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<正>现已充分证明,假膜性结肠炎几乎都是由艰难梭菌引起的,而且,抗生素相关性腹泻(约占25%)也与之有关。其实验诊断主要是取病人的粪便分离培养艰难梭菌,然后再行鉴定。然而现行的鉴定方法不是费时、需要贵重的仪器设备,就是重复性差或需要作补充鉴定试验。本文报道的是一种快速(30分钟内)、准确、重复性良好的确证方法。 相似文献
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琼脂糖凝胶直接杂交快速鉴定低拷贝数转基因 总被引:3,自引:0,他引:3
采用常规的PCR方法检测低拷贝数转基因有一定困难.提出一种使用琼脂糖凝胶直接杂交的方法,结果明确、简单可行,是转基因动物中低拷贝数转基因鉴定的一种较好方法. 相似文献
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DNA环介导恒温扩增技术快速检测霍乱弧菌 总被引:1,自引:0,他引:1
霍乱弧菌是一种重要的食源性致病菌,主要引起急性肠道传染病,其快速检测具有重要意义。根据霍乱弧菌的mdh管家基因序列,设计2对特异性检测引物,利用DNA环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),经反应体系优化,成功建立了霍乱弧菌的LAMP快速检测方法。该方法最佳反应温度为65℃,60min完成检测,对培养菌的检测限为25CFU/mL,污染食品中霍乱弧菌的检测限为32CFU/g。对33株同种或近源细菌进行LAMP检测,仅霍乱弧菌得到阳性扩增。LAMP方法实践应用结果表明,对1057份虾、蟹、牡蛎、肉类、人腹泻物等样本进行检测,共检出85份阳性,与国际标准(ISO TS21872-1-2007)检测结果的符合率为100%。结果表明,本研究建立的霍乱弧菌LAMP检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便,有利于霍乱弧菌疫情的监测。 相似文献
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<正>对于任何传染病贵在诊断迅速,尤其象霍乱这样传播迅速的疾病。协同凝集这一类快速诊断方法在一些传染病的应用中已肯定是成功的、有效的。 制备10%的葡萄球菌CowanI菌悬液、抗血清致敏。致敏过程:霍乱多价抗血清和小川型(Ogwan)抗血清0.1ml分别加入10%葡萄球菌悬液1ml中,将其混匀,置室温30~45分钟,然后离心;沉淀物中的致敏葡萄球菌在磷酸盐缓冲盐水(含0.1%叠氮钠)中再悬浮,使成2%浓度。试验发现 相似文献
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浙江人民卫生实验院卫生学微生物研究所 《微生物学报》1975,15(3)
本文报导的膨胀试验,为一种鉴定钩端螺旋体菌群的快速而可靠的方法,经近二年的实验研究和现场考核应用,其结果可归述如下:
1.据我们实验研究,膨胀试验的抗血清浓度以1:500倍稀释为宜(指血清凝溶效价为1:12800之通常定群用诊断血清)。当此稀血清与同群钩端螺旋体各一接种环在玻片上加以混和,并覆以盖玻片,置于400倍暗视野下,于10分钟内观察结果,阳性时,可见钩端螺旋体发生膨张、伸长和部分溶解等显著形态学变化。
2.对304株不同群别的钩端螺旋体地方株(病人37,猪16,鼠251)和国内13群14型标准菌分别进行了膨胀试验定群鉴定,并同时以凝溶试验作对照,结果两者完全相符。
3.膨胀试验具有快速、简单、特异性高等优点。本文结果表明该法较凝溶试验更为优越,特别是可在“非常”条件下用于快速鉴定钩端螺旋体菌群。 相似文献
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1材料与方法1.1实验材料1.1.1菌种E1-Tor生物型霍乱弧菌,菌号103,小川血清型,由军事医学科学院提供。1.1.2免疫荧光血清购于长春生物制品研究所,批号940205。1.1.3培养基Ⅰ号增菌液(碱性胨水),Ⅱ号增菌液(碱性陈水中加入1:200000亚碲酸钾、1:100000十二烷基磺酸钠),由本室制备。双氢链霉素洗衣粉亚硫酸钾琼脂培养基(双洗琼脂培养基),购手上海市卫生防疫站。1.1.4器材①接种环:单环接种环内径为3nun,多环接种环用4个内径3rum环排列成花瓣状,由本室自制。②微量吸引器:由上海生物实验研究所提供。③荧光显微镜… 相似文献
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利用PCR技术直接鉴定苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型的快速方法 总被引:3,自引:0,他引:3
根据PCR程序中热变性温度可使菌体裂解,释放出DNA的原理,利用苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白不同基因型的特异混合引物,对苏云金芽孢杆菌营养体直接进行PCR分析。根据不同基因型的特异扩增产物片段的分子量大小便可直接确定该苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的基因型。本文对本室筛选天然菌株和苏云金芽孢杆菌克隆菌株分别进行了cryl基因的PCR分析。表明,该法结果可靠快速易行,在方法学上,为苏云金芽孢杆菌菌株鉴定、新菌株的筛选和基因型分析提供了极大的方便。 相似文献
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我们从1987年开始进行非01群霍乱弧菌的检验工作,已做了病人及外环境(水产品、鲜猪肉)的调查。几年来,一直应用我们自己研制的这种综合生化法,效果满意,与常规法做的245株非01群霍乱弧菌对比,符合率为99.43%。现将有关方法介绍如下: 相似文献
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目的:建立针对O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,并进行模拟粪便标本的检测评价。方法:根据O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度及特异性评价;将O1群霍乱弧菌灭活菌株悬液倍比稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成模拟带菌者粪便标本,提取DNA,进行Taq-Man PCR检测,用以评价该方法。结果:建立了快速检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR方法,灵敏度为每反应体系104拷贝;该方法对其他14种肠道菌DNA没有扩增;该方法对模拟粪便标本的检测灵敏度为每反应体系102 CFU。结论:建立了一种快速、高效检测O1群霍乱弧菌的荧光定量PCR检测方法,该方法可用于O1群霍乱弧菌临床粪便标本的检测。 相似文献
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一步法快速质粒鉴定方法 总被引:1,自引:0,他引:1
对《分子克隆实验指南》(第三版)中的牙签法小量制备质粒DNA的方法做了改进,减少了 加样次数,免去冰浴、离心等步骤,改进后的方法在琼脂糖凝胶电泳前仅需一步加样和加热过程, 提高了实验效率。同时结合使用多孔道移液器和96孔板,更适合于在高通量筛选中鉴定阳性克 隆。实验对改进后的方法与《分子克隆实验指南》上的方法进行了比较,表明“一步法”的检测效 果、准确率与重复性均有到较好的结果。 相似文献
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淋巴细胞杂交瘤技术和单克隆抗体(McAb)已经广泛地应用于细菌学研究中。目前,国内外研究制备的抗霍乱孤菌脂多糖(LPC)和抗霍乱弧菌肠毒素(CT)及其亚单位的McAb达100多株,为霍乱弧菌抗原分析、CT及其亚单位的结构与功能研究以及与大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的鉴别等,提供了有力的工具。 相似文献
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GUS基因表达的简易快速鉴定法 总被引:1,自引:0,他引:1
GUS基因是目前遗传操作中常用的报道基因。该基因的DNA片断已克隆到许多农杆菌遗传工程菌种中,用于多种植物的外源基因导入研究。由于几乎在所有的高等植物中并没有该基因所编码的葡糖苷酸酶的活性或几乎测不出来,因此,葡糖苷酸酶在高等植物的外源基因导入研究中可以作为一种极其 相似文献