银河I号杨叶外植体再生体系建立

以银河 号杨 (Populus alba× P.hopeiensis)无菌试管苗叶片为外植体 ,建立了叶片外植体快速繁殖的培养程序。实验结果表明 ,MS附加 6 - BA∶ IAA(5∶ 1 )、每天 1 4h光照 ,可诱导离体叶片产生大量不定芽 ,且生根试管苗叶片的不定芽分化率明显高于无根试管苗。不定芽长至 1 cm以上时切下后转至 1 /2 MS附加 IBA 0 .2 mg/L的培养基上 ,可生根而形成完整的再生植株     

花生幼叶为外植体的植株再生系统的建立

本文报道利用花生成熟胚幼叶为外植体获得高频植株再生的方法,为花生转基因提供有效的受体系统。通过诱导培养基TDZ、BA、NAA的浓度以及种子萌发时问、继代培养基种类五个因素不同水平的正交试验,筛选出了分化高频发生的最佳组合为：MS培养基中应含有TDZ 1．0／μmol／L、BA0．4μmol／L、NAA5．0μmol／L,种子萌发4d,继代培养基为MS0。本研究表明,五因素中诱导培养基TDZ浓度为诱导花生幼叶分化的主要影响因素,其次为继代培养基、种子萌发时问,而诱导培养基中BA和NAA的浓度作用较小。试管苗生根后移栽田间,可正常开花结果。     

猕猴桃实生苗再生体系的建立

以成熟饱满的美味猕猴桃种子发芽获得实生苗,分别以实生苗的茎段、叶柄和叶片为材料建立了再生体系。结果表明:种子以2.5mg/L的赤霉素(GA3)处理8h较适合;以培养基发芽较为适合;茎段、叶柄和叶片的愈伤组织的诱导率均为100%,且茎段、叶柄比叶片容易脱分化,但叶片的平均出苗率最高。再生苗在移栽5d后,开始长出新叶,10d后就能完全适应外界环境。     

添加物影响花生外植体再生及基因转化

取花生上胚轴为外植体,在农杆菌介导的基因载化过程中,在共育时加入一定量的烟草或马铃薯提取物,在共培养基和分化培养基中分别加入0.179mM的还原型谷胱甘肽（GSH）和0.147mM的VC 0.035mM的VE。进行培养,结果表明,添加15%（W/V）的烟草或马铃薯提取物,胚轴生长状况明显好于对照组,分化率较对照组提高10%-23.5%。自由基清除剂能明显减轻外植体褐化现象,促进外植体再生,GUS检测阳性率最高可达10.2%。     

多年生黑麦草再生体系的建立

以多年生黑麦草‘高帽2号’(Lolium perenne‘Top Hat 2’)颖果为外植体,分别研究了胚端半粒颖果、纵切的胚端半粒颖果、胚端颖果小块、颖果小块这四种外植体处理方式与氯化汞、次氯酸钠两种表面灭菌方法对其愈伤组诱导的影响;利用两因素(2,4-D和6-BA)随机区组试验设计研究了不同植物生长调节物质及其浓度配比对外植体愈伤组织诱导的影响;利用三因素(NAA,6-BA和ZT)四水平正交试验设计研究了不同植物生长调节物质及其浓度配比对不定芽诱导的影响;研究了0.10 mg·L-1的NAA和IBA分别对不定根诱导的影响。结果表明:相同条件下,以饱满胚端半粒颖果为外植体,75%酒精表面灭菌1 min后,再用含1 m L·L-1Tween 20的次氯酸钠溶液(有效氯含量10%)处理30 min,愈伤组织诱导率最高;适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+5 mg·L-12,4-D+0.03 mg·L-16-BA(p H=5.8),诱导率达68.7%,获得的高质量愈伤组织;不定芽诱导培养基为MS+0.5 mg·L-1NAA、0.5 mg·L-16-BA+0.9 mg·L-1ZT,不定芽诱导率最高,为56%;不定根诱导培养基为1/2MS+IBA培养基时,根系粗壮,诱导生根率为90%。该研究建立了多年生黑麦草高效组培再生体系,为高效基因工程育种的开展奠定了良好基础。     

乌桕不同外植体高效再生探索

以乌桕的成熟胚、胚乳、叶片和茎段为外植体,建立高效、稳定的组培快繁再生体系,并成功获得其再生苗.结果表明:(1)全胚乳带胚的愈伤组织诱导率达90%,其愈伤组织继续在MS+1.0 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA培养基上培养,不定芽最多达15个/外植体.(2)去胚乳的胚不加调节剂则胚直接萌动成苗,萌动率和成苗率可达100%;去胚乳的胚在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 6-BA最佳培养基中培养,其胚轴处可直接诱导不定芽,最多达6个/外植体.(3)无菌苗叶片在MS+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA培养基中诱导的有效不定芽数最高达18个/外植体,诱导率达90%.(4)茎段在MS+0.05 mg·L-1 NAA+0.1~0.3 mg·L-1 6-BA培养基上不定芽的诱导率较高(100%),直接诱导的不定芽数最多达17个/外植体.(5)芽苗在1/2MS+0.5 mg·L-1 IBA上生根率达到100%,但根系较细弱,而在MS+1.0 mg·L-1镧稀土中的生根率达100%,且根系粗壮;生根的小苗练苗移栽后温室内成活率为89.2%,移栽到室外沙质土壤中的成活率为68.9%.     

啤酒花节间外植体再生体系的建立

在国内首次建立了两个啤酒花主栽品种（麒麟丰禄,青岛大花）的节间外植体再生体系。实验表明：啤酒花无菌苗的节间为适于不定芽再生韵外植体;适宜的再生培养基为Ms基本培养基＋B5维生素＋葡萄糖20g／L,附加IAA0．25mg／L＋TDZ2mg／L（麒麟丰禄）或IAA0．125mg／L＋TDZ1．5mg／L（青岛大花）,以7g／L琼脂固化,pH5．8;不定芽再生频率可达57％（麒麟丰禄）或16％（青岛大花）。啤酒花再生体系的建立,为利用植物基因工程技术培育抗病虫害啤酒花新品系奠定了基础。     

以根为外植体建立大蒜的组织培养体系

以国内4个大蒜栽培品种为材料,建立了以根为外植体的再生体系。将蒜瓣去皮后灭菌消毒,萌发后选取苗龄为5~7 d的无菌苗的根接种到含不同激素配比的培养基中进行愈伤组织诱导,发现MS+2,4-D 1 mg/L+2ip 0.1 mg/L组合愈伤诱导效率最高,平均为56.06%;愈伤组织经过2~3次继代培养,选取胚性愈伤组织置于不同分化培养基上进行培养,2~3个月后可见小芽产生,分化培养基为MS+KT 1 mg/L时,植株再生效率最高,平均达到35.01 %。本研究建立了一种以根为外植体的高效的大蒜愈伤诱导和再生体系,为大蒜遗传转化体系的建立打下良好基础。     

紫苏不同外植体的培养及再生

探讨了紫苏（Perilla frutescens）不同外植体在不同激素的不同浓度及组合培养基中的培养及再生情况,建立了紫苏的高效快捷再生体系。结果表明：（1）再生率由高到低依次是茎尖、真叶、子叶和下胚轴;（2）茎尖无论有无激素处理,再生率都在85%以上,添加合适的激素可提高增殖系数。真叶在MS＋TDZ 0.05 mg/L～0.1 mg/L范围处理下再生率均达70%左右。子叶最适激素组合为MS＋KT 1.0 mg/L＋IAA 1.0 mg/L,再生率22.22%。下胚轴最适激素组合为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IAA 1.0 mg/L,再生率14.61%;（3）再生苗在1/2 MS中生根良好,生根率达86.67%,平均根长7.36 cm;（4）真叶外植体可形成叶簇,并可反复诱导不定芽发生,增殖能力强,培养周期短,是最理想的外植体。     

锡金海棠子叶再生体系的建立

锡金海[Malussikkimensis（Wenz．）Koehne]是我国稀有植物和优良苹果砧木种质资源。本研究探讨了影响锡金海棠离体再生的条件,建立了锡金海棠子叶高效离体再生体系。结果表明,子叶再生体系的最佳诱导培养基SC＋0．1mg·L-1 NAA＋2．0mg·L-1 TDZ,最佳分化培养基SC＋0．1mg·L-1 NAA＋1．5mg·L-1 TDZ,最佳继代增殖培养基SC＋2．0mg·L-1 6-BA＋0．2mg·L-1 NAA,最佳生根培养基为1／2MS＋I．0mg·L-1 IBA。炼苗后,移入珍珠岩、花生壳与草炭（1：1：1）的基质中,20d移栽成活率高达90％。     

影响油菜子叶外植体不定芽高频率再生的因素

采用７个甘蓝型和２个白菜型油菜品种研究了影响子叶外植体芽再生的一些因素和不同基因型的子叶外植体的离子体培养反应和芽再生能力。结果表明,苗龄４ｄ的幼苗叶子含２,４－Ｄ０．５－１．２ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基培养２或６ｄ后再转到分化培养基上培养,芽再生率３４％－４６％。     

芥蓝植株再生体系的优化

采用正交设计方法对影响芥蓝植株再生体系的因素进行了优化研究,结果表明：影响芥蓝植株再生的最主要因素是外植体类型,其次依次为NAA,BAP,蔗糖和AgNO3。结果进一步显示,最利于芥蓝再生植株的培养基条件为：MS BA P2mg／L NAA0．03mg／L 1％蔗糖 AgNO3 7．0mg／L 0．8％琼脂,最适宜的外植体类型为下胚轴,植株再生频率高达97．5％。     

金鱼草（Antitthinum majus L.）下胚轴外植体不定芽的高频再生

本文发展的技术可以使金鱼草下胚轴外植体不定芽高频再生。添加有2mg/l BAP和0．5mg/l NAA的MS培养基上再生芽出得又快又多,淡黄色愈伤组织易于形成并存活,但主要依赖的是6－BAP。MS培养基中含有0．1mg/l和6mg/l浓度的6－BP均能刺激芽的发育,最适浓度为2－3mg/l。仅加2．4－D,也能形成正常的黄色愈伤组织,但这样形成的愈伤组织在只含有0．1－6mg/l6－BAP或含有2mg/l6－BAP和0．5mg/lNAA的MS培养基上均不能分化生出再生芽来。仅加NAA,能够刺激下胚轴形成根。加入AgNO3,则抑制不定芽的再生,并导致整个外体变成棕色而死亡。组织化学分析结果表明：不定芽的再生源于下胚轴外植体表皮细胞。在不含有任何生长调节的MS培养基上,再生苗均能形成根。再生植株移栽至花盆可开花结实。     

圆叶葡萄'Alachua'叶柄再生体系的建立

以圆叶葡萄'Alachua'的叶柄为外植体,通过对基本培养基、激素种类及浓度组合的筛选,研究圆叶葡萄Alachua再生体系的建立.结果表明:以B5 2.0 mg/L BA 0.5 mg/L 2,4-D诱导叶柄形成愈伤组织效果较好,叶柄诱导率达86%;再分化培养基以B5 4.0 mg/L TDZ效果较好,达到19.32%;诱导生根以培养基WPM 0.1mg/L IBA的效果较好,生根率达90%.移栽至珍珠岩与营养土(3∶1)的混合基质中,成活率达93%.     

结球白菜带柄子叶外植体不定芽离体再生能力的遗传分析

解析控制植物不定芽离体再生能力的遗传因素,有助于从根本上提高离体培养困难材料的不定芽再生能力,是植物基因工程遗传改良的基础.本研究以结球白菜4个纯合亲本及其杂交后代的带柄子叶为外植体,建立了高频率离体不定芽再生技术.据此我们还对白菜不定芽再生能力进行遗传分析,并开展亲本与后代杂种的离体培养及反应研究,包括对培养基的激素需求,不定芽形成频率,不定芽形成数量,芽形态等系列特征.研究结果表明,杂种与亲本在培养基的激素浓度上有类似需求;杂交后代的不定芽再生率均至少高于一方亲本,在一些组合中可以高于双亲;在适宜的杂交组合及培养条件下,结球白菜带柄子叶外植体的不定芽再生率可以达100%,每一外植体上的不定芽数达3～7个.方差分析表明,结球白菜的不定芽离体再生能力存在基因的加性效应.     

影响一品红再生系统建立的因素

本试验以一品红“旗帜”和“福星”两个品种的茎段和叶片为试验材料,研究了影响建立一品红再生系统的因素。筛选出一品红初代培养的适宜培养基。     

狭叶黄芩组织培养再生体系的建立

以狭叶黄芩的茎段为外植体,研究不同消毒剂处理、不同植物生长激素配比对狭叶黄芩茎段腋芽诱导、愈伤组织诱导、丛生芽分化、增殖、生根及移栽的影响。结果表明：最佳消毒方式为0.1% HgCl₂消毒5 min,污染率最低为8.25%;诱导腋芽最佳培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+1 mg·L^-1 NAA,诱导率可达73.66%;诱导愈伤最佳培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+1 mg·L^-1 2-4D,诱导率为91.33%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA,分化率为44.71%。芽增殖的最佳培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA,其芽增殖倍数为5.85;最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^-1 IBA,生根率可达到74.07%;试管苗移栽时蛭石：珍珠岩：园土比例按1：1：3的体积比搭配使用,移栽成活率最高达到79.24%,并且植株生长旺盛。本研究建立狭叶黄芩再生体系,为狭叶黄芩野生资源在妥善的保护基础上开发应用提供一定的理论支持。     

茎瘤芥(榨菜)高效离体再生体系的建立

利用离体培养技术,以榨菜的3个主栽品种的子叶、带柄子叶和下胚轴为外植体,对影响榨菜植株再生的关键因素进行了优化.结果表明,培养25d不定芽的分化率最高;最佳不定芽诱导的激素组合为6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,其中带柄子叶不定芽的分化率达94.4％;“蔺市草腰子”和“郫县榨菜”容易诱导不定芽,而“永安小叶”不容易被诱导,说明基因型的影响比较大;不定根的最佳诱导激素为NAA 0.2 mg/L,其生根率为83.4％.榨菜高效离体再生体系的成功建立,为榨菜遗传转化、突变体筛选和种质资源保存打下了基础.     

观赏羽衣甘蓝高频再生体系的建立

观赏羽衣甘蓝是一种赏食兼用的耐冻优良景观植物.为了通过基因工程手段赋予其抗虫性,并进一步提高其低温耐受性,获得新的抗性种质,本研究以优良育种品系为试材,详细探讨了影响离体培养不定芽再生的因素,建立了高效再生体系.以8份不同类型羽衣甘蓝基因型的带柄子叶、子叶、下胚轴为外植体,研究了不同基因型、不同外植体、不同的培养基激素浓度配比及添加AgNO3对不定芽诱导的影响.结果表明:无论基因型及使用的培养基,带柄子叶均为最佳外植体;不同的基因型、不同外植体其最佳的芽诱导培养基不同;筛选出两份材料,其带柄子叶分别在L6(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L)及L3(MS+6-BA 1.5 mg/L)培养基中不定芽诱导率为100%,下胚轴诱导率最高也能达88.33%;培养基中添加4 mg/L AgNO3不利于羽衣甘蓝的不定芽诱导;再生株生根以MS+NAA 0.1 mg/L效果好,生根率可达100%.     

廊坊杨3号快繁和转基因的再生系统

对杂交杨树新品种廊坊杨3号（Populus langfangensis 3,(P. deltoides (“Shan Hai Guan”)×((P. simonii × pyramidalys)₁₂×Ulmus pumila) 的离体叶片和茎段在附加BA、NAA、IBA和2,4-D的MS培养基上的直接和间接的器官分化、愈伤组织形成和植株再生进行了研究。叶柄和叶片最容易在叶脉处直接诱导生芽。从叶片直接诱导生芽的激素条件为1～2 mg·L^-1 BA和0.5 mg·L^-1 IBA,最高生芽率可达90%。2,4-D促进愈伤组织的形成。由愈伤组织诱导生芽的激素条件为0.3～0.5 mg·L^-1 BA 和 0.02 mg·L^-1 IBA或NAA,生芽率达76%。较好的生根条件为0.1 mg·L^-1 BA和0.2～0.5 mg·L^-1 IBA,生根率可达67％。以上再生条件为廊坊杨3号的转基因育种和无性快繁技术提供了可能。