梨形四膜虫的一种长期保种方法

随着梨形四膜虫细胞在生物学、医药学和环境科学研究方面的广泛应用,梨形四膜虫细胞株在实验室内的长期继代保种问题,就显出更为重要。     

梨形四膜虫毒性试验方法

梨形四膜虫~*(Tetrahymena pyriformis)是广泛分布在中污性水体中,较容易采集到的一种单细胞动物。是能够成功地人工无菌培养为单株的一个种。由于它繁殖快,用于细胞毒性试验,可以缩短实验研究的周期,是一种廉价的、比较理想的实验动物。 本文介绍汞、镉、铅、锌及锰五种重金属离子对梨形四膜虫的毒性作用的研究,采用了半     

四膜虫—分子生物学研究的理想材料

四膜虫(Tetrahymena)与人们熟悉的草履虫一样,都是单细胞的原生动物,属纤毛虫纲,一般长50μm,宽30μm。细胞前端略细,后端变宽呈梨形,表面有15-25条毛带。口位于细胞的前端,内有三个小膜,口的边缘有一个波动膜,故称四膜虫。     

诱导嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)细胞凋亡样变化的研究

本文以单细胞真核生物嗜热四膜虫(Te-trahymena thermophila)作为实验材料以抗肿瘤药物高三尖杉脂碱(Homoharringtonine,HHT)、糖皮质激素类药物地塞米松(9α-Fluo-ro-16α-methylprednisolone,Dex)和抗生素类药物放线菌素D(Actinomycin D)诱导嗜热四膜虫凋亡并研究其细胞凋亡过程的生物化学特性。结果表明抗肿瘤药物及抗生素类药物均不能明显地诱导嗜热四膜虫细胞凋亡。但糖皮质激素类药物在含一定量的Ca~(2 )、Mg~(2 )离子时能诱导嗜热四膜虫发生凋亡。作者认为诱导嗜热四膜虫凋亡过程可能与糖皮质激素类药物诱导鼠胸腺细胞凋亡的机制是类似的,嗜热四膜虫与胸腺细胞的凋亡过程可能同样被Ca~(2 )、Mg~(2 )离子依赖性的核酸内切酶的活化机制所控制着。     

间接能量传递超声法在生物医学制剂制备中的应用

我们曾报道过用国产CSF-1A型超声波清洗机处理DNA分子,取得了与用英制MSE及上海一医研制的CPS-1型探头式超声波粉碎机同样的剪切效果,并且避免了探头式超声波仪因变幅杆伸入溶液可能引起的污染。在前述基础上,我们进一步用此机对常见生物医学制品进行了粉碎试验,现将实验结果及其与探头式超声波粉碎机粉碎效果的比较,介绍如下: 一、材料与方法①DNA溶液小牛胸腺DNA(上海牛奶公司产品)分子量4—40×10~6dal,以0.2mg/     

采用固定液法改进"酵母菌种群数量的变化"实验

"培养液中酵母菌种群数量的变化"是高中生物学重要的探究实验之一,但因其时间跨度大、计数耗时长,实验开展难度较大.为克服上述困难,尝试采用对不同培养时间的酵母菌先进行固定后统一计数的方法,比较用不同细胞固定液或不同处理条件下(无水乙醇、95％乙醇∶冰醋酸=1∶ 1、-20℃冰冻处理)的固定效果.结果表明:选用无水乙醇作为...     

四膜虫功能基因组数据库增量更新2016:生活史和减数分裂转录组及磷酸化蛋白组资源建设

原生动物嗜热四膜虫是一种优良单细胞真核模式生物,以其作为研究对象在基础生物学领域的研究已经取得了一系列突破性的成果。2006年,其大核基因组测序完成并发表,标志着四膜虫的研究进入了功能基因组时代。2013年基于基因芯片、基因网络和转录组数据,我们构建了四膜虫功能基因组数据库,其目前已成为模式生物嗜热四膜虫研究的两个重要数据库之一。在过去几年里,随着对四膜虫功能基因组学研究的深入,相关组学数据也实现了一定积累,对这些数据的整合也非常迫切。基于此,我们对四膜虫功能基因组数据库进行了增量更新。更新内容主要包括三个方面:(1)四膜虫生活史不同时期转录组数据;(2)四膜虫接合生殖减数分裂过程转录组数据;(3)磷酸化蛋白组数据。此次增量更新进一步提升和完善了四膜虫功能基因组数据库的内容和功能,对以四膜虫为对象的相关研究工作具有重要作用。     

一种快速简便的酵母菌制备法

经过多次实验,我们找出一种制备酵母菌的快速而简便的方法——利用干酵母制备酵母菌悬液。酵母菌未经染色时在显微镜下是无色透明的,不利于观察,但用美蓝染色后观察效果较好,并且可借此鉴定酵母菌的死活。     

纤毛虫大核发育过程中程序化的DNA消除

纤毛虫大核发育过程中发生程序性的ＤＮＡ消除,被消除的序列为内在删除顺序非编码区。消除以后,大核胚基中的ＤＮＡ发生片段化,在腹毛目纤毛虫中,ＤＮＡ断裂成为只有基因大小的ＤＮＡ分子;在四膜虫中,ＤＮＡ断裂成为平均长度约６００ｋｂ的片段,在断裂位点发现一个１５ｂｐ的顺序,为断裂位点的标志信号。通过对四膜虫小核基因组某一内在删除顺序的研究,发现此序列的删除受两套顺式作用顺序的控制。     

采后药剂处理防治荔枝果实贮藏腐烂病的效应

1977—1980年期间测定了不同杀真菌剂和化学药剂防治白地霉菌引起的荔枝冷藏腐烂病的效应。荔枝果实采后用0.1％氯化镍、0.1％硫酸镍、0.2％敌菌丹或0.2％克菌丹分别处理10分钟,效果均好;但在保持果实色泽鲜艳度方面,只有用0.1％氯化镍处理的效果最佳。在3.88～5.55℃的冷藏条件下,把经处理的果实装入穿孔聚乙烯袋中可贮藏6周。     

嗜热四膜虫接合生殖后期皮层细胞骨架蛋白的研究

用秋水仙素和细胞松驰素B处理接合期的嗜热四膜虫,以观察其对接合生殖期,尤其是接合后期的嗜热四膜虫皮层细胞骨架蛋白的影响,用秋水仙素处理的试验组的皮层细胞骨架蛋白组分中34KD、37KD、46KD和57KD蛋白的含量有明显改变,而用细胞松驰素B处理的试验组中40KD和74KD蛋白的含量改变较大。根据相关文献,作者推测34KD、37KD、46KD、57KD蛋白是微管蛋白,而40KD和74KD可能是微丝蛋白。这些蛋白对嗜热四膜虫接合过程中的形态发生的重要作用有等进一步研究。     

嗜热四膜虫减数分裂研究进展

减数分裂是真核生物有性生殖过程的关键步骤,染色体的行为变化贯穿整个减数分裂的过程。近些年来,借助先进的分子生物学技术和细胞学实验手段,通过对突变细胞株的筛选和评价,单细胞真核模式生物原生动物嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)减数分裂方面的研究取得了长足的进展。本文主要介绍嗜热四膜虫减数分裂的过程,以及在此过程中伴随染色体行为变化的相关基因的功能,从而为进一步探讨嗜热四膜虫减数分裂的分子机制提供有效信息。     

游仆虫信息素Er-1和Er-2对四膜虫的种间作用

信息素是生物体向外释放的化学物质,在细胞及生物体中具有种内信息传递的生理学功能。信息素这一类分子广泛分布于系统发生史中,它们的特异活性在单细胞生物、昆虫以及脊椎动物中均有报道。脊椎动物中信息素的信号传输已被证实是一嗅觉依赖过程,7TM-受体被认为是信号传输过程中的信号转换器。在低等单细胞生物(例如:来可夫游仆虫)的细胞膜上存在有信息素异构体,作为信息素分子的有效结合位点而行使其功能。本研究主要探讨单细胞的信息素(Er-1和Er-2)的基础细胞生理学作用是仅限于产生该信息素的物种,还是对其它的原生动物(例如:四膜虫)或对系统发育中分类地位较高的细胞(例如:MRC5成纤维细胞或J774巨噬细胞)均具有调节活性。研究结果表明,游仆虫的两种信息素对梨形四膜虫GL的生长调节有显著不同的作用:当信息素浓度为10-11M时,Er-1具有正调控作用,而Er-2具有抑制剂的作用。这两种配体的趋化作用也有很不同:Er-1具有一种广范的化学排斥特性,而Er-2具有一个双峰的化学吸引剂的性质。计算机检测发现,与Er-2的作用不同,Er-1可略微降低被测细胞的游动速率。趋化现象的选择特性表明Er-2信息素的受体有一种“短期”的特性;而Er-1是不能选择任何亚种群的,这也支持了我们先前的研究数据,即这两种信息素在四膜虫GL内产生两种不同的信号。四膜虫对信息素特异性的反应表明四膜虫能辨别非常近似但带有微小差异的配体(如Er-1和Er-2的电荷差异)。     

慢性前列腺炎患者假丝酵母菌感染及耐药性分析

目的 了解慢性前列腺炎与假丝酵母菌感染的相关性及假丝酵母菌的耐药性。方法 采用常规沙堡平板分离360例慢性前列腺炎患者的前列腺液标本中的假丝酵母菌,疑似菌落用ATB Expression鉴定仪进行鉴定。采用ATB-Fungus真菌药敏板,对假丝酵母菌株进行药敏试验。结果 11．7％前列腺液标本（42／360）似丝酵母菌阳性,其中自假丝酵母菌23例（54．7％）,近平滑假丝酵母菌13例（30．9％）,其它6例（14．3％）。假丝酵母菌菌株对两性霉素B和制霉菌素敏感率均为100％,其次为酮康唑,敏感率为97．0％;对5-氟胞嘧啶耐药性最强,其耐药率为56．5％。结论 白假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌是慢性前列腺炎假丝酵母菌感染的优势菌种,假丝酵母菌株最敏感的药物是两性霉素B和制霉菌素。     

酵母菌细胞呼吸方式的再探究

在实施“酵母菌细胞呼吸方式”实验教学后发现,学生对实验中的诸多环节依然存在质疑,引起了教师的反思。为消除质疑,接近真相,对该实验进行再探究,包括实验材料、实验装置、检测方法的再改进。通过对“酵母菌细胞呼吸方式”实验的改进和优化,将定性观察与定量测量相结合,使实验结果快速呈现,科学直观;增加实验教学后的再探究过程,有利于调动学生自主实验的积极性。     

“酵母菌发酵实验”改进

通过对限制酵母菌发酵的温度、酵母菌浓度、蔗糖浓度、液体量等限制因素进行研究,通过正交实验和方差分析发现,温度和液体量对酵母菌发酵影响非常显著,酵母菌浓度影响显著,而蔗糖浓度影响不大,并得出酵母菌发酵实验的最佳条件为:蔗糖浓度5%,酵母菌浓度3%,温度50℃,液体量300 m L,发酵所需时间为4 min 30 s。同时对实验装置进行了改进,使得检测二氧化碳更加简便。用酸性重铬酸钾检测酒精使整个实验更具科学性。     

哈尔滨地区假丝酵母菌DNA异质性及药物敏感性分析

研究假丝酵母菌的DNA异质性及药物敏感性,为预防和监控院内假丝酵母菌感染奠定基础。将临床分离的假丝酵母菌菌株,用科玛嘉显色培养基鉴定菌种,经纸片扩散法进行药敏试验,应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对这些菌株进行基因分型。结果显示：93株假丝酵母菌中白假丝酵母菌68株,非白假丝酵母菌25株,所有菌株对制霉菌素,两性霉素B两种药物的敏感率最高（100％）,酮康唑其次（70．9％）,氟康唑的敏感率最低（50．5％）,引物1和引物2将来源不同的68株白假丝酵母菌分别分成4型（A1、B1、C1、D1）和6型（A2、B2、C2、D2、E2、F2）。哈尔滨地区的假丝酵母菌感染以白假丝酵母菌为主,且主要为A1、B1型（引物1）或A2、B2型（引物2）;基因型与药敏谱无明显相关性。     

灵芝孢子粉在真菌性肠炎所致腹泻中的应用

目的了解真菌性肠炎所致腹泻的菌种分布特点,探索灵芝孢子粉对其的治疗效果。方法将110例腹泻患者的粪便直接涂片革兰染色镜检。查见较多真菌孢子和菌丝者进行分离鉴定,并采用灵芝孢子粉治疗。结果110例腹泻患者中查见真菌孢子及菌丝者62例;真菌分布白色假丝酵母菌占56．45％,克柔假丝酵母菌占16．13％,热带假丝酵母菌占14．52％,近平滑假丝酵母菌占6．45％,季也蒙假丝酵母菌占6．45％,用灵芝孢子粉治疗真菌性肠炎所致腹泻21d后有效率为96．77％。结论真菌性肠炎所致腹泻以白色假丝酵母菌感染为主,应用灵芝孢子粉治疗方法简单、安全、有效。     

实验探究“酵母细胞呼吸方式”

在限定的实验条件下,学生设计"探究酵母菌细胞呼吸的方式"实验装置,通过对比实验进行探究的方式,使学生在有限的教学时间内了解在不同类型的呼吸条件下,酵母菌有氧呼吸和发酵的产物不同,并容易得出酵母菌在有氧和无氧条件下均会产生CO_2,而仅在无氧条件下产生酒精的结论。改进实验装置后的实验效果明显,可作为优质实验课的参考题材,以提高教学效果。     

乳杆菌优良菌株的筛选及对小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖干预

目的探讨乳杆菌优良菌株的筛选及其对小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖干预作用。方法对德氏乳杆菌DM8909菌株进行诱变筛选,得到耐抗生素突变株208,以ICR小鼠为实验对象,用甲硝唑进行小鼠阴道菌群脱污染,将白假丝酵母菌接种到小鼠阴道内,构建小鼠阴道白假丝酵母菌过度增殖模型。采用阴道接种德氏乳杆菌DM8909突变株208菌液（2×108CFU/mL）处理,取其阴道冲洗液进行阴道菌群分析,并进行阴道上皮细胞的电镜检查。结果乳杆菌干预后显著清除阴道内的假丝酵母菌,肠杆菌恢复正常水平,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论德氏乳杆菌DM8909抗性菌株208能调整白假丝酵母菌在小鼠阴道内定植,对小鼠阴道上皮细胞有恢复作用。