文昌鱼LH—RH的初步分离及其生物活性的测定

作者(1984)曾报道文昌鱼的轮器哈氏窝匀浆中含有类似脊椎动物的促性腺激素。在此基础上,我们用 Sephadex G-25 柱层析法,从文昌鱼头部匀浆中初步地分离到 LH-RH 的活性物质,这种物质同样有促使幼体黑眶蟾蜍睾丸发育的作用。现报道如下。 文昌鱼(Branchiostoma belecheri Gray)取自厦门同安琼头海区。黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus)取自郊区,当年生,体重 3.6—5.1克。     

高剂量LH—RH对妊娠早期人滋养层组织蛋白分泌的影响

本研究分析了妊娠早期不同周龄人胎盘绒毛滋养层组织培液中蛋白含量的变化。可知6、7、8、10周组织培养液,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测得12种主要蛋白质,此12种蛋白的相对百分含量不同,其中有三种是随周龄增加而增加;有一种是随周龄增加而减少;另有七种蛋白在6周后,它们的百分含量维持在稳定状态;仅有一种蛋白从6周至10周几乎一直保持在稳定水平。有可能这些蛋白质在妊娠过程中起着不同生理作用,所以在不同周龄中的合成量亦有变化。本研究同时证明高剂量LH-RH对胎盘绒毛滋养层组织中分子量大约为50,000和6,000左右的蛋白有抑制作用。由此,讨论了这两种蛋白的消失是否与LH-RH终止妊娠的作用有密切关系。     

醋酸铜诱导家兔排卵前LH峰过程中下丘脑β—阿片受体密度的变化

下丘脑β－内啡肽活动减弱是排卵前ＧｎＲＨ／ＬＨ峰形成的重要因素,为了解下丘脑μ－阿片受体是否参与了这一过程,本文利用放射受体自显影结合计算机图像处理,观察醋酸铜诱导家兔排卵前ＬＨ峰过程中下丘脑μ－受体密度变化。给新西兰雌兔注射１％醋酸铜０．９ｍｌ或生理盐水（对照组）,于注射后不同时间处死,观察下丘脑内侧基底核及视前内侧区的μ－受体密度变化,结果表明：醋酸铜组给药后１ｈＭＰＯ部位μ－受体密度明显增加     

新生大鼠下丘脑神经元L—Ca^2＋通道电流活动特征

目的研究新生大鼠下丘脑神经元L-Ca2+通道单通道特性;Ca2+通道激动剂BayK8644对Ca2+通道单通道特性的影响.方法采用神经元急性分离技术;用膜片钳细胞贴附式记录方式进行研究.结果大鼠下丘脑神经元L-Ca2+通道是一种电导相对较大的Ca2+通道,其电导为(29.5±3.1)pS,平均开放时间(τ0)为0.28ms,平均关闭时间的短关闭时间常数(τc1)为2.91ms,长关闭时间常数(τc2)为53.22ms.此通道几乎不存在时间依赖性失活.BayK8644显著增加通道的开放概率,通道平均开放时间增加为1.61ms.结论下丘脑神经元存在L-Ca2+通道,该通道具有明显电压依赖性,而无显著的时间依赖性.通道特征与文献报道的其它神经元上L-Ca2+通道相似,也有明显不同,显示下丘脑神经元L-Ca2+钙通道的独特性.     

P物质对动情期大鼠下丘脑—垂体轴系的调控

自Vijayan首次报道P物质(SP)与生殖功能有关以来,SP对生殖活动的影响已开始引起人们的注意。我们的研究工作初步证明在雌性大鼠不同性周期中,下丘脑SP含量最高,垂体次之,卵巢内含量最低,并以间情期含量为最高,情前期次之,动情期最低;而血清中孕酮含量与SP含量呈反比关系。侧脑室注入SP拈抗剂可对抗SP对卵巢孕酮生成的抑     

醋酸铜诱导家兔排卵前LH峰过程中下丘脑μ—阿片受体密度的变化

下丘脑β-内啡肽（β-EP）活动减弱是排卵前GnRH／LH峰形成的重要因素，为了解下丘脑μ-阿片受体是否参与了这一过程，本文利用放射受体自显影结合计算机图像处理，观察醋酸铜诱导家兔排卵前LH峰过程中下丘脑μ-受体密度变化。给新西兰雌兔注射1％醋酸铜0．9ml（醋酸铜组）或生理盐水（对照组），于注射后不同时间处死，观察下丘脑内侧基底核（MBH）及视前内侧区（MPO）的μ-受体密度变化，结果表明：醋酸铜组给药后1hMPO部位μ-受体密度明显增加（P＜0．05），于给药后3及3．5h明显减少，LH峰出现。MBH部位μ-受体密度变化和MPO部位相似，对照组μ-受体及LH水平无明显波动。相关分析表明：MBHμ-受体密度变化和血LH水平呈显著负相关（γ＝-0．5481，P＜0．01）。上述结果表明下丘脑μ-受体减少与排卵前LH峰形成密切相关。     

培养的下丘脑神经细胞电生理特征的衰老性变化

本文采用玻璃微电极细胞内记录技术,研究了培齿０－１４０ｄ新生ＳＤ大鼠下丘脑神经细胞电生理学特征的增龄性变化。以神经突起的生长速度为指标,将细胞体外存活过程分为三期,即恢复期、生长期、衰老期。发现,神经细胞膜时间常数及膜电容于生长期达最大值,而在衰老期显著减小。恢复期膜阻抗最高,生长期显著下降,但衰老期变化不显著。神经细胞可产生单个或多个诱发放电,其静息电位约－３０－－６０ｍＶ,并呈增龄性增高。可见     

LHRH刺激雄性大鼠垂体LH分泌高峰时细胞形态变化的图象分析

应用ＡＢＣ亲和组织化学顺序、ＭＩＳ－１计划机图象处理系统测定外源性ＬＨＲＨ刺激雄性大鼠ＬＨ分泌高峰前后ＬＨ细胞面积、细胞内液泡面积和细胞形状等形态参数的变化。结果表明：雄性大鼠ＬＨ基础分泌时,ＬＨ细胞处于贮存状态。     

新生大鼠下丘脑GnRH免疫反应性神经元的体外发育

应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术,研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元;１～３ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快,胞体和突起的平均生长速度分别为４５．５９μｍ２／ｄ和１９．３９μｍ／ｄ,染色加深;培养７ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体截面积、胞体染色强度和突起长度均达最高峰,分别为１７１．２１±４３．１７μｍ２,０．２８９±０．０３４,８７．０１±２２．３３μｍ;培养１４ｄ,ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体大小和突起长度维持在７ｄ时的水平,但染色减弱。结果提示,培养第１周是ＧｎＲＨ神经元体外发育成熟的关键时期,其发育良好状态可维持到第２周末     

低氧预处理提高离体培养的下丘脑细胞缺氧耐受性及其与线粒体膜电位稳定性的关系

本文用新生大鼠下丘脑培养细胞,研究了低氧预处理对下丘脑细胞缺氧耐受性的影响及其与线粒体膜电位的关系.结果显示：在急性缺氧条件下,低氧预处理可以提高细胞存活率,减少乳酸脱氢酶漏出,此外,低氧预处理可以使线粒体膜电位在缺氧时保持相对高的水平,并诱导B淋巴细胞／白血病－2（B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)高表达,结果提示,低氧预处理能提高下丘脑细胞的缺氧耐受性,其机制与线粒体膜电位稳定性增强有关;低氧预处理诱发bcl-2高表达可能是线粒体膜电位稳定性增强的机制之一。     

下丘脑室旁核β—内啡肽在大鼠烫伤休克中的作用

以１００摄氏度沸水接触雄性大鼠去毛的背部２０ｓ,形成占体表面积２０％的三度烫伤。收集下丘脑室旁核推挽灌流液测定β－内啡肽免疫活性物质的含量;向下丘脑室旁核微量注射β内啡肽或其抗血清,观察烫后心血管功能指标的改变及存活时间。结果表明,烫后下丘脑室旁核灌流液中β－内啡肽免疫活性物质含量显著升高,有两个峰值。烫后给予β－内啡肽抗血清,可显著改善心血管功能指标,延长存活时间;给予β－内啡肽则作用相反。上述     

新生大鼠下丘脑神经元发育过程中膜特性变化

大鼠出生后下丘脑神经元温度敏感性逐步升高,采用电流钳技术发现,膜被动特性在出生后18 d内变化显著,同时峰电位升高,动作电位间期延长,前电位及后电位均有明显的变化,大多数神经元表现为单次放电.这些结果表明发育过程中离子通道的密度和活动特性发生了改变,同时温度敏感性与突触特性存在着一定的关系.     

大鼠表皮细胞的体外培养及纯化方法

根据表皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶敏感性、贴壁时间及要求不同的,采用胰蛋白酶消化法和反复贴壁法相结合,能有效清除成纤维细胞的混合生长,获得纯化的表皮细胞。本方法经济、简便、实用。     

GABA对大鼠下丘脑正中隆起LHRH释放调节的研究

本研究应用大鼠下丘脑正中隆起(ME),观察 γ-氨基丁酸(GABA)和去甲肾上腺素(NA)对下丘脑促黄体生成激素释放激素(LHRH)神经元末梢分泌作用的影响。结果发现:GABA(10~(-6)mol/L)可显著促进 ME 的 LHRH 和 NA 的释放,即 LHRH 释放量由27.3±2.5pg/100ul 增加至150.4±27.9pg/100μl;NA 释放量由50.9±4.2pg/100μl 增加至105.5±19.1pg/100ul,两者与对照组相比有显著差异(P<0.01)。GABA 这些作用可被受体拮抗剂荷包牡丹碱(Bicuculline)所翻转。当荷包牡丹碱和 GABA(10~(-6)mol/L)同时存在于 ME 的培灌液中,LHRH 的分泌量下降为18.2±1.9pg/100μl,而 NA 分泌量下降为43.9±3.4pg/100μl。在内源性 NA 被利血平耗竭时,LHRH 的释放量仅增加26.5%,而 GABA 能使正常大鼠 LHRH 释放量增加451.9%。本研究提示:GABA 可促进下丘脑 ME 释放 LHRH,这一作用可能通过 NA 中介。     

大鼠排卵前促性腺激素释放激素释放过程中下丘脑前阿黑皮素基因表达 …

在大鼠动情前期促黄体生成激素峰形成前后测定了血清雌、孕激素水平变化、下丘脑正中隆起促黄体生成激素释放激素含量及弓状核区雌、孕激素受体密度改变和弓状核前阿黑皮素ｍＲＮＡ水平变化。结果表明：动情前期１４小时时血清雌激素水平开始升高（Ｐ〈０．０５）,于１６小时时达高峰。此时状核雌激素受体密度降低（Ｐ〈０．０５）,孕激素受体密度增加（Ｐ〈０．０５）,前阿黑皮素ｍＲＮＡ水平减少（Ｐ〈０．０５）。前阿黑皮素ｍ     

大鼠下丘脑离体脑薄片视上核神经元的全细胞记录

在大鼠下丘脑薄片标本上对52例视上核神经元进行了全细胞膜片箝记录。膜被动及主动电生理参数测量如下：静息电位,59±8mV;输入阻抗,535±129MΩ;时间常数,32±9ms;动作电位幅度,99±11mV;超射值,37±13mV（n＝39）。大多数神经元在接受去极化刺激时出现明显的慢后超极化电位或电流。我们发现,在电压箱状态下几乎所有的视上核神经元均接受兴奋性和／或抑制性突触传λ（n=13）。药理学实验表明,兴奋性突触后电流是由non－NMDA亚型谷氨酸受体介导,而抑制性突触后电流由GABAA受体介导。     

烫伤对大鼠下丘脑室旁核内皮素—1合成和分泌的影响

目的研究烫伤后下丘脑室旁核(PVH)内皮素-1(ET-1)的合成和分泌改变,探讨PVHET-1在烫伤中的病理生理学意义。方法用原位杂交和免疫组织化学方法观察了烫伤后PVHET-1合成和分泌的变化,并用通用图象颗粒分析法检测单位面积内ET-1mRNA阳性杂交信号的强度和ET-1样免疫反应物(ET-1-ir)免疫反应强度。结果烫伤后15minPVH神经元胞浆内ET-1mRNA阳性杂交信号与对照组相比未见明显差异,烫伤后60min和180minPVH神经元胞浆内ET-1mRNA阳性杂交信号较对照组(100％±25％)明显增多,强度明显增高,分别为138％±26％(P<0．05)和167％±18％(P<0.01);而烫伤后15minPVH神经元胞浆内ET-1阳性反应物明显减少,免疫反应物强度为6．3％±1．5％,显著低于对照组(P<0．01),烫伤后60min和180min逐渐回升,分别为23．1％±2．9％和44．1％±3．8％,但仍显著低于对照组(P＜0．01)。结论烫伤后PVHET-1合成和分泌增加。     

新生大鼠下丘脑CRF和AVP神经元对急性低氧的应答

目的:观察肾上腺摘除新生大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)和精氨酸加压素(AVP)神经元对急性低氧的应答.方法:在低压氧舱中模拟高海拔低氧,用放免法测定AVP和CRP含量.结果:新生大鼠暴露于急性低氧环境下(模拟5 000 m和7 000 m海拔高度,24 h),其下丘脑CRP在3 d和7 d龄大鼠中无明显变化,但14d、21 d和28 d时低于对照;下丘脑AVP在3 d大鼠中亦无变化,但14 d时低于对照,7 d、21 d及28 d时高于对照.两者对低氧的应答模式随日龄而变化.摘除肾上腺后,14 d、21 d及28 d大鼠下丘脑CRF和AVP含量均显著低于同龄完整大鼠,此时暴露于急性低氧环境下,CRF和AVP无进一步的变化.结论:摘除肾上腺抑制下丘脑CRF和AVP的发育,影响它们对低氧应激的正常应答.     

新生大鼠下丘脑神经元L-Ca~(2 )通道电流活动特征

目的 :研究新生大鼠下丘脑神经元L Ca2 通道单通道特性 ;Ca2 通道激动剂BayK 86 44对Ca2 通道单通道特性的影响。方法 :采用神经元急性分离技术 ;用膜片钳细胞贴附式记录方式进行研究。结果 :大鼠下丘脑神经元L Ca2 通道是一种电导相对较大的Ca2 通道 ,其电导为 (2 9.5± 3.1)pS ,平均开放时间 (τ0 )为 0 .2 8ms,平均关闭时间的短关闭时间常数 (τc1)为 2 .91ms,长关闭时间常数 (τc2 )为 5 3.2 2ms。此通道几乎不存在时间依赖性失活。BayK86 44显著增加通道的开放概率 ,通道平均开放时间增加为 1.6 1ms。结论 :下丘脑神经元存在L Ca2 通道 ,该通道具有明显电压依赖性 ,而无显著的时间依赖性。通道特征与文献报道的其它神经元上L Ca2 通道相似 ,也有明显不同 ,显示下丘脑神经元L Ca2 钙通道的独特性