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《生物技术通报》1992,(2)
920468采用生物素和一种荧光染料标记的引物对聚合酶链反应产物进行定t分析〔英万Landgraf,A.“·/A rtal.Bioehem。一1991,193(2)一231~235〔译自DBA,1991,10(12),91一06628〕 经生物素和异硫氰酸荧光素共价标记的PCR引物可被固定化分离。采用在5‘末端有不同标记的成对引物,可对PCR产物进行同步纯化和鉴定。产物经生物素标记,可用连有抗生物素蛋白或共类似物的吸附剂加以分离。对异硫氰酸荧光素标记的DNA引物进行碱变性和洗脱,即可定量测定荧光标记的吸人量。为测试实用性,用2个互补于人bcr外显子n的104bp靶序列的寡聚核普酸引物,… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(6)
再于72℃下放置2.5分钟;用2种BLB引物对共扩增时,94℃1分钟(第一次循环3.5粉爹钟),在65922074利用pCR检测牛淋巴瘤中的牛白血病病那〔英〕/Rasmussen,H.B.…了Bioteeh。ForumEur一2991,s(9)一527~519〔译自DBA,1901,10(23),91一13308〕 利用聚合酶链反应(PCR)从含30只雌牛淋巴瘤样品的材料中将由牛白血病病毒(BLV)引起的肿瘤与其它病因的肿瘤区分开。设计了两种扩增DNA BLV一专性片段的引物对,还设计了第三种识别牛K一酪蛋白基因启动子区的引物对,以控制模板的质量。利用Taq DNA一聚合酶扩增DNA(0 .25件g),条件如下:用1种BLV… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(4)
931129由各种方法纯化的质粒ONA的Taq循环翻序〔英〕/Hradetzky,D.…1 Bioteeh Forum Eur一1092,9(7~8)一471~472〔译自DBA,1992,11(20),92一11144) DNA模板的纯化是测序中最关键最困难的一步。就DNA得率、花费、碱基范围和碱墓精确率等方面,考察了制备双链DNA的各种方法,包括小型制备一水煮法,小型制备一碱法,氮化艳制备法,Stratagene过柱法,Qiagen过柱法。采用质粒pBlueseript IIKS、ABI Taq引物循环侧序药盒及AIB Taq染料脱氧终止子循环测序药盒,对DNA进行自动测序。Stratagene或Q二age。层析给出高纯度DNA,使测序范围… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(6)
核酸及蛋白质合成、提取、纯化931888ONA侧序反应纯化的固相方法〔英〕/Tong,X.…/Anal。Chem一1992,6魂(22)。一2672~2677〔译自DBA,1993,12(i),。3一00002〕 在酶促延伸反应中采用了5尸末端用吕:P标记、中间位置含生物素类的引物寡核昔酸,形成的产物与抗生蛋白链菌素包被的磁性珠拉结合。通过变性并洗涤珠粒除去模板链和其它反应污染物,通过在EDTA/甲酞胺混和物中加热,洗脱残留的纯单链片段。将珠粒固定于具固定磁铁的样品管之后,洗涤珠粒以除去各种污染物(如蛋白、盐类、模板DNA及未掺入或降解的三礴酸脱氧和双脱氧核昔。通过在9… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(6)
922029利用超薄报胶快速定序ONA〔会,英〕/Sm川1,L .M.…了Abstr.pap.Am.Chem.Soc一1991,202 Meet.,Pt.1一ANYL 33〔译自DBA,1992,10(23),91一13304〕 研究了用毛细管电泳提高荧光DNA白动测序仪的定序速度。用毛细管电泳比用常规电泳分离和测定DNA定序反应荧光标记产物的速度快25倍。为了增加多样本平行分析的分辨逮度,发明了一种进行超薄板(50林m)凝胶电泳的装置。这种凝胶电泳的电场高达300V/cm,利用自显影法经25分钟电泳可厕定多达320碱基的序列。设计并制造了一个用于检测多个在上述超薄凝胶上荧光定序的荧光团的检测系统。… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(5)
921598自动化引物延伸装置〔专,日〕/Toa一Fuel/Jo3154一869:13.11。89一JP一294369(02。07.91)13.11。89 as 294369.92一235530/32(10页)〔译自DBA,1991,10(21),91一12085〕 新装置能将荧光标记的DNA引物加入样品、退火、酶促引物延伸及浓缩。该系统包括:DNA样品容器支撑及定位装置、将样品、引物及缓冲液导人容器的设施、加盖去盖装置、加热及温控装置、样品冷却装置、容器振荡(混匀)装置、低速及高速顺序离心装置以及控制装置(使退火、延伸及浓缩等过程可自动进行)。通过应用混匀和离心过程,可完全消除粘连在管壁上的样品,并且,微… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924618在固态发醉过程中木质纤维素降解:桩皮健耳和Phanerochaete chrysosPorium[英〕/Kerem,Z。…/Appl.Environ.Miorobiol一i。。2,58 (4)一1121~1127〔译自DBA,1992,11(11),92一06579〕 采用糙皮侧耳(ple。,ot:5 05‘,ea‘。s)Flo-rida f6和p无二eroc而ae‘e ch,,。o舀夕。,东“m BKM,试验了在棉杆的固态发酵过程中,木质纤维素的降解及与木质素降解相关的活性。尸.“五r梦808,。-石。。可旺盛生长,在15天内快速无选择降解55%的棉杆的有机组分。糙皮侧耳生长缓慢,具有明显的选择性,30天后仅仅有20%的有机物降解。“C木质素矿化动力… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
924297降解2,4一二氯苯氧乙酸(2,4一O)的质粒pJP4的PCR和基因探针检测〔英〕/Neilson,J.W.一/Appl .Environ.Mierobiol一1992,55(4)一1271~1275[译自DBA,1992,11(11),92-06019〕 用PCR和DNA探针灵敏性检测2,4一D降解菌真养产碱菌(Azca不‘夕e,ese:t,o,hos)JMPi34(含质粒pJP4)。甩2个20一聚寡核普酸DNA引物扩增pJP 4 tfdB基因的Zosbp区,并优化扩增条件 (94℃变性1分30秒、72℃退火并延伸1分钟、72℃最后延伸7分钟,共进行25轮)。PCR和5产端标记DNA探针的杂交都是对含pJP4或其衍生质粒pRO103菌株专性的。检测灵敏性为30oocfu… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(1)
920001大肠杆菌JM鸽的盆组A蛋白〔会,英〕/Hamm。-nd,P .M.…尹Ann.N.Y.Acad.Sci一1990,623一563~567〔译自DBA,1991,10(9),91一04829〕 含外源基因的大肠杆菌JM83(pPA34)产生的重组A蛋白占其可溶蛋白的42%。产物没有C一末端疏水尾部,但具有完全的生物学活性。以甘油作碳源,可使JM83的Lac启动子免受代谢抑制。应用疏水反应色谱法,建立A蛋白纯化新法。将33。。克冷冻细胞浆匀化,纯化的抽提物在80“C加热10分钟。除去沉降蛋白,$lJ剂在Sephadex G25一C上脱盐,洗脱液是25mM Tris一HCI(P H8.3),用DEAE一Sepharose FF(用线性梯… 相似文献
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《生物技术通报》1985,(6):81
852466从山鸡椒(Litsea polya,tha)叶分离出的多糖mUcilage的结构〔英]/Bhatta-eharya,S.B。…ICarbohydr.Res一1984,126(2)一297一302〔译自DBA,1984,3(18),84一08609〕 药用植物山鸡椒的叶是一种缓泻剂。将叶干燥并粉碎,分别用乙醇、苯一甲醇和无水甲醇提取。多糖从无水甲醇部分中分离出来,并经过滤、透析和乙醇沉淀纯化。多糖水解后可得到单糖:L一阿拉伯糖和D一木糖以及微量的D一葡萄糖和D一乳糖。用澳化三十六烷基三甲胺复合物除去所含的己糖杂质以纯化多糖。在三氟醋酸中,100℃加热,保持45分钟,可获得降解的多糖。用天然多糖和降… 相似文献
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《生物技术通报》2003,(4)
030 0 2 3囊尾蚴膜联蛋白 32在大肠杆菌中的表达及纯化〔中〕/郭氵嬴军… / /生物工程学报 .- 2 0 0 1,17(5 ) .- 5 5 3～ 5 5 6在已获得的囊尾蚴膜联蛋白 (Annexin) 32cDNA的基础上 ,以PCR的方法在cDNA两端加上酶切位点 ,插入原核表达载体 pJLA 5 0 3,热诱导表达后 ,外源蛋白大部分以可溶形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 35 %。经(NH4) 2 SO4分级沉淀、DEAE阴离子交换层析及Sephacry1S 2 0 0凝胶过滤层析得到电泳单一条带 ,Westernbolt及抗凝血实验证明表达产物是有生物活性的。0 30 0 2 4猪生长激素基因在巴斯德毕赤酵母中的高… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(5)
921951用一种黑蛋集菌(Cyathus helenae)降解稻米副产物〔英〕/Kuhad,R.C.…了Indian J.Mi-crobiol一1991,31(3)一291~295〔译自DBA,1991,10(21),91一12271〕 C,ath”sh“le“ae生长于含有稻草或稻壳作为唯一碳源的培养基上,显示适中的生长。该真菌在稻草和稻壳表面形成菌落,并浸蚀表皮。发酵还造成基质松弛,这可能是胧木素作用的结果。稻谷废料由培养滤液在28℃发酵62天后。稻壳中木质素损失为8.3%,稻草中为5.3%。木质素降解由滤液中过氧化物酶表示。发酵培养基中还原_糖数量逐步增加。C.h“z“”a。可用于改善稻谷废料的可消化性。(… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(3)
930806 利用引物接头介导对结合在磁性同相上的DNA徽 PCR扩增进行檀物启动手的克隆和直接定序[荚]/Espelund,M.…,BioTechniques.一1992,13(1).一74～81[译自DBA,1992,儿(17),92—09541] 目标DNA是一已知序列的旁侧片段。通过引物一接头(adaptor)与一个经限制性酶切的基因f~[DNA相连,而免去逆向PCR所需的环化步骤。扩增的第一步即有专一性。用一种生物素标记的DNA引物(与已知的侧翼序列互补)进行线性PCR,可产生单链产物,用抗生蛋白链菌素包埋的磁珠可将之纯化。在第一步去除染色体组DNA后,进行两轮指数PCR,先用adaptor一引物… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
920805通过酚抽提法从服硫氛酸中纯化质粒〔英〕/Fishe-r,J .A.…了Anal.Bioehem一1991,194(2)一309~315【译自DBA,1991,10(15),91-08441〕 该方法利用自动核营酸提取设备。基本操作是于pH4.5时用酚从IM的脏氰酸中进行抽提,这样能从水相中有效地去除染色体DNA,而超螺旋的质粒DNA仍留在水相中。51核酸酶消化表明,去除的染色体DNA已经变性,因而可溶于有机相。整套方法包括:用溶菌酶、RNA酶A和蛋白酶K连续预处理细菌细胞;消化后的溶液用酚/氯仿十水混合物抽提二次,再用氯仿抽提一次。通过异丙醇沉淀收集纯化的质粒。这样提纯的质粒中… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923659链激酶发醉的动力学分析及模型建立〔英〕/Stueb-ner,K.…了Aeta Bioteehnol一1991,11(5)一467~477〔译自DBA,1902,11(7),。2- 03774〕 研究了厌氧等温等容批量培养过程中链激酶生产的动力学。发酵在CHEMAP发酵罐中进行,培养基含酵母自溶物(氮源)、葡萄糖(碳源)和无机盐。在发酵罐中进行5个实验流程,每1或2 hr移去培养液中样品,并根据生物量、细胞计数、消光值和糖浓度进行分析。动力学特性鉴定表明生长受初始产物的限制,该产物呈S形行为、在专性底物降解与乳酸形成比率间呈线性相关,蛋白形成和底物降解间呈线性相关。提出了具… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922884直接偏选含YAC克隆的cosmid文库〔英〕/Bax“-ndale,5.…/Nueleio Aeids Res一i。。1,1。 (25)一6651〔译自DBA,1992,11(4),92-01865〕 介绍了直接筛选含人类人造染色体(HAC)的cosmid基因文库的方法。从48XXXX人类细胞系的酵母人造染色体(YAC)基因文库中分离出重叠YAC克隆〔YGAS(41okb)和YGAio(4‘okb)〕,置于亨廷顿舞蹈病基因4 p16。3候选区内在紫外光下(36Onm)从凝胶上的酵母染色体带中切下HAC带。用(a一‘ZP)一dGTP和一dATP对D NA进行随机引物标记。通过与人切变胎盘DNA预杂交,从探针和经流式分拣的人第4染色… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(4)
9乙1 156利用消除了单独位点的pCR产生的形式对任何段较进行位点特异性诱变〔英万R ay,F .A。“·,BioTee五niques一xogz,13(3)一s‘2〔译自DBA,1902,11(21),。2一21692〕 使用单独位点消除作用(USE)时,目标DNA被热变性,引物指引的DNA合成与2个诱变引物有关,一个在单独位点引起突变(USE引物),第二个能引入任何所濡的突变。DNA被转入大肠杆菌muts株,以加强两个突变的共分离。用识别单独位点的限制酶消化转化体DNA,用其转化一个适合的大肠杆菌菌株。得到的产物通常有两个突变。与此相比,长引物(LP)USE是以PCR扩增开始,产生具有… 相似文献