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水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮类活性成分合成 总被引:10,自引:0,他引:10
在MS培养基上进行水母雪莲(SausureamedusaMaxim.)细胞悬浮培养,研究了摇床转速、接种量、培养液初始pH、碳源等的影响。结果表明,摇床转速为90~120r/min,接种量为50~80gFW/L,培养液初始pH5.5~6.0,对水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮合成最有利。碳源以蔗糖最适合,蔗糖浓度则以40g/L较好,此时细胞生长量为18~19gDW/L,总黄酮合成量可达1423.25mg/L。用HPLC检测显示4′,5,7三羟基3′,6二甲氧基黄酮(jaceosidin)和4′,5,7三羟基6甲氧基黄酮(hispidulin)的含量分别达到总黄酮含量的22.11%和0.15%。 相似文献
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青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
试验以青扦(Piceawilsoni)的胚性愈伤组织为材料,以改良59基本成分附加24-D1mg/L及KT1mg/L为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明:液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为268%,是半固体培养的124倍;体细胞胚的分化率为93%,是半固体培养的22倍;悬浮培养较佳的培养条件为:初始细胞密度为2%(鲜重),蔗糖浓度为20g/L,摇床转速为100r/min,pH为58。经过两个月悬浮培养,将培养物转至1/2改良59附加ABA1mg/L的分化培养基上,3个月后每g培养物上可获得285个正常的子叶期体细胞胚。 相似文献
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碳源和氮源对水母雪莲悬浮培养细胞生长和黄酮合成的影响 总被引:10,自引:0,他引:10
在MS培养基上进行水母雪莲(Saussurea medusa Maxim)细胞悬浮培养时研究了碳源和氮源的影响。结果表明碳源以蔗糖最适合,蔗糖浓度则以40g/L较好,细胞生长量干重为18.12g/L,总黄酮合成量达到1423.25mg/L。在培养过程中,水母雪莲细胞能够快速将蔗糖水解为葡萄糖和果糖,并首先利用葡萄糖。氮源总浓度(包括NH+4和NO-3)为60~120mmol/L,NH+4/NO-3比例为20/40有利于雪莲细胞生长和黄酮合成。用HPLC检测显示4′,5,7-三羟基3′,6-二甲氧基黄酮(Jaceosidin)和4′,5,7-三羟基-6-甲氧基黄酮(Hispidulin)2种黄酮的含量分别达到细胞干重的1.46%和0.010% 相似文献
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光照对悬浮培养的玫瑰茄细胞生物量无影响。随着光照强度增大,玫瑰茄细胞合成花青素的量增加,光照强度31.0w/m^2为饱和光照强度,超过该强度,玫瑰茄细胞合成花青素的量不再进一步增加;可见光中蓝光(420 ̄530nm)是促进玫瑰茄细胞合成花青素最有效单色光,光强为30.0w/m^2,接种量为0.2g湿细胞的50ml培养液经16d培养,花青素产量为8.97mg/50ml,高出相同光照强度全色光下的6. 相似文献
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三尖杉培养细胞中抗癌活性成分的研究 总被引:14,自引:0,他引:14
从三尖杉(CephalotaxusfortuneiHook.f.)茎和叶片作外植体在MS附加KT 0.1 m g/L、NAA 3 m g/L培养基上诱导出的愈伤组织,建立了三尖杉悬浮培养细胞系,研究了光、pH 值、激素、碳源和添加物等因子对悬浮细胞生长的影响。结果表明: pH 5.8 及低浓度的糖和NAA适于细胞生长,糖含量超过40 g/L则不利于细胞生长,NAA 大于3 m g/L抑制细胞生长。蔗糖或葡萄糖作碳源,二者无明显区别。添加水解蛋白或氨基酸不适合细胞生长。白光对细胞生长有明显的抑制作用。建立了灵敏、快速高效液相色谱测定方法,测得离体培养细胞含有三尖杉碱及抗癌酯类生物碱:三尖杉酯碱、异三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱。细胞悬浮培养中合成生物碱的能力明显高于固体培养,前者有效生物碱的含量和细胞增长速率均比后者高1 倍以上。悬浮培养细胞中各生物碱组分比率为:22% 三尖杉碱,6% 氧桥三尖杉碱,8% 三尖杉酯碱,23% 高三尖杉酯碱,41% 异三尖杉酯碱。用气相色谱-质谱联用技术,除测得上述生物碱外,还检测到细胞培养物中含有去氧三尖杉酯碱、麦角甾醇、豆甾醇和谷甾醇等化合物 相似文献
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对聚β-羟基丁酸(PHB)产生菌Z5-GⅡ的发酵培养基及发酵条件进行优化研究;结果表明:该菌株在蔗糖1%,酵母粉0.3%,酵母浸汁0.3%,K2HPO40.2%;pH7.2 ̄7.4的优化发酵培养基中,接种量8%,种28h,发酵培养36h,细胞干重为6.87g/L,PHB产率可达的细胞干重的61.86%。该菌株还可利用葡萄糖生产废液为碳源生产PHB,具有实现工业化生产的潜力。 相似文献
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中麻黄悬浮培养体系的建立 总被引:5,自引:1,他引:4
本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加2mg/L2,4-D和0.5mg/L 6 BA的MS培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于MS+0.5mg/L2,4-D+0.2mg/L6BA+0.2mg/L NAA+4%蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加0.2mg/L2,4-D+0.1mg/L6BA+0.1mg/LNAA+2%蔗糖的MS液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由2-30个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为0.35g·fw/20ml·d,细胞有丝分裂指数为11.2%。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,1g/10ml接种密度可使分裂指数提高至21.2%。 相似文献
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培养基初始pH值对木聚糖酶合成的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
本文探讨了培养基三种初始pH值对木聚糖酶合成的影响。试验结果表明,培养基初始pH值对木聚糖酶的合成有重大影响,低pH有利于提高木聚糖酶活力。在碳源为7g/L条件下,初始pH值为4.0时合成的木聚糖酶活力高达32.87IU/ml,酶产率和得率分别为6574.0IU/L·d和4695.7IU/g木聚糖。酶活力和酶产率是初始PH5.0的1.7倍,分别是初始PH6.0的3.8倍和2.3倍。进一步研究表明, 相似文献
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搅拌式生物反应器悬浮培养水母雪莲细胞的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
应用 2L通气搅拌式生物反应器一步批式培养水母雪莲细胞。采用倾斜式搅拌桨代替透平桨 ,研究了搅拌转速、通气量和接种量对细胞生长和黄酮合成的影响 ,发现在 75r min、70 0~1000L min和 4.0~ 5.0gDCW L接种量下细胞生长和黄酮合成比较好。经过 12d培养细胞干重达 13.8gDCW L ,黄酮产量 416mg L ,黄酮含量占细胞干重的 30%。水母雪莲细胞生长及黄酮合成的进程表明 ,黄酮积累与细胞生长呈正相关。对细胞聚集体分布的研究发现 ,流变压力使细胞聚集体分裂 ,使反应器中细胞生长受到影响 ,黄酮产量较摇瓶中降低 相似文献
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水母雪莲(Saussurea meduasaMaxim)是典型的高山雪线植物。本文研究了其愈伤组织及悬浮细胞的培养过程,并对其抗寒性做了初步研究。 研究结果表明,水母雪莲愈伤组织和悬浮培养细胞分别可抵抗-6.5 ℃、-7.5 ℃的冰冻低温胁迫。水母雪莲愈伤组织细胞内丰富的蛋白质和淀粉粒多糖构成其较强抗冻能力的物质基础。低温锻炼后,悬浮细胞分泌蛋白中有新的多肽(76,48,27.5,19.5 kD)合成,而33,51 kD两条多肽合成增强。悬浮细胞抗冻能力的提高同蛋白质合成的增强是一致的。 相似文献
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为了提高樟叶越桔(Vacciniumdunalianum)悬浮培养细胞的生物量,以樟叶越桔叶片愈伤组织为试材,通过单因素试验探究不同蔗糖浓度、培养基pH值、培养基体积、初始接种量和摇床转速对悬浮培养细胞生长的影响,并根据响应面法Box-Behnken试验设计原理进行组合试验以优化培养条件。结果显示,以改良WPM培养基为基础培养基,樟叶越桔细胞悬浮培养的最优条件为40 g·L–1蔗糖、培养基pH5.2、培养基体积45 mL、初始接种量2.64 g和摇床转速为149 r·min–1,其细胞生物量干重为0.184 4 g,与理论预测值0.184 5 g较为接近,且细胞的生长曲线呈S型。研究结果为樟叶越桔悬浮培养细胞次生代谢产物的生产调控奠定了技术基础。 相似文献
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水母雪莲愈伤组织和悬浮培养细胞的抗冻性研究 总被引:12,自引:0,他引:12
水母雪莲(Saussurea meduasa Maxim)是典型的高山雪线植物。本文研究了其愈伤组织及悬浮细胞的培养过程,并对其抗寒性做了初步研究,研究结果表明,水母雪莲愈伤组织和悬浮培养细胞分别可抵抗-6.5℃、-7.5℃的冰冻低温胁迫,水母雪莲愈伤组织细胞内丰富的蛋白质和淀粉粒多糖构成其较强抗冻能力的物质基础,低温锻炼后,悬浮细胞分泌蛋白中有新的多肽(76,48,27.5,19.5kD)合成,而33,51kD两条多肽合成增强,悬浮细胞抗冻能力的提高同蛋白质合成的增强是一致的。 相似文献
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云南红豆杉细胞的悬浮培养 总被引:41,自引:0,他引:41
在云南经豆杉细胞悬浮培养中,适宜的增减基为B5,接种量为0.5-0.8g干重细胞/100ml培养基,2,4-D浓度为1.0mg/L;培养细胞的生长周期约30d;增减基中较高浓度的蔗糖(40g/L)可提高紫杉醇含量;添加的椰子汁(CM)、酪蛋白氨基酸(CA)和水解乳蛋白(LH)3种有机添加剂均能提高培养细胞中紫杉醇的含量,但只有CM和CA能促进细胞的生长。于B5培养基中添国不同浓度的NH4NO3对培 相似文献
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《生物技术通报》2003,(5)
030 0 2 9搅拌式生物反应器悬浮培养水母雪莲细胞的研究〔中〕/黄艳… //生物工程学报 .- 2 0 0 1,17(5 ) .- 5 6 1~ 5 6 5应用 2L通气搅拌式生物反应器一步批式培养水母雪莲细胞。采用倾斜式搅拌桨代替透平桨 ,研究了搅拌转速、通气量和接种量对细胞生长和黄酮合成的影响 ,发现在 75r/min、70 0~ 10 0 0L/min和 4 .0~ 5 .0gDCW /L接种量下细胞生长和黄酮合成比较好。经过 12d培养细胞干重达 13.8gDCW /L ,黄酮产量 4 16mg/L ,黄酮含量占细胞干重的 3.0 %。水母雪莲细胞生长及黄酮合成的进程表明 ,黄酮积累与细胞生长呈正相关。对细… 相似文献
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耐碱性巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)9-A2经紫外线、甲基磺酸乙酯和硫酸二乙酯等多次诱变处理,获得一株产碱性α-淀粉酶能力较高的变异株L-49。L-49菌株比出发株的产酶能力提高近2.5倍,当以酵母膏为氮源,可溶性淀粉为碳源,初始pH9 ̄10,种龄18h,接种量5%(V/V),30℃培养48h,酶活力可达730μ/ml。 相似文献
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诱导产生的青蒿毛状根培养物置于MS培养基(含30g/L蔗糖)进行悬浮培养,并对悬浮培养过程中毛状根生长、青蒿素合成、蔗糖、磷酸盐和不同氮源的消耗、PH和电导率的动力学过程进行分析。经30天培养,生物量干重和青蒿纱产量分别达到13.7g/L和0.23g/L,碳源和氮 源在培养过程中被逐渐利用,而磷酸盐的利用速率最快,培养至15天所有的磷酸均被吸收,PH在培养初期降低,后又通宵四升, 率由于毛状根生长 相似文献