M2型巨噬细胞经TLR-7/IL-33通路参与IgG4-RD发病

正IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是一种以血清IgG4升高和组织内IgG4~+浆细胞浸润为特征的自身免疫疾病,可累及胰腺、肾脏、肺、泪腺和唾液腺等器官。有研究发现,激活巨噬细胞的Toll样受体(TLRs)可促进IgG4-RD的发展,但具体机制尚未阐明。     

淋巴细胞亚群成员研究进展

淋巴细胞是人体重要的免疫细胞,占外周血白细胞总数的20﹪~45﹪,主要分为T细胞、B细胞和NK细胞三大类。根据细胞表面标志及功能特征,将淋巴细胞亚群分为CD3~+CD4~+辅助性T细胞、CD3~+CD8~+的细胞毒性T细胞、CD19~+B细胞、CD16~+CD56~+NK细胞。随着基础免疫学及免疫学技术的不断发展,临床和科研工作者不断地将淋巴细胞亚群细化并发现一些新的亚群,包括γδT细胞、Th1/Th2细胞、Th17细胞、Th9细胞、Tfh细胞、Treg细胞、Breg细胞、NKT细胞和NKB细胞等,淋巴细胞亚群的内容也随之被赋予了新的定义,现将近年来淋巴细胞亚群的研究进展进行综述。     

IgG4乔本甲状腺炎中TRAIL、FasL的表达及临床病理意义

目的探究IgG4乔本甲状腺炎(IgG4Hashimoto's thyroiditis,IgG4HT)的临床、病理、血清学特征,分析血清TRAIL和/或FasL浓度与IgG4HT的临床、病理特征的相关性。方法采用免疫组化检测46例HT组织中的IgG~+、IgG4~+浆细胞,化学发光法及酶联免疫吸附测定法分别检测患者术前血清TgAb,TPOAb和TRAIL、FasL的浓度,并进行分析。结果依据IgG4+浆细胞20/HPF、IgG4~+/IgG~+浆细胞30%的诊断标准,HT组中11例(23.9%)为IgG4 HT。IgG4 HT较非IgG4HT具有更显著的甲状腺纤维化(P=0.006),更易发生亚临床甲状腺功能减退(P=0.02),血清TPOAb水平较低(P0.001),FasL浓度较高(P0.001);血清FasL浓度与IgG4HT甲状腺纤维化程度呈正相关(r=0.620,P=0.042),与甲状腺功能状态呈负相关(r=-0.841,P=0.001)。结论 IgG4HT为更具破坏性的乔本甲状腺炎亚型,FasL可能在甲状腺功能减退进程中发挥作用。     

人类免疫缺陷病毒阴性隐球菌性脑膜炎患者外周血淋巴细胞亚群分析

目的分析人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)阴性隐球菌性脑膜炎(Cryptococcal meningitis,CM)患者外周血淋巴细胞亚群改变特点,深化对隐球菌病发病机制的认识。方法筛选HIV阴性CM患者31例和健康献血员21例进行淋巴细胞亚群分析,CM患者根据是否存在免疫抑制基础疾病分为两个亚组,比较3组研究对象淋巴细胞亚群中B、NK、CD_4~+T、CD_8~+T细胞亚群,CD_4~+T及CD_8~+T细胞的第二信号受体CD28表达比例及CD_8~+T细胞激活标记物HLA-DR、CD38的表达水平。结果有基础病CM组B、NK、CD_4~+T和CD_8~+T 4种亚群中位数依次为56×10~6/L、86×10~6/L、218×10~6/L、164×10~6/L,显著低于健康对照组的223×10~6/L、280×10~6/L、695×10~6/L、521×10~6/L(P值均0.001),同时存在CD_8~+T细胞激活亚群比例较健康对照显著升高。无基础病CM患者上述4种细胞亚群中位数依次为128×10~6/L、128×10~6/L、567×10~6/L、527×10~6/L,除CD_8~+T细胞计数水平与健康对照相似以外,B(P=0.02)、NK(P=0.002)和CD_4~+T细胞(P=0.03)计数均低于健康对照,其CD_8~+T细胞激活亚群比例与健康对照组相似。CD_4~+T和CD_8~+T细胞的CD28表达水平在3组间未见显著差异。结论 HIV阴性CM患者,无论是否存在免疫抑制基础疾病,外周血B、NK及CD_4~+T 3种细胞计数可出现同时减少。     

OX40参与RSV气道炎症反应中CD4~+T细胞的增殖活化

OX40是TNFR超家族成员之一,主要表达于活化的CD4~+T细胞表面。OX40能促进CD4~+T细胞的增殖与活化,但其在呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytial virus, RSV)感染所诱发的气道炎症反应中对CD4~+T细胞增殖与活化的作用尚不十分清楚。通过建立RSV急性感染的实验动物模型,采用流式细胞术、免疫磁珠分选、Real-time RT-PCR、Elisa、Western Blot等实验方法,旨在揭示在RSV感染性气道炎症中OX40对CD4~+T细胞增殖与活化的影响作用。结果显示,RSV感染后脾组织内表达OX40的CD4~+T细胞数量及CD4~+T细胞OX40 mRNAs和OX40蛋白表达水平显著增加。从感染3 d的BALB/c鼠脾组织分选CD4~+T细胞进行体外培养并加入OX40激动型抗体,发现加入OX40激动型抗体的CD4~+T细胞组与未加组相比,其细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-13的表达水平显著增高。证实在感染性气道炎症中OX40对CD4~+T的细胞增殖与活化起着重要的调控作用。     

肝癌患者体液免疫和细胞免疫的变化情况

目的:探讨肝癌患者体液免疫和细胞免疫功能状况。方法:选取2012年1月20日至2015年3月25日在西宁市第一人民医院就诊的126例肝癌患者和87名健康者作为研究对象,采用免疫透射比浊法测定血清IgA、IgG水平,采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+和CD4~+/CD8~+水平。结果:与健康对照组相比,肝癌组患者血清中IgA和IgG水平显著升高(P0.05),外周血中T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+显著降低(P0.05),CD8~+显著升高(P0.05)。结论:肝癌患者体液免疫功能增强,细胞免疫功能降低,外周血T细胞亚群和血清免疫球蛋白的检测对了解肝癌患者的病情、预后以及免疫治疗具有一定的临床指导意义。     

SLE带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞的表达及相关性研究

目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞的表达及相关性,探讨其在SLE合并带状疱疹发病中的临床意义。方法:采用流式细胞术检测30例SLE患者、30例SLE合并带状疱疹患者及30例健康对照者外周血中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群表面CD28的表达及CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞的表达水平,并分析SLE合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞表达的相关性。结果:SLE合并带状疱疹组患者急性期外周血CD4~+T淋巴细胞比率、绝对计数显著降低,CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表面的CD28表达下调,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞水平显著高于SLE组及健康对照组,SLE合并带状疱疹组患者外周血CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg水平与CD4~+CD28~+水平成负相关(P均0.05)。结论:SLE合并带状疱疹患者CD4~+、CD8~+T细胞活化异常,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞可能参与抑制了T细胞的活化。     

体外诱发抗体生成过程中淋巴细胞的变化

为了了解体外抗体应答中T、B淋巴细胞的变化,以进一步阐明体外抗体应答的细胞学过程,并为完善体外免疫实验系统提供方向和依据,利用荧光激活细胞分选仪(FACS),在本实验室建立的人淋巴细胞体外免疫实验系统的基础上,对体外诱发抗体应答中淋巴细胞的变化进行了分析和研究,得到以下初步结果。一、T细胞所占比例的变化与设置培养物时细胞浓度相关,如果T细胞一开始占比例较大时,其变化为下降,否则其变化为上升。但最终都维持在30%上下。二、CD4~+(T辅助)细胞和CD8~+(T抑制)细胞的变化在扁桃体细胞和脾细胞中有所不同。在两周的培养过程中,前者无论加或不加C.M.(T细胞条件培液)或MTG(混合丝裂原),CD4~+细胞的比例均高于CD8~+细胞;而后者在加了C.M.或MTG后,CD8~+细胞的比例明显上升,但CD4~+细胞却有下降趋势。论文讨论了上述变化与免疫应答强度的可能关系。此外,亮氨酸甲酯(Leu-O-Me)的加入对CD8~+细胞没有影响。三、B淋巴细胞的变化,在培养两周过程中,无论扁桃体还是脾脏来源的细胞,B细胞富集的程度没有发生明显的变化,直至培养结束时,B细胞的比例仍维持在60%左右。T、B细胞间的比例也无明显变化,这表明所建立的体外免疫实验系统对B细胞的存活及其应答的诱发是适宜的。CD19~+B细胞的变化较为明显,其意义目前尚难推测。此外,一般认为CD5~+B细胞是一类分泌自身抗体的细胞,在培养过程中一直处于少数,未见增多。四、对于本实验中设置“框界”(“gating”)的合理性进行了讨论。     

早期口服益生菌对早产儿免疫系统及消化系统的影响

目的探讨出生后早期口服益生菌对早产儿免疫系统及消化系统的影响,为临床合理应用益生菌提供参考。方法选取2018年4月至2018年10月入住武汉同济医院新生儿科的40例早产儿(胎龄28～34周,出生体质量2 500 g)为研究对象,按单双号编号法随机分为观察组(20例)和对照组(20例),观察组患儿出生后第1天起给予鼠李糖乳杆菌溶液(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG,4×10~9 CFU/mL, 0.25 mL/d),对照组患儿给予等量的LGG空白溶液(玉米油)口服,疗程30 d。抽取两组患儿生后第1天和第42天时2 mL血液检测免疫球蛋白(IgM、IgG)及T淋巴细胞亚群(B淋巴细胞百分比、CD3~+ T细胞百分比、CD4~+ T细胞百分比、CD8~+ T细胞百分比、CD4~+T/CD8~+T比值)水平,并记录患儿胃潴留、腹胀、呕吐、喂养不耐受、坏死性小肠结肠炎的发生情况及患儿生长情况。结果最终观察组和对照组均有16例患儿完成了研究。出生后第1天,两组患儿血液IgG、IgM和T淋巴细胞亚群水平差异无统计学意义。出生后第42天,观察组患儿CD8~+T细胞百分比低于对照组、CD4~+T/CD8~+T比值高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。与对照组相比,治疗后观察组患儿胃潴留(18.8%vs 50.0%)、腹胀(6.25%vs 18.8%)、呕吐(12.5%vs 18.8%)、喂养不耐受(25.0%vs 56.3%)及坏死性小肠结肠炎(0例vs 2例)的发生率均较低。两组患儿出院体质量及出生后第42天体质量差异无统计学意义(均P0.05)。结论出生后早期口服益生菌能够提高早产儿的细胞免疫功能,并且在增强早产儿胃肠动力、降低喂养不耐受及坏死性小肠结肠炎发病率方面发挥一定的作用。     

早期肠内营养对重症脑出血患者免疫功能和预后的影响

目的:研究早期肠内营养(EEN)对重症脑出血患者免疫功能和预后的影响。方法:选取2013年1月至2015年3月间我院收治的重症脑出血患者161例,依据随机数字表法分为对照组(n=77)和观察组(n=84),观察组患者入院12h~24h内予以肠内营养乳剂支持,对照组患者予普通鼻饲流食。所有患者于治疗前及治疗后采用GCS评估患者意识情况,检测血Alb、TP、PA、IgG、IgM、IgA、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及CD4~+/CD8~+水平,并观察治疗后患者并发症的发生率。结果:治疗后观察组Alb、TP、PA水平均显著高于对照组(均P0.05);治疗后观察组IgG、IgM、IgA、CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+水平均显著高于同期对照组,CD8~+T细胞显著低于同期对照组(均P0.05);治疗后观察组GCS评分显著高于对照组(P0.05);治疗后观察组患者肺部感染率,消化道症状发生率略低于对照组,但差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:重症脑出血患者予以EEN治疗可明显改善其营养状况,有助于神经系统功能和免疫功能的恢复,改善预后,值得临床推广应用。     

重组人B7-H1 IgV疫苗的初步毒理学研究

目的:对重组人B7-H1 Ig V疫苗进行重复给药毒性研究,为后续系统临床前研究提供依据。方法:常规免疫BALB/c小鼠,检测疫苗及佐剂对小鼠一般毒理学指标的影响及疫苗的免疫毒性。结果:B7-H1疫苗及氢氧化铝佐剂对小鼠的进食、体重等一般状况,血液学和血清生化学指标,重要脏器组织的大体病理学,组织病理学情况及相对重量均无显著性影响;B7-H1组小鼠的CD4+T细胞百分率和CD4+/CD8+T细胞比值明显增高。结论:B7-H1疫苗及氢氧化铝佐剂对小鼠一般毒理学指标未见显著影响;疫苗组小鼠的CD4+T细胞百分率和CD4+/CD8+T细胞比值明显增高,提示该疫苗诱导了明显的免疫应答;该研究为重组人B7-H1 Ig V疫苗的进一步临床应用提供了重要证据。     

人子宫颈癌肿瘤相关巨噬细胞浸润与T细胞亚型及临床病理特征的相关性分析

为了探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)在人子宫颈癌微环境内的分布与T细胞亚型和临床病理特征的相关性,本研究应用S-P免疫组化法检测TAMs在60例子宫颈癌组织、10例高级别鳞状上皮内病变组织及10例子宫颈组织的分布情况;间接免疫荧光双标法分析浸润的FOXP3~+Treg细胞数量、CD8~+T细胞数量及其粒酶B分泌情况。统计学分析TAMs数量与癌间质浸润的FOXP3~+Treg、CD8~+T数量和临床病理特征的相关性。结果显示TAMs在子宫颈癌微环境的数量均显著多于高级别鳞状上皮内病变和子宫颈组织(p0.01,p0.01),同时高级别鳞状上皮内病变组织阳性细胞数也明显多于子宫颈组织(p0.01);TAMs数量与宫颈癌间质内浸润的FOXP3~+T细胞数量呈正相关性(p0.05),且与淋巴结转移和癌栓相关(p0.05,p0.05),但与CD8~+T细胞浸润数量无明显相关性(p0.05)。本实验发现TAMs在宫颈癌微环境内大量分布,且与肿瘤局部免疫抑制及淋巴结转移和癌栓有关。     

流式细胞仪分选人外周血T淋巴细胞的方法建立与评价

目的:利用流式细胞仪同时分离外人周血单个核细胞中T淋巴细胞并检测其分离纯度及存活率。方法:本文采用流式细胞仪同时分选人外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞为例,推而广之,采用人外周血淋巴细胞分离液梯度离心法制备外周血单个核细胞,采用流式细胞仪同时分选CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,分离细胞再通过流式细胞仪回测其分离纯度并通过台盼蓝染色检测分离细胞的存活率。结果:采用此方法能有效人外周血细胞CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,分选前CD4~+淋巴细胞纯度为(50.5±11.5)%、CD8~+T淋巴细胞纯度为纯度为(15.4±7.1)%;分选后CD4~+T淋巴细胞纯度为(94.3±1.3)%、CD8~+T淋巴细胞纯度为(93.6±1.6)%;分选后CD4~+T淋巴细胞存活率为(95.3±1.8)%,CD8~+T淋巴细胞存活率为(94.8±1.5)%,细胞的形态完整。结论:采用人外周血淋巴细胞分离液梯度离心法制备外周血单个核细胞后利用流式细胞仪分选的方法能够高效、快速的分离人外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,且存活率高,为进一步研究其功能提供了保证。采用不同的荧光抗体标记其他淋巴细胞亚群,也能高效、快速的分离出细胞。     

CD8~+ T细胞在系统性硬皮病组织纤维化中的作用

系统性硬皮病是一种累及皮肤和黏膜组织、内脏器官,引起组织纤维化和硬化性的慢性结缔组织病,主要分为局限肢端型和弥漫型,对患者身心健康及生活质量造成严重影响。其病因及发病机制仍在不断研究过程中,较为公认的结论包括CD8+T细胞参与调控成纤维细胞中胶原表达异常与硬皮病的发病相关,其中白介素13介导的CD8+T细胞参与的皮肤纤维化过程得到多方验证。本综述旨在总结和讨论CD8+T细胞在系统性硬皮病皮肤及皮下组织纤维化过程中的角色和作用机制。     

中国解剖学会第十五届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会暨第十二届组织学与胚胎学教学与科研技术研讨会论文汇编

<正>2017年7月12日—15日新疆石河子1成年大鼠周围神经损伤后机械痛异常慢性转化中CD4~+T细胞浸润相应脊神经背根柔膜丁有权杜彬肖霞齐建国四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 CD4~+T细胞自身免疫在神经损伤后病理性疼痛慢性转化中至关重要。致病性CD4~+T细胞浸润神经环路的位置目前尚未明确,因此阻碍了慢性神经病理性疼痛自身免     

利用单克隆抗体检查淋巴细胞亚群的方法及其评价

<正>1979～1980年Kung等利用杂交瘤技术研制出一系列鼠抗人T细胞表面抗原的单克隆抗体(OKT系统)。这些单克隆抗体鉴定的T细胞亚群是与一定功能相联系的。例如,OKT_3~+细胞代表外周血总T细胞;OKT_4~+细胞是辅助T细胞;OKT_8~+细胞是抑制或细胞毒T细胞。     

基于肿瘤基因作用的妊娠妇女调节性免疫细胞与巨细胞病毒的相关性研究

研究基于肿瘤基因作用的妊娠妇女调节性免疫细胞与巨细胞病毒的相关性。收集2015年5月~2016年9月四川省人民医院就诊的妊娠患者,病例纳入标准:年龄范围在22~40岁;初次妊娠患者;排除前置胎盘、先兆流产和妊娠高血压等异常妊娠患者;排除合并慢阻肺、糖尿病、艾滋病等慢性疾病患者;排除艾滋病和乙肝病毒等感染患者;排除长期吸烟、酗酒患者。梯度离心的方法分离患者外周血的淋巴细胞。CD4、CD25和Foxp3流式抗体标记调节性T细胞(Treg细胞);CD19和TGF~-β流式抗体标记调节性B细胞(Breg细胞);CD4、CXCR5和Foxp3流式抗体标记滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)。结果表明,对照组共有30例正常妊娠患者,年龄在22岁至37岁之间;CMV感染组包括30名CMV感染的妊娠患者,年龄在22岁至39岁之间。CMV感染组中CD4~+CD25~+Foxp3~+的Treg细胞、CD19~+TGF~-β~+的Breg细胞和CD4~+CXCR5~+Foxp3~+的Tfr细胞比例均显著的低于对照组,分别下降了31.9%、78.5%和65.1%,结果具有统计学差异(P0.05)。CMV感染后,妊娠患者体内Treg细胞、Breg细胞和Tfr细胞等调节性免疫细胞的比例均显著下降,可能对胎儿的生长发育造成影响。     

山西省健康成年人淋巴细胞亚群正常参考值范围

目的:建立山西省健康成人外周血淋巴细胞亚群的正常参考值范围,为机体免疫状态的分析和肿瘤患者的免疫评估提供理论依据。方法:选取山西省1 238例健康成人体检人群,采用流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群的绝对计数和相对计数。结果:确定了健康成人外周血淋巴细胞表达水平,并发现CD3~+T细胞相对计数和绝对计数、CD4~+T细胞相对计数、CD8~+T细胞相对计数和绝对计数、NK细胞相对计数和绝对计数、CD19细胞相对计数和绝对计数、CD4/CD8比值在不同年龄组间存在显著差异性(P0.05);不同性别之间CD8~+T细胞相对计数、CD4~+T细胞绝对计数和CD19细胞绝对计数无统计学意义,CD3~+T细胞、CD8~+T细胞、NK细胞相对计数和绝对计数、CD4~+T细胞、CD19细胞相对计数均存在显著差异(P0.05)。结论:初步建立了山西省健康成年人外周血淋巴细胞亚群参考值范围,为机体免疫功能的评价和肿瘤免疫治疗、诊断提供了参考依据。     

凋亡相关蛋白Bcl2、Bax在IgG4相关性乔本甲状腺炎中的表达及其临床病理意义

目的探讨IgG4相关性乔本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT)的临床病理特征,并进一步分析凋亡相关蛋白Bcl2、Bax的表达与其临床、病理特征的相关性。方法用免疫组化检测46例HT和15例滤泡性腺瘤瘤旁甲状腺组织中IgG4+浆细胞、IgG+浆细胞及Bcl2、Bax蛋白的表达,依据IgG4+浆细胞20/HPF及IgG4+/IgG+30%的标准,将HT分为IgG4组和非IgG4组,分析两组间临床病理特征及Bcl2、Bax蛋白分布、表达的差异。结果 46例HT患者中11例为IgG4-HT(占23.9%)。与非IgG4组比较,IgG4组患者更容易出现亚临床甲状腺功能减退(P=0.02)、甲状腺纤维化程度更显著(P=0.006);IgG4-HT甲状腺滤泡上皮中Bax蛋白的表达显著高于非IgG4-HT组(P=0.001),且与甲状腺纤维化的程度呈正相关(r=0.622,P=0.04)。结论 IgG4-HT代表了更具破坏性的一种乔本甲状腺炎亚型,更容易出现甲状腺功能减退;凋亡促进蛋白Bax可能在IgG4-HT的病理进程中发挥了作用。     

阿莫西林联合甲强龙治疗老年支气管肺炎患者的临床效果及机制分析

目的：探讨阿莫西林联合甲强龙治疗老年支气管肺炎患者的临床效果及其可能的作用机制。方法：选取我院呼吸科收治的 老年支气管肺炎患者84例,根据治疗方案不同分为常规组及试验组。比较两组患者治疗前后临床体征、IgA、IgM、IgG、CD4+及 CD8+T 淋巴细胞、NK 细胞及血清LDH3、LDH4、HBDH水平的变化情况。结果：治疗后,试验组咳喘、高热、肺内干湿罗音的恢复 时间明显短于常规组,IgA、IgM、IgG、LDH、HBDH、NK 细胞及CD8+T 淋巴细胞水平明显低于常规组,CD4+T 淋巴细胞水平明显 高于常规组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：阿莫西林联合甲强龙可有效快速改善老年支气管肺炎患者的临床症状,这可 能与其降低IgA、IgM、IgG、LDH、HBDHNK 细胞及CD8+T 淋巴细胞水平及提高CD4+T 淋巴细胞水平有关。