几种冰冻切片固定液固定效果的比较

<正>冰冻切片具有方便快捷的特点,对手术中的的快速病理诊断具有重要的意义。冰冻切片质量的好坏直接关系到术中病理诊断的结果,制做高质量的冰冻切片要求每一环节都要做到精益求精,尤以固定液的选择更为至关重要[1]。为了选择一种固定效果较为理想的固定液,我们选择了几种较为常用的固定液,切片染色后对比观察各自的固定效果对染     

三种固定液对两种氧化应激细胞模型Bclin1和LC3蛋白免疫荧光染色的影响

摘要 目的：比较采用三种不同的固定液对两种氧化应激细胞模型Beclin1和LC3蛋白免疫荧光染色的影响。方法：本研究使用丙酮/甲醇（1:1）固定液、甲醇固定液和4%多聚甲醛三种固定液分别对氧化应激细胞模型大鼠原代心肌成纤维细胞和MCF-7乳腺癌细胞株进行固定,然后再分别进行免疫荧光双染实验,对比三种固定液固定后对自噬关键调控蛋白Beclin1和LC3染色效果。结果：三种固定液对氧化应激细胞模型Beclin1和LC3蛋白免疫荧光染色结果存在较大差异。丙酮/甲醇（1:1）固定液固定后免疫荧光染色效果最佳,细胞结构清晰可见,两种蛋白定位表达清晰,甲醇固定液次之,4%多聚甲醛固定液效果欠佳。结论：在对大鼠原代心肌成纤维细胞和MCF-7乳腺癌细胞进行自噬相关蛋白免疫荧光双染色实验中,在使用其它固定液染色效果不佳的情况下,可以选择应用丙酮/甲醇（1:1）固定液固定,再进行免疫荧光染色;根据不同实验需求相应选择更适宜的固定液,以达到最佳的荧光染色结果。     

大鼠睾丸组织固定法的优选研究

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10％甲醛溶液、NBF—Bouin’s、Bouin’s和改良Davidson’s四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染色,比较不同固定液中的睾丸组织学形态的差异;利用糖原特殊染色（PAS）,探讨不同固定液对睾丸糖原观察的影响;采用免疫组织化染色,测评睾丸组织内雄激素受体的固定效果。结果改良Davidson’8固定液较NBF—Bouin’s引起的曲细精管萎缩轻,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson＇s固定液在需要对精子发生进行分期时,其PAS染色的效果与Bouin＇s液固定后等同。结论与苴守圈常浦相№曲冉David0Rnn浦对女宙奥由的圈索特罩掂杯     

青蛙胚胎三色染色法

一.杀死与固定青蛙产卵一般在四月中至六月底之间,在稻田及河沟中都可以采到,采集后选择所需要的发青时期,固定于施氏固定液中,固定时间24小时.固定后以流水冲洗24小时.然后依次换入30%、50%、70%、酒精中各2小时.胚胎就可以保存在70%酒精中.     

混合甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本的最佳免疫组化效果研究

目的:探讨混合甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本的最佳免疫组化效果。方法:采用不同pH值(6.0、7.0、8.0)的混合甲醛固定液对39枚大肠癌淋巴结标本进行不同时间(6 h、6 h-12 h、1 d-7 d)的固定处理。以细胞角蛋白20(CK20)为目标抗原,运用OIympusdp 70图像采集分析仪抽选出混合甲醛固定液最佳免疫组化染色的pH值及固定时间。结果:经pH值为7.0混合甲醛固定液处理后,阳性率为92.31%,高于经pH值为6.0、8.0的混合甲醛固定液处理后的76.92%、74.36%,且经pH值为7.0、8.0处理后的阳性率比较有统计差异(P0.05)。混合甲醛固定液的固定时间在6 h-12 h时的阳性率为94.87%,高于固定时间为6 h、1 d-7 d处理的30.77%、76.92%(P0.05)。结论:对于大肠癌淋巴结标本,以CK20为目标抗原,选择pH值为7.0的混合甲醛固定液固定6 h-12 h能够得到质量较佳的免疫组化染色效果。     

论线粒体的固定方法

一、绪言 在前一报告中,作者曾证明綫粒体能被许多固定高尔基体的固定液固定,而且在这些混合固定液中,对綫粒体的固定起决定作用的是福马林和重铬酸钾,其他金属和非金属盐类只有辅助作用。但关於綫粒体的固定,至今有一些问题还没有十分肯定,如醋酸、氧化汞和铬酸是否能保存綫粒体?虽然在一些显微技术的方法上普遍地记载着固定剂中的     

固定对免疫组织化学反应的影响

为在组织固定过程中最大程度地减少固定剂对抗原性和组织结构的破坏,使免疫组织化学反应清晰可靠,我们观察研究了１０％中性缓冲福尔马林（ＮＢＦ）、酒精－甲醛（ＡＦ）、甲醛钙（Ｆｃａ）、Ｃａｒｎｏｙ氏液、Ｂｏｕｉｎ氏液、Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ氏液和Ｈｅｌｙ氏液,分别对ＡＢＣ法显示基底膜Ⅳ型胶原,ＳＰ法显示血管内皮第Ⅷ因子和小肠固有层浆细胞的影响。结果表明用同一免疫组织化学方法显示不同固定剂固定的同一抗原物质可出现明显差异。本文还简要阐述了有关固定剂的作用机理与免疫组织化学染色的相关性。为观察研究组织和细胞的某种或某些抗原物质,而准确选择适当固定剂提供了一定依据     

一种半永久玻片标本的制备方法

这里介绍一种用蔗糖液制备半永久玻片标本的方法。用这种蔗糖液制备半永久玻片标本研究染色体是很方便的和有实际意义的。这种用蔗糖液制备的半永久玻片标本,可以保存较长时间(一年或更长)。蔗糖液的制备方法取40克蔗糖(化学纯)溶解在60毫升水中,并加热至沸,直至溶液总体积减少了1/4时为止。为避免蔗糖液冷却后出现结晶,要向蔗糖液滴入2—3滴香柏油,细心搅匀,然后再加0.2克苯酚结晶,该糖液可保存一个月以上。花药制片方法 1.从经卡诺固定剂(95％酒精:冰醋酸3:1)固定的保存在70％酒精中的花序上取出一些花药,用醋酸地衣红色液(醋酸洋红、醋酸间     

介绍一种效果良好的涡虫固定方法

介绍一种效果良好的涡虫固定方法在涡虫教学制片实践中,我们发现刺激性不同的固定液,会使虫体产生不同的形状。制片厂生产的涡虫装片标本,大都是虫体缩的较短,有失活体时的形象,这是由于固定液不太适合所造成的。我们总结出一种效果良好的固定方法,兹介绍如下：固定...     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

介绍一种新的昆虫标本保存液

浸渍昆虫标本,一般都用酒精,福尔马林等为保存固定液,但这些固定液中,有的是易燃物品或腐蚀剂,乘车坐船到外地采集不能随身携带,以保旅途安全,而达些固定液往往到了采集地又不易购得,即是用这些固定液浸渍的标本,又不能寄运,为了解决这一困难,     

兼顾免疫组化和电镜样品的戊二醛–多聚甲醛混合固定液的应用

探寻兼顾同一实验动物用于免疫组化和电镜标本取材的灌注固定液中戊二醛–多聚甲醛的合适配比。小鼠分别用不同配比的固定液进行心脏灌注固定,对心肌、肾脏、肝脏进行电镜观察,并选择心肌组织进行免疫组化反应和免疫胶体金标记。结果发现,采用0.10%戊二醛+4%多聚甲醛混合液灌注的小鼠各脏器既能很好地保存其超微结构,又能保存某些抗原活性。     

聚乙烯醇封藏水绵永久装片

用聚乙烯醇不仅可以封藏较大的生物标本(参见本刊1983年第四期第54页聚乙烯醇膜藏叶脉标本一文),经过实验,还可用来封藏显微玻片标本,效果十分理想,特别是含水的标本。采集水绵投入FAA固定液中固定24小时,取出浸入50％酒精中(一段时间),移入清水中2—3小时,浸渍洗除固定液,在这期间要注意换清水,如果是流水清洗1小时即可。把水绵放入滴有品红染液的表面皿中染色10分钟,经镜检认为满意便可用清水洗去浮色。     

改良混合固定液在HE制片中的应用

在病理技术工作中,组织固定是最基础,也是最关键的步骤。因固定不当造成切片困难、着色不良而延误诊断,严重影响临床治疗。我科通过长期实践对固定液进行改良,收到满意效果。材料和方法1.组织来源日常送检淋巴结、诊刮的子宫内膜、子宫肌瘤组织各60例,每一实验组20例。2.固定液     

一种简便经济的凝胶电泳同工酶特异染色方法

介绍一种简单、经济的同工酶染色方法：用熔化的0．4％琼脂糖处理滤纸备用,染色前将滤纸浸于同工酶染色液中,染色时将滤纸盖在聚丙烯酸胺胶上,然后将胶放在有盖塑料盒中保温染色,染色时间要比普通方法略长。染色后将胶和滤纸移入固定液中用镊子除去滤纸．     

肱骨外科颈骨折临床治疗观察

目的:对肱骨外科的骨折进行临床治疗,在此期间观察病情的进展情况,并结合多种手段提高预防效果。方法:在我医院2014年一整年的患者中随机选择80例,将其分为两组进行治疗分析,其中一组选择用常规的钢板固定治疗,另一组选择用三叶草性钢板固定治疗,并对两组的治疗效果、恢复状态、手术时间进行记录,以便对临床效果进行研究。结果:使用常规钢板固定的一组患者骨关节的复原效率几乎为百分之百,另一组的恢复效率为百分之六十左右,两组在数据上比较具有统计学意义(P0.05)。结论:对肱骨外科骨折的治疗要遵循骨骼的生理方式,使用常规钢板固定的方法不会引起并发症,且提高了关节的恢复能力,应该在临床上给予重视。     

不同固定液对体外细胞系荧光蛋白淬灭及对胞内蛋白荧光染色的影响

目的:比较不同细胞固定液对荧光蛋白淬灭情况以及核内、胞浆蛋白免疫荧光染色的影响。方法:分别对融合了RFP和GFP基因的鼻咽癌HK1细胞采用95%乙醇、75%乙醇、甲醇、丙酮:甲醇=1:1、5%冰乙酸、Carnoy固定液进行固定,然后采用免疫荧光法对细胞进行免疫染色。结果:六种固定液均能使荧光蛋白猝灭。免疫荧光染色方面,对于核蛋白染色,75%乙醇、95%乙醇、丙酮:甲醇=1:1、Carnoy固定液固定后核区获得明显的荧光染色,而采用甲醇、5%冰乙酸固定后荧光染色不明显。对于胞质蛋白染色,按荧光染色的清晰程度分为固定于Carnoy固定液丙酮:甲醇=1:1甲醇5%冰乙酸75%乙醇95%乙醇,前四者固定可见分布于胞质,75%乙醇或95%乙醇固定的目标蛋白定位不清。结论:六种不同的固定液在有效失活荧光蛋白的情况下对核蛋白及胞浆蛋白抗原性的影响略有不同,可根据研究目的蛋白表达的部位及特点来选用合适的固定液。     

小鼠眼球标本固定液及制片方法的改进

在小鼠眼球标本石蜡切片制作过程中,由于眼球组织结构的特殊,各部分组织的软硬度不同,各层组织之间连接性差,如用常规10％甲醛液固定,眼球经过固定后用乙醇脱水,各层组织由于收缩率的不同容易造成组织分离,特别是造成视网膜的分离甚至脱落。其他的一些固定液虽然可以保证眼球内部各层组织完整,但是细胞肿胀肥大,细胞着色不均匀,给在显微镜下观察带来困难。因此我们结合眼球的结构特点,总结出一种比较适合固定眼球组织的固定液以及采用适当的取材方式,有助于制作高质量的眼球组织HE片,介绍如下。     

不同固定液对豚鼠免疫器官石蜡切片质量的影响

摘要 目的：比较不同固定液对SPF级豚鼠免疫器官的固定效果,为筛选适用于脾脏、淋巴结和骨髓的固定液提供参考。方法：将21只300～350 g雄性SPF级豚鼠随机分为7组,每组3只,摘取脾脏、肠系膜淋巴结、髂骨骨髓,各组分别使用4 %多聚甲醛溶液、10 %中性福尔马林溶液、Bouin''s溶液、Carnoy溶液、Davidson''s溶液、Zenker溶液、Helly溶液固定48 h。髂骨骨髓在固定前浸泡于EDTA脱钙液（pH7.2）中并置于37 ℃孵箱进行脱钙。通过制作石蜡切片并进行HE染色,从切片龟裂程度、细胞形态、染色效果等方面比较7种固定液对切片质量的影响。结果：10 %中性福尔马林溶液固定后的脾脏未出现龟裂,白髓和红髓着色清晰,淋巴细胞形态易辨。Carnoy溶液固定后的淋巴结生发中心明区暗区分明,红蓝染色适中,淋巴细胞形态清晰。4 %多聚甲醛溶液固定后的骨髓着色适中,清晰可辨。结论：常温条件下对组织固定48 h,经HE染色后想要达到理想的切片质量,建议使用10 %中性福尔马林溶液固定脾脏,使用Carnoy溶液固定淋巴结,首选4 %多聚甲醛溶液固定骨髓,如果考虑固定的同时完成脱钙建议选择Bouin''s溶液固定骨髓。     

利用微波固定组织的收缩率

目的探讨利用微波辐射固定、微波辐射与固定液结合固定组织的收缩程度。方法将组织分成40组,用一定强度的微波辐射或一定强度的微波辐射与不同固定液结合方法固定动物组织,并制做石蜡组织切片和HE染色,在此过程中测定各步骤前后的组织块体积,计算出收缩率。结果与结论一定强度的微波辐射和一些微波辐射与固定液结合方法固定的组织收缩率低,这些组织的切片具有细胞质均匀,染色鲜艳,细胞核大而清晰的良好效果。