人末稍血B细胞集落形成法及克隆化法

<正>材料 1、RPMI 1640培养液(普通浓度和二倍浓度)。 2、N-2羟乙基哌啶N′-2乙磺酸缓冲液(HEPES)。 3、2-巯基乙醇(2ME)。 4、L-谷氨酰胺。 5、琼脂。 6、植物血凝素P(PHA-P)。 7、脂多糖(LPS)。 8、胎牛血清(FCS)。 9、器具:塑料平皿(直径30mm),     

淋巴细胞单抗致敏的红细胞花环试验和荧光染色法检测人外周血液的淋巴细胞

本文应用T、B淋巴细胞和T细胞亚群单抗致敏的红细胞花环试验结合荧光染色法,检测了50例健康人外周血液内的淋巴细胞。人外周血液中与T_3单抗致敏红细胞形成花环的T_~+细胞平均百分率为61.29±11.686,与T_4单抗致敏红细胞形成花环的T_4~+细胞平均百分率为32.76±8.974,与T_8单抗致敏红细胞形成花环的T_8~+细胞平均百分率为21.66±7.443,B细胞以单抗致敏红细胞识别的B细胞平均百分率为19.55±10.018,但标准差过高,个体间淋巴细胞的百分率波动范围相当大。用同一方法和试剂连续检测同一个体的淋巴细胞和T细胞亚群的百分率亦很难得到重复性结果。我们对检测人外周血液中的淋巴细胞的方法判断人体的免疫状态,和作为各种疾病的诊断指标进行了讨论。     

用滤纸血片法检测乙型肝炎

用滤纸血片做反向间接血凝检测乙型肝炎表面抗原HBsAg,其结果与血清标本是一致的。为了进行大面积乙肝检测,我们对滤纸血片和血清标本同时进行对比观察其结果如下。一材料与方法 1 标本采集份数:计450份。 2 滤纸血片:滤纸系中国杭州新华造纸厂制。直径11cm,滤纸分四等份,每份滴一人血液两滴,每滴直径>9mm。     

与豚鼠红细胞形成自然花环的狗淋巴细胞类别的探讨

本文研究了豚鼠E花环形成狗淋巴细胞(E-RFC)的类别。狗淋巴细胞于37℃孵育后,可提高E花环形成率。E-RFC与总淋巴细胞的SIg阳性率相近。E-EAC(豚鼠红细胞—抗体和补体包被的绵羊红细胞)混合花环实验表明一部分狗淋巴细胞同时具有E和补体二种受体,总淋巴细胞与补体受体淋巴细胞的E花环阳性率无显著差异。这些结果说明E受体不仅表现于一部分T细胞上,而且见于某些B细胞上。因此,不宜用E花环试验作为检测狗T细胞的方法。     

“免疫”核糖核酸对热处理后的人淋巴细胞恢复花环的作用

正常人外周血T淋巴细胞经46℃处理1小时,失去与绵羊红细胞形成玫瑰花环的能力。这种淋巴细胞用正常人白细胞“免疫”核糖核酸(iRNA)4℃保温1小时,可以部分地恢复与绵羊红细胞形成玫瑰花环的能力。玫瑰花环恢复的程度在一定范围内与所用的白细胞iRNA浓度有关。白细胞iRNA经核糖核酸酶处理后其恢复玫瑰花环的能力明显降低,但脱氧核糖核酸酶或胰蛋白酶处理后对恢复玫瑰花环的作用很少影响,若白细胞iRNA先与绵羊红细胞温育,再以此红细胞与加热处理的淋巴细胞在4℃温育1小时,未见玫瑰花环的恢复作用,提示白细胞iRNA的这种作用是通过淋巴细胞来实现的。对白细胞iRNA恢复加热处理的淋巴细胞的作用机理进行了讨论。     

用聚合酶链式反应法检测人乳头状瘤病毒DNA

实验研究表明,宫颈癌的发生和发展与人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的感染有着密切关系。约有80％的宫颈癌组织中含有人乳头状瘤病毒第16型(HPV 16)及18型(HPV 18)的DNA,因此,检测宫颈癌组织中的HPV DNA对研究宫颈癌的发生和发展机制以及宫颈癌的防治都有重要意义。目前检测HPV DNA的手段都采用DNA探针杂交技术,该方法要有高比活的同位素,而且费时。聚合酶链式反应(Polymerase Chain Rea-     

火箭电泳法进行人用狂犬病疫苗抗原的检测

应用火箭电泳法(RIE)建立并优化了人用狂犬病疫苗抗原的检测方法。以传统的动物NIH法对电泳结果进行验证,实验结果显示该方法特异、重复性好、简便易行,与NIH法有较好的相关性。适用于人用狂犬病疫苗中间品抗原的检测,对人用狂犬病疫苗的生产及质量控制有重要意义。     

用火箭电泳法检测人用狂犬病疫苗半成品抗原含量初探

用火箭电泳法（ＲＩＥ）检测了５批ａＧ株地鼠肾细胞人用狂犬病疫苗半成品（未加吸附剂）的抗原含量。结果表明,ＲＩＥ法快速、简便、准确。峰高与浓度的线性相关系数ｒ〉０．９９５０,待检疫苗与标准品的剂量反应曲线高度一致,试验的灵敏度为０．１５ＩＵ／ｍｌ,重复性好,５次结果的变异系统ＣＶ％≤５．７４％。因此,ＲＩＥ法有可能作为检测狂犬病疫苗半成品抗原含量的适宜方法     

利用猪血清短期培养人体外周血淋巴细胞的研究

用猪血清代替小牛血清作人体外周血淋巴细胞短期培养,进行染色体分析及淋巴细胞转化的研究。在94例姐妹染色单体差别染色的培养中,培养液分别加入小牛血清与猎血清,细胞有丝分裂指数分别为3.91％和3.78％;21例常规法培养中,分裂指数分别为9.10％和9.21％;5例淋巴细胞转化试验,小牛血清和猪血清培养的转化率分别为69.52％和69.59％;16例阉割后公、母猪血清加入培养基中,细胞分裂指数(SCD法)分别为2.96％和3.14％。以上各项对照试验,均无显著性差异(P>0.05)本研究证实,猪血清可用于人体外周血淋巴细胞短期培养。     

酶标SPA玻片法快速检测流行性出血热血清抗体的研究

本文介绍了 HRP-SPA 玻片染色法检测病人和动物血清抗体的方法,并与酶标抗体和 IF 法作了比较。结果提示 EHF病人在发病3天直至病后16年均可检出抗EHF 的 IgG 抗体,故这三种方法均可用于对 EHF 的早期、快速及追溯诊断和流行病学调查。这三种方法均较快速,并具有较好的特异性,但 HRP-SPA 法较后两种方法敏感并具有更多的优点,主要是便于在基层推广使用。     

用生物素标记的葡萄球菌蛋白A(SPA)检测日本脑炎抗体

<正>自从亲和素和生物素特异性相互反应由Guesdon(1979)引入ELISA以来,此方法已被广泛采用为一种有用的技术,以检测和定量免疫球蛋白或抗原。用生物素标记的抗猪免疫球蛋白(Ig)抗体,结合酶标记亲和素结合物的ELISA,也已成功用到作者     

CCK-8法检测九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用

为了明确九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,本文利用Bradford法检测九香虫血淋巴浓度,用不同浓度的九香虫血淋巴处理体外培养的MCF-7细胞,采用CCK-8法检测九香虫血淋巴对MCF-7细胞的抑制作用。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的生长,且对MCF-7的抑制率呈时间、剂量依赖关系。     

混合淋巴细胞培养法用于小鼠遗传监测的初步研究

如果将两个有遗传差别个体的淋巴细胞进行混合培养(混合淋巴细胞培养,MLC),则其中一定比例的淋巴细胞会发生一系列改变,包括大分子物质合成速率增加,发生淋巴母细胞转化和增殖等,即混合淋巴细胞反应(MLR)。MLR受主要组织相容性复合体(MHC)的控制,而MLR是MHC可以识别的特征,其反应符合移植规律。故可将MLC用于实验动物遗传监测。本文旨在探讨MLC用于实验小鼠遗传监测的实际问题。1 材料和方法     

用体外免疫法建立人—人抗流行性乙型脑炎病毒杂交瘤细胞株

利用单克隆抗体(McAb)进行病毒病的治疗是人们所关心的一个重大课题。 流行性乙型脑炎(乙脑)是一种严重威胁人民健康的急性传染病,病死率高,后遗症严重。国内外目前尚无特效疗法。陈伯权等用乙脑病毒皮下或腹腔感染3周龄小白鼠24、48小时及5天后,分别用乙脑病毒51-8McAb进行治疗,平均治愈率分别为78％、73％及22％。     

亚甲基兰法检测人白介素—2（rhIL—2）活性

用亚甲基兰法、3 H TdR掺入法和MTT法 3种方法对 2 0批检品重组人白介素 2 (rhIL 2 )活性进行检测 ,结果差异不显著 ( p >0 .0 5)。与3 H -TdR掺入法和MTT法相比较 ,亚甲基兰法具有经济、快捷、对操作者无损害和对环境无污染等特点 ,是一种值得采用的重组人白介素 2活性检测方法 ,适合重组人白介素 2生产过程中中间品的质量监控。     

人—小鼠淋巴细胞杂交瘤中抗体分泌和人染色体丢失的关系

本文应用G带,G11和C带染色体制片的方法分析16个人一小鼠杂交瘤抗体分泌和人染色体丢失的关系。结果表明抗体阳性的9株杂交瘤保留人的染色体较多,7/9在13条以上,阴性的7株中4/7在5条以下。Ig基因相关的三对人染色体中,14号(重链基因相关)最稳定,22号(入链基因相关)其次,2号(K链基因相关)最易丢失。9株以SHM-D33为融合亲本瘤系的杂交瘤,没有1株保留第2号染色体,而用RF瘤系建立的4株杂交瘤中有3株拥有2号染色体,提示2号的丢失可能也与瘤系相关。     

醛化人血清火箭免疫电泳Ig定量技术 Ⅰ.人血清蛋白质醛化条件及IgG定量的初步探讨

本文确定了醛化人血衍的最适条件是:0.3毫升稀释的血清加0.2毫升2.2M 甲醛,37℃保温5分钟。已醛化的血清在含1.4%兔抗人IgG 抗血清的琼脂糖凝胶中电泳150分钟,出现单一的正极峰,染色后可用厘米直尺测量峰高。同一血清样品同时使用Mancini 免疫单扩散法进行测定。两法结果相比较,误差无显著性意义。认为本文醛化条件用于血清IgG 定量测定具有快速、敏感和重复性良好等优点。