大黄素提高HeLa细胞对三氧化二砷促凋亡敏感性的研究

活性氧(reactive oxygen specis ROS)在三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)诱导肿瘤细胞凋亡中扮演重要角色。本研究用一种天然蒽醌类物质——大黄素(emodin)作为提高HeLa细胞ROS水平的手段,考察其对As_2O_3促凋亡敏感性的影响,并探究可能涉及的信号传导机制。结果显示大黄素10μmol/L提高ROS并增加了HeLa细胞在As_2O_32μmol/L作用下的凋亡率,对正常成纤维细胞却无影响。该联合作用可以促进HeLa细胞线粒体跨膜电位降低;抑制转录因子NF-kB激活。本研究提示:大黄素通过提高ROS介导凋亡信号传导的增强和生存信号传导的抑制,增加HeLa细胞对As_2O_3促凋亡的敏感性。     

大黄素提高HeLa细胞对三氧化二砷促凋亡敏感性的研究

活性氧(reactive oxygen species,ROS)在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肿瘤细胞凋亡中扮演重要角色。本研究用一种天然蒽醌类物质——大黄素(emodin)作为提高HeLa细胞ROS水平的手段,考察其对As2O3促凋亡敏感性的影响,并探究可能涉及的信号传导机制。结果显示大黄素10μmol／L提高ROS并增加了HeLa细胞在As2O32μmol／L作用下的凋亡率,对正常成纤维细胞却无影响。该联合作用可以促进HeLa细胞线粒体跨膜电位降低;抑制转录因子NF-κB激活。本研究提示：大黄素通过提高ROS介导凋亡信号传导的增强和生存信号传导的抑制,增加HeLa细胞对As2O3促凋亡的敏感性。     

大黄素通过抑制FOXO1活性减轻NO对神经细胞的损伤

氧化应激所产生的活性氧和一氧化氮(nitric oxide,NO)自由基在心脑血管疾病、神经退行性疾病中发挥着重要作用,过量的NO可以导致自由基损伤,并诱导神经元的凋亡.大黄作为中医传统药物具有重要的药用价值,临床应用非常广泛.近年研究表明,大黄素具有抗氧化、免疫调节、抗菌、抗炎等功能,被广泛应用于肠道疾病、肾病、心血管疾病、胰腺炎等病症的治疗.Forkhead转录因子1(FOXO1)是Forkhead转录因子家族的一个重要成员,FOXO1对于胰岛素信号通路、DNA修复、清除活性氧损伤、细胞周期和凋亡的调控非常重要.而NO自由基对FOXO1的调控作用还不清楚,我们研究发现,NO的供体GSNO(亚硝基谷胱甘肽)或者L-Arg(L-精氨酸)可显著提高FOXO1的转录活性并促进其下游促凋亡基因Fas L、Bim的转录表达,进而诱导神经元死亡.我们进一步研究发现,大黄素可以通过降低FOXO1的转录水平以及蛋白质水平,缓解NO所诱导的神经元凋亡.该研究揭示了NO自由基诱导神经元损伤的新机制,同时也为了解大黄素的抗氧化作用提供了新的实验依据,对大黄素等中药有效成分的临床应用提供了重要参考.     

凋亡抑制因子FAP-1与肿瘤的关系

在肿瘤细胞抵抗凋亡的研究中发现,FAP-1是Fas诱导凋亡的抑制因子,在多种肿瘤细胞中表达。通过对FAP-1基因、蛋白质结构等方面的研究发现,FAP-1以PDZ3结构域介导,与Fas在细胞内强结合,将Fas限制于高尔基体内,不表达于癌细胞表面,从而降低Fas的功能。另外FAP-1会通过磷酸酯酶活性的发挥、NF-κB等途径来抵抗Fas诱导的肿瘤细胞的凋亡。因此,从其作用机制出发,抑制FAP-1mRNA的表达、阻断FAP-1与Fas的结合及其信号转导通路,可以诱导肿瘤细胞的凋亡从而为肿瘤的诊治提供新途径。     

革兰阴性杆菌内毒素诱导肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-163A3凋亡作用的研究

目的：研究革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌以及革兰阴性杆菌（GNB）的内毒素对小鼠肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-163A3的杀伤作用与诱导细胞凋亡作用。方法：利用美国B-D公司生产的FACS-Cal-ibur流式细胞仪检测与革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌、革兰阴性杆菌内毒素共育后的肿瘤细胞凋亡。结果：革兰阳性球菌产生凋亡不明显,革兰阴性杆菌、标准细菌的内毒素分别共育后的肿瘤细胞在G0/G1峰前,均产生一个典型的凋亡峰-AP峰。结论：革兰阴性杆菌的内毒素是对肿瘤细胞的诱导凋亡作用的主要成分。     

榄香烯治疗非小细胞肺癌的作用机制研究进展

榄香烯注射液是从天然中草药姜科植物温郁金中提取获得的萜烯类化合物,其主要生物学活性为降低肿瘤细胞有丝分裂能力,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的生长,从而改善NSCLC患者的临床症状,增强患者免疫力.本文主要从杀灭癌细胞、诱导癌细胞凋亡、抑制癌细胞血管形成、增强患者免疫力等几方面综述榄香烯注射液对非小细胞肺癌的作用机制.     

基于TRAIL的肿瘤治疗策略进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能选择性诱导肿瘤细胞凋亡,且对机体正常组织细胞无毒副作用,被认为是一种非常有潜力的抗癌药物。我们简要介绍TRAIL及其配体诱导细胞凋亡的机制、肿瘤细胞对TRAIL的耐受机制及其克服策略。     

大黄素介导铁死亡途径抑制MHCC-97H人肝癌细胞的迁移和侵袭

目的 探讨大黄素对肝癌细胞生长的影响及其作用机制。方法 体外培养人肝癌细胞MHCC-97H,使用不同浓度的大黄素处理细胞,使用CCK-8实验检测细胞存活率筛选后续大黄素实验剂量。并将MHCC-97H细胞随机分为Blank组、Dose 1组（8μmo/L的大黄素）、Dose 2组（16μmo/L的大黄素）和Positive组（60μg/mL的顺铂）,药物处理24 h后采用平板克隆法检测细胞菌落形成,Western blot检测细胞GPX4、ACSL4、FTH1蛋白表达水平,Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力,并评估细胞铁离子含量和GSH水平。结果 大黄素可呈剂量依赖性降低细胞存活率;大黄素可降低MHCC-97H细胞克隆形成率、迁移和侵袭细胞数、GPX4蛋白水平、GSH水平,提高细胞凋亡率、铁离子含量、及ACSL4和FTH1蛋白水平。结论 大黄素可能通过诱导铁死亡途径,抑制细胞迁移和侵袭,诱导凋亡。     

c—myc表达对顺铂诱导人胶质瘤细胞系BT325凋亡的影响

研究c-myc在化疗药物顺铂诱导肿瘤细胞凋亡中的作用。在原有已构建好c-myc反义表达载体pcDNA3-MYC并成功转染BT325细胞的基因上,用顺铂诱导细胞凋亡。采用TUNEL技术并从光镜、电镜、荧光微镜及激光内共聚焦显微镜水平观察BT325细胞凋亡的形态学特征;流式细胞仪检测实验组（即pcDNA3-MYC转染的细胞）及对照组（包括未转染或仅转染空载体pcDNA3的细胞）凋亡率的异同。结果显示：与转染pcDNA3及未转染组的细胞相比,在转染pcDNA3-MYC的BT325细胞中,顺铂诱导的细胞凋亡作用明显受阻,结果表明：肿瘤细胞内异常表达的c-myc在顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的过程中有重要作用。     

c-myc表达对顺铂诱导人胶质瘤细胞系BT_(325)凋亡的影响

研究 c- m yc在化疗药物顺铂诱导肿瘤细胞凋亡中的作用。在原有已构建好 c- myc反义表达载体 pc DNA3- MYC并成功转染 BT32 5 细胞的基础上 ,用顺铂诱导细胞凋亡。采用 TUNEL技术并从光镜、电镜、荧光显微镜及激光共聚焦显微镜水平观察 BT32 5 细胞凋亡的形态学特征 ;流式细胞仪检测实验组 (即 pc DNA3- MYC转染的细胞 )及对照组 (包括未转染或仅转染空载体 pc DNA 3的细胞 )凋亡率的异同。结果显示 :与转染空载体 pc DNA3及未转染组的细胞相比 ,在转染 pc DNA 3-MYC的 BT32 5 细胞中 ,顺铂诱导的细胞凋亡作用明显受阻 ,结果表明 :肿瘤细胞内异常表达的 c- myc在顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的过程中有重要作用。     

体内致敏的树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的基础研究

目的证实树突状细胞（dendritic cells,DC）可在体内通过吞噬凋亡肿瘤细胞获取抗原物质,探讨其在肿瘤免疫治疗中的意义.方法以615小鼠的前胃癌细胞株造模,在体外用rmGM-CSF和rmIL-4从荷瘤小鼠骨髓细胞分化、诱导未成熟树突状细胞.分为4组：小剂量化疗组、树突状细胞组、小剂量化疗＋树突状细胞组和对照组,以BAX试剂盒检测肿瘤细胞凋亡.在瘤体内注射树突状细胞,观察给药侧瘤体及对侧瘤体体积,生存期,和特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）对肿瘤细胞的特异性杀伤作用.结果小剂量化疗能诱导肿瘤细胞凋亡.小剂量化疗后瘤内应用树突状细胞,给药侧瘤体及对侧瘤体体积明显缩小（P＜0.05）,小鼠的生存率提高,体内凋亡肿瘤细胞致敏的DC诱导的CTL对MFC有显著的杀伤作用,在效靶比为40：1、20：1、10：1和5：1时72 h的杀伤率分别为87.64%、70.32%、34.63%和13.87%.并能特异性杀伤小鼠前胃癌细胞MFC（P＜0.01）.结论体外诱导分化的未成熟DC,能于体内捕获小剂量化疗诱导的凋亡肿瘤细胞所携带的肿瘤抗原,诱导机体特异性抗肿瘤免疫反应.     

白介素24的抗肿瘤机理

白介素24(interleukin 24,IL-24)是利用消减杂交技术,从重组的纤维母细胞干扰素和密执毒素共同作用的黑色素瘤细胞株中筛选得到的一种高表达基因。由于IL-24能选择性地诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有细胞毒作用,因此在肿瘤治疗研究中受到人们广泛的重视。IL-24诱导肿瘤细胞凋亡的机理涉及多种信号途径,有些信号途径目前还不十分清楚。本文就IL-24通过启动不同的信号途径,诱导广泛的肿瘤细胞凋亡的机理作一综述,从而为IL-24抗肿瘤机理研究提供一些有用的信息。     

声化学激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡

本实验采用频率为2．0MHz，声强分别为1．0w／cm^2、1．5w／cm^2、2．0w／cm^2等不同参数，研究超声激活血卟啉对艾氏腹水肿瘤细胞的杀伤作用和诱导肿瘤细胞凋亡现象。通过扫描电镜、透射电镜以及荧光显微镜观察受损后细胞形态结构的变化，主要表现为细胞微绒毛的减少，胞膜结构和通透性的改变，细胞器的受损以及核物质的分解、丢失；同时发现处理后的肿瘤细胞有核物质凝集、趋边排列以及凋亡小体的形成等细胞凋亡特征。研究中首次发现声化学激活血卟啉在对艾氏腹水肿瘤细胞杀伤的同时，也能诱导艾氏腹水肿瘤细胞发生凋亡，提示在声动力疗法中并存着对癌细胞的直接杀伤和通过诱导癌细胞凋亡的两种抗癌途径。     

Procaspase-8失调与肿瘤细胞对TRAIL的耐受

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可激活胱天蛋白酶（caspase）家族蛋白系列级联反应,最终诱导细胞凋亡. TRAIL选择性地诱导肿瘤细胞凋亡而不损伤正常细胞,使其成为治疗癌症的潜在药物靶点. 目前已知,细胞型FADD样白介素-1-β转换酶抑制蛋白(c FLIP)和凋亡抑制蛋白(IAPs)是肿瘤细胞对TRAIL耐受的主要原因.胱天蛋白酶原-8（procaspase-8）是TRAIL凋亡信号途径中的凋亡起始蛋白. 然而近年发现,在某些肿瘤细胞中procaspase-8功能失调常会阻碍凋亡信号传导,使肿瘤细胞对TRAIL诱导的凋亡产生耐受. 本文就其机制进行概述.     

新城疫病毒抗肿瘤效应机制的研究现状

溶瘤病毒疗法是一种重要的抗癌手段。经研究,新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)是一种非常有效的溶瘤病毒(oncolyticvirus,OV),它能选择性杀伤肿瘤细胞,对正常细胞几乎无影响。本文从NDV诱导肿瘤细胞发生凋亡、自噬、抑制细胞代谢、刺激机体免疫反应和诱导肿瘤细胞发生核糖体应激反应等方面综述了新城疫病毒的抗肿瘤效应机制,并着重探讨了NDV通过诱导核糖体压力应激反应调控肿瘤细胞翻译系统并诱导细胞发生凋亡的具体机制,旨在为今后NDV抗肿瘤作用的深入研究及靶向治疗癌症提供更加扎实丰富的理论基础。     

磁场抑制肿瘤的机理

综述了磁场抑制肿瘤的机理。磁场可以抑制肿瘤组织的供血与代谢,损伤肿瘤细胞的DNA,诱导肿瘤细胞凋亡,以及增强机体对肿瘤的免疫作用等。     

脂蟾毒配基诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 通过体外脂蟾毒配基对人肝癌细胞（Bel7402）的凋亡诱导作用,为研究其抑制肿瘤细胞生长的作用机制提供依据。方法 通过应用流式细胞光度术检测细胞凋亡;采用细胞免疫细胞化学显色检测和Western blotting分析凋亡相关基因蛋白的表达来研究脂蟾毒配基对人肝癌细胞（Bel7402）凋亡的诱导作用。结果 表明脂蟾毒配基能够诱导Bel7402细胞发生凋亡,凋亡率大于50%;脂蟾毒配基提取液(浓度1.0 μm）作用于Bel7402细胞24小时后,bc1-2蛋白的表达下调,到48、72小时后下调更明显;而Bax蛋白的表达从24小时后开始上调,到48、72小时后表达上调明显。使用方差分析法与对照组相比较,P<0.05 ,统计学有显著意义。结论 提示诱导肿瘤细胞凋亡可能是脂蟾毒配基抑制、杀伤人肝癌细胞的机制之一。     

前列腺凋亡反应蛋白-4抗肿瘤作用研究进展

前列腺凋亡反应基因-4（prostate apoptosis responsegene．4,par-4）是从凋亡的前列腺癌细胞中分离出来的一种基因,该基因编码的产物是前列腺凋亡反应蛋白4（Par-4）。Par-4可通过细胞内、外途径调节各种分子表达,诱导癌细胞凋亡,选择性抑制肿瘤细胞生长,因此,Par-4的表达与肿瘤的发生、发展及预后有密切的联系。Par-4在治疗恶性肿瘤中表现出良好的肿瘤细胞靶向杀伤效应,对正常组织细胞无明显影响,故具有极其重要的应用价值。就Par-4特异性诱导肿瘤细胞凋亡及其潜在抗肿瘤作用的进展进行综述。     

大黄素对人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG蛋白表达的影响

目的:观察大黄素干预后,体外培养的人肝癌HepG2细胞株胞浆和胞核内AIF和EndoG的表达情况,探讨大黄素对非Caspase依赖细胞凋亡的影响.方法:将体外培养的HepG2细胞分为四组:空白对照组、Caspase抑制剂组、大黄素干预组、大黄素+Caspase抑制剂组;取对数生长期的细胞进行实验,药物作用48小时后提取各组细胞胞浆及胞核蛋白;采用Western Blotting法分别检测各组细胞胞浆和胞核内AIF与EndoG的表达,并进行统计学分析.结果:AIF和EndoG在大黄素干预组、大黄素+Caspase抑制剂组细胞胞浆和胞核的表达均高于空白对照组及Caspase抑制剂组(p＜0.01),其中以大黄素+Caspase抑制剂组的表达最高(p＜0.01).结论:大黄素能促进体外培养的人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG的表达和核转位,可以通过非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡.     

抗癌药莪棱舌草Ⅱ号诱导人肺癌细胞凋亡的研究

通过运用流式细胞光度术检测细胞凋亡;运用细胞化学方法检测凋亡相关基因蛋白的表达以及Westernblotting分析等方法来研究抗癌药莪棱舌草Ⅱ号对人肺癌细胞(A549细胞)凋亡的诱导作用。结果表明药物能够诱导A549细胞发生凋亡,凋亡率近40%;药物作用可以使细胞中凋亡抑制基因bcl2表达减少,而凋亡促进基因Bax表达增加。提示诱导肿瘤细胞凋亡可能是莪棱舌草Ⅱ号抑杀肺癌细胞的机制之一。