钙调素mRNA在受精前后分离的烟草胚囊中的定位

建立了一种新的ｍＲＮＡ原位杂交方法,适用于微量材料的整体观察。应用这一方法定位烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．ｃｖ．Ｗ３８）受精前后胚囊成员细胞中的钙调素ｍＲＮＡ（ＣａＭｍＲＮＡ）。结果显示成熟胚囊中的ＣａＭｍＲＮＡ主要分布于珠孔极的卵器和合点极的反足细胞;中央细胞中较少。受精前后胚囊中ＣａＭｍＲＮＡ的分布发生显著变化,特别是授粉后到受精前极核与卵器之间出现一条暂时的钙调素ｍＲＮＡ条带。受精前不久该带消失,ＣａＭｍＲＮＡ扩展为占据胚囊珠孔端的扇形区域。受精后胚囊中钙调素ｍＲＮＡ主要集中于伸长的合子和原胚的合点端。讨论了钙调素ｍＲＮＡ表达与受精的关系。     

烟草花粉母细胞减数分裂前期I肌动蛋白的免疫细胞化学定位

The Pollen Mother Cells of Nicotiana Rustica L. were studied using the techniques of immunofluorescence microscopy and protein A-colloidal gold IEM. Immunofluorescence microscopy indicates the presence of actin in both nuclei and cytoplasm. IEM observation shows that gold particles are present in cytoplasm, chromatin and cytomictic channels. These results indicate that actin has some relation with chromatin condensing at synizesis. Moreover, actin may also play an important role in cytomixis.     

水稻受精前后胚囊内钙调素分布的变化：免疫金电镜观察

用胶体金免疫电镜技术观察了水稻 (Oryzasativasubsp .japonica)受精前后胚囊内钙调素的分布变化。授粉后 ,卵细胞、助细胞和中央细胞内的钙调素较授粉前均有所增加。中央细胞内钙调素的增加要比卵细胞中约早 2h ,退化助细胞与宿存助细胞之间的钙调素含量无明显差异。授粉到受精期间 ,钙调素的主要分布形式由分散的单颗粒转变为聚集颗粒 ,受精完成后再变为分散的单颗粒形式。胚囊壁及珠心细胞的细胞壁和胞间隙中也观察到钙调素的分布和数量变化。初步讨论了胞内和胞外钙调素在水稻受精与合子形成中的作用。     

甘蓝型油菜授粉前后珠孔和胚囊中钙分布的超微细胞化学定位

用焦锑酸盐沉淀法对甘蓝型油菜（ＢｒａｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）授粉前后珠孔和胚囊中的钙进行了超微细胞化学定位。Ｘ射线能谱微区定性分析（ＥＤＸＡ）表明前法所得沉淀确系焦锑酸钙。同时利用图像处理系统对胚囊成员细胞中钙沉淀颗粒的体密度和大小进行了定量分析。结果显示,授粉前后内、外珠孔处钙沉淀明显较珠被其它部位为多,钙主要分布在细胞壁和胞间基质等质外体系统中。授粉前２个助细胞中均含有较其它细胞为多的钙沉淀,约为卵细胞的２５倍,中央细胞的１９倍;但沉淀颗粒的直径仅为它们的２／３左右。助细胞中含钙最多的部位是丝状器和细胞核。授粉后１对姊妹助细胞均明显退化,钙含量显著增高,约为授粉前的２４倍;钙颗粒明显减小,不足授粉前的１／３。讨论了钙的分布与助细胞的退化及其功能的关系。     

水稻受精前后胚囊内钙调素分布的变化:免疫金电镜观察

用胶体金免疫电镜技术观察了水稻(Oryza sativa subsp. japonica)受精前后胚囊内钙调素的分布变化.授粉后,卵细胞、助细胞和中央细胞内的钙调素较授粉前均有所增加.中央细胞内钙调素的增加要比卵细胞中约早2 h,退化助细胞与宿存助细胞之间的钙调素含量无明显差异.授粉到受精期间,钙调素的主要分布形式由分散的单颗粒转变为聚集颗粒,受精完成后再变为分散的单颗粒形式.胚囊壁及珠心细胞的细胞壁和胞间隙中也观察到钙调素的分布和数量变化.初步讨论了胞内和胞外钙调素在水稻受精与合子形成中的作用.     

植物激素的免疫细胞化学定位

本文介绍了植物激素免疫细胞化学定位研究中常用抗原与抗体的制备、激素小分子在植物细胞内的原位固定及其在激素生理研究中的应用。     

大肠癌细胞GST-Pi免疫细胞化学的超微结构定位

探讨GST－Pi在大肠癌细胞内亚微结构定位及其与大肠癌发生的关系。应用免疫电镜技术（免疫胶体金法）对6例大肠腺癌及3例正常大肠粘膜细胞进行GST－Pi的定位观察。6例大肠癌细胞内均出现GST－Pi胶体金阳性颗粒,主要分布于胞浆的线粒体、溶酶体、近胞膜部位的胞头中,也分布在核内和核膜上。金颗粒呈团状、点灶状分布,图象清晰。3例正常粘膜细胞内未见GST－Pi的金颗粒阳性表达,结果表明,GST－Pi在癌细胞内的特异性表达可作为大肠癌的诊断指标之一。     

大麦与白粉病菌互作中钙调素的细胞化学定位

对不同抗病性的大麦近等基因系受白粉病菌侵染诱导后的钙调素(CaM)变化进行了免疫细胞化学研究。结果表明,钙调素普遍存在于各种不同类型的细胞中,代谢活跃的细胞中CaM标记密度相对较高;CaM分布于细胞核、细胞壁、叶绿体等细胞器中,其中细胞核标记密度最高。在健康叶片中,感病品系Ingrid伴胞中CaM的标记密度明显高于抗病品系mlo—3,而其他细胞中CaM标记密度没有明显差别。病原菌接种后,各种细胞的CaM标记密度均呈现一定程度的上升,但Ingrid上升幅度相对较大。在叶肉细胞中,mlo-3细胞核中CaM增加最明显。并对叶肉细胞和伴胞中CaM的变化进行了讨论。     

采用GUS标记技术研究钙调素在转基因烟草中的分布

为了监测钙调素 (Ca M)在植物细胞内的分布并探索其生物学功能 ,将水稻 Ca M和 GU S融合基因 (cam.gus)分别置于 35 S启动子和花粉特异启动子 L AT5 2 - 7控制下 ,构建出载体 p MD/ Ca M.GU S和 p BI/ L AT.Ca M.GU S,转化烟草 (N icotiana tobacum cv.SR ) ,GU S染色结果显示 ,Ca M.GU S融合蛋白广泛分布于植物根、茎、叶等组织 ,根尖生长点细胞、根毛细胞、表皮毛细胞、气孔保卫细胞、维管束细胞的细胞质中融合蛋白含量较多。花粉粒中也分布着 Ca M,并在萌发沟处表现出较高的浓度。保卫细胞和表皮毛细胞中 Ca M分布在相邻细胞连接处细胞模内侧 ,呈现出极性分布。研究结果表明 ,细胞内 Ca M的不均匀分布可能与细胞功能相关。     

水稻雌蕊与胚囊中钙的超微细胞化学定位

用焦锑酸盐沉淀法对水稻（OryzasativaL．）授粉前后雌蕊和胚囊中的钙进行了超微细胞化学定位。结果表明,柱头乳突细胞表面和花柱薄壁细胞中均含钙沉淀;开花前1d,整个胚囊中含钙较少,两个助细胞中钙分布无差异;临近开花时,1个助细胞已退化,其钙含量明显增加;开花后6h,胚囊已受精,退化助细胞中钙含量进一步增加;受精前卵细胞中钙主要分布在液泡中,核和胞质中较少;受精后,其钙含量明显增加,主要分布于核中。重点讨论了钙与助细胞退化和卵细胞激活的关系。     

外源钙调素和钙调素拮抗剂对烟草离体花粉管生长和生殖核分裂的调节

外源花椰菜钙调素（CaM）、牛脑CaMagarose以及CaM拮抗剂TFP对花粉管生长与生殖核分裂的作用均具有浓度和时间效应,CaM在花粉管生长早期,较低浓度能促进花粉管生长和生殖核分裂;但后期,较高浓度则有抑制作用。ITP在花粉管生长早0000000000000期,较高浓度抑制花粉管生长和生殖核分裂。     

草鱼GH单克隆抗体对9种硬骨鱼的免疫细胞化学定位

研究结果表明：１）鳜和鲇的胰岛中有大量的ＧＨ免疫活性内分泌细胞存在;８种有胃硬骨鱼的消化道中均未见到阳性特异性反应。２）草鱼的中腺,前腺垂体中均发现有ＧＨ和Ｓｏｍ两种免疫活性肉发泌细胞存在。     

毛竹茎细胞壁半纤维素多糖的免疫细胞化学定位研究

本文以毛竹（Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ）为材料,采用免疫细胞化学标记方法对两种细胞壁半纤维素多糖成分,即木聚糖（Ｘｙｌａｎ）和（１－３）（１－４）－β－葡聚糖「（１－３）（１－４）－β－ｇｌｕｃａｎ」在毛竹茎中的分布进行了观察。结果表明,应用免疫细胞化学方法可以准确、有效地观察这两种半纤维素多糖成分在细胞壁中的分析;木聚糖分布在已木质化的组织细胞的细胞壁中,与细胞壁木质化有密切     

玉米根尖细胞内钙调素的胶体金免疫电镜定位

钙调素(Calmodulin,简称CaM)抗体是研究CaM的特异性生物探针,常被用来研究CaM的定量和分布.CaM分布的研究不仅对揭示细胞内CaM的作用位点有重要意义,而且还可深入探讨CaM的功能.     

烟草培养细胞中钙离子,钙调素与细胞质流的关系

烟草愈伤组织的培养细胞中,当钙离子载体将Ca~(2 )导入细胞时,细胞质流停止.CaM拮抗剂试验表明,高钙使细胞质流停止的效应可能与CaM无关,除W7外的多种CaM拮抗剂都明显而且可逆地抑制细胞质流。酶联免疫吸附分析(ELISA)检出培养细胞中存在有CaM。间接酶标免疫组织化学分析进一步证明CaM存在于胞质条纹中。     

钙调素激酶在玉米体内的免疫组织化学定位

应用免疫组织化学定位方法研究了玉米体内钙调素激酶(CaM kinase,CaMK)的表达模式。结果表明CaMK广泛分布于玉米体内,但表达水平存在着明显时空差异。在营养器官中钙调素激酶主要分布于叶的维管束鞘细胞、侧根原基和根尖等部位,而其它部位没有检测到明显的分布。在生殖器官中,有大量钙调素激酶分布于幼胚及花药小孢子母细胞、四分体及绒毡层细胞中;在成熟胚囊的卵细胞、中央细胞以及二者的分界面上也有少量分布。这些结果为进一步探索钙调素激酶在植物体内的生理功能提供了重要线索。     

烟草杆化学组成的研究

对烟划杆化学组成进行了初步分析,并对烟杆综纤维素的糖基比进行了气相色谱分析,结果表明烟草杆是一种有利用价值的纤维资源。