环氧丙醇酯立体专-性水解酶产生菌的筛选

从土壤中筛选出一株能拆分（Ｒ,Ｓ）－环氧丙醇丁酸酯的根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｓｐ．Ｂｃ０－０９）,该菌株所产胞外脂肪酶在水解环氧丙醇丁酸酯的反应中具有良好的立体专一性。在ｐＨ恒定７．０的条件下,以其发酵液水解底物,当转化率为５８％时,残留的（Ｒ）－环氧丙醇丁酸酯的光学纯度（对映体过量值）达９６．１％。     

小单孢菌细胞壁中3－OHDAP的快速分析

本文介绍了用微结晶纤维素簿板层析对小单孢菌（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）细胞壁中二氨基庚二酸（ＤＡＰ）异构体及其３－羟基衍生物（３－ＯＨＤＡＰ）进行快速分析的方法。在甲醇：水：冰乙酸：吡啶（１０：５：０．２５：１）的溶剂系统中测得Ｒ_{ＬＬ－ＤＡＰ}：ｍｅｓｏ－ＤＡＰ为０．８８,ＤＤ－ＤＡＰ为０．７８,３－ＯＨＤＡＰ为０．７２。     

阿特拉津降解菌株的分离和鉴定*

从农药厂废水中分离到６株能以除草剂阿特拉津为唯一氮源生长的细菌,即假单胞菌（Ｐｓｅｕ－ｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．）ＡＤ１、ＡＤ２和 ＡＤ６,土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｓｐ．）ＡＤ４,黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）ＡＤＳ,欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａ ｓｐ．）ＡＤ７。ＡＤ１菌株能使无机盐培养基中的 ０．３ｇ／Ｌ阿特拉津在７２ｈ内降解９９,９％。当以ＡＤ１、ＡＤ２、ＡＤ４、ＡＤ５、ＡＤ６和ＡＤ７菌株的总ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增时,除Ａ     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金     

环氧丙醇酯立体专一性水解酶产生菌的筛选

从土壤中筛选出一株能拆分－环氧丙醇丁酸的根,该菌株所产胞外脂酶在水解环氧丙醇丁酯的反应中具有良好的立体专一性。     

芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９ 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ．） 。Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ ． Ｍ５０２５０ｍ Ｌ三角瓶摇瓶培养试验,以４ ％ 的魔芋粉为碳源,１－０ ％ （ ＮＨ４）２ＳＯ４ 为氮源,０－３５ ％Ｎａ２ＣＯ３ ,３０ ～３４ ℃培养６０ｈ 产酶达到高峰。酶活力为１８０ ～２００ｕ／ｍ Ｌ。１００Ｌ 罐发酵,在３０ ～３２ ℃,１∶０ ．７５ｖｖｍ 通气量,２００ｒ／ｍｉｎ 条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍ Ｌ。酶的最适反应温度和ｐＨ 分别为５０ ℃和６－０ ,低于５０ ℃,ｐＨ５ ．０ ～７ ．０ 酶稳定。Ｆｅ^３＋ 、Ａｌ^３＋ 、ＥＤＴＡ、Ｈｇ^２＋ 对酶有抑制作用,而Ｂａ^２＋ 、Ｍｎ^２＋ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。     

确证冬虫夏草无性型的分子生物学证据* I.中国被毛孢与冬虫夏草之间的关系

从青海的冬虫夏草子实体上分离出中国被毛孢［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．］,并利用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术,筛选出８种引物,获得了冬虫夏草和中国被毛抱相应的基因组ＤＮＡ指纹图谱,两者相似率高达９６％,从而表明冬虫夏草的无性型为中国被毛孢。     

S－921抗生素效价的化学测定法

Ｓ－９２１抗生素由金色链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｕｒｅｕｓ）Ｓ－９２１菌株产生,它在３０４ｎｍ处有极大吸收峰,以３０４ｎｍ处的吸光度Ａ对浓度（效价）Ｃ进行线性回归,当吸光度Ａ在０．０４０－０．８２０范围内时,得回归方程为：Ｃ＝１２３．６４Ａ－２．６５１,经检验线性回归关系极显著,可用紫外分光光度法测定其效价。     

单甲脒降解菌的分离筛选

从土壤、水体和受单甲脒长期污染的样品中通过富集培养,从中分离筛选到一株单甲脒耐性较高的ＤＲ－８菌株。该菌株在牛肉汁培养基中对单甲脒的耐性可达１２５０ｍｇ／Ｌ,而在无机盐培养基中的耐性则为５００ｍｇ／Ｌ。该菌株可以利用单甲脒作为唯一氮源,但是不能以单甲脒作为碳源和能源而生长。降解单甲脒的最适温度为３７℃,最适ｐＨ为７．０,其完整细胞悬液对５５０ｍｇ／Ｌ左右单甲脒的降解率最高可达６４．８２％。经鉴定该菌株为门多萨假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｍｅｎｄｏｃｉｎａＤＲ－８）。     

反相高效液相色谱法制备HMC毒素纯品

本文采用反相高效液相色谱纯化制备了从玉米小斑病病菌Ｃ小种（ＨｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｒｉｕｍｍａｙｄｉｓＲａｃｅＣ）分离出来的毒素ＴｏｘｉｎＩ,经ＮＭＲ的结构分析证实此制备物纯度较高,达到结构分析要求。用氯仿提取含有ＨＭＣ的毒素培养滤液,经过多次ＴＬＣ展层层析（ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝９：１）,刮取具有侵染活性的部分（Ｒ_ｆ＝０．４）溶解在小体积甲醇中备用。色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ（制备型２５０ｍｍ×１０ｍｍ）填料为ＹＷＧ－Ｃ１８反相柱,粒度１０ｕｍ,流动相选用甲醇：水５５：４５     

stNI同功酶限制 修饰系统基因的表达检测和定位分析

鉴定了Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１和ＪＭ１１０的部分遗传标记,作为受体菌分别用于ＢｓｔＮＩ同功酶限制－修饰系统中限制性内切酶（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ,简称Ｒ）基因和甲基化酶（Ｍｅｔｈｙｌａｓｅ,简称Ｍ）基因表达的检测。用外切酶ＩＩ单向删切含ＲＭ基因的ＤＮＡ片段,获得２３个缺失突变亚克隆。通过检测各亚克隆表达的Ｒ酶和Ｍ酶活性,将Ｒ和Ｍ基因分别定位在距克隆位点ＰｓｔＩ的０２→１４ｋｂ和１５→３．３ｋｂ范围内。分析表明：该系统属于Ｉ类限制修饰系统,两个基因受控于不同的启动子;该系统与Ｅ．Ｃｏｌｉ染色体编码的胞嘧啶ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｃｍ）的识别序列相同,后者的甲基化作用也能阻止Ｒ酶的切割。Ｒ＋Ｍ－的重组质粒对Ｄｃｍ＋和Ｄｃｍ－的宿主都是致死性的,这说明在进化过程中,与Ｒ基因紧密连锁的Ｍ基因对系统的存在至关重要     

链霉菌质粒pSGL1最小复制子序列测定及分析

质粒ｐＳＧＬ１（７．４ｋｂ）是从球孢链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｌｏｂｉｓｐｏｒｕｓ）中分离得到的一个高拷贝质粒,已证明其最小复制子位于Ｓａｕ３ＡＩ酶切的２０ｋｂ片段上。对该片段进行亚克隆,测序后数据表明该片段是一个新序列。仅有一个开放阅读框架（ＯＲＦＲ）位于最小复制子中,推测其编码的蛋白质含有滚环复制质粒复制酶的特定序列。     

柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠中益生菌的影响*

双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐｐ．）及乳酸杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｐ．）被认为是动物机体内重要的有益微生物菌群之一。本文对鸡感染柔嫩艾美耳球虫后盲肠中上述两种微生物的变化情况进行了研究。结果表明：鸡在感染球虫后第４、７、１０ｄ时盲肠中双歧杆菌的数量显著减少（Ｈ＜０．０５）;在球虫感染后的第４、７、１４ｄ时,盲肠中的乳酸杆菌呈显著下降趋势（Ｐ＜０．０５）。     

凝胶板植酸酶活力检测

将１ｍｍ厚凝固于复印膜上的水琼脂（１５％～２．０％）凝胶板侵入含１２ｍｍｏｌ／Ｌ植酸钠的Ｇｌｙ—ＨＣｌ缓冲液中达１ｈ以上,取出干至胶表面无水迹,于上加Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｐ．５９—２植酸酶或与电泳后的凝胶板紧贴１０～６０ｍｉｎ。然后水平置于恒温水浴锅中反应一定时间,取出浸入１ｍｏｌ／ＬＨ_２ＳＯ_４－２％（ＮＨ_４）_６Ｍｎ_７Ｏ_２４－１０％ＦｅＳＯ_{４相似文献}   

脱卤脱亚硫酸菌脱氯呼吸链的遗传分析*

以携有结合转座子Ｔｎ９１６的Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　ＪＨ２－２为供体,脱卤脱亚硫酸菌ＨＳＳ１（Ｄｅｓｕｌｆｉｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｄｅｈａｌｏｇｅｎａｎｓ,Ｓｍ抗性突变株）为受体,在厌氧条件下,通过滤膜杂交、结合转移,将Ｔｈ９１６转移并插入到受体菌的染色体上,其转移频率为：１．１×１０^－７～３×１０^－８。　在丙酮酸／乳酸－３－氯－４－羟基苯氧乙酸、Ｔｃ、Ｓｍ培养基上,筛选脱氯呼吸的缺陷型突变株,并用反向ＰＣＲ（Ｉ     

变灰青霉固态发酵降解植酸的初步研究

从发霉植酸钠溶液中分离到一株产植酸酶的变灰青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｎｅｓｃｅｎｓ）Ｐ４。以麸皮：玉米面：黄豆饼粉＝７：２：１为主要培养基成份,用优选法确定最适培养基为在上述基本培养基中添加４％（ＮＨ４）２ＳＯ４,１％葡萄糖,１．５倍水,自然ｐＨ。发酵过程的动态分析表明,该菌在上述条件下２８℃恒温培养６ｄ后植酸降解率可达９０％;无机磷含量由０．１３％增至０．５７％;可溶性蛋白含量由３．８０％增至７．６０％。用４％ＣａＣｌ_２·２Ｈ_２Ｏ水溶液抽提     

利用淀粉产生碱性蛋白酶工程菌的构建

以不能利用淀粉为碳源、抗ｐｐ系列噬菌体和ｐＬ１噬菌体、产碱性蛋白酶（９４００－９８００ｕ／ｍｌ）的ＢａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓＣ１７２－６０为受体株,采用原生质体转化技术将携带糖化型小淀粉酶基因（Ａｍｖ）、Ｃｍ^ｒ基因、Ｋｍ^ｒ基因的ｐＢＸ９６质粒导入到受体株内,经两次利福平抗性筛选,获得一株能直接利用淀粉为发酵碳源、保留噬菌体抗性、产碱性蛋白酶的工程菌Ｃ１７２－３０６（ｐＢＸ９６）。菌体增殖９６．５代质粒丢失率为０．７７％,摇瓶发酵蛋白酶活力１４０     

猪瘟病毒石门株与兔化弱毒株E0糖蛋白基因的克隆及序列分析

参考已发表的猪瘟病毒序列,设计并合成了一对引物,应用ＲＴＰＣＲ 技术,扩增了猪瘟兔化弱毒（Ｈｏｇ ｃｈｏｌｅｒａ ｖｉｒｕｓ ｌａｐｉｎｉｚｅｄ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｓｔｒａｉｎ , ＨＣＬＶ） 和石门强毒株的Ｅ０ 糖蛋白基因,并将其克隆到ｐＧＥＭＴ 载体中,测定了其核苷酸序列,并推导了其氨基酸序列。结果表明我国这两株强弱不同毒株Ｅ０ 糖蛋白核苷酸序列同源性和推导的氨基酸序列同源性分别为９５－０ ％ 和９４－３ ％ ,有１３ 个氨基酸的差异,ＨＣＬＶ 比石门株多了一个潜在的Ｎ糖基化位点。将我国这两株病毒与国外已报导的ＨＣＶ 毒株Ｅ０ 基因序列进行了比较,发现石门株与日本的两株毒株ＡＬＤ 和ＧＰＥ－ 同源性较高,核苷酸序列同源性分别为９７－４ ％ 和９６－５ ％ ,氨基酸同源性分别为９７－４ ％ 和９６－０ ％ ,而与欧洲Ｂｒｅｓｃｉａ 株和Ａｌｆｏｒｔ 株同源性较低,核苷酸同源性分别为９２－２ ％ 和８６－５ ％ ,氨基酸同源性为９５－２ ％ 和９２－５ ％ , ＨＣＬＶ 与ＡＬＤ、ＧＰＥ－ 、Ｂｒｅｓｃｉａ、Ａｌｆｏｒｔ 株核苷酸同源性分别为９５－６ ％ 、９４－９ ％ 、９１－３ ％ 、８５－５ ％ …     

米曲霉原生质体融合及杂合二倍体的形成

采用混合酶液处理纤维素酶高产苗株３０４２_Ｎ－２（天冬酰胺缺陷型“Ａｓｎ^－”）及蛋白酶高产菌株３０４２_Ｎ－１９（蛋氨酸缺陷型“Ｍｅｔ^－”）的营养菌丝,获得原生质体,以ＰＥＧ为助融剂进行融合处理,成功地获得了米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）原生质体的营养互补融合。将异核体菌落的菌丝转接到合有０．１％樟脑的新鲜ＭＭ上,２５℃诱导培养７─１５天,挑取绿色角变菌落的孢子,将其转接到ＭＭ上能迅速生长,经孢     

紫色非硫细菌Rhodocista属一新分离株的鉴定及其系统学研究

从污水处理厂分离到一株紫色非硫细菌３ｐ ,该菌株具避光性,能形成孢囊,具片层状光合内膜,在波长７９８ ｎｍ 处的吸收峰很低,需硫胺素和维生素Ｂ１２ 作生长因子。该菌株可以琥珀酸为碳源,最佳生长温度为３４ ℃～４１ ℃,体内未发现Ｒ 体结构,醌类的主要成分是Ｑ９ 。对菌株３ｐ 的１６ＳｒＲＮＡ 基因的分子系统学分析结果表明,菌株３ｐ 与世纪红篓菌（ Ｒｈｏｄｏｃｉｓｔａ ｃｅｎｔｅｎａｒｉａ） 关系最近,相似性为９５ ％ ,二者可归为同一属;与Ｒｃ．Ｃｅｎｔｅｎａｒｉａ 的杂交结果表明,二者的ＤＮＡ 相关性为５６ ％ ,故可把３ｐ 定为一个新种：北京红篓菌（ Ｒｈｏｄｏｃｉｓｔａｐｅｋｉｎｅｎｓｅ ｓｐ ．Ｎｏｖ） ．