生长发育过程中金黄仓鼠视皮层中Cholecystokinin(CCK)阳性神经元的变化及CCK睁眼效应观察

利用免疫组织化学方法对生后发育过程中金黄仓鼠视皮层中ＣＣＫ阳性神经元的出现时间和分布层次的变化进行了观察。利用多功能图象分析仪（ＭＰＶ）对生后不同年龄段动物视皮层阳性神经元的数量和胞体大小进行定量测定。ＣＣＫ阳性神经元在动物生后第７天开始出现,主要分布在第Ｖ,ＶＩ层;神经元的相对数量为３．９％,阳性胞体的平均面积为１９．９μｍ＾２生后第１２天动物开始睁眼时,其神经元的分布层次、胞体数量及胞体大小均     

金黄仓鼠视皮层、上丘和外侧膝状体中的血管活性肠肽(VIP)神经元及其纤维

用程序稍有不同的两种ＰＡＰ法对视觉通路中的三个重要区域视皮层、上６和外侧膝状体中的 血管活性肠肽（ＶＩＰ）进行了定位,．视皮层Ⅱ至Ⅵ层都有ＶＩＰ阳性神经元分布,内域性的阳性神经 纤维遍布整个视皮层。上丘中的ＶＩＰ阳性神经无数量较少,主要分布于上丘的咀部表层,视皮层和 上丘中的ＶＩＰ神经元均为非锥体型的多极和双极神经元。外侧膝状体中未发现有ＶＩＰ阳性神经元 胞体．只有弥散的阳性神经纤维。     

生后发育过程中金黄仓鼠视皮层中缩胆囊肽阳性神经元形态及分布

生后发育过程中金黄仓鼠视皮层中缩胆囊肽阳性神经元形态及分布ＴＨＥＭＯＲＰＨＯＬＯＧＹＡＮＤＤＩＳＴＲＩＢＵＴＩＯＮＯＦＣＨＯＬＥＣＹＳＴＯＫＩＮＩＮＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＮＥＵＲＯＮＳＩＮＴＨＥＶＩＳＵＡＬＣＯＲＴＥＸＯＦＧＯＬＤＥＮＨＡＭＳＴＥＲＤ...     

金黄地鼠视觉中枢发育过程中P物质神经元数量及分布的变化

本实验用免疫细胞化学技术观察了不同年龄金黄地鼠视皮层和上丘中P物质(SP)阳性神经元数量和分布的变化,同时观察了不同年龄金黄地鼠视皮层SP阳性神经元的形态和类型。结果表明,出生后10天小鼠视皮层SP阳性神经元为36％,Ⅱ—Ⅳ层密度最大,约占40％。上丘中SP阳性神经元约为37％。出生后20天,视皮层及上丘中SP阳性神经元分别减少到23％和16％。视皮层Ⅱ—Ⅳ层减少最明显,Ⅴ层和Ⅵ层变化不大。成年鼠视皮层及上丘中偶见SP神经元,但出现一些SP阳性纤维。出生10天及20天鼠视皮层中SP阳性神经元的形态及类型没有差别。     

视觉经验与皮层神经元感受野特征

视觉经验在高等动物视皮层神经元感受野特征形成的过程中起着重要作用。正常成年动物皮层细胞的感受野具有明显的方位选择性和双眼视差,而缺乏视觉经验的初生动物和在失视条件下成长的动物,其视皮层中方位选择性细胞数量很少,双眼细胞没有视差调谐。后天的视觉训练能够明显地影响和改变幼年动物视皮层感受野的大小、方位和视差调谐。视觉经验的作用在生后4～7周达到高峰,以后逐渐减弱,对成年动物影响不明显。     

S100蛋白在猫初级视皮层中分布及其年龄相关性变化

比较青年猫和老年猫初级视皮层(primary visual cortex)各层神经元密度,及S100蛋白在初级视皮层各层中的表达与分布,探讨其表达与分布的年龄相关性变化及意义.Nissl法显示初级视皮层各层神经元,免疫组织化学方法(SABC法)示S100蛋白免疫阳性(S100-IR)细胞.光镜下观察、拍照,计数初级视皮层各层中神经元密度和S100-IR细胞密度.S100-IR细胞在初级视皮层中分布呈现区域性特点,白质较灰质密集.与青年猫相比,老年猫初级视皮层神经元密度有下降,老年猫初级视皮层各层S100-IR细胞密度均有不同程度的显著增加(尤其是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层),胞体较大,阳性较强.动物衰老过程中,初级视皮层存在着明显的星形胶质细胞反应性增生,这种增生可能对灰质层中神经元的丢失有补偿作用,并对维持老年个体初级视皮层形态结构和延缓老年动物初级视皮层功能衰退具有积极意义.     

金黄地鼠视皮层中乙酰胆碱(Ach)阳性神经元及纤维

本文通过色疫组织化学方法-PAP法,使用乙酰胆碱(Ach)抗体对金黄地鼠视皮层中的Ach进行定位Ach阳性神经元分布于视皮层的第Ⅱ—Ⅵ层,主要集中在Ⅱ、Ⅲ层.其细胞形态除大部分为非锥体神经元外,还发现有极少数锥体型神经元.这些神经元的数量和树突形态在视皮层17区和18区存在某些区域性差异.17区细胞比较密集,18区比较稀疏.17区第IA层细胞排列整齐,顶树突特别粗大,18区这种现象不太明显.皮层白质中也有少量的Ach阳性神经元.视皮层Ach阳性神经元的相对含量约为10%.视皮层中遍布外源性和内源性Ach阳性神经纤维,它们主要分布在第Ⅳ层.在视皮层微血管周围有大量Ach阳性神经元,说明对血管有舒张作用的Ach可能来源于血管内壁.     

金黄地鼠视皮层17、18区乙酰胆碱阳性神经元

利用乙酰胆碱( acetylcholine,Ach)自身抗体对金黄地鼠视皮层17、18区乙酰胆碱阳性神经元及其分布进行免疫学显示并进行量化分析.实验发现,Ach阳性细胞大部分为非锥体神经元,也有少量锥体神经元.Ach阳性神经元在视皮层的Ⅱ～Ⅵ层,主要分布在Ⅱ～Ⅳ层.在不同层次中其阳性神经元类型存在某些差异,Ⅱ～Ⅳ中双极细胞居多,其他层次中多极细胞占优势.17区的这类神经元数量较多且集中成垂直于皮层表面的细胞带,18区的神经元数量相对较少且多呈分散状态.     

幼年大鼠皮层听-视多感觉神经元和听-视信息整合

应用常规电生理学细胞外记录技术,研究了生后3周龄幼年大鼠皮层听-视双模态神经元及听-视信息整合特性,并与成年动物进行对照。在听皮层的背侧,听皮层和视皮层的交界处,即颞-顶-枕联合皮层区,共记录到了324个神经元,其中45个为听-视双模态神经元,占13.9%,远低于成年动物双模态神经元所占比例(42.8%)。这些双模态神经元可分为A-V型,v-A型和a-V型3种类型。根据它们对听-视信息的整合效应,可分为增强型、抑制型和调制型。整合效应与给予的声和光组合刺激的时间间隔有关,以获得整合效应的时间间隔范围为整合时间窗,幼年动物的平均整合时间窗为11.9 ms,远小于成年动物的整合时间窗(平均为23.2 ms)。结果提示,与单模态感觉神经元对模态特异性反应特性一样,皮层听-视双模态神经元生后有一个发育、成熟的过程。研究结果为深入研究中枢神经元多感觉整合机制提供了重要实验资料。     

新生大鼠下丘脑GnRH免疫反应性神经元的体外发育

应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术,研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元;１～３ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快,胞体和突起的平均生长速度分别为４５．５９μｍ２／ｄ和１９．３９μｍ／ｄ,染色加深;培养７ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体截面积、胞体染色强度和突起长度均达最高峰,分别为１７１．２１±４３．１７μｍ２,０．２８９±０．０３４,８７．０１±２２．３３μｍ;培养１４ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体大小和突起长度维持在７ｄ时的水平,但染色减弱。结果提示,培养第１周是ＧｎＲＨ神经元体外发育成熟的关键时期,其发育良好状态可维持到第２周末     

大鼠下丘脑薄片视上核神经元的细胞内生物电记录

从成年Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠用振动切片机制备含有视上核的下丘脑冠状薄片（５００μｍ厚）,并对视上核神经元（ｎ＝１７）进行常规细胞内生物电记录。测得静息电位－６０±８ｍＶ,膜输入电阻１７３±５８ＭΩ,时间常数１０．２±３．９ｍｓ,动作电位幅度６５±１２ｍＶ,阈电位－４４±７ｍＶ,由Ｉ─Ｖ曲线测得斜率电阻１５８±６２ＭΩ,大部分细胞还显示内向整流特性。在静息电位状态下,５７％细胞保持静息,４３％有自发锋电位发放。细胞的锋电位发放模式７８％为时相型,２２％为持续型。外源性去甲肾上腺素（ｎ＝７）或谷氨酸钠（ｎ＝５）可引起伴有膜电阻减小的去极化反应,并可导致锋电位的串发放。     

单眼剥夺对金黄地鼠视觉中枢GABA神经元分布的影响

用免疫细胞化学技术观察了单眼剥夺后金黄地鼠视觉中枢GABA神经元分布的变化。结果表明:单眼剥夺后,金黄地鼠视皮层和上丘的GABA阳性神经元暂时性增多,但剥夺后六个月,其数目显著减少。在单眼剥夺前和剥夺后侧膝体中GABA阳性神经元数目没有明显差异。剥夺眼对侧视皮层GABA阳性神经元数比剥夺眼同侧视皮层GABA神经元数目少。单眼剥夺后视觉中枢GABA神经元类型及形态与剥夺前没有差别。晚期单眼剥夺也能引起视觉中枢GABA神经元数量和分布的变化。以上结果表明,单眼剥夺后视觉中枢抑制神经元的结构发生了变化。     

脊髓和脊神经节原代分离培养中GABA能神经元的形态观察

选用１２－１４天胚胎小鼠（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）,取脊髓及脊神经节原代培养。观察神经元的发育并用ＧＡＢＡ抗血清、ＰＡＰ方法显示ＧＡＢＡ能神经元。脊髓神经元呈各种形态大小,随着培养的进行它们的起和胞体不断生长;脊神经细胞有不同大小,其体积在培养中保持恒定。随着神经元的逐渐成熟,它们的核质比不断增大。ＧＡＢＡ免疫细胞化学阳性脊髓神经元大小不等,可分为两类：１．突起和胞体阳性,核不着色而核仁着色;２．只在突     

肝硬变中丙型肝炎病毒C33c抗原及HBxAg的分布及意义

应用抗ＨＣＶＣ３３ｃ抗原２Ｂ６株单克隆抗体和抗ＨＢｘＡｇ多克隆抗体。以ＡＢＣ法对８６例肝硬变组织进行ＨＣＶ及ＨＢＶ相关抗原定位研究,ＨＣＶＣ３３ｃ抗原及ＨＢｘＡｇ在肝硬变中的阳性率分别为７６．７％及６２．８％,Ｃ３３ｃ抗原和ＨＢｘＡｇ阳性占所检病例８８．４％,二者同时阳性为５１．２％,ＨＣＶＣ３３ｃ抗原位于肝硬变组织的肝细胞胞桨内,充满整个胞桨,细胞核及胸膜未见阳性;阳性细胞呈弥温、局灶及散在分布     

木糖异构酶突变体的研究—纯化与性质

纯化了ＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒＤ－木糖异构酶的三个突变体,Ｔ８９Ｓ,Ｖ１３４Ｉ的比尖（Ｕ／ｍｇ）分别为３．４２和６．１８,Ｗ１３６Ｅ没有生。Ｔ８９Ｓ和Ｖ１３４Ｉ的活性需要二价阳离子,对于Ｔ８９Ｓ,Ｍｇ＾２＾＋的作用强于Ｃｏ＾２＾＋。在以木糖为底物时,Ｔ８９Ｓ的Ｋｍ值为４９．８ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｖ１３４Ｉ的Ｋｍ值为９．８ｍｍｏｌ／Ｌ,在以果糖为底物时,木糖醇对Ｔ８９Ｓ是竞争性抑制剂,山梨糖醇对Ｔ８９Ｓ和     

针刺对部分背根切断后猫脊髓Ⅱ板层SP、CCK、L－ENK和5－HT神经纤维可塑性的影响──免疫组化定量分析

本研究用免疫组化结合图像分析观测了针刺对切除一侧Ｌ１－Ｓ２背根（保留Ｌ６背根）猫脊髓Ｌ５Ⅱ板层内含Ｐ物质（ＳＰ）、胆囊收缩素（ＣＣＫ）,亮氨酸脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）神经纤维可塑性的影响。结果如下：非针刺组手术侧Ⅱ板层ＳＰ和ＣＣＫ阳性面积分别为非手术侧的７７％和４６％,而针刺组手术侧ＳＰ已恢复到非手术侧水平,ＣＣＫ为非手术侧的６６％,均比非针刺组明显增加。术后３０天再切断Ｌ６备用根后两组动物手术侧ＳＰ和ＣＣＫ阳性面积显著下降,表明针刺促进备用根中ＳＰ和ＣＣＫ神经纤维发生可塑变化;手术切断背根上Ｌ－ＥＮＫ阳性面积无影响,而针刺后有所增加,表明针刺能影响中间神经元的Ｌ－ＥＮＫ神经纤维发生可塑性变化;背根切断后下行投射的５－ＨＴ阳性面积明显增加,而针刺无进一步促进作用。     

成年大鼠体感皮层局限损伤引起的代表区重组

本文目的是探讨在成年大鼠初级体感皮层（ＳＩ）内进行局限损毁能否引起损毁区周围的代表区重组。在氯胺酮麻醉下用微电极技术测定隐神经代表区（ＳＡＲ）和坐骨神经代表区（ＳＣＲ）,然后用铂电极对ＳＡＲ进行选择性电解损毁。三至四周后进行重复测定。结果表明,在１４例所观察的大鼠中,９例在原损毁区以外发现新生的ＳＡＲ,其面积为０．２０±０．０８ｍｍ２。这表明成年大鼠ＳＩ神经元在中枢损伤后具有一定的重组能力。     

尖锐湿疣患者皮损中白介素2基因表达的研究

为探讨Ｔｈ１ 反应如白介素２ （ＩＬ－２） 产生在尖锐湿疣（ＣＡ） 发病及消退中的作用。本实验采用逆转录——聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 技术检测了ＣＡ患者皮损组织ＩＬ－２ 的基因表达, 实验分为三组： 正常对照组（ｎ＝ １０）, 单纯病例组（ｎ＝ １８） 及γ－ 干扰素（ＩＦＮ－γ） 诱导组（ｎ＝ ６）。结果发现正常皮肤组织未检测到ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ, 在１８ 例单纯病例的ＣＡ患者有２ 例皮损ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ阳性, ６ 例ＣＡ患者注射ＩＦＮ－γ前局部皮损未检测到ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ, 而在皮损内注射ＩＦＮ－γ７２ 小时后有４ 例阳性。研究结果提示了ＩＦＮ－γ可诱导Ｔｈ１ 应答, Ｔｈ１ 应答在抵抗人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ） 感染及清除ＨＰＶ中可能起着重要作用, 为临床应用ＩＬ－２ 及ＩＦＮ－γ治疗ＣＡ提供了理论依据。     

谷氨酸单钠透过胎盘屏障对仔鼠特定脑区的结构和功能的影响

３－Ｇｌｕ示踪实验表明,谷氨酸可以透过胎盘屏障进入胎鼠体内,较均一地分布于中枢神经系统及内脏各器官。给母鼠隔日注射高、低剂量的谷氨酸单钠（ＭＳＧ,２．５ｍｓ／ｇ,１．０ｍｇ／ｇ）至分娩,对成年后的仔鼠进行检测发现,高剂量组仔鼠记忆能力及Ｙ－迷宫空间分辨学习能力均严重受损,下丘脑弓状核及腹内侧核神经元被明显破坏,出现胞质肿胀、核固缩、神经元数目减少。孕期ＭＳＧ处理还可以使仔鼠下丘脑和海马３Ｈ－Ｇｌｕ受体－配体结合量显著变化。采用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子检测系统观察单个神经元内游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化时还发现,ＭＳＧ可以通过诱发胞外Ｃａ２＋内流及胞内钙库释放Ｃａ２＋来增高［Ｃａ２＋］ｉ。以上结果提示：ＭＳＧ对仔鼠的剂量依赖性神经毒性作用可能与其过度激活膜谷氨酸受体,引起细胞内Ｃａ２＋超载,最终导致特定脑区的神经元发生溃变甚至死亡有关,而这些变化可能正是仔鼠成年后学习记忆受损的原因。     

大鼠内侧隔核、斜角带中NOS与ChAT、NGF-R、AChE的共存神经元

用酶组织化学和免疫组织化学双标技术,观察了正常ＳＤ大鼠基底前脑内侧隔核（ＭＳ）、斜角带垂直支（ＶＤＢ）和水平支（ＨＤＢ）中ＮＯＳ阳性神经元的形态和分布及ＮＯＳ与胆碱能神经元标志物ＣｈＡＴ、ＮＧＦ受体（ＮＧＦ－Ｒ）和ＡＣｈＥ之间的共存关系。结果发现,ＭＳ、ＶＤＢ和ＨＤＢ的头端ＮＯＳ阳性神经元较多、胞体较大、突起多,尾端ＮＯＳ阳性神经元数目较少、胞体较小、突起少而短。ＮＯＳ＋ＣｈＡＴ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９０％,占ＣｈＡＴ阳性神经元总数的３９％;ＮＯＳ＋ＮＧＦ－Ｒ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的８３％,占ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元总数的４０％;ＮＯＳ＋ＡＣｈＥ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９６％,占ＡＣｈＥ阳性神经元总数的３９％。这些结果为研究Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ病理过程中基底前脑隔区胆碱能神经元退变与ＮＯ的关系提供了形态学依据。