四眼斑水龟卵泡和卵的超声波扫描研究

使用超声波技术检测了6只雌性四眼斑水龟的卵黄卵泡(包括生长卵泡和排卵前卵泡)、闭锁卵泡和输卵管卵的大小和数量.结果 表明:四眼斑水龟卵巢卵黄卵泡数目和大小呈明显的周期性变化,检测到的卵黄卵泡长径范围为4～24 mm(n=186).8月份卵泡数目开始增多,卵泡长径逐渐增大,至12月份排卵前期卵泡数量达最大值,卵巢发育成熟.排卵前期卵泡长径范围为19～24 mm(n=56),最大排卵前期卵泡出现于12月.排卵时间是1月至3月.闭锁卵泡长径范围在10～20 mm(n=14)之间,仅在10月至次年3月能检测到少数的闭锁卵泡.     

长角血蜱卵泡抑素相关蛋白的定性

参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株卵泡抑素基因的核苷酸序列(GenBank Accession No.DQ248886)设计合成一对引物,从本实验室保藏的单克隆洁净长角血蜱饥饿成蜱中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出814bp的卵泡抑素基因,序列比对结果显示:与长角血蜱致病性Okayama株的核苷酸序列及氨基酸序列一致性分别为97.8%和99%,将其亚克隆到表达载体pGEX-4T-1中进行表达,GST融合重组蛋白预期分子量为57kD。表达重组蛋白经MagneGSTTM蛋白纯化系统纯化后作为抗原分别与抗不同发育阶段长角血蜱(卵、幼蜱、若蜱、成蜱)多克隆抗体作为一抗进行免疫印迹,结果表明:与长角血蜱卵制备的多克隆抗体有很强的免疫反应,而与其他发育阶段(幼蜱、若蜱、成蜱)饥饿长角血蜱制备的多克隆抗体反应性很弱。以上结果表明:长角血蜱卵泡抑素蛋白在长角血蜱产卵及卵成熟发育时期的表达水平较其他发育阶段(幼蜱、若蜱、成蜱)的蛋白表达水平高。     

柳条鱼生殖方式的观察

我们的生物角饲养了柳条鱼,这种鱼与一般的鱼生殖方式不同。雄性柳条鱼的臀鳍鳍条一部分变长成为交接器(生殖鳍),约为体长1/3,不断向前摆动。当追逐到发情雌鱼时,很快地将按交器插入雌性柳条鱼的交接孔(生殖孔)进行交配。雌鱼的卵为卵泡受精、卵泡受孕,且是单受孕。受孕的雌鱼臀鳍上方有明显的黑色胎斑,为腹中怀胎位置。将具有胎斑的雌鱼分别饲养在小瓶中,水温26℃—30℃,结果有8个瓶号     

四川无尾两栖类的繁殖模式

依据Duellman和Trueb(1986)的定义,对四川无尾两栖动物的繁殖模式多样性进行了研究。研究结果如下:(1)73种四川无尾类可以划分为2类共5种繁殖模式。水内产卵是比较原始的一类繁殖模式,又分2种:静水产卵(模式1)和流水产卵(模式2),68种(93%)是在水内产卵;水外产卵是较进化的一类繁殖模式,又分3种:卵产在近水塘的泥窝中(模式12),卵泡产在近水域的土穴中(模式21)和卵泡产在近水域的树上或灌丛上(模式23),仅5种(7%)在水外产卵。(2)模式1、12、21、23的两栖动物,雌雄性的体型较模式2的物种为小,产卵的数量大,但卵径较小;蝌蚪的生态表型均可归入静水型,共同特点是蝌蚪体型小,在静水中觅食,生长发育快。模式2的两栖动物,雌雄性的体型较大,产卵的数量少,而卵径较大;蝌蚪的生态表型可归入流水型,特点是蝌蚪体型大,在流水中觅食,生长发育慢。(3)水内产卵的两栖动物的窝卵能量投入方式可以分为两种:静水产卵(模式1)的物种通过增加卵的数量来增加投入,接近于r-选择物种;流水产卵(模式2)的物种通过增大卵径来增加投入,接近于k-选择物种;是两种适应不同环境条件的的繁殖策略。     

卵巢血纤维蛋白溶酶原激活物受激素调控

卵巢有多种来源的血纤维蛋白溶酶原激活物(PA)。1985年作者发现颗粒细胞和卵泡膜细胞产生不同类型的 PA。刺激颗粒细胞主要产生组织型 PA(t-PA),卵泡膜细胞主要分泌尿激酶型 PA(u-PA)。颗粒细胞的制备和培养按 Crisp 和 Denys(1975)的修改法;实验给大鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG)后,48小时杀死;分离收集卵泡或卵丘-卵母细胞复合物,以 DME 配方新配的培养基液洗涤。卵细胞的细     

鼎突多刺蚁群体结构和生活史的研究

本文报告了鼎突多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)的群体结构和生活史。通过研究表明,鼎突多刺蚁一年发生一代,以蚁后、雄蚁、工蚁、幼虫和卵越冬。卵和幼虫在冬天发育停滞(或极慢)。到了春天,随着气温的上升,卵和幼虫又恢复正常发育。据室内人工饲养观察,卵的发育历期为23.8±2.5天(平均温度26℃)幼虫为20.4±4.4天(26℃),工蚁蛹为19.8±5.5天(27℃)。成长工蚁在5—11月出现;8—11月,雄蚁从蛹中羽化;10月,雌蚁从蛹中羽化。雌蚁分飞交尾后,进入邻近蚁巢或回到原巢,脱翅成为蚁后。蚁巢内存在着多后现象。     

屠宰绵羊卵巢卵母细胞的体外培养成熟

[目的] 探索把屠宰母羊卵巢卵母细胞在体外条件下培养成熟的有效处理方法和条件以便为体外受精技术的研究提供更多的成熟卵子。 [方法] 把从屠宰母羊新鲜卵巢的发育卵泡中采集的784枚卵母细胞分为3种类型,即A型(卵丘细胞层较完整的卵子)、B型(卵丘细胞层部分脱落的卵子)和C型(卵丘细胞、放射冠均脱落的裸卵)。并     

脂联素在应激状态下对小鼠卵泡发育的影响

目的:利用饥饿刺激探讨应激状态下脂联素缺失对小鼠卵泡发育的影响。方法:C57BL/6、脂联素半缺失(APN+/-)、脂联素全缺失(APN-/-)三种基因型小鼠以正常进食量的一半给予饥饿刺激,建立应激模型,30天后处死小鼠取卵巢,计数三种基因型小鼠各级卵泡数目。结果:1经过30天饥饿后饥饿组小鼠体重下降与初始体重比较有统计学意义(P0.001),应激模型建立。2应激状态下三种基因型小鼠卵巢重量未见统计学差异(P0.05)。3正常饮食组三种基因型小鼠各级卵泡比例未有统计学差异(P0.05)。饥饿后C57BL/6小鼠原始卵泡比例为(47±2.966)%,APN+/-原始卵泡比例为(36.5±1.555)%(P0.05),APN-/-原始卵泡比例为(36.8±2.200)%(P0.05);C57BL/6闭锁卵泡比例为(12±1.225)%,APN+/-闭锁卵泡比例为(19.75±1.887)%(P0.01),APN-/-闭锁卵泡比例为(20±0.8367)%(P0.001),与野生型闭锁卵泡比例比较差异有统计学意义。结论:饥饿刺激下脂联素缺失小鼠原始卵泡消耗增加,而闭锁卵泡的发生增加,处于生长状态的卵泡减少,提示在应激状态下脂联素水平的下降可导致卵泡成熟的过程受阻。     

鼎突多剌蚁群体结构和生活史的研究

本文报告了鼎突多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)的群体结构和生物史。通过研究表明,鼎突多刺蚁一年发生一代,以蚁后、雄蚁、工蚁、幼虫和卵越冬。卵和幼虫在冬天发育停滞（或极慢）。到了春天,随着气温的上升,卵和幼虫又恢复正常发育。据室内人工饲养观察,卵的发育历期为23.8±2.5天（平均温度26℃）幼虫为20.4±4.4天(26℃),工蚁蛹为19.8±5.5天(27℃)。成长工蚁在5—11月出现;8—11月,雄蚁从蛹中羽化;10月,雌蚁从蛹中羽化。雌蚁分飞交尾后,进入邻近蚁巢或回到原巢,脱翅成为蚁后。蚁巢内存在着多后现象。     

颗粒细胞EGF类因子信号通路在调控卵母细胞成熟和发育中的作用

动物体内卵泡排卵前促黄体素(luteinizing hormone, LH)诱导了卵丘颗粒细胞扩散,并启动卵母细胞恢复减数分裂。普遍认为,卵泡壁层颗粒细胞表达LH受体,卵母细胞及其周围卵丘细胞不表达LH受体,LH通过作用于卵泡壁层颗粒细胞产生信号分子,这些信号分子作用于卵丘颗粒细胞介导了LH生物作用。然而,一直以来,关于排卵前介导LH作用而诱导卵母细胞成熟的机制一直存在争议。目前研究认为,LH作用于卵泡壁层颗粒细胞后产生了EGF类因子,并与颗粒细胞的受体结合,促进了卵母细胞的成熟和发育。由于体外成熟的卵丘卵母细胞复合体来源于生长卵泡,其卵丘颗粒细胞EGF类因子信号系统不完善,目前的体外成熟培养体系难以模拟卵泡内的生理环境,导致卵母细胞体外发育能力较差,限制了这些卵母细胞的利用效率。本文综述了颗粒细胞EGF类因子信号系统、EGF类因子在调控卵母细胞成熟中的作用及对卵母细胞发育能力的影响,为优化卵母细胞体外成熟培养体系,完善卵丘颗粒细胞的EGF类因子的信号系统,进而提高卵母细胞体外成熟效率提供理论依据。     

绵羊卵泡成分对卵母细胞体外减数分裂调控的研究

哺乳动物卵巢中的卵母细胞一直处于减数分裂的停滞状态,卵泡内各成分被认为是产生抑制因子的主要来源。本研究以绵羊卵泡各成分为研究对象,用共培养的方法对卵丘细胞、颗粒细胞、膜细胞在卵母细胞体外减数分裂过程中的作用加以探讨。结果表明：1．卵泡整体及卵泡分泌物在体外可以有效地维持减数分裂停滞,经过24h培养,这两个处理组中,处于GV期的卵母细胞分别为69．6％和49．1％。经抑制处理后的卵母细胞脱离抑制环境后可以继发成熟,MⅡ比率可达88．9％。去掉卵丘细胞的裸卵其减数分裂过程不能被卵泡分泌物有效抑制,24h培养后其GV期比例为17．8％。以上结果说明卵泡中的抑制因子主要是通过卵丘细胞束发挥其调控作用的。2．用颗粒细胞与卵母细胞共培养,结果发现具有颗粒细胞卵丘细胞缝隙连接的卵母细胞(COCGs)在培养24小时后47．4％达到MⅡ,与在不具有细胞连接的总浮颗粒细胞中共培养的卵母细胞之间存在无显差异,无论是紧密连接的颗粒细胞层还是悬浮在培养液中的颗粒细胞都不能有效抑制生发泡破裂(GVBD)的发生,只能将卵母细胞抑制在MⅡ以前的各个时期。以上结果说明颗粒细胞在体外分泌抑制图子的活力大大下降。3．卵泡膜细胞具有分泌抑制成熟分裂因子的能力,与膜细胞层共培养的卵母细胞在8h和24h时,其GV期的比例为34．4％和32．7％,显高于没有膜细胞层的对照组(4．5％和1.1％)。综上所述,绵羊卵泡中的抑制因子不仅来自于颗粒细胞,而且膜细胞也参与了成熟分裂的抑制,这些细胞在体外仍具有分泌抑制因子的能力,只是与体内分泌能力有所不同。     

正常月经周期妇女卵泡液中激素水平的变化

本文测定了24例正常月经妇女在不同时相、不同大小卵泡的卵泡液中雌二醇(E_2)、孕酮(P_0)、雄烯二酮(A)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和催乳素(PRL)的含量,并分析其与外周血中相应激素浓度的关系。测定结果显示:小卵泡的卵泡液中E_2、Po,FSH,LH水平低于大卵泡中水平,而A和T水平则相反。排卵前大卵泡中E_2(9815nmol/L),P_0(3316nmol/L),FSH(1.34IU/L)和LH(3.9lIU/L)达最高值。A(280nmol/L)和T(137nmol/L)却较小卵泡中水平低(相应为692nmol/L和176nmol/L)。PRL水平在大小卵泡中无显著性差异。卵泡液中甾体激素水平高于外周血7—20.000倍,FSH、LH水平为外周血的10—80％,PRL水平为60％—3倍。     

新生小鼠卵巢移植雄鼠肾囊下卵泡的生长发育

将1日龄小鼠卵巢移植入成年雄鼠肾囊下,分别于移植后18d、36d回收移植卵巢进行形态学、组织学观察,以评价卵巢移植体在成年雄性受体小鼠体内生长及卵泡发育潜能。结果表明:移植体生长增大,有各级生长卵泡发育;18日龄移植体平均直径为1881.1μm±204.7μm,与1日龄卵巢相比差异极显著(P<0.01),卵泡发育到有腔卵泡阶段;36日龄移植体平均直径达2575.3μm±466.4μm,显著大于18日龄移植体(P<0.01),有成熟卵泡出现,未观察到黄体;从移植体分离到GV期卵母细胞和卵丘卵母细胞复合体。研究表明1日龄小鼠卵巢移植体在雄性受体生理环境中具有正常生长发育和形成成熟卵泡的潜能。     

人卵巢颗粒细胞的体外培养方法探讨

目的建立人卵巢颗粒细胞分离纯化、体外培养的有效方法。方法收集体外受精—胚胎移植(IVF-ET)穿卵时的卵泡液,用胰蛋白酶消化法及密度梯度离心法分离纯化颗粒细胞并用不同培养基进行培养。结果用体积分数为50%的Percoll细胞分离液分离,DMEM/F12或McCoy’5a液体培养基进行培养,细胞纯度高,存活率高,后续生长良好。结论建立了人卵巢颗粒细胞体外培养的稳定模型,为颗粒细胞的体外研究奠定良好的基础。     

近30年中国卵巢生理学研究进展（英文）

卵泡的形成和分化是在激素、卵巢内调节因素以及细胞间相互作用的精密调控下发生的序贯过程。细胞增殖与凋亡的平衡在优势卵泡的筛选中发挥着重要作用。原始生殖细胞在生殖嵴内的迁移和归巢需要诸多因素的协同调控,包括卵母细胞源性多肽生长因子、生长分化因子9、骨形态发生蛋白、干细胞因子(stem cell factor,SCF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、转录因子肾母细胞瘤蛋白1(Wilms’tumour 1,Wt1)等,同时这一过程还需要原始生殖细胞在逐渐成熟的性腺刺激下与细胞外基质蛋白、细胞基质进行相互作用。卵丘-卵母细胞复合体的形成以及排卵的发生直接受黄体生成素(luteinizing hormone,LH)的调控,同时需要卵巢颗粒细胞中丝裂原活化蛋白激酶的活化参与其中。本文将对卵泡发育和分化以及排卵过程中涉及的细胞间作用以及信号转导的关键分子做一综述,重点关注卵母细胞以及体细胞产生的信号因子。     

斑须蝽蝽卵蜂生物学特性的初步研究

<正> 以蝽科昆虫卵为寄主的蝽卵蜂属(Trissol-cus)是缘腹细蜂科(Scelionidae)中一个较大类群,Kieffer(1926),Hellen(1971),Козлов(1970,1971),Masner(1976)等人先后进行了详细的研究,仅苏联就记述了53种(Медведва,1978),有的国家还用蝽卵蜂作了蝽科害虫的生物防治试验(Larachi,1976)。我国仅周仁濂(1955)等人记载一种稻蝽沟卵蜂能寄生稻褐蝽卵,寄生率达41.75—94.2％。作者近年发现广泛为害粮、棉、油料、麻类、甜菜、蔬菜、烟草和果树的害虫斑须蝽Dolycoris baccarum L.的卵能被另一种蝽卵蜂——斑须蝽蝽卵蜂Trissolcus sp.大量寄生,寄生率达35—60％,为其重要天敌,国内未见报道,我们对其生物学特性作了初步观察,现把两年来结果报道如下。     

药学角度探讨和分析不同来源卵泡刺激素对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:比较基因重组卵泡刺激素(r-FSH)及高纯度尿源性卵泡刺激素(HP-u FSH)对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响,结合临床表现从药学角度探讨和分析。方法:回顾分析具IVF/单精子卵细胞浆内显微注射授精(ICSI)指诊并首次接受IVF/ICSI助孕的不孕症患者235例,以给予的FSH药物种类不同分为2组:HP-u FSH组(n=135)和r-FSH组(n=100)。主要研究指标为出生率,次要研究指标为临床妊娠率,流产率及着床率。结果:HP-u FSH组外源性促性腺激素(Gn)总量和FSH量均多于r-FSH组(P0.01),获卵数和可移植胚胎数较r-FSH组少(P0.01),受精率较r-FSH组低(P0.05)。两组平均Gn刺激天数,妊娠结局及中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率均无统计学差异(P0.05)。对患者年龄35岁和≥35岁分别进行分组发现,年龄35岁患者中的HP-u FSH组较r-FSH组平均年龄更大,不孕年限更长,基础窦卵泡数(AFC)更少(P0.01),≥35岁患者中的HP-u FSH组与r-FSH组的基本特征(年龄,不孕年限,AFC)无统计学差异(P0.05);无论年龄35岁或年龄≥35岁,HP-u FSH组的Gn量和FSH量较r-FSH组均更大,获卵数及可移植胚胎数更少(P0.01)。结论:在IVF/ICSI周期治疗中,国产HP-u FSH与r-FSH进行COS具有等同的IVF临床妊娠率及出生率。     

光周期对四眼斑水龟繁殖影响

为探讨光周期对四眼斑水龟(Sacalia quadriocellata)繁殖的影响,于2008年10月至2009年9月对其进行光周期实验.将39只成体分成短光照组、长光照组和对照组,每个组别中样本量均为7♀、66.每月用超声波技术对雌性个体进行卵泡数量、大小的检测,并用X光投射法确定硬壳卵数;每半月对雄性进行录像观察.结果表明:三个实验组卵泡数量和卵泡大小表现出明显的周期性,原始卵泡从8月份开始生长发育,卵泡数量在11月份最多,尺寸在12月份也达到最大值;光周期对雌性卵泡数量和卵泡大小的发育有影响,短光照组检测到的总卵泡数高于长光照组和对照组,其中短光照组卵泡数与对照组卵泡数差异显著(P＜0.05),长光照组卵泡尺寸相对于另外2个实验组显著变小(P＜0.01);光周期对雌性产卵数和雄性发情强度无影响(P＞0.05).光周期对四眼斑水龟雌雄个体性腺发育的作用不同,缩短光照对雌性繁殖有促进作用,延长光照对雄性发情强度在特定阶段具有一定促进作用.     

基础窦卵泡数对IVF/ICSI-ET超排卵周期卵巢反应的预测价值*

摘要目的：窦卵是女性宫腔内的泡状细胞,与女性卵巢的发育及功能密切相关。本研究针对体外受精(IVF)周期中基础窦卵泡数 (antral follicle count, AFC)的变化情况,探讨AFC 对卵巢反应的预测价值,为临床研究提供理论基础。方法：回顾性分析2012 年1 月至2012 年12 月在我院生殖医学中心接受体外受精- 胚胎移植的157 例患者的临床资料,根据基础窦卵泡数将所选病例分为 A 组(bAFC逸10)和B组(bAFC＜10)。对比并分析两组研究对象的促性腺激素(Gn)的用量及使用时间、获卵数、人绒毛膜促性腺激 素(HCG)注射日的血清中雌激素(E2)水平、受精率、临床妊娠率等。结果：A 组患者的Gn 用量、HCG日E2 值、获卵数及临床妊娠 率均显著高于B 组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的年龄和基础卵泡刺激素水平差异显著且具有统计学意义(P<0.05); 两组患者的不孕原因、不孕年限及助孕方式无明显差异(P>0.05)。结论：基础窦卵泡对体外受精女性促排卵周期的卵巢反应及助 孕结局具有一定的预测价值,其数量的多少可作为促排卵过程中评价卵巢反应性的参考指标,应在临床进一步推广。     

多囊卵巢综合征模型鼠颗粒细胞凋亡及TRAIL蛋白的表达

目的通过观察卵巢颗粒细胞凋亡及TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)蛋白的表达情况,探讨颗粒细胞凋亡与PCOS发病的相关性及凋亡调控蛋白TRAIL在PCOS颗粒细胞凋亡中的作用。方法采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,3’-末端原位标记法(TUNEL)检测大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,免疫组化染色及RT-PCR分析检测TRAIL蛋白及TRAIL mRNA在颗粒细胞的表达。结果PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达较对照组明显增强(P<0.01,P<0.05),窦前卵泡颗粒细胞凋亡发生率及TRAIL蛋白的表达两组无显著性差异(P>0.05),两组卵巢始基卵泡颗粒细胞未发现凋亡征象及TRAIL蛋白表达。PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论PCOS大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞凋亡明显增强,TRAIL在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控中发挥了作用。