进行鉴定,结果显示马牙七中含有氨基酸、还原糖、多糖、皂苷、鞣质、酚类、黄酮类、蒽醌等物质。茎中各种化合物的含量最高,根中次之,而叶中含量均较少。继而测定了马牙七提取物的抗氧化活性,结果显示马牙七水提取物具有强的还原性。     

三氯化钛对氨基酸茚三酮显色的影响

在氨基酸的分析中,常用茚三酮显色法进行定性定量测定。无论用离子交换柱层析和液体色谱法还是用氨基酸自动分析仪分析氨基酸,常在茚三酮显色剂中加入二氯化锡还原剂作为增色剂,但由于二氯化锡不稳定,配制茚三酮时加入255毫克/升的三氯化钛代     

茚三酮与氨基酸显色反应再探

<正> 一、前言迄今为止,茚三酮与氨基酸显色反应的机理仍不十分清楚。尤其已报道的操作中,该反应对各种氨基酸选择性极低,因而使本法的应用受到了一定限制。此外,据文献报道:茚三酮与氨基酸显色反应不仅仅发生于α-氨基酸、对于β氨基酸、伯胺类等亦能进行;金属离子会干扰显色反应等。对茚三酮与氨基酸显色反应进行深     

红酵母产类胡萝卜素提取工艺的优化研究

目的:从提取溶剂及提取条件等方面对红酵母产类胡萝卜素提取工艺进行了优化研究。方法:用单因子实验对提取溶剂进行了筛选;用析因试验对提取条件进行了分析研究;通过最陡爬坡实验和中心组合设计实验,优化得到了最佳的类胡萝卜素提取条件。结果:结果表明丙酮和二甲亚砜组成的复合体系是理想的提取溶剂。溶剂添加量、提取温度、提取时间、丙酮与二甲亚砜组分比例都对红酵母产类胡萝卜素提取产生一定影响,其中溶剂添加量和丙酮与二甲亚砜组成比例的影响最为显著(P<0.001)。最佳优化提取条件为:溶剂添加量为42.66%(V/V),丙酮与二甲亚砜组成比例为62.47%(V/V),温度为20℃,提取时间为90min,在此条件下红酵母产类胡萝卜素的最大提取量为5.51μg/ml。结论:实验得到了红酵母发酵产类胡萝卜素溶剂提取条件的一个非常合适的模型。     

三种典型赤潮藻产生与消耗二甲基硫化物的速率估算

采用抑制剂加入法估算了中肋骨条藻、棕囊藻和东海原甲藻在不同生长期内二甲基硫化物的产生与消耗速率.结果表明:颗粒态二甲基巯基丙酸(DMSPp)和颗粒态二甲亚砜(DMSOp)在3种藻类的不同生长期内均为净消耗,溶解态二甲基巯基丙酸(DMSPd)和溶解态二甲亚砜(DMSOd)的含量受藻类产生与细菌病毒消耗控制,在藻类不同生长期内存在不同的产生与消耗速率,而二甲基硫(DMS)在3种藻不同生长期内均为净产生.同一种藻在不同生长期内以及不同藻在相同生长期内二甲基硫化物的产生与消耗速率均存在较大差异,表明藻类的生理状态和种间差异均对二甲基硫化物的产生与消耗速率产生影响.     

不同一级结构寡肽的α-羰酰及喹喔啉衍生物的荧光性质

通过对寡肽N-末端α-羰酰及喹喔啉衍生物和荧光在碘化钾、乙二醇、盐酸胍和氯化钠溶液中的变化测定结果表明:不同一级结构寡肽的羰酰荧光物的碘化钾淬灭过程彼此有差异.在不同浓度的乙二醇和盐酸胍溶液中,第三位氨基酸残基的种类和构型不同的寡肽羰酰衍生物的荧光变化亦有不同.乙二醇引起羰酰甘氨寡肽荧先发射峰位红移.丙氨寡肽的发射峰位蓝移;并且不同链长的甘氨短肽及丙氨短肽羰酰衍生物在不同浓度的乙二醇或盐酸胍溶液中各自的荧光变化有差异,但这种差异随肽链的延长逐渐减小.以上结果提示:尽管(含有2-6个氨基酸残基的)寡肽在溶液中难以形成二级结构,但它们的空间构象可能不是随机的;寡肽链越长,结构相对稳定.     

不同一级结构寡肽的α-羰酰及喹喔啉衍生物的荧光性质

通过对寡肽N-末端α-羰酰及喹喔啉衍生物和荧光在碘化钾、乙二醇、盐酸胍和氯化钠溶液中的变化测定结果表明:不同一级结构寡肽的羰酰荧光物的碘化钾淬灭过程彼此有差异.在不同浓度的乙二醇和盐酸胍溶液中,第三位氨基酸残基的种类和构型不同的寡肽羰酰衍生物的荧光变化亦有不同.乙二醇引起羰酰甘氨寡肽荧先发射峰位红移.丙氨寡肽的发射峰位蓝移;并且不同链长的甘氨短肽及丙氨短肽羰酰衍生物在不同浓度的乙二醇或盐酸胍溶液中各自的荧光变化有差异,但这种差异随肽链的延长逐渐减小.以上结果提示:尽管(含有2-6个氨基酸残基的)寡肽在溶液中难以形成二级结构,但它们的空间构象可能不是随机的;寡肽链越长,结构相对稳定.     

冬虫夏草口服液游离氨基酸和微量元素的分析比较

目的：为了研究冬虫夏草口服液的有效成分和药用价值,测定冬虫夏草口服液中的游离氨基酸和微量元素的不同种类和含量。方法：采用安捷伦1200高效液相色谱仪,C18反相柱梯度分离,邻苯二甲醛一芴甲酯柱前自动衍生化,利用已知浓度氨基酸标准品进行外标法定量,根据已知浓度氨基酸标准品的峰面积与样品峰面积之比计算游离氨基酸的含量。结果：冬虫夏草口服液中含有23种游离氨基酸和18种微量元素,氨基酸总量在口服液中占0．892％,必需氨基酸在游离氨基酸总量中占53．1％;含量最高的游离氨基酸依次是赖氨酸、亮氨酸、精氨酸。结论：游离氨基酸是冬虫夏草口服液中重要的生物有效成分,为冬虫夏草口服液的药效提供了基础数据。     

稻米赖氨酸快速测定条件的探讨

以氨基酸自动分析仪测定稻米赖氨酸含量为参照标准。在“茚三酮测定赖氨酸含量”(A法)的基础上,对该法中大米蛋白质的提取温度和时间、色温度和时间及茚三酮用量等条件进行了探讨,提出了稻米赖氨酸含量快速测(B法)。提取条件为90℃5分钟,显色条件为90℃20分钟;茚三酮试剂用1 ml。用B法对10个大米样品进行测定,赖氨酸含量与氨基酸分析仪测得的赖含量基本上一致,无显著差异(P>0.05)。