广东两株人免疫缺陷病毒的分离和鉴定

从我省两名经性途径感染艾滋病的病人中采血,分离外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）,将其与正常人ＰＢＭＣｓ共培养分离人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）,３周后检测上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）超过阈值。将共培养第四周细胞和上清分别感染Ｈ９细胞（Ｔ细胞淋巴瘤传代细胞）,一周后检测ＨＩＶ－１ ｐ２４怕,证明有病毒生长。用ＨＩＶ－１ ＥＮＶ基因引物的套式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）证实,两株新分离的病毒     

同时表达蓝舌病毒四个主要结构蛋白可装配成病毒样颗粒

为研制蓝舌病毒（ｂｌｕｅｔｏｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ,ＢＴＶ）基因工程疫苗和进一步研究ＢＴＶ结构与功能的关系,对ＢＴＶ病毒样颗粒（ＶＬＰ）的装配进行了研究。同时在昆虫细胞中表达ＢＴＶ主要结构蛋白ＶＰ７、ＶＰ３、ＶＰ２与ＶＰ５,将细胞裂解液超速离心纯化后,发现主要存在两 形态的颗粒：一种与前文报道的病毒核心颗粒（ＣＬＰ）相同,直径约为６０ｎｍ￣７０ｎｍ,蛋白壳厚１０ｎｍ￣１５ｎｍ;另一种大小为７０ｎｍ￣     

我国首次发现的HIV—1和HIV—2双重感染样品中病毒部分基因的序列特 …

上海市卫生检疫局送检了一例ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２抗体检测均呈阳性的双重感染样品,对其感染的ＨＩＶ前病毒的ｇａｇ和ｅｎｖ基因区进行了序列分析,首次阐明我国发现的ＨＩＶ双重感染样品的ＨＩＶ部分基因特征。从ＨＩＶ感染者淋巴细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ,ＰＢＭＣ）中提取前病毒ＤＮＡ,分别使用ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２特异性引特用套式ＰＣＲ扩增ＨＩＶ－１和ＨＩＶ－２     

人I型免疫缺陷病毒gag—env嵌合基因在重组痘苗中的表达

Ｇａｇ和Ｅｎｖ蛋白是人Ｉ型免疫缺陷病毒（Ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｔｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １,ＨＩＶ－１）的结构蛋白,是ＨＩＶ－１诱导机体产生体液免疫和细胞免疫的主要抗原。本实验通过多交亚克隆,将ｅｎｖ基因以正确的三联密码读框插入ｇａｇ基因的下游制备了ＨＩＶ－１ ｇａｇ－ｅｎｖ嵌合基因,并将嵌合基因分别置于痘苗病毒ｐ７．５启动子和牛痘病毒Ａ型包涵体（ＡＴＩ）启动子的下游,经过同源     

犬瘟热病毒细胞膜受体的鉴定

犬瘟热病毒（ＣＤＶ）敏感细胞Ｖｅｒｏ用ＳＤＳ或ＲＩＰＡ溶解缓冲液溶解,利用病毒铺覆蛋白印迹技术（ＶＯＰＢＡ）鉴定犬瘟热病毒疫苗株（ＣＤＶ－ｏｎｄｅｓｔｅｐｏｏｒｔ）的细胞受体。结果发现,在Ｖｅｒｏ细胞上有两组ＣＤＶ结合蛋白质,即高分子量组蛋白质（１２７ｋＤ、１２０ｋＤ、１１０ｋＤ）与低分子量组蛋白质（２７ｋＤ和３０ｋＤ）。这些ＣＤＶ结合蛋白组分的性质及在ＣＤＶ致病中的作用有等进一步研究。     

树Ju免疫细胞体外感染Ⅰ型人免疫缺陷病毒的实验研究

至今可以感染Ⅰ型人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）的动物只有黑猩猩和长臂猿,这严重阻碍了ＨＩＶ－１的疫苗研究和治疗研究。因此,寻找新的可以感染ＨＩＶ－１的动物模型成为十分迫切的课题。已知树Ｊu对许多重要的医学病毒易感,为了探讨树Ｊu是否可以感染ＨＩＶ－１,利用不同辅助受体的５种ＨＩＶ－１病毒株。体外感染云南野生成年树Ju的淋巴细胞和单核／巨噬细胞;同时还用这些病毒感染人外周血淋巴细胞或单核细胞。然后用ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ和流式细胞术分别进行了检测,用ＲＴ－ＰＣＲ方法未检测到感染上清中有病毒粒子的存在,用ＰＣＲ法未能发现树Ｊu的这些免疫细胞中有前病毒ＤＮＡ,用流式细胞术也未能在这些感染ＨＩＶ－１的树Ｊu细胞的表面检测到特异抗原;而感染ＨＩＶ－１的人免疫细胞均为阳性结果。实验结果表明树Ju的这些免疫细胞在体外未能感染上ＨＩＶ－１,可能的原因是树Ｊu的这些免疫细胞的ＨＩＶ－１受体（ＣＤ４）和辅助受体（ＣＣＲ５或ＣＸＣＲ４）与人的免疫细胞胞差别较大。     

AIDS疫苗在录长类动物模型中的发展

ＡＩＤＳ病是ＨＩＶ感染引起的一种世界性的严重病毒病。发展一个安全、高效的疫苗将是最终控制ＨＩＶ蔓延的方法。目前对ＡＩＤＳ疫苗的研究主要集中在全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒疫苗、亚单位疫苗和多肽疫苗、减毒活疫苗、活载体疫苗和核酸疫苗等。在检验新型ＡＩＤＳ疫苗策略方面,非人灵长类动物模型能较好地反映ＨＩＶ感染人体过程,有很重要的价值。现在主要有三种非人类模型：ＨＩＶ－１感染的大猩猩、ＨＩＶ－２感染的恒河猴;ＳＩＶ感染的恒河猴及ＳＨＩＶ感染的恒河猴。本文就ＡＩＤＳ疫苗在灵长类动物模型中的最新发展作一综述。     

从一名国内感染的艾滋病人分离人免疫缺陷病毒（HIV）

从一名国内感染的艾滋病人采血,分离其外周血单核细胞（ＰＭＣｓ）。首先与正常的ＰＭＣｓ共培养,４周后检测其ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ）达到峰值。用此时的细胞及其上清分别感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ、ＣＥＭ、ＭＴ４细胞,可很快地在这三株细胞中检测到ＨＩＶ生长,ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中生长情况最好,同时用病人血清直接感染Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ和ＭＴ４细胞,４周后检测其细胞上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）为阳性,但ＯＤ值很低（约为ＰＭＣ共培养组的一半）。用病人的少量全血与正常ＰＭＣｓ共培养,得到的结果与分离病人ＰＭＣｓ法相近。应用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）、免疫酶法（ＩＥＡ）、蛋白印迹法及ＨＩＶ－１ＰＯｌ基因和Ｅｎｖ基因特异引物的聚合酶链反应（ＰＣＲ）等证实为ＨＩＶ－１病毒。分离的ＨＩＶ在Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞中连续传代,细胞被感染后２－３天即出现以大量融合细胞为主的细胞病变,感染后７－１０天细胞几乎全部死亡。病毒在连续传代过程中的生长特征及致细胞病变特征不变。此病毒命名为ＣＡ－２毒株。     

猪瘟病毒弱毒株感染对体外培养细胞增殖的促进作用*

猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）能在多种体外培养细胞中增殖,却不使细胞产生病变（ＣＰＥ）。使用原代细胞增殖ＣＳＦＶ弱毒疫苗。结果显示：病毒的增殖能够增加原代牛睾丸细胞的传代次数和维持时间。因此,ＣＳＦＶ疫苗一产上能够在接毒后多次收获病毒。此外,ＣＳＦＶ弱毒株还能够刺激体外培养的兔巨噬细胞增殖,使形成致密的单细胞层。使用传代细胞ＰＫ１５样殖病毒,经流式细胞术检测发现ＣＳＦＶ弱毒的增殖不仅不改变ＰＫ１５细胞的增殖     

中国HIV-1 B亚型P55和嵌合的P55-V3病毒样颗粒候选疫苗免疫效果的研究

研究我国艾滋病病毒Ⅰ型（ＨＩＶ－１）病毒样颗粒（ＶＬＰ）候选疫苗的免疫原性,为疫苗进行灵长类实验提供实验依据。将ｇａｇ和ｇａｇ－Ｖ３ ＶＬＰ不同剂量（５０μｇ、１０μｇ、１μｇ）在有佐剂（氢氧化铝）和无佐剂条件下皮下免疫小鼠,然后眼眶采血,用ＥＬＩＳＡ法观察免疫鼠血清中抗体与剂量关系,以及中和抗体滴度和抗体ＩｇＧ亚型ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ的水平。同时取鼠脾淋巴细胞,体外抗原刺激后收取淋巴细胞分泌上清     

HIV感染的辅助因子CC-CKR-5

ＨＩＶ感染的辅助因子ＣＣ┐ＣＫＲ┐５早在１９８６年，ＭａｄｄｏｎＰ．等即证明，细胞上的ＣＤ４分子不能独立地介导人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）进入免疫细胞，表达人类ＣＤ４分子的小鼠基因工程细胞不被ＨＩＶ感染。此后１０年间，许多研究人员致力于寻找ＨＩＶ感染细...     

脂质体——一种理想的抗HIV药物载体

脂质体——一种理想的抗ＨＩＶ药物载体戎隆富秦德安（华东师范大学生物系,上海２０００６２）关键词脂质体抗ＨＩＶ药物针对ＡＩＤＳ的致病病毒ＨＩＶ（Ⅰ型和Ⅱ型）复制周期中的不同阶段,已研制出多类抗ＨＩＶ药物,如：阻断ＨＩＶ与靶细胞（ＣＤ＋４Ｔ细胞、神经胶质...     

在昆虫细胞中同时表达蓝舌病毒VP3与VP7蛋白可装配成核心样颗粒

将蓝舌病毒（ＢＴＶ）１３型Ｓ７与Ｌ３基因同时插入杆状病毒双表达载体ｐＥａｓｔＢａｃＤｕａｌ,获得重组杆状病毒ｒｖＢａｃＢＴＶＰ３７。该病毒在昆虫细胞中同时高水平表达ＢＴＶ１３ ＶＰ３与ＶＰ７蛋白,可以高效自动装配出２０面体的６０￣７０ｎｍ空心颗粒。分析表明,所获颗粒为空心的ＢＴＶ核心样颗粒（ＣＬＰ）,其成分为ＶＰ３与ＶＰ７,不含ＢＴＶ其它任何蛋白与核酸。这种装配需要ＶＰ３与ＶＰ７的共同参与,二者缺     

用PCR方法证实HIV—1感染性病毒颗粒携带有前病毒DNA

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）为检测手段，证明了成熟的人免疫缺陷病毒Ⅰ型（ＨＩＶ－１）可携带前病毒ＤＮＡ。用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）代替细胞裂解液，结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异ＤＮＡ。完整的病毒颗粒对ＤＮＡ酶不敏感，而只有在病毒裂解以后才能对ＤＮＡ酶敏感。当靶细胞膜上的ＣＤ４受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时，ＤＮＡ也不能被检测到，而且     

人免疫缺陷病毒1型Rev单链抗体细胞内免疫抗病毒基因治疗研究

应用抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗体细胞内免疫方法,研究在人Ｔ细胞和周围血淋巴单核细胞内抗病毒复制的效果,探讨细胞内免疫抗ＨＩＶ－１基因治疗的可行性。克隆抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗抗体（ｓＦｖ）基因,以逆转录病毒为基因载体,将名装后的含靶基因的逆转录病毒转导至人ＣＤ４阳性Ｔ－细胞株ＣＥＭ和ＳｕｐＴ１,以及ＨＩＶ－１阴性自愿者的周围血淋巴单核细胞（ＰＢＭＣ）,再分别用不同剂量（ＭＯＩ）的ＨＩＶ－１病毒株ＰＮ     

人类免疫缺陷病毒辅助受体的研究进展

人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）进入靶细胞需要ＣＤ４受体及辅助受体的参与,不同的ＨＩＶ株进入靶细胞需不同的辅助受体,亲Ｔ细胞ＨＩＶ株进入靶细胞需融合因子辅助,而亲巨噬细胞ＨＩＶ株进入靶细胞则需另一种辅助受体ＣＣ－ＣＫＲ－５辅助受体的发现,为研究ＨＩＶ的致病机制及艾滋病的治疗提供新的方向。     

CD28共刺激可促HIV阳性患者CD_4~ T细胞增殖

ＣＤ２８共刺激可促ＨＩＶ阳性患者ＣＤ＋４Ｔ细胞增殖ＣＤ＋４Ｔ细胞是人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染的主要细胞。由于在体外难以诱导ＨＩＶ感染者的自体ＣＤ＋４Ｔ细胞增殖,因此限制了许多疗法如基因治疗、免疫重建疗法的应用。已知在Ｔ细胞活化中,Ｔ细胞受体（ＴＣＲ...     

人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）是公认的几种瘤病毒之一,与多种人类良、恶性肿瘤的发生密切相关。有效疫苗的研制,对控制ＨＰＶ感染和ＨＰＶ相关肿瘤的免疫治疗都有十分重要的意义。本文就近年来ＨＰＶ的肽疫苗、重组病毒（细菌）疫苗,病毒样颗粒（ＶＬＰ）疫苗以及ＤＮＡ疫苗的研究进展作一综述。     

人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白gp41核心结构的药物研究

人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）包膜糖蛋白ｇｐ４１在病毒膜和靶细胞膜的融合过程中发挥重要作用。本文叙述了Ｃ多肽抑制剂研究成果、ＨＩＶｇｐ４１核心结构的特征及作用于ｇｐ４１核心结构的抗ＨＩＶ药物研究的最新发展。可望在不久的将来,研制出针对ＨＩＶｇｐ４１核心结构的新的抗病毒药物用于治疗和预防ＨＩＶ－１感染和ＡＩＤＳ。     

用PCR方法证实HIV－1感染性病毒颗粒携带有前病毒DNA

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）为检测手段,证明了成熟的人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）可携带前病毒ＤＮＡ;用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）代替细胞裂解液,结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异ＤＮＡ．完整的病毒颗粒对ＤＮＡ酶不敏感,而只有在病毒裂解以后才能对ＤＮＡ酶敏感。当靶细胞膜上的ＣＤ＿４受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时,ＤＮＡ也不能被检测到,而且ＤＮＡ的数员和病毒滴度的高低相一致。这些证据都提示这种和病毒相关的ＤＮＡ存在于完整的有感染性的成熟病毒颗粒内部。