抗癌药物ADM与DNA相互作用的紫外共振拉曼光谱的研究

用紫外共振拉曼光谱研究了ＡＤＭ与小牛胸腺ＤＮＡ相互作用,分析表明：ＡＤＭ插入ＤＮＡ的ＧＣ－ＣＧ位置,ＡＤＭ与ＤＮＡ之间的主要相互作用是蒽环π电子与碱基Ｇ和Ｃ的π电子形成的π－π电子相互作用,并通过碱基Ｇ,Ｃ的ＮＨ２的氮的孤对Ｐ电子与ＡＤＭ的π－Ｐ电子相互作用以及ＡＤＭ和ＤＮＡ碱基Ｇ,Ｃ和ＰＯ２之间形成的氢键使相互作用加强;ＡＤＭ插入ＤＮＡ使其构象产生一定变化,但未破坏ＤＮＡ碱基对间的氢键。     

抗癌药物ADM与DNA相互作用的紫外共振拉曼光谱的研究

用紫外共振拉曼光谱研究了ＡＤＭ与小牛胸腺ＤＮＡ相互作用,分析表明：ＡＤＭ插入ＤＮＡ的ＧＣ－ＣＧ位置;ＡＤＭ与ＤＮＡ之间的主要相互作用是蒽环π电子与碱基Ｇ和Ｃ的π电子形成的π－π电子相互作用,并通过碱基Ｇ、Ｃ的ＮＨ＿２的氨的孤对Ｐ电子与ＡＤＭ的π电子形成的π－Ｐ电子相互作用以及ＡＤＭ和ＤＮＡ碱基Ｇ、Ｃ和ＰＯ＿２之间形成的氢键使相互作用加强;ＡＤＭ插入ＤＮＡ使其构象产生一定变化,但未破坏ＤＮＡ碱基对间的氢键。     

低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响

应用蛋白ｄｏｔｂｌｏｔ技术检测了低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和常氧内皮细胞条件培养液（ＮＥＣＣＭ）内ＰＤＧＦ相对含量,并利用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术观察了ＨＥＣＣＭ和ＮＥＣＣＭ及加入特异ＰＤＧＦ抗体对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）生长的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ中的ＰＤＧＦ含量明显高于ＮＥＣＣＭ;ＨＥＣＣＭ能明显增强ＰＡＳＭＣ内ＤＮＡ合成,促进ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期;当预先加入ＰＤＧＦ－Ｂ链抗体时,则会明显地抑制ＨＥＣＣＭ对ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成,阻止ＰＡＳＭＣ从Ｇｏ／Ｇ１期进入Ｓ期。结果提示,低氧时ＰＡＳＭＣ增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放ＰＤＧＦ增加有关     

国内信息

ＤＥＧＣＭ技术中的ＲＤＡ、ＳＳＨ和ＲＳＤＤ差异表达基因分离技术 (ＤＥＧＣＭ )发展很快 ,主要是ＰＣＲ技术的发展和相应新技术的出现为ＤＥＧＣＭ注入了新的活力。ＰＣＲ引入差式筛选之中 ,可提高效力和降低假阳性率。若引入扣除杂交 ,可发展扣除扩增方案 ,并用特异引物结合于ＰＣＲ中选择扩增差异ｃＤＮＡ而形成代表性差式分析法 (ＲＤＡ)。采用抑制性ＰＣＲ选择性扩增差异基因片段 ,用ＤＮＡ链内“退火”优先于链间退火 ,使非目的序列产生“发夹”式互补结构 ,不能与引物配对 ,从而选择性抑制非目的基因片段的扩增 ,以此形成抑制性差…     

阿霉素铁(Ⅲ)配合物与DNA结合作用的研究

应用吸收光谱法研究了阿霉素铁（Ⅲ）［ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）］与ＤＮＡ的结合作用,结果表明ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）作为一个整体嵌入ＤＮＡ碱基之间形成ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）·ＤＮＡ三元复合物。应用荧光淬灭法得到了不同Ｎａ＋浓度下ＡＤＭ及ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）与ＤＮＡ结合作用的结合常数（Ｋ）、结合位点距离（ｎ）及标准自由能（ΔＧ）,并根据多聚电解质理论将ΔＧ分解为电荷作用部分（ΔＧｐｅ）及非电荷作用部分（ΔＧｔ）。结果表明ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）中铁离子直接参与了与ＤＮＡ的作用,ＡＤＭ·Ｆｅ（Ⅲ）较ＡＤＭ更易与ＤＮＡ结合,且结合更为紧密     

酵母基因组DNA的两个简易制备方法

酵母基因组ＤＮＡ的制备一般需要制作原生质体。我们基于丝状真菌的方法[1,2 ] 发展了 2个酵母基因组ＤＮＡ的制备程序 ,取得了良好的效果。1　材料与方法1.1　材料菌种　野生酿酒酵母菌种Ｇ1Ｍ 2 34为本中心周惠副教授惠赠。1.2　方法1.2 .1　酵母基因组ＤＮＡ制备方法　①方法 1:接种酵母菌种于无菌的 5 0ｍＬＹＰＤ或ＳＤ培养基 ,在30℃生长至对数生长晚期。滤液 4 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心10ｍｉｎ。菌体用液氮碾磨破壁。加 7ｍＬＤＮＡ缓冲液 (10 0ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌ,ｐＨ 8.0 ,10ｍｍｏｌ/ＬＥＤ ＴＡ ,1%ＳＤＳ)。混匀 ,6 5℃保…     

一种新型的C型凝集素

美国、荷兰、英国科学家新近鉴定了一种新型的Ｃ型凝集素———树突细胞特异性、胞间粘附分子 (ＩＣＡＭ)可获取的非整联蛋白 (ＤＣ ｓｐｅｃｉｆｉｃＩＣＡＭ ｇｒａｂｂｉｎｇｎｏｎｉｎｔｅｒｇｒｉｎ) ,简称ＤＣ ＳＩＧＮ(ＣＤ2 0 9) ,它在免疫调节及免疫缺陷病毒致病过程中的作用日益受到重视。1 .ＤＣ ＳＩＧＮ的结构[1～ 3]ＤＣ ＳＩＧＮ是一种Ｃ型凝集素 ,为 40 4个氨基酸的Ⅱ型跨膜蛋白 ,分子量为 45775,Ｎ末端 40个氨基酸位于细胞质 ,跨膜结构域(ＴＭ)为 2 1个氨基酸 (Ｇｌｙ40 ～Ｓｅｒ6 1位个氨基酸残基 ) ,Ｃ末端 3 4 2个氨基…     

从带烟草花叶病毒外壳蛋白亚基因组启动子的负链RNA产生正链RNA

克隆了能在植物中表达白喉毒素Ａ链基因（ＤＴＡ）负链ＲＮＡ的基因ＴＣＤＴＡＮ,这个基因的读码框５′端上游带有ＴＭＶ外壳蛋白基因５′端上游６３１个碱基,它的ＤＮＡ和ＴＭＶ－ＲＮＡ共转化烟草原生质体后,能抑制同时导入原生持体的堪因的表达,ＣＡＴ基因表达的抑制,是ＴＣＤＴＡＮ基因产生白喉毒素Ａ链蛋白的结果,ＴＣＤＴＮＡ基因上ＴＭＶ外壳蛋白基因５′端上游片段,是产生白喉毒素Ａ链ｍＲＮＡ的必要条件,只有用多量     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

植物学通报2002年19卷关键词索引总目次(括号内为页码)

数字或英文3’ｃＤＮＡ末端 (5 84)ＡＦＬＰ (4 4 4)ＡＦＬＰ分析 (1 94)ＡＭ菌根 (4 62 )ＡＴＰ酶 (5 88)α 淀粉酶 (63 )ＣＨＳ (2 65 )ＣＯＰ1 (62 0 )ＤＮＡ甲基化 (3 74)Ｆｉｂｅｒ ＦＩＳＨ技术 (3 5 9)ＦＬＣ (4 0 6)ＧＡ12 ＿醛 (1 3 7)ＧＡｓ (63 )ＧＡ信号传导 (1 3 7)Ｈ ＿ＡＴＰａｓｅ (1 84)ＩＴＳ (698)ＭＡＤＳ＿ｂｏｘ基因 (1 5 0 )ｍＲＮＡ (1 0 3 )ＰＬＤ (1 5 6)ＰＣＲ产物克隆测序 (698)ＰＣＲ产物直接测序 (698)ＲＡＰＤ (2 0 1 ) (4 5 2 )ＲＮＡｉ (4 91 )Ｒｉ质粒 (65 0 )ｒｏｌ基因 (65 0 )ＳＳＲ标记 (4 4 )中文一…     

多胺对水稻CMS系及其保持系幼穗蛋白质、核酸和活性氧代谢的影响

用ＤＡｒｇ＋ ＭＧＢＧ 处理保持系, 降低花粉可育度, 并使其幼穗中蛋白质、ＤＮＡ 和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ 酶和ＤＮＡ 酶活性下降,使Ｏ－·２ 生成速率和ＭＤＡ 含量上升。Ｐｕｔ＋ Ｓｐｄ ＋ Ｓｐｍ 可消除或部分消除ＤＡｒｇ ＋ＭＧＢＧ的上述效应（ 对酶活性的影响除外） 。ＤＡｒｇ ＋ ＭＧＢＧ 也使ＰＯＤ、ＳＯＤ 和ＣＡＴ活性上升, 但是,多胺只能降低抑制剂对ＰＯＤ 的刺激作用。用Ｐｕｔ＋ Ｓｐｄ ＋ Ｓｐｍ 处理不育系, 使花粉可育度轻度提高, 并使其幼穗蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ 含量略有上升,使蛋白酶、ＤＮＡ酶和ＲＮＡ 酶活性、Ｏ－·２ 生成速率、ＭＤＡ 含量、ＳＯＤ 和ＣＡＴ活性下降, 使ＰＯＤ 活性上升     

一种从鱼类卵巢制备地高辛标记mtDNA探针的简易方法

一种从鱼类卵巢制备地高辛标记ｍｔＤＮＡ探针的简易方法＊ＡＳＩＭＰＬＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＧＥＴＴＩＮＧＤＩＧＯＸＩＧＥＮＩＮＬＡＢＥＬＩＮＧＰＲＯＢＬＥＯＦｍｔＤＮＡＦＲＯＭＯＶＡＲＹＯＦＦＩＳＨ关键词鱼类,线粒体ＤＮＡ,地高辛标记ＫｅｙｗｏｒｄｓＦｉ...     

多胺对水稻CMS系及其保持系幼穗蛋白质,核酸和活性氧代谢的影响

用Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ处理保持系,降低花粉可育度,并使其幼穗中蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ酶和ＤＮＡ酶活性下降,使Ｏ２生成速率和ＭＤＡ含量上升。Ｐｕｔ＋Ｓｐｄ＋Ｓｐｍ有除或部分消除Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ的上述效应（对酶活性的除外）。Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ也使ＰＯＤ、ＳＯＤ和ＣＡＴ活性上升,但是,用Ｐｏｔ＋Ｓｐｄ＋Ｓｐｍ处理不育系,使花粉可育度轻度提高,并使其幼穗蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含     

一个新的水稻MADS—box基因的克隆及表达分析

根据ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因保守区结构,设计简并性引物,利用３＇ＲＡＣＥ从水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）中克隆了１个新的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因的ｃＤＮＡ片段,同时利用５＆ＲＡＣＥ获得了全长ｃＤｎＡ命名为ＦＤＲＭＡＤＳＳ。序列分析表明,该ｃＤＮＡ全长１４０６ｂｐ,开放阅读框共编码２３３个到,具有典型的植物ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因的结构。推测的氨基酸序列与拟南芥的ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因,ＡＧＬ１４同     

天花粉蛋白T18肽片段的溶液构象及T14,TDK和T18肽…

用＾１Ｈ ＮＭＲ法测定Ｔ１８肽在ＤＭＳＯ（ＭＳ１８）和５０％六氟异丙醇（ＦＰ１８）中的溶液构象。ＭＳ１８含有Ｉｌｅ３￣Ｇｌｕ７和Ａｌａ１２￣Ｇｌｎ１６两段β－折叠链;而ＦＰ１８则转变为α－螺旋结构。综合分析Ｔ１４,Ｔ１８和ＴＤＫ三个模型肽的结构性质和稳定性,比较肽链序列和溶剂作用,提出肽链局部优势结构的概念,并据此讨论天花粉蛋白小结构域折叠起始过程。     

碳离子诱导的DNA双链断裂

ＤＮＡ双链断裂（ＤＳＢｓ）是电离辐射诱导的最重要的原发损伤,研究ＤＳＢｓ有利于揭示细胞辐射敏感性的机理。用倒转脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描进行ＤＮＡ定量研究７５ＭｅＶ／ｕ１２Ｃ６＋对小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞ＤＳＢｓ的诱导,结果表明：ＤＳＢｓ产额约为０．７４ＤＳＢｓ／１００Ｍｂｐ／Ｇｙ;ＤＮＡ片段分布在两个区域。大片段区分子量约为１．４Ｍｂｐ～３．２Ｍｂｐ,分子量小于１．２Ｍｂｐ的为小片段区;并且随着剂量的增加,大片段区ＤＮＡ含量逐渐下降,而小片段区的ＤＮＡ含量显著增加。表明Ｂ１６ＤＮＡ分子上可能存在对重离子较为敏感的位点。     

天花粉蛋白T18肽片段的溶液构象及T14、TDK和T18肽构象比较

用１ＨＮＭＲ法测定Ｔ１８肽在ＤＭＳＯ（ＭＳ１８）和５０％六氟异丙醇（ＦＰ１８）中的溶液构象．ＭＳ１８含有Ｉｌｅ３～Ｇｌｎ７和Ａｌａ１２～Ｇｌｎ１６两段β－折叠链;而ＦＰ１８则转变为α－螺旋结构。综合分析Ｔ１４,Ｔ１８和ＴＤＫ三个模型肽的结构性质和稳定性,比较肽链序列和溶剂作用,提出肽链局部优势结构的概念,并据此讨论天花粉蛋白小结构域折叠起始过程．     

重组人MCAF／GM－CSF融合蛋白表达及其生物学活性研究

利用ＰＣＲ技术和ＤＮＡ体外重组方法,把作为导向效应细胞到靶部位的单核细胞趋化激活因子（ＭＣＡＦ）和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）进行基因融合,置于ｐＢＶ２２０载体的λＰＲＰＬ串联启动子下游,构建了ＳＤ序列与ＡＴＧ之间含有不同核苷酸组成的重组质粒ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３。ｐＭＧ０１、ｐＭＧ０２和ｐＭＧ０３的翻译起始区都不存在稳定的二级结构,但ＤＨ５α（ｐＭＧ０２、ＤＨ５α（ｐＭＧ０３）的表达水平远远高于ＤＨ５α（ｐＭＧ０１）,ＤＨ５α（ＰＭＧ０１）几乎没有表达。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,它能分别与ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ抗体发生特异反应。生物学活性测定表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性和维持ｈＧＭ－ＣＳＦ依赖的ＴＦ１细胞生长的特性,说明ＭＣＡＦ和ＧＭ－ＣＳＦ的生物学功能是相容的．     

三链DNA的分离纯化

λ－ＤＮＡ Ｈｉｎｄ ＩＩＩ热变性可得到单、双、三链ＤＮＡ等混合物,本文利用ＤＮａｓｅＩ选择性地将其中的单、双链酶解后,经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分离,得到了纯化的三链ＤＮＡ,并对其进行了ＵＶ、荧光光谱、ＣＤ谱及Ｔｍ等性质测定。     

抑瘤素M cDNA的克隆及表达研究

抑瘤素Ｍ是一种我功能的细胞生长调节因子,从ＰＭＡ刺激后的Ｕ９３７细胞系提取总ＲＮＡ,采用逆转录－ＰＣＲ方法分离到了抑瘤素Ｍ的ＣＤＮＡ;将抑瘤素Ｍ的ＣＤＮＡ克隆到质粒ＰＵＣ１９中,筛选三个阳性克隆进行序列分析,与国外报导序列完全一致;将抑瘤素Ｍ的ＣＤＮＡ克隆到质粒ＰＢＶ２２０后再转化ＤＨ５α进行模拟表达,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明有ＯＳＭ表达,表达量约占细菌总蛋白５％,经过初步纯化的ＯＳＭ能明显抑制Ａ