血卟啉衍生物(BHPD)光敏反应的原初过程Ⅰ.活性氧的产生

为了阐明血卟啉衍生物(HPD)的光敏作用机理,本文以我国自行研制、并已应用的第一代产品——北京血卟啉衍生物(简称BHPD)为对象,采用电子自旋共振(ESR)和自旋捕捉(Sping-Traping)等技术,从光生物物理角度,探讨了BHPD光敏反应的原初过程.结果表明,不仅观察到~1O_2的产生,而且还观测到O_2~(?)和·OH的产生.这提示,在BHPD对生物系统的光敏损伤过程中,不只是~1O_2,O_2~(?)和·OH等活性氧,很可能也起重要作用.     

血卟啉衍生物的生物学作用与制备

一、血卟啉衍生物是一种诊治癌瘤的光敏物质早在本世纪初,人们在研究血卟啉衍生物(Hematoporphyrin derjrative,简写 HPD)的光动力学过程时就发现其对人和哺乳动物癌瘤的光敏治疗作用。近年来,随着激光技术的发展,利用血卟啉加激光诊治癌瘤,在世界各国得到了广泛的应用。我国学者也在进行大量研究,还组织过攻关组来协调这方面的工作。HPD 光敏诊治癌瘤具有安全、简便、诊断率高,治疗效果好,对正常组织损伤少等优点,是一种很有前途的诊治癌瘤方法。     

卟啉类光敏药物HPD活性组分DHE的光敏作用：Ⅱ.产生…

本文用ＥＳＲ方法研究了血卟啉衍生物（ＨＰＤ）和ＰｈｏｔｏｆｒｉｎⅡ的活性成分双卟啉醚酯混合物（ＤＨＥ）生成＾１Ｏ２的光敏作用。利用２,２,６,６－Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ－４－ｐｉｐｅｒｉｄｏｎｅ（Ｔｅｍｐｏｎｅ）对＾１Ｏ２的捕捉,测定所生成的氮氧自由基的ＥＳＲ信号,并经加ＮａＮ３和Ｄ２Ｏ的实验,证实了ＤＨＥ光敏反应有＾１Ｏ２的生成,并在实验的浓度范围内,随ＤＨＥ浓度增大,生成的＾１Ｏ２也增加。结合     

铝酞菁:人癌细胞的吸收及光敏杀伤的研究

本文比较了光敏剂铝酞菁(AISPC)及血卟啉衍生物(HPD)在人癌细胞的吸收及光敏杀伤中的差异.探讨了两光敏剂在细胞中的分布、摄入量,血清的影响、及细胞对两光敏剂的吸收动力学过程,结果显示,除了类似的特征外,细胞对AISPC的吸收速度慢于HPD.光敏杀伤的结果表明,在红光照射下,两光敏剂对细胞有相近的杀伤效率;在室内自然光下,AISPC对细胞的损伤明显低于HPD,显示出其较低的光毒付作用,具有适合临床应用的优点.     

HPD对人工膜的光敏作用

本文用ESB、荧光和冰冻断裂电子显微镜技术在分子水平上研究了血卟啉衍生物(HPD)作用于人工膜的光敏作用过程,损伤细胞膜的途径以及各种因素的影响.结果表明,HPD光敏作用与羟基·OH有关的动力学过程和靶分子密切相关.光照HPD的主要靶物质是不饱和分子,双键是其重要的进攻部位,由此导致脂质过氧化和膜的破坏.但这并不一定是引起膜损伤的唯一途径.HPD光敏作用也可破坏靶分子的空间排列或构象,从而导致膜结构的无序和损伤.牛血清白蛋白可以加强HPD的光敏作用.此外,HPD的光敏作用还受温度,光照时间、HPD和靶物质的浓度等因素的影响.     

激光、血卟啉对小鼠S-180V肿瘤细胞膜通透性的作用及其影响因素

通过Na_2~(51)CrO_4在肿瘤细胞膜内外的分布比值的测定,观察了激光血卟啉衍生物(简称HPD)对小鼠S-180V肿瘤细胞膜通透性的作用及其影响因素:(1)通过紫外吸收光谱的测定对肿瘤细胞摄取HPD的动态过程作了观察。选择了实验所需的合适HPD浓度和作用时间,并观察到细胞悬液中血清蛋白能阻抑细胞对HPD的摄取。(2)在氦氖激光照射后即可观察到含有HPD的肿瘤细胞膜外~(51)Cr/膜内~(51)Cr的比值明显增加,而单照激光或单加HPD两组的~(51)Cr比值与正常对照组相比无明显变化。(3)上述的~(51)Cr比值变化随着照后保温时间的延长而逐渐加大。与此同时细胞形态也发生相应的变化,细胞死亡率也逐渐增加。说明除了原初的光敏反应外,还有继发的细胞损伤。(4)细胞悬液中血清蛋白的存在虽然对激光血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用有所减弱,但在这样条件下的光敏反应比较接近临床上治疗肿瘤的实际情况。     

NaN_3血清等对血卟啉衍生物光敏致溶血作用的影响

含有血卟啉衍生物(HPD)的细胞在红光照射后,其光动力学过程的主要产物是一些HPD的自由基和单态氧等。这些极为活泼的物质使膜或其它细胞器上的重要大分子因过氧化而损伤,并进而可引起癌细胞或正常细胞死亡。人血红细胞材料容易得到,其死亡指标(溶血)容易测量,是一个研究光敏作用的良好模型。已有人用红细胞研究原卟啉等光敏机理。本文用人红血球为材料,探讨HPD的光动力学过程,以及某些~1O_2的淬灭剂对这一过程的影响及血清等的保护效应。     

血卟啉衍生物——光敏疗法治疗皮肤恶性肿瘤

血卟啉衍生物(Hematopor phyrinderivatives-Hpd)和激光相结合用以诊断和治疗恶性肿瘤,是当前国际上积极开发的新技术。光敏方法是把光敏药物注入人体后,用一定波长的光去敏化药物,产生光动力学反应,借以确定肿瘤的部位和杀灭癌细胞以达到治疗恶性肿瘤的目的。     

铝酞菁光敏反应中间产物的实验研究

铝酞菁(AISPC)是有潜力用于光动力癌症疗法(PDT)的新光敏剂.本文应用ESR波谱技术,对AISPC光敏反应的中间产物进行实验研究,探讨了重水,β—胡萝卜素、迭氧钠、SOD、细胞色素C、甘露醇及乙醇等活性氧增进或抑制剂对光敏反应的影响.结果表明,(Al-SPC)在水溶液中的光敏反应,除之有~1O_2生成外,还有O_2~-及·OH自由基产生.但以~1O_2.中间产物为主.光敏疗法是一种有希望的肿瘤治疗新方法.但由于光敏剂血卟啉衍生物(HPD)组份复杂、红光吸收太弱等局限性,1985年以来,探寻结构明了、成份稳定、主吸收峰位于红光区(人体绍织透射的最佳波段)的新光敏剂的研究工作不断增多,其中尤以对酞菁类染料的研究较为集中.我组在研究出可溶于水的磺化铝酞菁后,亦已在离体人癌细胞及小鼠移植瘤实验中(待发表)获得杀伤癌细胞、癌组织的功效.随着酞菁染料作为新光敏剂的潜力被挖掘,其反应机制的研究也受到重视,但目前尚不甚明了,且较系统的研究也不多.本文应用ESR波谐技术,可2、2.6、6—四甲基—4羟基哌啶醇为探针,并利用~1O_2,0_2~1·OH消除剂,研究了磺化铝酞菁的光敏反应中间产物,探讨了其可能的反应机制.     

竹红菌乙素(乙醇胺)修饰物对于鼠肝线粒体光敏损伤研究

竹红菌乙素与乙醇胺进行化学结构的修饰,可以得到红光性能更加优良的新型光敏剂(简称HB-E),为此,我们作了以下几方面的研究:1.对线粒体膜脂质过氧化损伤的光敏作用;2.对线粒体膜巯基蛋白光敏损伤;3.对ATP酶的失活;4.损伤机理的探讨;5.不同光敏剂光敏能力的对比;从以上研究可以看到HB-E光敏作用对于线粒体的损伤十分明显,从损伤的机理角度证明了氧自由基的作用是存在的,对于体系中产生超氧阴离子的来源认为并不是单线态氧的作用,而是HB-E自身产生自由基与氧反应的结果;所以说HB-E光敏作用中存在两种机制即:Ⅰ型和Ⅱ型并存;与其它光敏剂的光敏能力比较中明显大于血卟啉和亚甲兰。     

NaN_3血清等对血卟啉衍生物光敏致溶血作用的影响

含有血卟啉衍生物(HPD)的细胞在红光照射后,其光动力学过程的主要产物是一些HPD的自由基和单态氧等。这些极为活泼的物质使膜或其它细胞器上的重要大分子因过氧化而损伤,并进而可引起癌细胞或正常细胞死亡。人血红细胞材料容易得到,其死亡指标(溶血)容易测量,是一个研究光敏作用的良好模型。已有人用红细胞研究原卟啉等光敏机理。本文用人红血球为材料,探讨HPD的光动力学过程,以及某些~1O_2的淬灭剂对这一过程的影响及血清等的保护效应。一、材料与方法 1、HPD:北京制药工业研究所制。NaN_3:国产分析纯,α-生育酚为国产。小牛血清上海     

血卟啉光动力作用对小鼠腹水肝癌细胞膜损伤的ESR波谱研究

已知血卟啉衍生物(以下简称HPD)能较长时间潴留在癌组织内,在可见光或低能量激光照射下受激,可以破坏生物分子和杀伤癌细胞。细胞膜在此过程中有肿胀和通透性发生改变等现象。然而,HPD对细胞膜类脂分子的物理性质有何影响未见报道。为此,我们用脂肪酸噁唑氮氧自由基自旋标记小鼠     

血卟啉衍生物光敏引起NAD(P)H氧化作用研究

血卟啉衍生物(HPD)光敏引起NAD(P)H氧化为中介的luminol化学发光(CL)与多种因素有关,如pH、激光功率密度、照光时间以及luminol、HPD以及底物NAD(P)H浓度等的改变都可引起CL的变化.当NAD(P)H浓度远远大于HPD浓度时,CL强度与HPD浓度成正比关系,这表明化学发光测定可以作为检测HPD光敏反应的指标,而且HPD敏化的NAD(P)H光氧化过程中化学发光的产生是与活性氧物质(ROS)有关的.选择性应用O_2、H_2O_2、OH、~1O_2的专一性清除剂研究ROS及~1O_2在HPD敏化的NAD(P)H氧化过程中的作用,其主要结果如下:(1)NAD(P)H光氧化为中介的lumlnol化学发光在水溶液中受到铜锌超氧化物岐化酶(CuZn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和甲酸钠(F)的抑制,在D_2O中受到His和Met的抑制.1μg/ml的CuZn-SOD抑制可达84%,但再增加酶量,抑制程度不再增加;CAT的抑制作用也出现类似情况;F的抑制作用较弱,在14—42mM浓度范围内,抑制程度不超过60%.(2)CuZn-SOD对化学发光的抑制作用随照光时间延长而持续下降,而CAT和F的抑制作用却随照光时间延长而有上升的趋势.His和Met在D_2O中的作用比较复杂.(3)观察伴随NAD(P)H光氧化失活时OD_(340)值的变化,发现ROS清除剂在H_2O中对失活有保护作用,而~1O_2猝灭剂His和Met在D_2O中对失活有保护作用.上述清除剂和猝灭剂     

水环境中活性氧的来源、种类及测定方法

各种环境介质和生命体中许多微观化学过程都与活性氧密切相关.本文介绍了水环境中活性氧的来源、种类和测定.它们主要包括:¹O₂(单线态氧)、O₂^-(超氧自由基)/HO₂·(氢过氧自由基)、·OH(羟基自由基)、H₂O₂、RO·(烷氧基)、ROO·(烷过氧基)和R·OH(氢过氧化物)等.其主要来源于辐射分解、热解和氧化还原法等.测定采用分子探针法、图谱法和酶法.     

竹红菌光敏作用的初步探讨*

用纸片法作为筛选光敏物质及光敏作用的研究方法。结果证实了(1)竹红菌Hypo crella bambusae中含有对革兰氏阳性细菌具光敏活性的成分;(2)从中筛选到一种红色的光敏色素,属苝醌的一个新的衍生物,取名竹红菌甲素(Hypocrellin A简称“甲素”);(3)揭示了“甲素”是对可见光敏感、作用光谱较宽的光动力学(photodynamic)物质。从化合物的类型、光敏特性、治疗方法、治疗对象及其效果看,可以认为甲素是一新型的光化学疗法药物。     

竹红菌光敏作用的初步探讨

用纸片法作为筛选光敏物质及光敏作用的研究方法。结果证实了(1)竹红菌Hypo crella bambusae中含有对革兰氏阳性细菌具光敏活性的成分;(2)从中筛选到一种红色的光敏色素,属苝醌的一个新的衍生物,取名竹红菌甲素(Hypocrellin A简称“甲素”);(3)揭示了“甲素”是对可见光敏感、作用光谱较宽的光动力学(photodynamic)物质。从化合物的类型、光敏特性、治疗方法、治疗对象及其效果看,可以认为甲素是一新型的光化学疗法药物。     

能量补充对红细胞膜通透性的影响

本文报道利用亚硝酸钠(NaNo_2)穿透红细胞膜与血红蛋白(Hb)作用生成高铁血红蛋白(MetHb),测定MetHb可作为红细胞膜通透性的指标,研究在红细胞悬液中补充葡萄糖,萄葡糖-6-磷酸(G-6-P),3-磷酸甘油(3-PG),ATP后红细胞膜通透性的变化。萄葡糖,G-6-P,ATP均可不同程度地提高通透性,而3-PG有一定的抑制作用,可改善由血卟啉衍生物或γ-线(1000 rad)照射小鼠后引起的红血球通透性增加的作用,使恢复到接近正常水平。     

竹红菌乙素光敏作用对于小鼠肝癌细胞内游离钙浓度的影响

本文用Quin 2/AM荧光探针作为细胞内部钙离子指示剂,研究了竹红菌乙素光敏损伤后引起小鼠腹水肝癌细胞的钙离子浓度变化。实验结果表明,细胞内的钙离子浓度随着乙素光敏作用增强而上升。并且钙离子浓度的升高与细胞的存活率下降呈正比关系;用数种单线态氧淬灭剂(L-His,NaN_3);羟自由基清除剂(PABGA)观察了乙素光敏过程中产生的活性氧与细胞内的钙离子浓度增加相关。用膜去极化方法研究了细胞在光敏损伤过程中钙离子浓度变化与去极化的关系。     

激光小剂量血卟啉及OMA系统在支气管肺癌诊断上的应用

目的 :研究激光小剂量血卟啉及 OMA计算机系统在支气管肺癌荧光诊断的临床应用。方法 :以2 mg/kg剂量的血卟啉衍生物 ( HPD)对 3 7例患者进行荧光诊断 ,其中 2 2例为肿癌患者 ,1 5例为非肿瘤患者。以 OMA计算机系统记录和分析荧光光谱 ,数据经归一化处理。结果 :肿瘤患者的标本荧光强度 Itumor/Ino-mal总平均为 1 .2 4± 0 .0 8,非肿瘤患者的标本荧光强度 Itumor/Inomal总平均为 0 .98± 0 .0 6,两组 t检验显示 p<0 .0 1 ,有非常显著的差异 ,以前者下限 1 .0 5为诊断肿瘤标准 ,2 2例恶性肿瘤患者的检测值全部符合标准 ,1 5例非恶性肿瘤患者中除 2例鳞状化生比值高于标准为假阳性外 ,其余均符合标准 ,据此诊断准确率为94 .6%。结论 :2 mg/kg小剂量血卟啉可作肿瘤荧光诊断。     

活性氧与植物细胞编程性死亡

在各种条件诱导的植物细胞编程性死亡(PCD)过程中都有活性氧的参与,H2O2和O2可能是参与PCD调节的最重要的活性氧.文中概述了活性氧与植物细胞编程性死亡的关系以及活性氧的生成调节和与其它一些信号物质之间可能的相互作用.