一种新型的激光微束细胞打孔仪系统

研究成一种高性能的激光微束细胞打孔仪。YAG腔外倍频激光经空间滤波器、聚焦物镜作用于细胞,产生小于1μ的打孔直径,一个高倍率(约2000~X)电视监测系统作为细胞打孔及观测用;设计了一种长工作距(c′≥15mm),短焦距(f_o=6.25mm)的特殊聚焦物镜。     

农业激光生物效应的可比性实验与数理统计

本文根据数理统计的原理和方法,初步讨论了农业激光生物效应可比性实验的问题。     

新型温敏微载体用于无损收获贴附型细胞的研究

聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)接枝的微载体由于表面同时含有疏水性的异丙基和亲水性的酰胺基而成为一种典型的温敏性微载体。但是微载体表面PNIPAAm接枝浓度会很大地影响贴附型细胞在微载体上的贴附能力和脱附能力,限制了它在相关领域的应用效果。该实验运用原子转移自由基聚合作用(atom transfer radical polymerization,ATRP)合成法将PNIPAAm接枝到表面氯甲基化的聚苯乙烯微球[chloromethylated poly(styrene),CMPS]表面,合成不同PNIPAAm接枝浓度的温敏微载体,研究其细胞贴附、脱附以及在转瓶悬浮培养中的细胞增殖能力。同时,运用电子扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)、原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)、X-射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)对温敏微球表面形貌进行表征。实验结果表明,当PNIPAAm添加浓度是200 mmol/L时,温敏微球表现出60%的细胞脱附率及50%的细胞贴附率,并且在转瓶悬浮培养中具有持续稳定的增殖能力。另外,SEM与AFM表征结果显示,温敏微载体表面粗糙度有明显地增加;XPS结果表明,温敏微球表面N元素有显著增加。这些结果证明了微载体上温敏材料NIPAAm的成功接枝。以上实验结果表明,这种新型温敏微载体具有良好的细胞贴附和脱附能力,将会是大规模培养贴附型细胞的良好材料。     

一种实时、灵敏检测细胞功能活动的仪器—微生理记录仪

微生理记录仪（microphysiometer)能够快速、实时、连续、灵敏地检测生理状态下完整细胞胞外环境的酸度变化,借以反映细胞的功能活动。现已广泛应用于药理学、毒理学、胞内信息传递等多个领域,本文仅就其基本原理及其在生命研究中的应用做一简要综述。     

生物多样性与广东的大农业──生物学家既往开来的战略任务

生物多样性与广东的大农业──生物学家既往开来的战略任务林有润（广东省植物学会）１问题的提出当今上正进行着一场新的技术革命，电子、微电子的应用正促进自然科学各领域、包括生物科学问题向高精尖方向发展，但是世界上与日俱增的“人口爆炸”、“能源匮泛”、“环境...     

激光生物效应的生化分析与机理研究──激光对大豆作用的生化分析与作用机理的初步探讨

比较分析研究红宝石、Ｎ＿２、ＣＯ＿２激光对大（青）豆单独或复合辐照的作用,观察到激光软应对生物大分子的含量和生物活住的影响因激光种类和剂量不同而异,特别是不同激光效应对大（青）豆系列种子蛋白中的组份氢基酸含量的影响各具类型。尤以Ｇｌｕ,Ｍｅｔ含量变化显著而特异。     

东方蜜蜂微孢子虫一新型孢壁蛋白的基因克隆、 表达及亚细胞定位

【目的】微孢子虫(Microsporidia)孢壁在孢子构成及孢子侵染宿主过程中扮演重要的角色。本研究旨在鉴定获得的东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae新型孢壁蛋白,并进行基因克隆和原核表达,明确其亚细胞定位。【方法】通过在线软件对东方蜜蜂微孢子虫新型孢壁蛋白AAJ76_1400036761序列进行生物信息学分析。利用PCR法获取目的片段并将其克隆至原核表达载体pCold II中,利用IPTG诱导表达重组蛋白并通过镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。以获得的重组蛋白为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,通过间接免疫荧光技术和免疫胶体金定位技术对该蛋白进行亚细胞定位分析;利用蛋白质免疫印迹法检测该蛋白与东方蜜蜂微孢子虫几丁质壳的互作。【结果】在MicrosporidiaDB数据库中获得AAJ76_1400036761基因序列,基因全长681 bp,编码226个氨基酸;预测等电点为6.84,分子量为26.19 kD。SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明AAJ76_1400036761重组蛋白能够在大肠杆菌Eescherichia coli Rosetta中高量表达。Western blot结果表明,制备的多克隆抗体能够特异地识别东方蜜蜂微孢子虫总蛋白中的AAJ76_1400036761,说明其在成熟东方蜜蜂微孢子虫中有表达。亚细胞定位结果显示,AAJ76_1400036761定位于东方蜜蜂微孢子虫孢壁上。重组蛋白AAJ76_1400036761能够与蜜蜂微孢子虫的几丁质壳结合。【结论】AAJ76_1400036761蛋白在东方蜜蜂微孢子虫成熟孢子中有表达;该蛋白定位于东方蜜蜂微孢子虫孢壁上,为东方蜜蜂微孢子虫新的孢壁蛋白。本研究为深入研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。     

我国农业生物基因工程安全评价的现状、问题与建议

我国农业生物基因工程安全评价的现状、问题与建议吕建秋雷茂良石燕泉程金根（华南农业大学广州５１０６４２）（农业部科技质标司北京１０００２６）农业生物基因工程是指利用载体系统的重组ＤＮＡ技术及利用物理、化学和生物等方法把重组ＤＮＡ导入农业生物体内的技...     

树突状细胞、CD8~+ T细胞与单纯疱疹病毒1型的潜伏感染

单纯疱疹病毒1型(HSV-1)属于疱疹病毒α亚科,是一种在人群中广泛传播的病原体.HSV-1病毒感染机体后可在宿主神经系统中建立起长期的潜伏感染,并不时地从潜伏状态"重激活"导致临床症状及体液排毒.病毒抗原特异性CD8+T细胞具有抑制神经细胞中HSV-1"重激活",维持病毒潜伏感染状态的能力.本文从树突状细胞对病毒抗原的递呈,病毒抗原特异性CD8+T细胞的来源、种类、抗原特异性及功能等方面对近年来的研究进展做一综述.     

系统发育系统学——对现代生物系统学的理解与探讨(6)生物分类及相关的单系、并系与复系的问题

<正> 本系列第五篇中(孟津、王晓鸣,1989),我们讨论了对生物系统的不同表达方法,即:系统树与支序图,其中曾提到生物系统分类中的单系的问题。本篇将试图探讨生物分类原理及相关的几个种以上分类单元的重要概念:单系,并系与复系。在本文的讨论中,除非特别指出外,我们则假设生物系统发育(phylogeny)为已知,即:在已知支序图或系统     

临“疫”发“微”——新型冠状病毒肺炎疫情下“病原生物学与医学免疫学”课程思政教学模式的探索与研究

课程思政是高校思想政治理论课改革创新的重要举措,因其德育与智育协同的优势,逐渐成为高校课程改革的方向.为探究新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称“新冠”病毒肺炎)疫情下“病原生物学与医学免疫学”课程思政教学模式及其实施效果,以成都中医药大学2018级中医学(5+3一体化)的2个班级学生为教学对象,其中1班采用传统教...     

综述——基于纳米材料的生物检测与医学诊断技术：贵金属团簇探针用于细胞成像及体外检测

贵金属团簇(noble metal clusters)是近年来新兴的一类荧光标记材料．由于具有物理尺寸小、荧光可调及生物相容性等优异的性能使得其在生物成像及检测领域都有着广泛的应用前景．本文讨论了贵金属团簇的制备和荧光特性,重点论述了其作为标记材料在细胞成像方面及体外检测应用中的研究进展．     

O型口蹄疫病毒VP1 T细胞、B细胞表位双拷贝基因与大肠杆菌LTB、STI肠毒素基因融合表达产物的免疫应答

合成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中与细胞免疫（21～40表位肽）及体液免疫（141～160表位肽）相关的基因序列2020VP1,运用基因工程技术构建了含有肠毒素大肠杆菌LTB、STI基因及双拷贝2020VP1的融合表达载体r2020-B-2020-STI,转化宿主菌BL21(DE3)RIL后的表达产物经SDS-PAGE分析,结果显示重组融合蛋白的分子量约为45kDa,表达量较高。ELISA实验结果显示,融合蛋白能与霍乱毒素（choleratoxin）CTB抗体特异结合。动物实验表明,融合蛋白能够诱发兔体产生较强的FMDV中和抗体,免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应,说明融合蛋白能诱导机体产生FMDV特异性细胞及体液免疫反应;同时,融合蛋白免疫雌鼠能够抵抗大肠杆菌强毒株攻击,免疫兔体能够产生STI中和抗体,且融合蛋白不具STI毒性,证明融合蛋白具有良好的LTB、STI免疫原性。实验结果表明,此融合蛋白具有开发成为口蹄疫及肠毒素腹泻联合疫苗的应用价值。     

O型口蹄疫病毒VP1 T细胞、B细胞表位双拷贝基因与大肠杆菌LTB、STⅠ肠毒素基因融合表达产物的免疫应答

合成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中与细胞免疫(21～40表位肽)及体液免疫(141～160表位肽)相关的基因序列2020VP1,运用基因工程技术构建了含有肠毒素大肠杆菌LTB、STⅠ基因及双拷贝2020VP1的融合表达载体r2020-B-2020-STⅠ,转化宿主菌 BL21(DE3) RIL后的表达产物经SDS-PAGE分析,结果显示重组融合蛋白的分子量约为45 kDa,表达量较高.ELISA实验结果显示,融合蛋白能与霍乱毒素(cholera toxin)CTB抗体特异结合.动物实验表明,融合蛋白能够诱发兔体产生较强的FMDV中和抗体,免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应,说明融合蛋白能诱导机体产生FMDV特异性细胞及体液免疫反应;同时,融合蛋白免疫雌鼠能够抵抗大肠杆菌强毒株攻击,免疫兔体能够产生STⅠ中和抗体,且融合蛋白不具STⅠ毒性,证明融合蛋白具有良好的LTB、STⅠ免疫原性.实验结果表明,此融合蛋白具有开发成为口蹄疫及肠毒素腹泻联合疫苗的应用价值.     

水稻雄性不育新质源的研究──新型水稻细胞质雄性不育系马协A与野败型珍汕97A不育性的遗传学比较

采用套袋自交结实率和自然结实率为主,花粉育性和田间目测整株育性为辅的综合性状,判定新型细胞质雄性不育系马协Ａ以及它与明恢６３的杂种Ｆ_１、Ｆ_２和ＢＦ_１的植株育性,并以野败型珍汕９７Ａ作对照,比较研究了其不育性的遗传规律。结果表明,马协Ａ与珍汕９７Ａ不育性的遗传均由两对基因控制,但新型细胞质雄性不育系马协Ａ两对基因的作用方式与珍汕９７Ａ不同。前者Ｆ_２群体的育性分离符合９：３：３：１的比例,ＢＦ_１符合１：２：１的比例;后者相应群体则符合１２：３：１和２：１：１的比例,两对基因间表现为显性上位。斯米尔诺夫检验也表明马协Ａ／明恢６３和珍汕９７Ａ／明恢６３的Ｆ_２群体的结实率频率分布差异显著（Ｐ＜０．０１）。并讨论了细胞质雄性不育的遗传机理及分子基础。     

水稻雄性不育新质源的研究──新型水稻细胞质雄性不育系马协A与野败型珍汕97A不育性的遗传学比较

采用套袋自交结实率和自然结实率为主,花粉育性和田间目测整株育性为辅的综合性状,判定新型细胞质雄性不育系马协Ａ以及它与明恢６３的杂种Ｆ１,Ｆ２和ＢＦ１的植株育性,并以野败型珍汕９７Ａ作对照,比较研究了其有性的遗传规律,结果表明,马协Ａ与珍汕９７Ａ不育性的遗传均由两对基因控制,但新型细胞质雄性不育系马协Ａ两对基因的作用方式与珍汕９７Ａ不同,前者Ｆ２群体的育性分离符合９：３：３：１的比例,ＢＦ１符合１：     

肥胖2型糖尿病患者血清脂联素、E-选择素、可溶性细胞黏附因子-1的表达及其与氧化应激的关系

目的:研究肥胖2型糖尿病患者血清脂联素、E-选择素、可溶性细胞黏附因子-1的表达及其与氧化应激的关系。方法:选择2015年06月至2017年01月在我院治疗的2型糖尿病患者72名,根据患者体重和腰围分为观察组与对照组,观察组为肥胖2型糖尿病患者,对照组为非肥胖2型糖尿病患者。分析两组患者临床指标检测结果及与氧化应激的相关性。结果:观察组血清脂联素(Adiponectin,ADPN)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)水平[(6.05±1.01)μg/ml vs(7.83±1.25)μg/ml、(72.15±12.04)NU/ml vs(87.66±14.53) NU/ml]均明显低于对照组水平,且观察组E-选择素(Human soluble E-selectin, s E-selectin)、丙二醛(Malondialdehyde; malonic dialdehyde; Propanedial, MDA)、可溶性血管细胞黏附因子-1 (Human soluble vasccular cell adhesion molecule 1, s VCAM-1)、HOMA-胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment for insulin resistance, HOMA-IR)水平[(66.81±11.10)μg/L vs (55.22±9.05)μg/L、(5.68±0.92)μmol/L vs (4.15±0.62)μmol/L、(1.84±0.25) mg/L vs (1.70±0.24) mg/L、(4.52±1.88) vs(2.23±1.15)]均明显高于对照组(P0.05);观察组患者甘油三酯(Triglyceride,TG)、胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein, LDL-C)显著高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、糖化血红蛋白(Hemoglobin A1C, HbA1C)明显低于对照组(P0.05)。MDA与空腹血糖(fasting plasma glucose, FPG)、餐后2小时血糖(2 hours postprandial blood glucose, 2Hpg)、HbA1C、TG、TC、LDL-C、s E-selectin、s VCAM-1、HOMA-IR呈正相关关系(P0.05),与HDL3-C、ADPN、SOD呈负相关关系(P0.05);SOD与FPG、2Hpg、Hb A1C、TG、TC、LDL-C、s E-selectin、s VCAM-1、HOMA-IR、MDA呈负相关关系(P0.05),与HDL3-C、ADPN呈正相关关系(P0.05)。结论:肥胖易导致2型糖尿病患者的血清脂联素下降并抑制胰岛素的分泌,可溶性血管细胞黏附分子-1及E-选择素的高表达与肥胖2型糖尿病患者发生氧化应激有关。     

小麦与长穗偃麦草、中间偃麦草杂种及其衍生后代的细胞遗传学研究──Ⅲ．小麦和偃麦草基因重组的遗传基础浅析

十倍体长穗偃麦草和六倍体中间偃麦草均含有一些基因促使部分同源的染色体之间发生配对,这些基因分布于不同的染色体组中,并具很强的传递力。小麦与长穗偃麦草杂种回交后代的部分植株在减数分裂后期出现多条染色体同时断裂现象,使不同染色体通过断口联结形成新的易位成为可能。上述二因素可能是造成小麦和偃麦草基因重组的主要原因之一。     

免疫增强型与普通肠内营养制剂对老年重症肺炎营养状态、肠黏膜屏障功能及T细胞亚群的影响

摘要 目的：观察免疫增强型与普通肠内营养制剂对老年重症肺炎营养状态、肠黏膜屏障功能及T细胞亚群的影响。方法：选择2017年7月~2020年3月期间我院收治的136例老年重症肺炎患者,根据随机数字表法分为研究组（n=68）、对照组（n=68）,对照组患者给予普通肠内营养制剂进行干预,研究组给予免疫增强型肠内营养制剂进行干预,对比两组肠道菌群失调发生率、营养状态、肠黏膜屏障功能、T细胞亚群及并发症发生率。结果：研究组的肠道菌群失调发生率低于对照组（P<0.05）。并发症发生率两组对比无差异（P>0.05）。两组干预10 d后各项营养状态指标：白蛋白（ALB）、前白蛋白（PAB）、血红蛋白（HGB）均较干预前升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。干预10 d后两组各项肠黏膜屏障功能指标：内毒素（ET）、二胺氧化酶（DAO）均较干预前降低,且研究组低于对照组（P<0.05）。干预10 d后两组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均较干预前升高,且研究组高于对照组（P<0.05）,CD8⁺较干预前降低,且研究组低于对照组（P<0.05）。结论：免疫增强型肠内营养制剂与普通肠内营养制剂相比,安全性相当,但前者对老年重症肺炎患者的营养状态、肠黏膜屏障功能、免疫功能改善效果均更好,且肠道菌群失调发生率更低。